IDENTIFIKASI BAKTERI GRAM POSITIFI. HARI / TANGGAL: Selasa, 4 Maret 2014II. LOKASI PRAKTIKUM: Laboratorium BakteriologiIII. INSTRUKTUR: Salma P. Yunus, SKMIV. KELOMPOK: Kelompok III Tingkat I B

V. TUJUAN PERCOBAANMahasiswa mampu mengidentifikasi Bakteri Gram Positif pada pemeriksaan di bawah mikroskop.

VI. PRINSIP PERCOBAAN: Pewarnaan Gram membedakan Bakteri Gram Positif dan Bakteri Gram Negatifberdasarkan kemampuan bakteri mempertahankan warna kristalin violet, kemudian diperiksa di bawah mikroskop.

VII. DASAR TEORIBakteri Gram Positif adalah bakteri yang mempertahankan zat warna Kristal violet suatu proses Pewarnaan Gram sehingga akan berwarna biru / ungu jika diamati dibawah mikroskop. Bakteri Gram Positif hanya mempunyai membran plasma tunggal yang dikelilingi dinding sel tunggal berupa pepdoglikan sekitar 90% dari dinding sel tersebut, dan sinarnya berupa molekul lain yang berwarna asam teikhoat. Karaktersistik Bakteri Gram Positif yaitu sebagai berikut.1. Memiliki lapisan peptidoglikan yang tebal2. Memilki Sitoplasma membrane lipid 3. Beberapa Spesies memiliki kapsul polisakarida 4. Beberapa Spesies memiliki flagellum

Bakteri Gram Positif juga merupakan klasifikasi dari bakteri yang dibedahkan oleh ciri ciri fisik sebagai berikut :1. Struktur dinding sel sekitar 15 80 mm berlapis tunggal / monolayer.2. Dinding selnya mengandung lipid yang lebih normal ( 1 4 %) peptidoglikan yang ada sebagai asam tekoat.3. Mengandung asam tekoat4. Bersifat lebih renta n terhadap pertumbuhan, dihambat secara nyata oleh zat-zat warna seperti ungu Kristal.Contoh bakteri gram positif antara lain : 1. Staphylococcus2. Stretococcuc3. Enterococcus4. Bacillus5. Corynebacterium6. Nocardia7. Clostridium8. Antinobacteria9. Listeria.

VIII. ALAT DAN BAHAN1. Alat Mikroskop Binokuler Object glass Lap pembersih lensa objektif2. Bahan Minyak imersi Tissue Preparat Bakteri Gram Positif

IX. PROSEDUR KERJA1. Siapkan alat dan bahan2. Hubungkan mikroskop dengan sumber arus listrik 3. Nyalakan mikroskop dengan menekan tombol ON4. Atur Diafragma, kondensor dan refolvel5. lalu letakan preparat pada meja mikroskop, jangan sampai terbalik6. Carilah lapang pandang dengan perbesaran lensa objektif 10x atur fokus dengan menggunakan makrometer.7. Teteskan minyak Imersi pada preparat dan putar lensa objektif pada perbesaran 100x.8. Naikkan Kondensor, gunakan micrometer untuk memerjelas pengamatan objek.9. Identifikasi bakteri yang terlihat pada lapang pandang10. Setelah selesai mengamati, keluarkan preparat dari meja mikroskop kemudian kembalikan mikroskop pada posisi awal, cabut steker mikroskop dari hubungan arus listrik.11. Setelah selesai lakukan pemeliharaan mikroskop.

X. HASIL PENGAMATAN

Pada lapang pandang mikroskop terlihat bakteri berwarna ungu dan berbentuk bulat. Jadi preparat ini adalah Bakteri Gram Positif bentuk Kokus.

XI. PEMBAHASANPada dasarnya bakteri dapat dibedakan melaui teknik pewarnaan Gram. Teknik pewarnaan Gram tersebut dapat menghasilkan warna merah dan ungu. Bakteri gram negative ditandai dengan pewarnaan merah, sedangkan bakteri gram positif berwarna ungu. Hal ini bertujuan untuk memberikan warna pada bakteri dan pada akhirnya dapat diidentifikasi dengan mudah.Pemberian Kristal violet pada bakteri gram positif akan meninggalkan warna ungu muda. Perbedaan respon terhadap mekanisme pewarnaan gram pada bakteri adalah didasarkan pada struktur dan komposisi dinding sel bakteri, bakteri gram positif dinding selnya mengandung protein. Pada bakteri gram positif, dinding selnya terhidrasi dengan perlakuan alcohol. Pori-pori mengkerut, daya rembes dinding sel dan membrane menurun sehingga pewarnaan safranin tidak dapat masuk. Sehingga sel bakteri ggram positif tetap berwarna ungu.

XII. KESIMPULAN Bakteri Gram Positif berwarna violet (ungu) dengan bentuk bulat atau kokus membentuk seperti buah anggu dan berwarana ungu yang disebabkan oleh larutan ungu Kristal violet, saat penambahan iodium kompleks kristal iodium terbentuk didalam dinding sel, dinding sel mengalami dehidrasi, pori pori mengecil dan membrane menurun akibat penetesan alcohol. Bakteri Gram positif berbentuk kokus dengan diameter koloni 0,5 1,5 struktur dinding sel tebal, factor factor yang mempengaruhi adalah fruksasi, pelunturan, identitas warna, dan subsrat.Contoh bakteri gram positif antara lain : Staphylococcus, Stretococcuc, Enterococcus, Bacillus, Corynebacterium, Nocardia, Clostridium, Antinobacteria dan Listeria.

XIII. DAFTAR PUSTAKA

- Staf pengajar bagian mikrobiologi fakultas kedokteran universitas kedokteran Indonesia, buku ajar mikrobiologi kedokteran, Binarupa aksara publisher, Ciputat Tangerang.- Id.wikipedia.org/wiki/gram-negatif- Irianto, Koes. 2006. Mikrobiologi. Yrama Widia. Bandung- H, R. Hasdianah. 2012. Mikrobiologi. Nuha Medika. Yogyakarta

PARAF INSTRUKTUR

Salma P. Yunus,SKM1