biotek reg kel4 interferon alfa absrak

5/13/2018 Biotek REG Kel4 Interferon Alfa Absrak - slidepdf.com

http://slidepdf.com/reader/full/biotek-reg-kel4-interferon-alfa-absrak 1/3

ABSTRAK BIOTEKNOLOGI FARMASI (FA-4202)

INTERFERON ALFA-2b

Intron A®

Oleh,

Nadya Stephanie 10708006

Billy 10708019

Lin Hofa Nurul A. 10708035

Fakar Daras Kamal 10708051

Sul Arifin A.P 10708067

Vincent Angga G. 16208015

SAINS DAN TEKNOLOGI FARMASI

SEKOLAH FARMASI

INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG

2012



INTERFERON ALFA-2b

ABSTRAK

Interferon (IFN) merupakan sitokin atau hormon berupa glikoprotein yang disekresi

oleh sel-sel sistem imun tubuh sebagai respon rangsangan biologis terhadap virus, bakteri,

protozoa, mycoplasma, mitogen, dan senyawa lainnya. Ada tiga jenis IFN, tipe I , tipe II, dan

tipe III. Interferon alfa adalah subkelas dari interferon tipe I. Jenis interferon alfa yang telah

banyak digunakan untuk tujuan klinis adalah interferon alfa 2 (IFNA2) yang memiliki 3

subtipe diantaranya A 2a, A 2b, A 2c. Protein penyusun interferon alfa terdiri dari 188 asam

amino protein dengan titik isoelektrik teoritis sebesar 6,32 dan bobot molekul 21.578 Dalton.

IFNA2 digunakan untuk mengobati malignan hematologik, virus hepatitis, dan beberapa

penyakit lainnya (Pitha, 2007). Khusus untuk Interferon alfa 2b (IFNA2b), digunakan secara

luas dalam terapi hepatitis (B dan C), terapi tumor, dan terapi kanker. Salah satu produk rekombinan Interferon IFNA2b yang telah beredar adalah Intron A

®, dengan produsennya

yaitu Schering Plough dari Canada. Intron A®

dibuat dalam bentuk sediaan vial 10 million IU

dan 18 million IU. Bentuk sediaan berupa serbuk liofilisasi untuk injeksi yang dilengkapi

dengan pelarut WFI secara terpisah. Proses produksi Intron A®

terjadi pada sel bakteri ( E.

coli TOP10F) untuk kloning gen dan sel ragi ( Pichia pastoris GS 115) untuk ekspresi gen.

Sementara, vektor kloning dan vektor ekspresi yang digunakan adalah plasmid pPICZaA.

Dengan bantuan enzim reverse transcriptase, mRNA ditranskripsi balik membentuk cDNA.

DNA yang diperoleh kemudian diamplifikasi dengan metode RT-PCR. Urutan target pada

cDNA yang di kloning dapat diidentifikasi dengan salah satu dari empat metode berikut,

yaitu skrining dengan hibridisasi DNA (hibridisasi koloni), uji imunologi, aktivitas protein

atau komplementasi fungsional (genetik). Protein rekombinan pada P. pastoris dipurifikasi

menggunakan penukar ion, size exclusion chromatography dan dipekatkan. Sekresi protein

IFNA2b yang diekspresikan akan dikonfirmasi dengan menggunakan western blot dan SDS-

PAGE dan akhirnya produk mengalami proses liofilisasi. Persyaratan interferon sebagai

protein terapeutik meliputi uji perlindungan sitopatik dilakukan untuk mengetahui aktivitas

biologis dari IFNA2b, analisis konstruksi ekspresi, impurities, protein terkait, endotoksin

bakteri, potensi, penyimpanan, dan pelabelan (BP 2009, EP ed. 6, USP30-NF25).



DAFTAR PUSTAKA

British Pharmacopoeia Commission, 2009, British Pharmacopoeia 2009, The stationary

office: London, A249-296.

Jadhav, Trisul, 2009. Cloning and Production of Interferon Alpha (INFalfa). School of

Life Sciences, Skodve Universi: Sweden.

The United States Pharmacopeial Convention. 2006. USP30-NF25 The United States

Pharmacopeial Convention: Rockville, MD., 421-489.

____________, 2009, Product Monograph Intron A®, Merck Canada Inc: Canada.

biotek reg kel4 interferon alfa absrak

Documents