ANALISIS OBAT YANG DISALAHGUNAKAN DALAM CAIRAN BIOLOGIS

MORFIN DALAM PLASMA MANUSIA

DISUSUN OLEH:

RUPA LESTY

G1F009059

PUTRI KUSUMA W.

G1F010001

REZA RAHMAWATI

G1F010025

IRIYANTI

G1F010051ALDI PERMADI

G1F010079KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAAN

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMI KESEHATAN

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN

JURUSAN FARMASI

PURWOKERTO

2013

1. Bahan

Morfin sulfat, larutan morfin sulfat untuk injeksi 20 mg/mL, acetonitrile, n-hexane, methanol dan natrium hidroksida, kloroform, isopropil alkohol, etilene diamine garam natrium asam tetraasetat, asam borat, natrium borat, monopotassium phosphate, asam hidroklorida, plasma manusia

2. Larutan standar

Larutan standar stok morfin sulfat dibuat dengan cara melarutkan morfin sulfat sebanyak 100 mg ke dalam air bidistilasi 100 mL hingga didapatkan konsntrasi 1 mg/mL. Larutan stok disimpan pada suhu 4oC yang stabil selama 1 bulan. Larutan kerja (digunakan untuk validasi dan kalibrasi) yang disiapkan ex tempore dengan menambahkan air bidistilasi ke dalam larutan stok untuk mendapatkan larutan dengan konsentrasi 10, 20, 30, 50, 75, 100, dan 150 ng/mL morfin sulfat dalam plasma. Kurva kalibrasi disiapkan dengan cara 10 mL larutan kerja ditambahkan ke dalam 0.5 mL plasma yang mengandung heparin, kemudian diektraksi sesuai prosedur yang tercantum dibawah.3. Ektraksi morfin sulfat dari sampel plasma

Sebanyak 0,5 mL sampel plasma yang mengandung morfin ditambahkan 0,5 mL larutan buffer borat (pH 8,9) dan 6 mL larutan kloroform:isopropyl alcohol (90:10, v/v). campuran ini kemudian divortex selama 20 menit dan kemudian disentrifugasi (2000 x g, 10 menit. Lapisan organic yang terbentuk dipindahkan ke tabung lain dan ditambahkan 2 mL dari 5 mM buffer ammonium fosfat (pH 9,3) dan campuran ini divortex selama 1 menit dan di sentrifus (2000 x g, 5 menit). Supernatant dibuang dan lapisan organic yang mengandung morfin dipindahkan ke vial gelas dan ditambahkan 150 mL asam hidroklorida 0,1 M. campuran ini kemudian divortex selama 2 menit dan disentrifus (2000 x g, 5 menit). Lapisan asam yang terbentuk dipindahkan ke tabung lain kemudian ditambahkan 15 mL natium hidroksida 1 M dan 1 mL hexane. Campuran ini divortex selama 20 detik dan disentrifus (1500 x g, 2 menit). Lapisan organic yang terbentuk dipindahkan ke dalam tabung Eppendorf berisi 1.5 mL polipropilene dan sebanyak 50 L diinjeksi ke dalam system kromatografi.