Beberapa faktor yang mempengaruhi aktivitas katalitik enzim antara lain :

* suhu

* pH

* konsentrasi substrat

* serta konsentrasi enzim.

Lipase adalah salah satu enzim dalam golongan hidrolase yaitu enzim yang bekerja sebagai

katalis pada reaksi hidrolisis. Selain itu Lipase merupakan enzim yang memecah ikatan ester

pada lemak, sehingga terjadi asam lemak dan gliserol.

            Pada percobaan ini, aktivitas katalitik enzim dipengaruhi oleh suhu dan pH. Mula-mula 5

tabung reaksi diisi 2 ml suspensi ekstrak pankreas. Kemudian tabung 1 yang merupakan tabung

standar dipanaskan diatas penangas air ± 20 menit, hal ini bertujuan untuk mematikan enzim

yang ada dalam tabung 1. sedangkan tabung 2, 3, 4, dan 5 ditambahkan masing-masing 5 ml

reagen emulsi minyak dan 1 ml air, dari setiap tabung nampak lapisan minyak berada dibagian

atas. Ini terkait dengan massa jenis dari minyak yang lebih kecil dari air. Campuran yang ada

pada tabung 2, 3, 4, dan 5 kemudian di inkubasi pada suhu 350C dengan variasi waktu yaitu

tabung 2 selama 15´, tabung 3 selama 30´, tabung 4 selama 45´, dan tabung 5 selama 60´.

Tujuan dari proses inkubasi dalam percobaan ini yaitu untuk mempengaruhi aktivitas enzim

dalam masing-masing tabung dalam hal ini faktor suhu yang mempengaruhi aktivitas enzim.

Inkubasi campuran reaksi dilakukan pada suhu 370C hal ini terkait karena dalam Wikipedia

dikatakan bahwa kadar tindak balas enzim paling optimum pada suhu 370C dan enzim akan

terhambat pada suhu tinggi yaitu lebih dari 500C. Selain itu jika inkubasi dilakukan pada suhu

tinggi, maka enzim akan mengalami denaturasi, dan dengan demikian konsentrasi efektif enzim

menjadi berkurang dan kecepatan reaksinya pun akan menurun.       

Tabung 1 yang telah dipanaskan kemudian ditambahkan pula dengan 5 ml reagen emulsi

dan 1 ml air. Pada tabung 1 tidak dilakukan inkubasi karena tabung 1 dianggap nol menit karena

enzim telah dimatikan pada awal reaksi. Pada akhir inkubasi, campuran reaksi pada tabung 1, 2,

3, 4, dan 5 kemudian dituangkan dalam labu erlenmeyer 100ml untuk dilakukan titrasi, proses

titrasi dimaksudkan untuk mengetahui/mengidentifikasi jumlah asam lemak yang terbentuk,

sehingga menitrasi asam lemak tersebut dilakukan dengan basa encer. Sebelum titrasi

dilakukan, masing-masing tabung reaksi ditambahkan dengan 20 ml alkohol 95% dan 10 tetes

larutan fenoftalein. Dalam percobaan ini larutan fenoftalein bertindak sebagai indikator yang

akan merubah warna campuran pada saat campuran reaksi mencapai titik ekivalen.

Berdasarkan hasil pengamatan, labu erlenmeyer 1, 2, 3, 4, dan 5 menunjukkan warna

campuran yang sama baik sebelum titrasi maupun setelah titrasi (setelah titik ekivalen ) yaitu

dari warna hijau muja menjadi merah maron. Namun setiap labu menunjukkan beberapa

campuran dalam labu menunjukkan perbedaan volume NaOH yang terpakai hingga mencapai

titik ekivalen. Untuk labu 1 dan 2, volume NaOH yang terpakai adalah sama yaitu 1,4 ml, volume

NaOH yang terpakai pada labu 3 yaitu 1,1 ml, sedangkan untuk labu 4 dan 5 menunjukan

volume NaOH yang sama yaitu 0,8 ml. Berdasarkan hasil pengamatan tersebut dapat diketahui

bahwa, jumlah asam lemak tiap labu setelah dilakukan inkubasi dengan variasi waktu 15, 30, 45,

dan 60 menit semakin berkurang, hal ini ditunjukkan dengan makin berkurangnya volume NaOH

yang dipakai untuk mentitrasi asam lemak.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

G.    JAWABAN PERTANYAAN

Soal :

Hitung aktivitas enzim lipase, jumlah mmol NaOH yang dipergunakan untuk menetralkan hasil

reaksi pada tabung 2, 3, 4 dan 5. kemudian buat grafik antara aktivitas enzim terhadap waktu

inkubasi.

Jawab :

      mmol NaOH   =  [NaOH] x  ml NaOH

*untuk tabung 1

      mmol NaOH   =  0,05 M x 1,4 ml

                              =  0,07 mmol

*untuk tabung 2

      mmol NaOH   =  0,05 M x 1,4 ml

                              =  0,07 mmol

*untuk tabung 3

      mmol NaOH   =  0,05 M x 1,1 ml

                              =  0,055 mmol

*untuk tabung 4

      mmol NaOH   =  0,05 M x 0,8 ml

                              =  0,04 mmol

*untuk tabung 5

      mmol NaOH   =  0,05 M x 0,8 ml

                              =  0,04 mmol

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

H.    KESIMPULAN

Dalam percobaan ini, salah satu faktor yang mempengaruhi aktivitas enzim adalah suhu.

Jumlah asam lemak setelah dititrasi dan telah melalui proses inkubasi dengan variasi

waktu semakin berkurang, ini ditunjukkan dengan semakin berkurangnya volume NaOH

yang terpakai.

 

 

 

 

 

I.       DAFTAR PUSTAKA

Ishak, netty dkk. 2006. Bahan ajar Biokimia. Gorontalo. Jurusan Pendidikan  Kimia

Nuringtyas, tri. 2006. Power Point Enzim.