Analisis Pengaruh Konsentrasi Substrat terhadap Aktivitas Enzim

Laporan Praktikum

Diajukan untuk Memenuhi Tugas Biologi

Oleh:

1. Agustaf Prasetiyo (XII IPA 3-02)

2. Kamal Firmansyah (XII IPA 3-18)

3. Mia Wahyu Nisa (XII IPA 3-23)

4. Monika Meitasari Astuti (XII IPA 3-24)

5. Tri Rustiyaningsih (XII IPA 3-31)

SMAN 1 BOJA

2011/2012

I. Landasan Teori

Enzim

Enzim merupakan suatu kelompok protein yang berperan penting di

dalam aktivitas biologic. Enzim berfungsi sebagai katalisator si dalam sel dan

sifatnya sangat khas. Di dalam jumlah sangat kecil, enzim dapat mengatur

reaksi tertentu sehingga di dalam keadaan normal tidak terjadi penyimpangan-

penyimpangan hasil akhir reaksinya.di dalam sel terdapat banyak jenis enzim

yang berlainan kekhasannya, sehingga suatu enzim hanya mampu menjadi

katalisator untuk reaksi tertentu saja. Ada enzim yang dapat mengkatalisa

suatu kelompok substrat, ada pula yang hanya satu kelompok substrat saja,

dan ada pula ynag bersifat stereospesifik. Karena enzim mengkataliser reaksi-

reaksi di dalam system biologis, maka enzim juga disebut sebgai biokatalisator

Bagian protein dari enzim disebut apo-enzim, sedangkan enzim

keseluruhannya disebut haloenzim.

Bagian protein ( tak aktif )          +          non-protein                   = haloenzim

( aktif )

            ( apoenzim )                          ( gugus protestik )

Kespesifikan enzim dibedakan dalam : kespesifikan optik dan gugus ( M.T

Simanjuntak, 2003 ). Kespesifikan optik tampak pada enzim-enzim yang

bekerja terhadap karbohidrat. Umumnya, enzim-enzim ini hanya bekerja

terhadap karbohidrat isomer D bukan L. Sebaliknya, enzim-enzim yang

bekerja terhadap asam amino dan protein hanya bekerja pada asam amino L

dan bukan pada isomer D. Kespesifikan gugus menunjukkan bahwa enzim

hanya dapat bekerjaterhadap gugus yang tertentu. Enzim alkohol

dehidrogenase tidak dapat mengkatalisis reaksi dehidrogenasi pada senyawa

bukan alcohol ( Hafiz Soewoto,2000).

Klasifikasi enzim berdasar Commission on Enzim Of The

Internasional uinion of Biochemistry ( CEIUB ) atau Internasional Enzim

Commision ( IEC ) adalah sebgai berikut :

1. Enzim yang berperan dalam reaksi oksidasi-reduksi contoh oksigenase

2. Enzim yang berperan dalam reaksi pemindahan gugus tertentu contoh

enzim transaminase

3. Enzim yang berperan dalam reaksi hidrolisis contoh peptidase

4. Enzim yang berperan dalam mengkatalisis reaksi addisi atau

pemecahan ikatan rangkap contoh liase

5. Enzim yang berperan dalam mengkatalisis reaksi isomerisasi contoh

alanin rasemase

6. Enzim yang berperan dalam mengkataliser reaksipembentukan ikatan

dengan bantuan pemecahan ikatan dalam ATP( ligase ) ( M.T.

Simanjuntak, 2003).

Seperti molekul protein lainnya sifat biologis enzim sangat dipengaruhi

oleh berbagai faktor fisiko kimia. Enzim bekerja pada kondisi tertentu yang

rerlatif ketat. Faktor-faktor yang mempengaruhi kerj enzim antara lain suhu,

pH, oksidasi oleh udara atau senyawa lain, penyinaran ultraviolet, sinar x, α, β,

dan γ. Di samping itu, kecepatan reaksi enzimatik dipengaruhi pula oleh

konsentrasi enzim maupun substratnya ( Hafiz Soewoto,2000).

Pengaruh konsentrasi substrat :

Pada suatu reaksi enzimatik bila konsentrasi substrat diperbesar,

sedangkan kondisi lainnya tetap, maka kecepatan reaksi (v) akan meningkat

sampai suatu batas kecepatan maksimum (V). Pada titik maksimum ini enzim

telah jenuh dengan substrat.

Dalam suatu reaksi enzimatik, enzim akan mengikat substrat

membentuk kompleks enzim-substrat [ES], kemudian kompleks ini akan

terurai menjadi [E] dan produk [P]. Makin banyak kompleks [ES] terbentuk,

makin cepat reaksi berlangsung sampai batas kejenuhan [ES]. Pada

konsentrasi substrat [S] melampaui batas kejenuhan kecepatan reaksi akan

konstan. Dalam keadaan itu seluruh enzim sudah berada dalam bentuk

kompleks E-S. Penambahan jumlah substrat tidak menambah jumlah

kompleks E-S.

.

II. Tujuan Praktikum

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah Untuk mengetahui pengaruh

konsentrasi substrat terhadap aktivitas enzim katalase.

III. Hipotesis

Hipotesis dari praktikum ini adalah bahwa konsentrasi substrat

berpengaruh terhadap aktivitas enzim katalase.

IV. Alat dan Bahan

1. Tabung Reaksi dan rak Tabung Reaksi

2. Mistar

3. Pipet ukutan 10ml dengan penyedotnya

4. Pena marker atau label

5. Scalpel atau cutter

6. Akuades

7. Hati sapi segar

8. Hidrogen Peroksida (H2O2

V. Cara Kerja

1. Siapkan 5 tabung reaksi yang diberi label 1-5

2. Ambil hidrogen peroksida (H2O2) dan akuades kedalam tabung reaksi

dengan volume sebagai berikut:

Tabung

Reaksi

Volume (mL)

H2O2 Akuades

1 0 10

2 2,5 7,5

3 5 5

4 7,5 2,5

5 10 0

3. Aduk larutan pada tiap-tiap tabung reaksi

4. Sementara ada beberapa yang menyiapkan tabung reaksi, yang lain

menyiapkan 5 potong hati sapi berbrntuk balok dengan panjang 6cm,

lebar 0,5cm, dan tinggi 0,5cm.

5. Masukkan masing-masing potongan hati sapi kedalam tabung reaksi.

Tandai ketinggian awal permukaan larutan dengan menggunakan pena

marker.

6. Setelah 5 menit ukur ketinggian gelembung oksigen yang terbentuk di

dalam tabung reaksi. Jika gelembung oksigen pada salah satu tabung

reaksi sudah mencapai salah satu mulut tabung sebelum 5 menit, maka

ukur ketinggian gelembung pada semua tabung reaksi. (ketinggian

gelembung oksigen diukur mulai dari batas awal tanda marker sampai

batas teratas gelembung oksigen).

7. Catat data yang kamu peroleh pada tabel.

8. Buatlah suatu grafik sebagai hubungan aktivitas enzim menggunakan

ketinggian gelembung oksigen dengan konsentrasi Hidrogen

Peroksida.

VI. Hasil Praktikum

Berdasarkan praktikum yang telah dilaksanakan, hasilnya adalah sebagai

berikut:

Tabung

Reaksi Volume (mL)

Ketinggian

(cm)

Adanya

Gelembun

g

Banyak

Gelembungwaktu

H2O2 Akuades awal akhir

1 0 10 7 9,8 tidak ada -

2 2,5 7,5 7 luber ada ++ 01:52.6

3 5 5 7 luber ada +++ 01:41.1

4 7,5 2,5 7 luber ada ++++ 00:10.6

5 10 0 7 luber ada +++++ 00:08.1

VII. Analisis Data

a) Tabung reaksi 1,yaitu pada 10 ml aquades. Tidak terjadi reaksi apapun.

Tidak muncul gelembung dan tidak terjadi perubahan ketinggian.

b) Tabung reaksi 2, yaitu pada 7,5 ml aquades dan 2,5 ml hidrogen

peroksida, terjadi reaksi walaupun berjalan lambat. Hal ini dapat

dilihat dengan munculnya sedikit gelembung dan waktu yang

dibutuhkan untuk mencapai ketinggian maksimum (luber) yaitu 1

menit 52 detik.

c) Tabung reaksi 3, yaitu 5,0 ml aquades dan 5,0 ml hidrogen peroksida,

terjadi reaksi yang lebih cepat di banding pada tabung reaksi 2. Hal ini

dikarenakan dalam waktu 1 menit 41 detik muncul gelembung dengan

ketinggian maksimum (luber)

d) Tabung reaksi 4, yaitu 2,5 ml aquades dan 7,5 ml hidrogen peroksida,

terjadi reaksi yang cepat disbanding tabung reaksi 3. gelembung sudah

melebihi mulut tabung reaksi pada detik ke-10

e) Tabung reaksi yang ke-5, yaitu 10 ml hidrogen peroksida, terjadi reaksi

yang sangat cepat, karena gelembung melebihi mulut tabung reaksi

hanya dalam waktu 8 detik

VIII. Diskusi (Jawaban Pertanyaan)

1. Darimanakah sumber katalase pada percobaan ini?

Jawab: Sumber katalase pada percobaan ini adalah hati sapi dengan

hidrogen peroksida sebagai substratnya.

2. Grafik Hubungan Aktivitas Enzim menggunakan Ketinggian Gelembung

Oksigen dengan Konsentrasi Hidrogen Peroksida

IX. Simpulan

Dari percobaan ini dapat disimpulkan bahwa:

1. aquades sebanyak 10 ml tidak mempengaruhi kecepatan reaksi sama sekali

( karena tidak ada substrat)

2. Adanya hidrogen peroksida, menyebabkan reaksi berlangsung lebih cepat

3. Hati sapi berperan sebagai enzim, sedangkan hidrogen peroksida sebagai

substratnya (bahan tempat enzim bekerja).

4. Jumlah atau konsentrasi substrat berpengaruh terhadap mekanisme kerja

enzim. Kerja enzim berlangsung lambat apabila jumlah substratnya sedikit.

Sebaliknya, jika jumlah substratnya banyak, maka akan semakin cepat

kerja suatu enzim tersebut.

X. Daftar Pustaka

Sembiring, Langkah. 2006. Biologi Untuk Kelas XII. Jakarta: Sunda

Kelapa

http://chocolate-purplepharmacy.blogspot.com/2011/04/pengaruh-suhu-

ph-konsentrasi-enzim.html

LAMPIRAN KEGIATAN PRAKTIKUM