Bawang putih (Allium sativum) sebagai agen anti-Candida:

perbandingan khasiat bawang putih segar dan ekstrak beku-kering

K.M. Lemar, M.P. Turner dan D. Lloyd

Mikrobiologi (BIOSI 1), Cardiff University, Cardiff, Wales, Inggris

2002/5: menerima 15 Januari 2002, direvisi 29 April 2002 dan diterima 13 Mei 2002

K. M. L E M A R, M. P. T U R N E R A N D D. L L O Y D. 2002.

Tujuan: Untuk menentukan efek dari ekstrak segar dan beku-kering dari Allium sativum pada fisiologi dan morfologi Candida albicans.

Metode dan Hasil: Penghambatan pertumbuhan glukosa-ragi ekstrak-pepton diukur menggunakan pembaca plat multiwell. Investigasi pemindaian mikroskop elektron transmisi dan menunjukkan hilangnya integritas struktural. Kromatografi gas-spektrometri massa dari ekstrak dipekerjakan untuk memisahkan dan mengukur diduga penghambatan komponen yang mengandung sulfur. Kesimpulan: ekstrak bawang putih segar memiliki khasiat lebih besar dari ekstrak bawang putih bubuk seperti ditunjukkan baik oleh dampaknya pada morfologi dan penghambatan pertumbuhan.

Signifikansi dan Dampak Studi: mana-mana patogen oportunistik C. albicans sensitif terhadap bawang putih; perlawanan terhadap spektrum yang luas dari prinsip-prinsip aktif hadir tidak mungkin sehingga efek anticandidal yang dapat memberikan rute alternatif penting untuk kemoterapi.

PENGANTAR

Patogen oportunistik Candida albicans dapat ditemukan dalam saluran pencernaan oral-in hingga 80% dari manusia sehat. Spesies Candida, bagaimanapun, sekarang diakui sebagai penyebab penyakit dengan frekuensi tinggi dan salah satu sumber yang paling umum dari infeksi nosokomial (Verduyn Lunel et al. 1999). Ledakan jelas dalam infeksi jamur dapat dijelaskan oleh meningkatnya jumlah pasien dikompromikan immuno- (Sullivan dan Coleman 1998), misalnya orang-orang dengan gangguan sistem kekebalan tubuh dan mereka yang menderita diabetes, cystic fibrosis dan leukemia. Ditambah dengan meluasnya penggunaan antibiotik ini semua mungkin faktor (Pfaller 1994; Fridkin dan Jarvis 1996).

Patogen manusia ini menyebabkan dangkal serta berpotensi mengancam nyawa mikosis. Meskipun mekanisme invasif masih belum sepenuhnya dipahami secara detail, ada beberapa faktor yang diyakini penting: interaksi protein-protein antara dinding sel Candida dan host permukaan mukosa. Bentuk-bentuk morfologi C. albicans (Phan et al.

2000) dan negara fisiologis tuan rumah juga dianggap penting. Dalam sampel jaringan, kehadiran

Surat menyurat ke: K.M. Lemar, Mikrobiologi (BIOSI 1), Cardiff University, Cardiff CF10 3TL, Inggris (e-mail: Lemarkm@cf.ac.uk).

hifa, pseudohyphae dan blastoconidia dapat patologis karakteristik genic C. albicans (Drago et al. 2000). Kemampuannya untuk mentranslokasi melalui mukosa epitel (Cole et al 1988;.. Alexander et al 1990) dan jaringan lain baru-baru ini dilaporkan sebagai faktor patogen tambahan (Drago et al, 2000.).

Watanabe (1966) melakukan penelitian yang luas ke dalam nilai farmasi jus bawang putih dan laporan berikutnya dicatat bawang putih sebagai memiliki aktivitas yang cukup terhadap jamur genic patologis dan ragi. Hal ini dapat digunakan sebagai agen anti jamur atau antimycotic dan telah lama digunakan dalam pengobatan tradisional. Schmidt dan Marquardt (1936) pertama kali didirikan khasiat bawang putih dengan budaya epidermorphyte. Kemudian, penulis Amerika dan Rusia melaporkan temuan yang sama (Leskinov 1947; Kecil et al 1947.). Allicin, komponen individu bawang putih, telah kemudian dilaporkan menghambat pertumbuhan jamur. Kabelik dan Hejtmankova-Uhrova (1968) adalah di antara yang pertama untuk melaporkan efek luar biasa kuat dari bawang putih terhadap ragi patogen, namun penggunaan tic therapeu- terbatas untuk kandidiasis. Aktivitas antimikotik allicin telah dilaporkan karena banyak faktor yang berbeda, termasuk penghambatan suksinat dehidrogenase. Hal ini tampaknya mungkin sebagai tarif penyerapan oksigen dalam Mycobacterium tuberculosis berkurang 70% dengan adanya bawang putih (Adetumbi 1985). Namun, mekanisme pertumbuhan C. albicans mungkin lebih kompleks seperti penghambatan sintesis

ª 2002 Masyarakat untuk Mikrobiologi Terapan

asam nukleat, protein dan lipid juga diamati

(Syzoma 1952).

BAHAN A N D metho D S Organism dan budaya

Candida albicans (Berkhout) 3153 ditumbuhkan dalam medium YPD (bacto-pepton 2% (b / v), Difco, Michigan, USA; ekstrak ragi 1% (b / v), Oxoid, Hampshire, Inggris dan glukosa 2% (w / v)). Budaya awal fase stasioner digunakan sebagai inokulum sebagai pengenceran 1: 100 untuk 20 ml budaya dalam labu kerucut 100-ml. Pertumbuhan aerobik pada 30 C dalam rotary shaker (150 rev min) 1). Jumlah sel yang menghalangi- ditambang dengan slide haemositometer (Fuschs-Rosenthal, London, UK) setelah pengenceran dalam media steril. Densitas optik (A450 nm) diukur dengan menggunakan spektrofotometer (SP-1400; Pye-Unicam, Cambridge, UK). Budaya saham dari C. albicans ditumbuhkan semalam pada 30 C dan dipertahankan pada

4 C pada YPD agar yang mengandung 2% (b / v) agar (Oxoid).

Persiapan bawang putih

Siung bawang putih hancur untuk memberikan ekstrak segar bawang putih (FGE) dan ekstrak bawang putih bubuk (EPG; disediakan oleh Cultech Biospeciality Produk, Swansea, Wales, Inggris) disiapkan dengan konsentrasi yang dibutuhkan (w / v) dalam medium steril. The FGE diizinkan untuk berdiri selama 30 menit dan kemudian kedua ekstrak ditempatkan pada suhu kamar selama 30 menit. Ekstrak disentrifugasi pada 3900 g selama 10 menit dan cairan supernatant melewati steril 0Æ2-lm filter (Millipore, Watford, Inggris). Solusi saham dari 40 mg ml) 1 disiapkan pada hari yang sama pengujian.

Penghambatan biosida

Untuk kedua jenis persiapan bawang putih, berbagai konsentrasi 0-20 mg ml) 1 diuji dalam termos 100 ml diinokulasi dengan

200 ll. Budaya ditempatkan di rotary shaker (150 rev min) 1) pada 30 C dan 200 ll setiap budaya tepat diencerkan diukur (A450 nm) pada interval 90-menit sampai budaya kontrol tidak menunjukkan peningkatan lebih lanjut dalam penyerapan.

Mikroskop elektron

Sel tetap di 3% (v / v) glutaraldehida dalam buffer fosfat, pH 7Æ4. Dehidrasi dicapai oleh 10-menit mencuci etanol berurutan. Penurunan ditempatkan ke sebuah coverslip kaca bulat untuk titik pengeringan kritis (CPD 030; Balzers, Lerchtenstein). Sampel dipasang, menggunakan cat perak (Agar Ilmiah, Essex, Inggris), ke sebuah ium slab alumin- (10 • 10 mm jenis JEOL; Agar tertentu). Lapisan menggerutu dilakukan dalam coater menggerutu (S150B;

Edwards, West Sussex, Inggris) dan gambar dilihat menggunakan mikroskop elektron scanning (5200LV; JEOL, Herts, Inggris).

Transmisi mikroskop elektron

Sel tetap dalam buffer cacodylate, pH 6Æ9, yang berisi

1% paraformaldehyde dan 2% glutaraldehid, pada 4 C untuk

1 jam. Postfixing selanjutnya digunakan buffered osmium ide tetrox- pada 4 C selama 1 jam. Sel-sel disentrifugasi dan dehidrasi dalam mencuci berturut etanol dengan mencuci akhir dalam etanol absolut selama 30 menit. Pelet sel yang tertanam ke Spurr resin dan ultrathin bagian yang diperoleh (Ultratome III; LKB, Stockholm, Swedia). Bagian yang dipasang pada 0Æ5% Pioloform

Waktu (h)

Gambar. 1 efek hambat ekstrak bawang putih segar pada pertumbuhan

Candida albicans. Konsentrasi (mg ml) 1): r, 0; j, 0Æ5; m, 1; •, 1Æ5;

*, 2; e, 0; h, 1; n, 1Æ5; s, 1Æ75. Terbuka dan tertutup simbol mewakili terpisah percobaan