aplikasi immunochromatography untuk mendeteksi kandungan babi dalam produk pangan

5/28/2018 Aplikasi Immunochromatography Untuk Mendeteksi Kandungan Babi Dalam Produk Pangan

1/6

AplikasiImmunochromatographyuntuk Mendeteksi

Kandungan Babi dalam Produk Pangan Olahan

Ratih Rizqi Nirwana, S.Si., M.Pd

Di akhir tahun 2012 yang lalu, masyarakat Indonesia, khususnya di wilayah

Jabodetabek dihebohkan berita adanya bakso sapi yang pada pembuatannya dioplos

dengan daging babi hutan (celeng). Pemberitaan yang terus menerus di barbagai media

tentang hal ini, tentu saja menyebabkan masyarakat Indonesia yang sebagian besar

beragama Islam menjadi was-was ketika akan mengkonsumsi bakso. Sebelum

pemberitaan ini marak, tepatnya ketika menjelang lebaran tahun 2012, juga ramai

diberitakan adanya pencampuran daging sapi segar dengan daging babi oleh pedagang

nakal. Hal ini disebabkan karena harga daging sapi yang cukup tinggi, sehingga untuk

menekan harga jual daging sapi, beberapa oknum nekat mencampurkan daging babi

diantara daging sapi. Tetapi pemanfaatan babi ternyata tidak hanya terbatas pada

produk makanan. Pada September 2012, walaupun tidak seheboh pemberitaan bakso

sapi yang dioplos dengan daging babi, juga telah dilaporkan oleh Reportase Investigasi

(Trans TV, 15 September 2012) mengenai adanya pencampuran lemak babi ke dalam

body lotionpalsu.

Tidak diragukan lagi bahwa babi memiliki segudang manfaat. Dari bulu hingga

kotorannya, semua bisa dimanfaatkan. Bulu babi biasa dimanfaatkan sebagai kuas

(kuas kosmetik, kuas cat, kuas masak, kuas lukis, dll). Lemak babi bisa dihidrolisis

menjadi gliserin untuk dimanfaatkan dalam pembuatan soft drink, bahan kosmetik

(pelembab, hand & body lotion), sabun, bahan roti, dll. Lemak babi juga bisadimanfaatkan sebagai emulsifier, pembuatan coklat, pengempuk / pelezat roti dan

masakan,serta sebagai bahan starter vetsin (kasus Ajinomoto). Dagingnya merupakan

sumber protein hewani yang murah, disamping sifatnya yang empuk dan berserat halus.

Tulang babi juga biasa digunakan dalam industri makanan/minuman,misalnya

penggunaan arang tulang sebagai filter penyaring air mineral, sebagai sumber gelatin

untuk pembuatan soft capsule dan soft candy (permen lunak). Bersama sama denag

kulit babi, tulang babi juga banyak dimanfaatkan dalam industry pariwisata, yaitu

dalam pembuatan handicraft seperti patung, bompet, sepatu, dll. Organ dalam babi juga

tak kalah dalam hal pemanfaatannya. Organ dalam babi bisa digunakan dalam

transplantasi ginjal, hati dan jantung. Plasenta-nya diekstrak untuk dimanfaatkan dalam

industri kosmetika (facial, hand & body lotion),sabun, dll. Usus babi biasa digunakan


2/6

untuk casing sosis dan benang jahit luka. Enzim pencernaannya (amilase, lipase,

tripsin, pankreatin, pepsin, dll) juga sering dimanfaatkan manusia. Yang terakhir,

kotoran babi juga banyak dimanfaatkan. Misalnya saja di Jepang untuk pupuk Apel,

dan di Indonesia sebagai Pupuk sayuran (di Baturraden, Temanggung, Wonosobo, dll).

Akan tetapi, walaupun babi memiliki banyak manfaat, tetap saja hewan ini diharamkan

dalam Islam.

Yang menjadi masalah, bagaimana cara membedakan produk yang mengandung

babi dengan produk yang tidak mengandung babi? Seperti yang dikutip Republika,

menurut Ahli Gizi Institut Pertanian Bogor, Dr. Ikeu Tanziha, sulit membedakan

daging sapi dan daging babi, jika sudah dalam bentuk bakso (Republika Online 13

Desember 2012). Hal ini karena protein dari babi telah terdenaturasi dan termodifikasi

karena adanya perlakuan pemanasan. Selain itu, seorang ahli dari UNPAD juga

mengatakan bahwa kandungan babi dalam body lotion palsu yang dibuat oleh oknum

seperti yang telah diberitakan Reportase Investigasi, tidak dapat dideteksi.

Sebenarnya, bukanlah hal yang mustahil untuk mengetahui adanya kandungan

babi dalam suatu produk. Selama ini, identifikasi kandungan babi bisa dideteksi dengan

cara PCR (Polymerase Chain Reaction) dan ELISA (Enzyme-linked immunosorbent

assay). PCR merupakan teknologi biokimia dalam biologi molekuler untuk

memperkuat salinan tunggal atau beberapa potong DNA melalui beberapa siklus

penguatan, menghasilkan ribuan sampai jutaan salinan dari urutan DNA tertentu.

Sedangkan ELISA adalah adalah format yang populer dari pengujian biokimia analitik

yang menggunakan immunoassay enzim - fasa padat untuk mendeteksi keberadaan

suatu zat, biasanya antigen, dalam sampel cair atau sampel basah. Kedua metode

tersebut sudah sangat dikenal dan sering digunakan untuk mengidentifikasi kandungan

babi. Akan tetapi, kedua metode ini dikenal mahal, dan harus melalui serangkaianlangkah yang rumit di laboratorium. Lagipula, bagi masyarakat umum, kedua metode

tersebut tidaklah mudah digunakan untuk mendeteksi kandungan babi kapan saja dan

dimana saja. Pada makalah ini penulis membatasi pada penentuan ada tidaknya

kandungan babi hanya pada produk olahan pangan saja.

Pada Agustus 2012 lalu, beberapa peneliti di Jepang mematenkan penelitiannya

tentang pendeteksi kandungan babi dengan menggunakan ujiImmunochromatography

yang dikombinasikan dengan nanoteknologi (European Patent Application, Bulletin

2012/31). Menurut mereka, cara ini lebih mudah, bisa digunakan kapan saja dan di

mana saja, dan lebih murah. Immunochromatography merupakan teknik kromatografi

fasa padat dengan eluen (fasa gerak) reagen immunologis. Sedangkan nanoteknologi


3/6

adalah teknologi manipulasi materi pada skala atomic atau molekuler, yang salah satu

dimensinya berukuran paling tidak dari 1 sampai 100 nanometer (10-9

m).

Prinsip dasar aplikasi immunochromatography merupakan gabungan dari

prinsip kromatografi dan immunoassay. Kromatografi merupakan teknik pemisahan

kimia berdasarkan perbedaan distribusi sampel dalam dua fasa yang berbeda, yaitu fasadiam dan fasa gerak. Sedangkan immunoassay merupakan metode untuk menentukan

suatu substansi (yang selanjutnya akan disebut antigen) dengan menggunakan antibodi.

Antigen merupakan zat asing yang masuk ke dalam tubuh, yang akan

merangsang timbulnya antibodi. Pada umumnya antigen merupakan makromolekul

berupa protein, tetapi beberapa diantaranya adalah oligosakarida atau polipeptida

dengan berat molekul lebih dari 10.000. Antibodi juga merupakan protein. Bedanya

dengan antigen, jika antigen ini adalah zat/substansi asing, antibodi merupakan protein

yang dibentuk oleh sel darah putih dalam rangka sistem pertahanan/kekebalan tubuh.

Jika ada antigen masuk ke dalam tubuh, misalnya antigen dari bakteri atau virus, maka

tubuh akan memproduksi antibodi yang spesifik berikatan dengan antigen tersebut.

Konfigurasi molekul antara antigen-antibodi yang sedemikian rupa, sehingga

hanya antibodi yang timbul sebagai respon terhadap suatu antigen tertentu saja yang

cocok dengan permukaan antigen itu sekaligus bereaksi dengannya. Interaksi antigen-

antibodi bisa terjadi karena adanya ikatan hidrogen, ikatan van der waals dan juga

ikatan elektrostatik antara keduanya (Sumartini, S., 2011).

Prinsip interaksi antigen-antibodi yang spesifik inilah yang mendasari

immunoassay yang selama ini telah berkembang, seperti ELISA (Enzyme-linked

immunosorbent assay), RIA (radioimmunoassay) dan CIA (chemoluminessence-

immunoassay), dan yang terbaru yaitu immunochromatography . Menurut Stolle, Babi

memiliki protein spesifik dengan berat 17.000 Da. Protein spesifik yang tidak dimiliki

oleh hewan-hewan lain tersebut, bisa digunakan sebagai antigen untuk memproduksi

antibodi spesifik (Ardhani, F., dkk, 2007). Tetapi ternyata protein spesifik yang ada

pada daging babi yang telah diolah dengan panas, memiliki perbedaan. Protein spesifik

dari produk daging babi yang telah diolah dengan pemanasan berada pada kisaran berat

molekul 23.000 dan 50.000 Dalton (Sakakibara, 2012)

Untuk bisa digunakan untuk mendeteksi kandungan babi dalam bahan pangan

olahan, diperlukan antibodi spesifik dari babi yang telah mengalami pengolahan suhu

tinggi. Antibodi ini diperoleh dari hewan seperti mencit ataupun kelinci yang telah

diimunisasi dengan serum albumin babi -yang telah terdenaturasi karena panas.

Sakakibara dkk kemudian mengembangkan alat/kit Immunochromatography yang


4/6

terdiri atas bagian aplikasi sampel (sample pad), bagian penyangga material yang telah

dilabeli (conjugate pad), bagian membran pembawa sebagai medium kromatografi,

bagian pendeteksi dan bagian penyerap (absorbtion pad). Gambar 1 berikut merupakan

gambaran dari kit tersebut.

Gambar 1. Alat immunochromatography

Bagian aplikasi sampel terdiri atas lembaran berpori yang bersifat cepat

menyerap sampel tetapi kua. Pada bagian ini bisa digunakan filter selulosa, filter kaca,

poliuretan, poliasetat, selulosa asetat, nilon, serat kapas, dll. Sedangkan reagen untuk

mengekstrak sampel berisikan larutan buffer, surfaktan non-ionik dan protein.

Bagian penyangga material berlabel (conjugate pad) mengandung molekul yang

memiliki kemampuan mengenali sampel analit, yaitu antibodi poliklonal dari antigen

yang berasal dari protein spesifik dari babi yang telah diolah dengan panas. Bagian

penyangga dikonfigurasikan sedemikian rupa untuk mendukung reagen yang telah

dilabeli dengan zat pengenal. Zat pengenal yang dimaksud misalnya partikel koloid

logam emas atau perak, lateks (karet) berwarna, enzim, zat yang bisa berfluoresens, dll.

Diantara material-material tersebut, penggunaan koloid emas menunjukkan

perkembangan warna yang kuat, mudah diproduksi, dan mudah diaplikasikan untuk

pelabelan. Guna kepentingan pelabelan, lebih disukai digunakan ukuran partikel emas

koloid 30 - 100 nm.

Bagian medium kromatografi terdiri atas membran pembawa dan bagian

pendeteksi. Bagian membran pembawa bisa berasal dari kelompok nitroselulosa,

selulosa asetat, nilon, polietet sulfon, polivinil alcohol, polyester, fiber gelas,

polyolefin, selulosa dan bisa juga dari polimer buatan yang terdiri dari campuran

beberapa serat tersebut. Sedangkan bagian pendeteksi mengandung antibodi poliklonal

yang diimobilisasi pada lembar nitroselulosa

Cara kerja dari sistem ini sebenarnya sangat sederhana, seperti terlihat pada

Gambar 2 berikut. Sampel dilarutkan ke dalam cairan pengekstraksi yang disediakan,


5/6

lalu dikocok. Setelah itu dilakukan pencelupan test kit immunochromatography ke

dalam larutan sampel yang telah dibuat, dan ditunggu selama 10 menit. Hasil yang

positif ada kandungan babi ditunjukkan adanya 2 garis, dan jika negatif hanya 1 garis

yang terbentuk.

Gambar 2. Proses deteksi kandungan babi pada sampel menggunakan

immunochromatography

Prinsipnya sebagai berikut. Sampel dilarutkan pada cairan pengekstraksisehingga proteinnnya terlarut. Cairan tersebut tersusun atas susu skim, surfaktan Tween

20, sodium klorida yang ditambahkan ke dalam larutan buffer pH 8, dan ditambah

bahan pengawet sodium azida. Test kit kemudian dicelupkan pada larutan sampel. Pada

test kit selanjutnya terjadi serangkaian reaksi. Jika pada sampel mengandung babi,

maka antigen babi akan terikat oleh antibodi yang telah dilabeli emas (antigen pertama)

yang terdapat pada bagian conjugate pad dari kit immunochromatography tersebut.

Kompleks antigen babi dengan antibodi lalu berjalan bersama hingga di bagian

pendeteksi, dan diikat oleh antigen ke-dua, sehingga timbul warna. Jika dalam sampel

tidak mengandung babi, maka tidak akan timbul warna karena tidak ada kompleks

antigen-antibodi berlabel yang ditangkap oleh antigen kedua. Secara singkatnya, dari

immunochromatography bisa dilihat pada Gambar 3 berikut.

Gambar 3. Prinsip deteksi denganImmunochromatography


6/6

Dengan immunochromatography kit tersebut, deteksi kandungan babi dalam

produk pangan bisa dilakukan kapan saja dan di mana saja. Hal ini karena jika dilihat

dari bahan-bahannya, produksi kit ini jauh lebih murah dari pada metode ELISA dan

PCR yang sudah populer.

Saat ini di Indonesia LPPOM MUI sudah mulai menggunakan kit pendeteksikandungan babi (porcine detection kits) produksi Amerika. Tetapi kit pendeteksi

kandungan babi belum dijual luas di pasaran. Harapannya, di masa mendatang

Indonesia bisa memproduksi sendiri kit ini, sehingga masyarakat Indonesia yang

kebanyakan pemeluk agama Islam bisa memanfaatkannya dalam proses pemilihan

makanan.

Daftar Pustaka

Ardhani, F., dkk, Deteksi Protein Spesifik Untuk Membedakan Daging Babi dengan

Berbagai Macam Daging Spesies Lain,Bulletin PeternakanVol 31 (1), 2007.

Koolman, J., dan Rohm, KH., 2000, Atlas Berwarna dan Teks Biokimia, Terj. LestariMuchtadi, Hipokrates, Jakarta

Sakakibara, Y., et.al, 2012a, European Patent Application Bulletin, Method For

Detecting Pork In Processed Food And Detection Kit Therefor, Japan, EP2482071,diunduh 24 Desember 2012 dari https://data.epo.org/publication-

server/rest/v1.0/publication-

dates/20120801/patents/EP2482071NWA1/document.pdf

Sakakibara, Y., et.al, 2012b, Patent, Method For Detecting Raw Pork And Detection

Kit Therefor, Japan, EP2541247, diunduh 9 Januari 2013 dari

http://www.freepatentsonline.com/EP2541247A1.html

Reportase Investigasi Trans TV, 15 September 2012.

Republika Online, 13 Desember 2012, Bakso Campuran Daging Babi dan Sapi Sulit

Dibedakan, diakses 7 Januari 2013

http://www.republika.co.id/berita/nasional/jabodetabek-nasional/12/12/13/meymg0-bakso-campuran-daging-babi-sapi-sulit-dibedakan

Sumartini, S., dkk, 2011, Aplikasi ELISA Kit untuk Mendeteksi Adanya Daging Babi

dalam Makanan, Prosiding Seminar Tantangan Penelitian Kimia, diunduh 25

Desember 2012 dari

http://elib.pdii.lipi.go.id/katalog/index.php/searchkatalog/downloadDatabyId/4074/

4075.pdf

Tanaka Precious Metal, 2010, Tanaka Precious Metals is Ready to Supply Japan and

Islamic Countries with a Sensitive Easy to Use Pork Detection Kits for Detection

of Pork in Food,Artikel Online, diunduh 24 Desember 2012 dari

http://www.tanaka.co.jp/english/topics/pdf/topics_20100405_01.pdf

Sujadi, 1988,Metode Pemisahan, Penerbit Kanisius, Yogyakarta.

aplikasi immunochromatography untuk mendeteksi kandungan babi dalam produk pangan

Documents