LAPORAN PRAKTIKUM

ANALISIS KANDUNGAN TOTAL LIPID

Oleh:

Golongan C/Kelompok 3C

1. Helmi Faghi Setiawan (161510501113)

2. Nimas Ardia Nandini (161510501148)

LABORATORIUM FISIOLOGI TUMBUHAN

PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS JEMBER

2017

1

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Tanaman umumnya melakukan proses fotosintesis agar dapat mencukupi

kebutuhan hidupnya. Proses fotosintesis memerlukan unsur hara yang diubah

menjadi energi dalam bentuk atp. Hasil fotosintesis yang disebut dengan fotosintat

akan di distribusikan ke seluruh bagian tanaman tak terkecuali pada biji tanaman

yang memiliki biji seperti padi. Malai tanaman padi akan disuplai fotosintat

hingga padi yang mula-mula berwarna hijau akan berwarna kuning kecoklatan.

Biji padi tersebut akan mengalami pengisian isi oleh cairan fotosintat hingga biji

tersebut masak, selain fotosintat yang terdapat pada malai terdapat pula lemak

nabati dari tanaman padi. Kandungan lemak yang terdapat pada biji padi dapat

berbeda-beda berdasarkan varietas dan juga jenis benih tersebut apakan milk rice

atau brown rice.

Kedua jenis biji padi diatas memiliki karakteristik yang berbeda, untuk

milk rice adalah biji padi yang telah diolah sedemikian rupa sehingga menjadi

beras yang dapat kita konsumsi sehari-hari. Sesuai namanya milk rice memiliki

warna putih bersih. Pembeda utama antara padi brown rice dan milk rice adalah

warnanya. Wana padi brown rice adalah kecoklatan. Warna coklat yang

dihasilkan padi ini dikarenakan kulit ari yang menempel pada padi tidak dikupas

sehingga warna padi tetap kecoklatan. Berbeda halnya dengan padi milk rice yang

mana harus dikupas kulit arinya terlebih dahulu sehingga berwarna putih bersih.

Secara logika brown rice memiliki kandungan lemak yang lebih tinggi

dibandingkan dengan padi milk rice dan hal tersebut terletak pada kulit beras.

Warna kuning kecoklatan pada tanaman maupun biji padi merupakan indikator

terdapatnya lemak pada biji terebut.

Cadangan makanan pada tanaman tidak selalu berbentuk hal yang dapat

manusia lihat seperti buah melainkan juga dapat berbentuk lemak. Lemak

tanaman umumnya lebih sehat dibandingkan dengan lemak pada hewan. Lemak

nabati atau lemak yang berasal dari tumbuhan dapat diolah menjadi bentuk lain

yang tentunya sangat berguna bagi kehidupan manusia.

2

Lipid atau lemak merupakan senyawa yang tidak dapat dipecah oleh air

karena memiliki rantai hidrokarbon yang panjang sehingga lemak memiliki sifat

non polar dan air adalah polar. Senyawa non-polar hanya dapat dipecah atau larut

oleh larutan non-polar. Contoh larutan non-polar adalah benzena, ethyl ether,

karbondioksida dan kloroform. Pemisahan antara lemak dan endapan-endapan

selain lemak dapat diekstraksi menggunakan metode Bligh-Dyer Method. Hal

yang diperhatikan dalam melakukan ekstraksi dengan cara Bligh-Dyer Method

adalah struktur, tekstur, sensitivitas dan kandungan lipid. Ke empat unsur tersebut

saling berikatan dan memiliki kesinambungan dan harus terpenuhi satu sama

lainnya. Oleh karena itu pada praktikum kali ini akan dilakukan analisa

kandungan lipid total.

1.2 Tujuan

1. Memisahkan atau bagian lipid dari komplek protein, karbohidrat dan minor

komponen sepeti asam amino acid mineral.

2. Menjaga lipid tersebut tidak rusak selama dalam proses isolasi dan sebelum

analisis.

3

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA

Lipid merupakan senyawa yang tidak dapat larut dalam air karena

senaywa ini bersifat non-polar yang mana hanya dapat dilarutkan dengan senyawa

non-polar juga. Lipid dapat dipisahkan dengan senyawa-senyawa lain dengan

menggunakan pengekstraksian lemak, metode tersebut menggunakan bahan utama

kloroform metanol dengan perbandingan 2:1. Menggunakan kloroform metanol

karena dapat menghasilkan sekat antara lemak dengan pellet (Sarungallo dkk,

2015). Selain menggunakan cara tersebut untuk mendapatkan lemak dari

tumbuhan khususnya biji dapat dilakukan dengan cara pengepresan. Kedua cara

dapat dikombinasikan sehingga dapat menghasilkan lemak yang berkualitas.

Lemak yang dihasilkan melalui proses pengepresan bisa jadi tercampur dengan

ampas jika saringan terlalu lebar jaraknya (Widayat, 2013).

Proses pengekstraksian dapat menghasilkan lemak dengan catatan hal-hal

kecil seperti penggunaan alat harus sesuai atauran dan juga durasi untuk

mengekstrak harus diperhatikan. Kloroform adalah senyawa yang mudah

menguap namun untuk lebih memastikan lagi dari campuran lemak dan kloroform

tersebut benar-benar tidak ada senyawa lain selain lemak maka perlu didiamkan.

Semakin lama waktu untuk menghilangkan kloroform semakin baik karena dapat

memisah secara sempurna (Purwanti, 2014).

Lemak juga terdapat pada daun tepatnya pada kromoplas. Berbeda dengan

pada bagian biji, pada bagian daunini lemak adalah berwujudan dari karetenoid

yang disimpan dalam gelembung lemak. Lemak yang terdapat pada biji dan daun

memiliki fungsi berbeda dan tidak dapat dibandingkan (Mulyani, 2006).

Proses pemisahan antara pellet dengan senyawa lemak dapat disebut

dengan sentrifugasi. Penggunaan sentrifugasi sendiri bertujuan untuk

mempermudah untuk memisahkan atau bahkan membuat senyawa menjadi

homogen tanpa harus menggoyang-goyangkan tabung reaksi. Tindakan-tindakan

tersebut dapat menjadikan lemak terekstraksi secara keseluruhan, namun harus

lebih diperhatikan dalam melakukan sentrifugasi atau menggoyang-goyangkan

tabung reaksi (Matyash et al, 2012).

4

Sampel yang mudah diamati adalah menggunakan brown rice dan milk

rice. Kedua jenis beras tersebut mempunyai ciri yang mencukupi jika dilakukan

ekstrasi lipid namun dengan catatan cara kerja yang dilakukan harus benar-benar

sesuai. Meskipun dari satu varietas yang sama kedua beras tersebut memiliki

kandungan lemak yang berbeda (Misir et al, 2013). Proses terjadinya lemak tidak

begitu saja terjadi melainkan melalui beberapa proses yang terjadi pada makhluk

hidup. Metabolisme lemak sendiri diatur oleh suatu sel ganda yang dapat

mengaktifkan sel-sel bioaktif lainnya sehingga lipid dapat melakukan

metabolismenya sendiri (Huang and Freter, 2015).

5

BAB 3. METODE PRAKTIKUM

3.1 Waktu dan Tempat

Praktikum mata kuliah Agrobiosains dengan judul “Analisa Kandungan Total

Lipid” dilaksanakan hari Sabtu, 4 November 2017 pukul 10.30-12.00 WIB di

LAbortorium Fisiologi Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Jember

3.2 Alat dan Bahan

3.2.1 Alat

1. Tabung reaksi

2. Timbangan

3. Pipet

4. Mesin giling

5. Blender

6. Aluminium foil

3.2.2 Bahan

1. Brown rice

2. Milk rice

3. Cloroform

4. Methanol

5. Aquadest

3.3 Cara Kerja

1. Mengupas padi untuk memisahkan antara kulit padi dengan bulir padi yang

kemudian akan mendapatkan brown rice.

2. Melakukan penggilingan brown rice menggunakan blender sampai

mendapatkan bubuk brown rice.

3. Menimbang bubuk brown rice menggunakan timbangan dengan berat 5 gram.

4. Memasukkan brown rice kedalam rabung reaksi tanpa tutup.

5. Menambahkan kloroform methanol 5 ml.

6

6. Mencampurkan antara brown rice dengan larutan kloroform sampai

homogen.

7. Membiarkan larutan tersebut salaam 5 menit, sampai terpisah antara pellet

(ampas) dengan larutan lipid yang terbentuk.

8. Memindahkan larutan lipid yang terbentuk kedalam tabung reaksi yang

bertutup

9. Mencampurkan kembali 2 ml kloroform dan 3 ml aquadest, melakukan

pencampuran dengan cara mengocok sampai homogen dan mendiamkannya

selama 30 menit untuk mendapatkan Chloroform layer dan Methanol layer.

10. Mengambil lipid yang terletak pada lapisan bawah menggunakan pipet, lalu

ditempatkan pada alumunium foil yang telah ditimbang sebelumnya.

11. Membiarkan larutan tersebut selama 24 jam.

12. Menimbang menggunakan timbangan analitik.

13. Menghitung presentase lipid yang terkandung dalam brown rice

menggunakan rumus:

𝐹 =(W2 − W0)

W3 x 100%

3.4 Variabel Pengamatan

1. Kandungan lipid pada brown rice dan milk rice

Kandungan klorofil pada brown rice dan milk rice dapat diketahui dengan

menimbang berat aluminium kosong, berat aluminium bersama lipid, dan

penambahan kedua berat tersebut

3.5 Analisis Data

Analisis data yang digunakan pada praktikum ini yaitu statistika kualitatif.

7

BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil

Berdasarkan data praktikum yang didapatkan, dapat diketahui bahwa

kandungan lipid antara brown rice dan milk rice pada ulangan 1 sama, yaitu

0,66%. Ulangan 2 didapatkan hasil bahwa kandungan lipid pada brown rice dan

milk rice sama, yaitu 0%. Ulangan 3 didapatkan hasil bahwa kandungan lipid

brown rice 0%, dan milk rice 0,33%.

4.2 Pembahasan

Data yang didapatkan dari praktikum analisa kandungan lipid total yaitu,

berupa kandungan lipid dari dua sampel bahan yaitu brown rice dan milk rice

dengan melakukan masing-masing 3 ulangan dan mendapatkan hasil yang

berbeda-beda. Kandungan lipid pada masing-masing sampel bahan dapat dihitung

menggunakan rumus:

𝐹 =(W2 − W0)

W3 x 100%

Keterangan:

F = Kandungan lemak dalam sampel (%)

0,00%

0,10%

0,20%

0,30%

0,40%

0,50%

0,60%

0,70%

Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3

pre

sen

tase

(%

)

Kandungan Lipid brown rice dan

milk rice

brown rice

milk rice

8

W0 = Berat aluminium kosong (gr)

W2 = Berat aluminium berisi lipid (gr)

W3 = Berat total jaringan sampel (w0 + w2)

Berdasarkan hasil analisa lipid pada dua sampel yang berbeda yaitu brown

rice dan milk rice, dapat diketahui bahwa setiap sampel mengandung lipid yang

berbeda. Ulangan yang dilakukan juga mengandung hasil kandungan lipid yang

berbeda. Hasil data yang didapatkan menunjukkan bahwa, kandungan lipid pada

milk rice lebih besar daripada kandungan lipid pada brown rice. Pernyataan

tersebut dapat dilihat pada ulangan ke 3. Kandungan lipid milk rice 0,33 lebih

besar daripada kandungan lipid brown rice. Hasil ini dapat dibandigkan dengan

Varsini (2013), berpendapat bahwa kandungan lipid pada brown rice lebih tinggi

daripada milk rice, berdasarkan hasil penelitiannya dapat diketahui bahwa brown

rice mengandung 1,17 gr lipid dan milk rice mengandung 0,205 gr.

Kandungan lipid pada beras dapat di ekstraksi untuk memisahkan antara

beras dengan lipidnya. Lipid pada brown rice dan milk rice masih tercampur

dengan protein, karbohidrat, dan rangkaian asam amino lain. Analisa lipid

digunakan larutan kloroform methanol untuk manghasilkan ekstrak lipid dari

beras baik brown rice maupun milk rice. Kandungan lipid yang terdapat setelah

dilakukan ekstraksi terdapat 3 macam, yaitu lipid, glikolipid, dan fosfolipid. Hasil

data yang didapatkan tidak dispesifikasikan, melainkan dalam kandungan total

lipid antara brown rice dan milk rice.

Analisis lipid menggunakan larutan aquadest 3 ml dan lauran kloroform 2

ml. Pemberian kloroform digunakan untuk mengikat kandungan lemak pada

larutan ekstraksi yang telah didapatkan dari pengendapan palet. Penggunaan

kloroform, karena klorofom merupakan larutan non polar, yang sama sifatnya

dengan lipid yaitu non polar, menyebabkan lipid dan kloroform mampu beraksi

secara homogen. Aquadest digunakan sebagai penanda adanya larutan lipid dalam

ekstrak pengendapan pellet (ampas). Aquades merupakan larutan polar, sehingga

saat bereaksi dengan lipid, tidak terjadi reaksi secara homogen, menyebabkan

terbentuk dua lapisan, yaitu lapisan lipid dan aquadest.

9

Penyimpanan larutan lipid pada aluminium foil digunakan untuk

menguapkan kloroform serta untuk membentuk perbedaan lapisan antara lipid dan

aquadest. Perlakuan ini menghasilkan lipid murni dalam satuan gram setelah

ditimbang. Berdasarkan hasil tibangan yang dilakukan pada brown rice langan

satu menghasilkan kandungan lipid sama dengan kandungan lipid pada milk rice.

Hasil data ulangan 2 menunjukkan tidak ditemukan lipid antara brown rice dan

milk rice. Hasil data ulangan tiga didapatkan kandungan lipid lebih tinggi pada

milk rice daripada brown rice.

Kadungan lipid bisa 0% karena terdapat kesalahan pada saat melakukan

pengekstrakan pada saat mencampur larutan kloroform dengan air dan juga saat

pemindahan lipid ke alumunium foil. Saat diendapkan memang terdapat lemak

yang mengendap pada permukaan alumunium foil namun saat ditimbang hasilnya

tidak meningkat berat alumunium foilnya. Kurang akuratnya timbangan juga

dapat menjadikan berat alumunium yang telah berisi lemak dapat mengalami

penurunan berat maupun tetap, karena saat menimbang pada timbangan analitik

hanya terbaca dua angka dibelakang koma sedangkan lipid yang kami peroleh

jumlahnya tidak banyak otomatis beratnya meningkat hanya sedikit.

10

BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

1. Kandungan lipid dalam brown rice dan milk rice berbeda, berdasarkan data

pengamatan, kandungan lipid pada milk rice relatif lebih besar daripada

kandungan lipid pada brown rice.

2. Kesalahan dalam melakukan ekstraksi dapat menyebabkan tidak

mendapatkan lemak yang banyak.

5.2 Saran

Saat dilakukan kegiatan praktikum, untuk alatnya sebaiknya dapat tersedia

sesuai kebutuhan praktikan, sehingga saat penggunaan alat tidak bergantian dan

lebih efisiensi waktu praktikum.

11

DAFTAR PUSTAKA

Huang, C., and C. Freter. 2015. Lipid Metabolism, Apoptosis and Cancer

Therapy. Mol. Sci, 1(1): 924-949.

Matyash, V., G. Liebisch, T. V. Kurzchalia, A. Shevchenko, and D. Schwudke.

2012. Lipid Extraction by Methyl-Tert-Butyl Ether for

High-Throughput Lipidomics. Lipid Research, 49(1): 1137-1146.

Misir, G. B., S. Kutlu, and S. Cibuk. 2013. Determination of Total Lipid and Fatty

Acid Composition of Pearl Mullet (Chalcalburnus tarichi, Pallas 1811).

Fisheries and Aquatic Sciences, 13(1): 777-783.

Mulyani, S. E. S. 2006. Anatomi Tumbuhan. Yogyakarta: Kanisius.

Purwanti, A. 2014. Pengambilan Lipid dari Mikroagabasah dengan Cara Ekstraksi

dalam Autoklaf. Sains dan Teknologi, 1(1): 231-238.

Sarungallo, Z. L., P. Hariyadi, N. Andarwulan, and E. H. Purnomo. 2015.

Characterization of Chemical Properties, Lipid Profle, Total Phenol and

Tocopherol Content of Oils Extracted from Nine Clones of Red Fruit

(Pandanus conoideus). Kasetsart, 49(2): 237-250.

Varsini, V., A. Sundharam K., and V. Praveen P. 2013. Brown Rice Hidden

Nutrients. Biosci Tech, 4(1): 503-507

Widayat, H. P. 2013. Perbaikan Mutu Bubuk Kakao Melalui Proses Ekstraksi

Lemak dan Alkalisasi. Tekonologi dan Industri Pertanian Indonesia, 5(2):

12-16.

12

LAMPIRAN

Tabel dan Perhitungan

No Sampel Prosentase (%)

1 2 3

1. Brown Rice 0,66 0 0

2. Milk Rice 0,66 0 0,33

Perhitungan

Diketahui:

W0 = 0,82 gram

W2 = 0,82 gram

W3 = 3 gram

Rumus:

𝐹 =(W2 − W0)

W3 x 100%

𝐹 =(0,82 − 0,82)

3 x 100%

𝐹 = 0%

13

Flochart dan Tabel Acc

14

15

16

17

Dokumentasi

Gambar 1. Brown rice

\

Gambar 2. Penimbangan beras seberat 3 gram

18

Gambar 3. Pengahalusan brown rice

Gambar 4. Hasil yang didapatkan

19

Gambar 5. Tepung dimasukkan ke tabung reaksi

Gambar 6. Penambahan kloforom methanol 5 ml

20

Gambar 7. Pengocokan larutan sampel sampai homogen

Gambar 8. Sampel yang telah di diamkan 5 menit

21

Gambar 9. Pengambilan kloroform layer

Gambar 10. Penambahan aquadest dan klorofom

22

Gambar 11. Berat akhir lemak setelah didiamkan 24 jam

23

Literatur

Huang, C., and C. Freter. 2015. Lipid Metabolism, Apoptosis and Cancer

Therapy. Mol. Sci, 1(1): 924-949.

24

Matyash, V., G. Liebisch, T. V. Kurzchalia, A. Shevchenko, and D. Schwudke.

2012. Lipid Extraction by Methyl-Tert-Butyl Ether for

High-Throughput Lipidomics. Lipid Research, 49(1): 1137-1146.

25

Misir, G. B., S. Kutlu, and S. Cibuk. 2013. Determination of Total Lipid and Fatty

Acid Composition of Pearl Mullet (Chalcalburnus tarichi, Pallas 1811).

Fisheries and Aquatic Sciences, 13(1): 777-783.

26

Mulyani, S. E. S. 2006. Anatomi Tumbuhan. Yogyakarta: Kanisius.

27

Purwanti, A. 2014. Pengambilan Lipid dari Mikroagabasah dengan Cara Ekstraksi

dalam Autoklaf. Sains dan Teknologi, 1(1): 231-238.

28

Sarungallo, Z. L., P. Hariyadi, N. Andarwulan, and E. H. Purnomo. 2015.

Characterization of Chemical Properties, Lipid Profle, Total Phenol and

Tocopherol Content of Oils Extracted from Nine Clones of Red Fruit

(Pandanus conoideus). Kasetsart, 49(2): 237-250.

29

Varsini, V., A. Sundharam K., and V. Praveen P. 2013. Brown Rice Hidden

Nutrients. Biosci Tech, 4(1): 503-507

30

Widayat, H. P. 2013. Perbaikan Mutu Bubuk Kakao Melalui Proses Ekstraksi

Lemak dan Alkalisasi. Tekonologi dan Industri Pertanian Indonesia, 5(2):

12-16.