Arya Ulilalbab 0811010103Efi Fitriani 0711010011Faurita Resti P. 0711010014Anugerah D. P. 0711013021Hafiz Iqbal M. 0611013025

Pembimbing : Dr.Teti Estiasih, STP, MP

Fakultas Teknologi PertanianUniversitas Brawijaya

BAB I : PendahuluanProses penuaan dan penyakit degeneratif

merupakan beberapa penyakit yang berkaitan dengan aktivitas radikal bebas

Di dalam tubuh manusia, sudah diproduksi beberapa antioksidan seperti superoksid

dismutase (SOD) dan gluthation peroksidase

Effervescent Rosella Ungu

Tablet effervescent merupakan tablet berbuih yang dibuat dengan cara kompresi granul yang mengandung garam effervescent atau bahan-bahan lain yang mampu melepaskan gas ketika bercampur dengan air (Ansel, 1989)

Dasar formula pada minuman serbuk dan tablet effervescent adalah reaksi antara asidulan dengan karbonat atau bikarbonat menghasilkan karbondioksida (Hui, 1992).

Terdapat dua macam warna rosella, yakni merah dan ungu, dimana semakin tinggi intensitas warnanya, maka semakin tinggi kadar antioksidannya. Hal ini berarti bahwa kandungan antioksidan pada rosella ungu lebih besar daripada rosella merah.

Konsumen lebih memilih pangan fungsional

Antosianin merupakan salah satu jenis pigmen yang juga berfungsi sebagai antioksidan yang dapat menghambat oksidasi radikal bebas dalam tubuh

(Best, 2004).

Antosianin dan Antioksidan

Antosianin dari Hibiscus sabdariffa (Malvaceae) telah digunakan secara efektif pada obat kedokteran untuk melawan hipertensi, gangguan hati, dan radikal bebas. Dianjurkan untuk mengkonsumsi minuman ringan, yang mengandung pigmen Hibiscus dimana pada dosis rendah (50 mg/kg) menunjukkan aktifitas antioksidan pada sebuah studi (Vargas and Lopez, 2003).

Faktor yang penting dalam kestabilan antosianin adalah harus diproses dan diolah pada temperature rendah dengan sedikit kehadiran oksigen serta cahaya (Vargaz and Lopez, 2003).

Antioksidan dapat menetralisir radikal bebas dengan menerima atau mendonorkan sebuah elektron untuk menghasilkan molekul yang lebih stabil (berpasangan). Ini berarti molekul antioksidan menjadi radikal bebas dalam proses menetralkan molekul radikal bebas menjadi molekul yang non-radikal bebas (Best, 2004)

Pengujian In Vivo

Pengujian secara biologis biasanya menggunakan hewan coba untuk membantu menjalankan penelitian yang tidak bisa secara langsung dilakukan dalam tubuh manusia dengan asumsi semua jaringan, sel-sel penyusun tubuh serta enzim-enzim yang ada dalam tubuh hewan coba memiliki kesamaan dengan manusia (Arrington, 1972)

Pengujian Kadar MDA Binatang diambil serum darah dan

fesesnya untuk dianalisa. Pengambilan serum dari jantung. Analisa ini dilakukan pada minggu ke-0, 1, 2, 3, dan 4. Pemeriksaan dilakukan dengan mereaksikan serum darah ataupun fesesnya dengan reagen-reagen, seperti TCA, Na-Thio, HCl, dan aquades dengan komposisi tertentu. Jumlah MDA ditera dengan metode spektrofotometri dengan λ : 532 nm.

Pengujian Kadar SODBinatang diambil serum darah untuk dianalisa.

Pengambilan serum dari jantung. Analisa ini dilakukan pada minggu ke-0, 1, 2, 3, dan 4. Serum dimasukkan dalam tabung dan dibagi menjadi tiga bagian. Serum disentrifuse selama 10 menit (3500 rpm). Diambil supernatannya 1 cc dan ditambahkan akuades 10 ml, yang selanjutnya dipakai untuk sampel pemeriksaan SOD. Kemudian masing-masing tabung tersebut dipanaskan pada suhu 30 0C selama 10 menit. Setelah itu didiamkan selama 30 menit. Kemudian kadar SOD dibaca dengan spektrofotometer panjang gelombang λ : 580 nm.

NEKROPSI dan HISTOPATOLOGI

Nekropsi atau bedah bangkai, untuk melakukan pemeriksaan yang cepat dan tepat dalam menetapkan diagnosa pada beberapa sebab penyakit atau kematian dari seekor hewan (pengambilan organ). Organ yang diambil adalah hepar dan ginjal

Pembuatan preparat Histopatologi melalui sayatan mikroteknik

Data diperoleh dari hasil pengamatan preparat yang diperoleh dibawah mikroskop, dengan pembesaran 100 atau 400 kali, dideskripsikan semua bentuk lesi , selanjutnya di lakukan skoring (penilaiaN), sesuai bentuk perubahan yang ada, selanjutnya dilakukan analisa datanya.

Diperoleh produk tablet effervescent rosella ungu dengan aktivitas antioksidan yang tinggi sehingga mampu mereduksi pengaruh oksidasi radikal bebas (peroksidasi) serta memiliki sifat organoleptik yang baik.

1. Menetukan formulasi proporsi antara jumlah filtrat rosella ungu dengan maltodekstrin untuk mendapatkan tablet effervescent dengan sifat fisik, kimia dan organoleptik yang terbaik.2. Mengetahui aktivitas antioksidan produk tablet effervescent rosella ungu perlakuan terbaik secara in vivo.

Mengangkat potensi rosella ungu untuk menambah keanekaragaman produk pangan yang memiliki sifat fungsional.

Memberikan masukan kepada instansi pangan dan farmasi untuk mengoptimalkan pemanfaatan tablet effervescent rosella ungu sebagai suplemen antioksidan.

Meningkatkan pengetahuan dan wawasan dalam dunia penelitian tentang potensi bunga rosella ungu dan produk olahannya, yaitu tablet effervescent.

Semakin rendah penambahan bahan pengisi (Dekstrin 40%), maka aktivitas antioksidan dan kadar antosianin semakin tinggi

Penggunaan Oven Vakum dapat meminimalisir kerusakan yang terjadi pada produk effervescent, sehingga kadar antosianin dan aktivitas antioksidan semakin tinggi.

Semakin tinggi dosis effervescent rosella ungu yang diberikan maka kemampuan menangkal radikal bebas semakin tinggi.

Analisa:- Aktivitas antioksidan- Kadar antosianin

Air panas 1:8 (b/v)

Suhu 70oCEkstraksi, 30 menit

Filtrasi Ampas

Filtrat Rosella Ungu

Sortasi, pembersihan, penghancuran, dan penimbangan

Bunga Rosella Ungu

Serbuk Bunga Rosella Ungu

Pencampuran

Ekstrak Rosella Ungu Basah

Perlakuan Faktor II (metode pengeringan)

Diblender 2 menit

Pengayakan 60 mesh

Pentabletan

Analisa:1. pH2. Warna3. Aktivitas antioksidan4. Kadar antosianin5. Kecepatan larut6. Organoleptik

Filtrat Rosella Ungu

40% (b/v) 50% (b/v) 60% (b/v)

Oven kabinet Oven kering Oven vakum

Serbuk Ekstrak Rosella Ungu- Asam sitrat 16 % (b/b)- Gula pasir 75% (b/b)- Na-bikarbonat 16% (b/b)

Serbuk Effervescent Rosella Ungu

Tablet Effervescent Rosella Ungu

Perlakuan Faktor I (% penambahan dekstrin)Dekstrin

Diblender 2 menit

Tablet effervescent Rosella UnguAnalisa:1. pH2. Warna3. Aktivitas antioksidan4. Kadar antosianin5. Kecepatan larut6. OrganoleptikPerlakuan terbaik

PerlakuanDiet jelantah

(+) effervescent (Dosis I, II, III)

Kontrol PositifDiet jelantah (bilangan peroksida 118 mek/kg)

Pakan Standard

Kontrol NegatifDiet normal

(Pakan Standard)

In vivo

Treatment selama 4 minggu

Serum darah

Pengambilan darah dari jantung

Analisa:- Kadar MDA- Kadar SOD

Anestesi dengan kloroform dan dibedah (Nekropsi)

Jasad Tikus dikubur

Mikro Teknik

Preparat Sel

Pengamatan sel Histopatologi

Pengambilan organ hepar dan ginjal

Rancangan Acak Lengkap (RAL)Faktor I : % Penambahan bahan pengisi terhadap filtrat

F1 = 40% dekstrin (b/v filtrat rosela)F2 = 50% dekstrin (b/v filtrat rosela)F3 = 60% dekstrin (b/v filtrat rosela)

 Faktor II : Metode pengeringan

P1 = Oven KabinetP2 = Oven KeringP3 = Oven Vakum

Pembuatan filtrat Pembuatan tablet effervescent rosella ungu Analisa fisik, kimia, dan Organoleptik Pemilihan perlakuan terbaik dari beberapa

perlakuan Uji In Vivo dari Effervescent perlakuan

terbaik, dengan pemberian sebanyak 2 ml tiap Dosis I (675 mg/12 ml), dosis II (1350 mg/12 ml), dosis III (2700 mg/12 ml)

Penelitian ini akan dilaksanakan selama 5 bulan dan dilakukan di beberapa tempat, yaitu:

Laboratorium Pengolahan Pangan, THP-UB, tempat pembuatan serbuk effervescent.

Laboratorium Biokimia dan Nutrisi, THP-UB, tempat analisa kimia.

Laboratorium Farmakologi, FK-UB, tempat pemeliharaan tikus, tempat pengujian nilai MDA (malonaldialdehisa) dan SOD (superoksida dismutase) dalam darah.

Laboratorium Farmasetika, Fakultas Farmasi UNAIR, tempat pentabletan

Laboratorium Histopatologi, Fakultas Kedokteran Hewan Unair, tempat analisa sel histopatologi

Recording Data Metode Recording Data

Analisa pH Form data dan grafikAnalisa derajat kecerahan (L*) Grafik tingkat kecerahanAnalisa derajat kemerahan (a*) Grafik derajat kemerahanAnalisa aktivitas antioksidan Form data dan grafikAnalisa kecepatan larut Waktu larut tablet dalam airAnalisa kadar antosianin Form data dan grafikUji inderawi/ organoleptik Form Hedonis (tingkat kesukaan)Pemilihan perlakuan terbaik ANOVA, BNT, DMRTUji In Vivo (dalam proses) Data SOD dan MDA

Data yang diperoleh dianalisa dengan Analisis Varian (ANOVA) dilanjutkan dengan uji beda nyata yaitu BNT (Beda Nyata Terkecil) menggunakan selang kepercayaan 1% dan 5% serta DMRT (Duncan Multiple Range Test) dengan selang kepercayaan 1% dan 5% (Yitnosumarto,1991).

Data yang telah dianalisa pengaruh Penambahan bahan pengisi dan penggunaan alat pengering terhadap kandungan Antosianin, aktivitas Antioksidan, serta sifat organoleptik yang baik untuk didapatkan hasil perlakuan terbaik untuk kemudian dilakukan uji in vivo.