adln - airlangga digital library networkrepository.unair.ac.id/9845/12/fulltext- muchlis.1.pdf ·...

PEMERIKSAAN KADAR TOTAL CHOLESTEROL DAL AM SERUM DENGAH METODA LIEBERMANH HJRCHARD DANLBESI<III) CHLORIDA

SKRIPSIDIHJAT UNTUK MEMENUHI SYARAT-SYARAT MENCAPAI GELAR SARJANA FAfMASl PADA FAKULTAS FAi&SASl

UNIVERSITAS AIRLAHGGA 1978

oleh

MUCHLIS DAEMAWAN 306 F.F.

ADLN - Airlangga Digital Library Network

Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan

KATA PENGANTAR

Dengan nama Allah Yang Maha Pengasih dan aha Pe-

nyayang, dengan memanjatkan puji syukur kehadirat fuhan-

Yang Maha Esa atas taufiq dan hidayahnya, maka selesai *

lah tuges skripsi yang diberikan kepada kami.

Dalam menyelesaikan tugas skripsi ini telah banyak

bantuan dan budi baik yang kami terima dari berbagai pihak*

Rasa terima kaslh kami ucapkan kepada Almamater kami, -

Fakultas Farmasi Universitas Airlangga yang telah mendi-

dik kami selama Ini.!

Pada kesempatan ini perkenankanlah kami menyampai1 "I

kafi rasa terima kasih dan penghargaan yang se-besar-besar

nya kepada pembimbing kami dr*S.P* Edljanto dari bagian**

Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga

yang dengan rela hatl telah membimbing kami secara sekaa

ma dan memberikan kesempatan yang seluas-luasnya dalam *

menggunakan segala fasilitas yang ada pada Laboratorium-

Patologl Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Airlang-

ga.

Ucapan terima kasih juga kami sampaikan kepada -

Bapak &jr*FX Budhianto^ Suhadi, Bapak dr.Siswanto Darmudi-

serta seluruh Staff den karyawan bagian Patologi Klinik*

Fakultas Ke&okteran Universitas Airlangga yang telah ba^

nyak membantu dalam penjxisunan skripsi ini..

ill



Tele lupa pula kami ucapksn terima kasitx kami kepa-

da rekan-rekan mahasiswa serto pthak-pihak loin yang tak

dapat koml sebutkan dalara kesempatan ini, yang telah ba*

nyak membantu dalara penyusunan skripsi Ini*

Semoga Tuhan Xeng Haha Esa cnelimpahkan rakhraadNya

kepada Bapak-Bapak, Ibu-Ibu ssrta rekan-rekan samua seau

al dengan araal balk yang teleh diberikan kepada kaai%.

Akhirnya kepada Panitis Skripsi yang teleh memeriksa dan

menerima skripsi ini, kami ueapkan terima kasih*

Sebagai akhir kata kami berharap semoga skripsi »

ini ada pula monf aafcnya Amin»;

Surabaya# akhir Mei 1970*

Penyusun*

iv



D4FIAR ISI I

HalamanKA$A PIKGAKTAH .......... ...... Ill

DAF3PAR ISI ............. ....................... ..v

DAFTAI TABEL |Mi i H m • M i • M4 i i i t i • t « « i • H i m t i m ViHil

DAFTjlP GAMBAH i>X

DAFSAB Xij^PXHAK # # *;* • * • • « . « « * • « t i n • « * » • * • * • » • • • * • • K

PMDAHOliUAR ........ .................. 1

B A B :

X * TXN*J AU AN PU5TAKA I* * * • ■• i • 6

1« Cholesterol dalam darah • 6

2* Motoda pemeriksaan kadar total choleste-

rol dalam ssnliB *« * Q

a* Motoda iilebermann Burchard ..».**»*** 8

Motoda Bos l (X i l ) Chlorids -# • * • # * * * . • 10

Xi* Metoda Kerja •*«#♦*«•• ***•••*!** 12

1« Bah an penelitian **«*••*««•»•»•*****••••• 12

2» Pemeriksaan kadar ............ 13

3* a.Pemerlksaan kadar total cholesterol ~

dalam serum dengan motoda Liebermann -

Burchard • #*..«*«***** ****.•**•*****« * 14

fc.Alat yang dipergunakan 14

c .Pembuatan reagencia . ...........*«*« Ik

d.Prosedur pemeriksaan kadar total cho ■-

lestorol dalam serum kontrol **«•«••** 15



B A B

XIX.

Halaman

©•Proeedur pemeriksaan kadar total cholesterol

dalam serum sampel **•.«*»•*.... **•..... 16

f* a*Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam so

nun dengan metoda Besi(III) Chlorlda •»*«»•• 16

b.Alat yang dipergunakan • *......17

caPembuatan reagensia ... ............. 1?

d «Pembuatan kurva absorbs! terhadap/Ranjang ge

lombang *.*«•** - .. * .••*.***»*«*,*.. * * . 16

©.Pembuatan kurva baku **"••****.••'.* i • * • 19

f*Prosedur pemeriksaan kadar total cholesterol

dalam serum kontrol •.«*<•••*« . 20

g.Prosedur pemeriksaan kadar total cholesterol

dalam serum compel « 21

HASIL P35ECOBAAK ...............22

L. Basil pengamatan dari metoda Liebcrmann Bur -

chard .......................22

a. Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam -

serum kontrol 22

b* Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam *

serum sarapel ......... ***** 25

2* Hasil pengamatan dari metoda Besi{III) Chlo -

rida . ............. *........ 25

a* Pembuatan kurva absorbs! terhadap pancang -

gelonbang • •••••*•••**«•< •***»••*•*«••**«•• 25

vi



B A B : Halaman

b* Pembuatan kurva baku *«.*...*<.... 2?

X. Perhitungan adanya korclaci linlair(Pear -*

80n) antara koneentrasi dengan absorbs! •• 30

2* Persamaan garis regressi linialr ......... 33

c. Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam se-

rum kontrol .«•*••«** * **•»*«« #«. *. **«*#.»«»• . 34

d* Pemeriksaan kadar total cholesterol,dalam se-

rum sanpel *. * ... ....................... 35

3* Analisa hasil-hasil yang didapat dari dua me-

toda k * * * * * * . * . . , . * * 3 9

1« Hasil pengamatan pengamatan dari dua meto-

da terhadap serum kontrol .*•*.. 39

2*a«Hasil pengamatan-pengamatan dari dua me *

toda terhadap serura eompel .*»•««*.****»• 40

b.Paxred **t** test •««..#..#•*«*******«•**«• 40

IV* PEMBICARAAN. .•..*•*«*•#•» ..***.•*• *«•*■<•••••**•• 48

V. KESIMPULAN.... ................... ......... 49

VI* saran-saran... ............ .......30

VII. hihgkasab ................. ................ 51

LAMPIRAN ..... ............ *.....** ... 45

DAJFTAR PUSTAKA ...... ......... ............. ...... 53

Vii



M W Vm f A S S L

i Urnlmm

I# K#*U U*6*r fc©t«&

m l dti** i#S’Ua kontrol doarl mtatLQ *

Lftobtfmro «urchard •»**♦•»##*»*«**«*»* 22

21« Htail jp*rhltun£«ifc kftdtar fcafcal Cholo*fc**

r&X <Ul*ss ******** fs&mpei 1 4« * i u t t o e * *

Li«fr«rwftsn Buretiarrt 33

I I I * f t a t i X t m r i g * » * t * n &U«lftb«o*frai t * r b e *

d®l> psnjtn* 6©rl «#*©£* J3**i-

(XIX) Chlorlfi. ............ ......... 26

If*...... p w y p m ztm , nll«i &&#&rt>st $+rhft «

d a p f a m j t t a t r a f t i « a a u r u f c w a f c a d o B » « l {111 *

ChlOFldi *M«M<«««t*«**«t*lMt«#*M«ll 21?

V» Dtftm tcMitJk p « ssb u ktt« n AftMtJPft &$*•«&•*£ *

<mt*ris to»*e»tr**l €*oe*!» *b*or?>»i pad*

«*•**•**#•••«*•••**••• 50

Tim Xhifca «mtufc mmfUkQxm p a r a * » * a n £1* 1# r a *

&*a«#l p#di« $p#te&3*etfo$os&trt ********** 33

VXX* &4t*i& jjarkittttt ett fecfte* total Cfcoieafca*

&&% 6*lm aarwkontrol d«ri &*te£« %»i

(XIX} Chior iC* 35

9X11* Hmmil p * r h l t i m s * n feadar CtioXaafa**

roi dalasft 'sampell 6«rl ata*o6a U#»

« i { X X I) Chlor ida • • * # * * • • • # * * « * * * # * # * * 3 7

XX* fiaall r a t a - r a f c a t i t p a a a ^ a X a a r u a d a H *

dua c»to6« *»*•••**••***«**»*•**#****«* /+1

«ill



M f T M &AIBAB

Oemfecr t itelrcaan

1* Xtirva rat let sbsorbei tsrfceda# jsftD ang #© ~

lonbang derl Chole&tftrol fcansefttreet XQOmj/

100 ol{ 200 mg/lQQ&ti 300 «g/iOQ ml ..... 28

2. £urva tiilsl ohe&rbsi ter&etiep koneentraet- ^ftri Chaleatdvol» podo ptnjang goloabong -

§90 Cta 51

3. Kurva bsfeta <5»rl psraeseaeR gori® regreesi -

y # 0f00262 x ~ 0,012 ............. . 36

£x



DAFfAR MIHMg

lampiran i Haldsssn

U Mfltrtboel *tw ............ ».*-.... 45

2* Sebel £feooritl«si*l valuoe of correlation * «

coefficient {3?* 0,05) .................... 47



1

PENDAHULUAN

Cholesterol akhir-akhir ini banyak dibicarakan di-

masyarakat luas dinegara kita*

Didalam kesehatan manusia menurut beberapa penyelidik dinya-

takan adanya hubungan yang erat antara type hyperlipoprote-

inemia dengan konsentrasi cholesterol dal am darah dimariaN

bagai manifestasi dari penyakit diabetes mellitusjhypothy -

roidism;obstruktive biliaris;nephritis;pangkreatitis(l,10

20).Dan oleh beberapa penyelidik lainnya terdapat bukti-bukti

yang menyokong adanya sangkut paut antara lemak darah dengan

penyakit arteriosclerosis(20).

Dengan mengingat hal-hal tersebut diatas penting

sekali terutama dokter untuk mengetahui secara tepat dan

cepat kadar total cholesterol dalam darah seorang penderi-

ta sehingga didalam menentukan diagnosa serta terapinya da-

pat secara tepat dan memuaskan.

4uga sudah hampir merupakan hal yang rutin bila seorang pen

derita menanyakan berapa tinggi kadar cholesterolnya untuk

mencegah hal-hal yang tak diinginkan bterhubungandengan kese-

hatan tubuhnya. *

Untuk membantu pemeriksaan-pemeriksaan rutin da-

lam suatu laboratorium klinik sangatlah diinginkan suatu

cara pemeriksaan kadar total cholesterol dalam serum darah



2

yang cepat serta masih mempunyai precision(ketelitian)

yang baik(3)*

Suatu pemeriksaan dikatakan mempunyai precision(kete-r

litian) yang baik apabila hasil pemeriksaan tersebut

dilakukan berulang-ulang mempunyai selisih yang kecil*

Dalam kepustakaan banyak kita jumpai cara pe-

meriksaan kadar total cholesterol dalam serum(3»6»7»

10,14,16,20) dan pada umumnya fase-fase analisanya «

sbb:

s I strj&si j:

Ekstraksi cholesterol' bebas maupun dalam ben-

tuk ester dengan pelarut-pelarut organik

misalnyas chloroform5asam aeetat glasialjiso-

propanol;

Ekstraksi dengan pelarut organik campuran mi-tsalnya ; chloroform-H^SO^pekat;ethyl asetat -

etanoljchlorof®"®^^11©!» etanol-eter«

11:Sagoni fikasi£

Saponifikasi dari cholesterol ester dengan

KOH dalam alkohol panas,kemudian cholesterol

bebasnya dipresipitasikan baru hasil presipi-

tatnya diekstraksi dengan pelarut organik ter-

tentu selanjutnya baru direaksikan dengan re-

agen warna



III:Isolasi :

Baik cholesterol bebas maupun ester dapat dii-

solasi dengan cara :

ekstraksi ci

presipitasi dengan suatu zat tertentu ;

kromatografi kolom 5

Penentuan titik akhir ini dapat pula dibagi-

bagi berdasarkan cara penentuannya yaitu3

l*secara gravlmetri

2*secara tetrasi

3«secara kolorimetri

^•secara spektrofotometri*

Pemeriksaan kadar cholesterol paling sering dilakukan

secara spektrofotometri dengan mempergunakan metoda

reaksi warna Liebermann Burchard (4,6,7*8) .

Kemudian pada akhir-akhir ini telah dimulai dipakai

metoda reaksi warna. Besi(III)Chlorida dalam lingkungan

HgSO pekat (3,6,10*16,19#20) .

Dalam pemeriksaan kadar total cholesterol

dalam serum dari dua metoda tersebut pemeriksaannya,

dapat secara pemeriksaan langsung dan dapat juga se-

cara tidak langsung*

Pemeriksaan langsung ialah,: pemeriksaan kadar total

cholesterol dilakukan tanpa ekstraksi ataupun presi-

pitasi dari protein serum*



Pemeriksaan tak langeung ialah ; pemeriksaan kadar to*

ted cholectorol dilakuka» dongan ©katrakoi ataupun pre

alpltaei dari protein corunj *

Ponoriknaun secara epoktro £otoaotri kadar total »

cholcetorol dalem aorum dari penelitian kami ini*kaai~

memilih motoda roakoi warn kiobomonn Barchord dari *

Herckoteot kit (4) dan metoda roakcl trama Booi(III) ~

Chlorida (19) dari S5ak«B*

Metoda roaksl warno Lioboroonn Burehard dari ltor-

koteot kit ini s

pemeriksaannya oecara langsung; caranya nudah ; banyak

dipergunakan dHaboratorium-iafeoratoriua klinik ; tota

pl harpanya ralativ aafaal •

Sedangkan netoda roakci warna Bosi{XXI) Chlorida*

dan Sak*B* ini i

pmoz&keaannya cocnra tak lancoung $ waktu pcraerlkeaan

rolativ oingkat j barganya rclatlv mwah *

Balea ponolitiaa kami inl^kacl Ingin aengotahui *

apakah kodua notodo tersobut Gccurccy(kotopatamya) •

fcaiiv'tidak baik *

Untuk makeud toroobut nacin^nacinc notoda kaai*»

lokukan penoritoaan torhadap eorun kontrol yaitu n cm «*

porgunaitan "lilptd Control*1 Procilipj Bochringer Hannhoin

Boct Gojraaany *



Serum kontrol tersebut mempunyai harga rata-rata choles-

terol (x) & 133 mg% dan range pemeriksaan s 110 ** 166 rag#

( 1*2 S D ) *

Serum kontrol ialah suatu serum yang telah diperiksa *

berulang-ulang kali kadar total cholesterolnya dengan -

pemeriksaan yang telltt dan saksaraa dari metoda dan

alat-alat yang terbaik sehingga menghasilkan harga rata-

rata total cholesterol(x) dalam serum tersebut dengan -

batas-batas pemeriksaan tertentu ( x * 2 S D ) *

Apabila hasil rata-rata pemeriksaan masing-masing*

metoda tersebut sama/mendekati harga rata-rata dari se -

rrnn kontrol dan juga memenuhi range pemeriksaan *maka -

metoda tersebut accuracy(ketepatannya) baik *

Sebaliknya apabila hasil rata-rata pemeriksaan masing -

macing metoda tersebut jauh dari harga rata-rata serum -

kontrol dan juga tidak memenuhi range pemeriksaan* maka-

metoda tersebut accuracy(ketepatannya) tidak baik •

Selanjutnya kami melagukan pemeriksaan kadar to -

tal cholesterol dalam serum pasien (penderita) dengan -

kedua motoda tersebut s kemudian kami ingin mencoba me **

ngetahui preclsion(ketelitlan) dari kedua motoda terse -

but •



adln - airlangga digital library networkrepository.unair.ac.id/9845/12/fulltext- muchlis.1.pdf ·...

Documents