2. skrining fitokimia (1)

8/10/2019 2. Skrining Fitokimia (1)

1/23


2/23

Farnsworth, N.R., Biological andPhytochemical Screening of Plants, J. Pharm.Sci, 1966

Cannel, R.J.P., Natural Product Isolation, 1998


3/23

Penggunaan obat yang berasal dari bahan alammelibatkan kandungan senyawa kimia yangterkandung di dalamnya Co/digitoksin, rutin, papain, morfin, codein, atropin, kina,

vinkristin, kafein, dll

Shg diperlukan adanya pengetahuan mgn aktivitasbiologi tanaman dan kandungan senyawa kimianya. Dalam rangka pencarian senyawa obat baru

Dalam rangka menemukan sumber baru

Sbg prekursor u/sintesis senyawa kimia kompleks baru Modifikasi semisintetis (atropin mjd homatropin, morfin mjd N-

alilnormorfin)


4/23

Pendekatan yang digunakan:

Pendekatan secara farmakologi

(Phytopharmacologic Approaches) Pendekatan identifikasi kandungan senyawa kimia

(Phytochemical Screening Approaches)


5/23

1. Pengetahuan empiris Doctrine of Signatures

Tidak ada justifikasi yang rasional

Herbal, medical botany, ethnobotany, eksplorasi di lapangan

2. Dokumentasi/pengetahuan mgn tanaman beracun3. Survei aktivitas farmakologi

Aktivitas antineoplasma

Aktivitas antimikroba

Aktivitas antivirus

Aktivitas antimalaria

dll


6/23

Penapisan Fitokimia

Merupakan tahapan awal dalam melakukan

hipotesaidentifikasi kandungan kimia yang

terdapat dalam tumbuhan.

Golongan senyawa kimia dapat ditentukan

dengan uji warna, penentuan kelarutan, harga Rf

dan ciri spektrum UV

Metode umum adalah dengan pereaksi yangspesifik karena dirasakan lebih sederhana.


7/23

SKEM UMUM

METODE FITOKIMI

IMPLISI

KSTR K

R KSI

ISOL T

EKSTR KSI

FR KSIN SI

ISOL SI

SKRINING

FITOKIMI


8/23

Syarat metode yang digunakan : Mudah

Dapat dilakukan dengan cepat

Didesain dgn peralatan sederhana

Selektif untuk golongan senyawa yang diuji Memberikan informasi tambahan ttg keberadaan senyawa dalam

golongan senyawa yang diuji

Hasil reaksi positif : tidak selalu menunjukkan

keberadaan senyawa metabolit ttt dlm simplisia karena

senyawa lain yg sejenispun dpt memberikan hsl positifpalsu


9/23

Penapisan fitokimia, dilakukan thd golongan

senyawa:

Alkaloid

Saponin

Flavonoid

Antrakuinon

Tanin

Monoterpen & seskuiterpen

Steroid & triterpenoid


10/23


11/23


12/23

Serbuk Simplisia

Filtrat

+ asam, filtrasi

Fase air Fase organik

Residu

+ basa, ekstraksi dgn kloroform

uapkan

Dragendorrf Mayer

asam


13/23

Terdapat bbrp pereaksi u/ alkaloid

Minimal digunakan 2 jenis pereaksi u/mengkonfirmasi hasil positif

Pereaksi alkaloid

Pereaksi Mayer

Larutan I: larutkan 1,36 g HgCl2 dlm

60 mL air. Larutan II: larutkan 5 g KI dalam 10

mL air.

Prosedur: campurkan kedua larutan,

encerkan dengan air hingga 100 mL.

Tambahkan bbrp tts ke dlm sampel

yg telah diasamkan (dgn HCl atauH2SO4encer)

Hasil positif: endapan putih hingga

Kekuningan

Perhatian: jgn digoyang!!!


14/23

Pereaksi Dragendorff

Larutan I: larutkan 8 g [Bi(NO3)3.H2O] dlm 30% b/v HNO3.

Larutan II: larutkan 27,2 g KI dlm 50 mL air. Prosedur:

campurkan kedua larutan, biarkan slm 24 jam, saring,

encerkan hingga 100 mL dengan air deionisasi. Teteskan kedalam sampel yang telah diasamkan.

Hasil positif: endapanoranyecoklat

Bisa digunakan sbg penampak bercak pd KLT


15/23


16/23

Pereaksi lkaloid

Pereaksi Mayer Pereaksi Hager

Pereaksi Dragendorf

(pereakasi tetes & spray)

Pereaksi Asam fosfotungstat

Pereaksi Wagner Pereaksi Valger

Pereaksi Amm.reinekat Pereaksi Kloroplatinat

Pereaksi Bouchardat Pereaksi Kloraurat

Pereaksi Asam silikotungstat Pereaksi Na-tetrafenilboron

Pereaksi Sonnenschein Pereaksi Asam tanat


17/23

Simplisia atau bahan uji lainditempatkan pada tabung

reaksi lalu ditambahkan air

secukupnya, lalu dipanaskan

diatas penangas air dan

disaring. Filtrat ditambahkan larutan

pereaksi FeCl3dan timbulnya

warna hijau atau biru-hijau,

merah ungu, biru-hitam hingga

hitam menandakan positiffenolat atautimbul endapan

coklat menandakan adanya

polifenolat.


18/23

Simplisia atau bahan uji lainditempatkan pada tabungreaksi lalu ditambahkan airsecukupnya, kemudiandicampur dengan serbuk Mgdan HCl 2N dan dipanaskandiatas penangas air dandisaring.

Filtrat ditambahkan amilalkohol lalu dikocok kuat-kuatdan timbulnya warna merah,kuning,jingga pada lapisanamil alkohol menandakan

positif flavonoid.


19/23

Sejumlah kecil bahan ujiditempatkan pada tabungreaksi lalu ditambahkanair secukupnya,kemudian dipanaskan

diatas penangas air laludisaring. Kepada filtrat

ditambahkan larutangelatin 1% dan adanyaendapan putihmenandakan positif tanin.


20/23

Sejumlah kecil simplisiaditempatkan pada tabungreaksi lalu ditambahkanair secukupnya,kemudian dipanaskan

diatas penangas air laludisaring. Filtrat ditambahkan

larutan NaOH atau KOH5% dan timbulnya warnakuning hingga merahmenandakan positifkuinon.


21/23

Simplisia digerus dg eterlalu disaring.

Filtrat ditempatkan dalamcawan penguap dandibiarkan menguapsampai kering.

Ditambahkan larutanvanillin 10% dalamH2SO4pekat dan

timbulnya warna-warnamenandakan positifsenyawa mono danseskuiterpen.


22/23

Simplisia digerus dengan

eter lalu disaring. Filtratditempatkan dalam cawanpenguap dan dibiarkanmenguap sampai kering,lalu ditambahkan larutanpereaksi Liebermann -Burchard dan terjadinyawarna merah-ungumenandakan positiftriterpenoid, sedangkan bilawarna hijau-birumenunjukkan positif steroid.


23/23

Sejumlah kecil simplisia ataubahan uji lain ditempatkanpada tabung reaksi laluditambahkan air secukupnya,kemudian dipanaskan diataspenangas air selama 30 menit,lalu disaring. Filtrat dibiarkan

sampai dingin, lalu dikocokkuat-kuat selama 10 detikdengan arah vertikal danterjadinya busa setinggi 1cm yang bertahan selama 10menit menandakan positifsaponin. Dan busa tersebutmasih bertahan (tidak hilang)

setelah ditambahkan beberapatetes HCl.

2. skrining fitokimia (1)

Documents