validasi proses formulasi sediaan p-cr koloid untuk...
TRANSCRIPT
VALIDASI PROSES FORMULASI SEDIAAN 32P-Cr KOLOID
UNTUK RADIOSINOVEKTOMI
SKRIPSI
KINANTHY PUTRI ANDINI
PROGRAM STUDI KIMIA
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
2020 M / 1441 H
VALIDASI PROSES FORMULASI SEDIAAN 32P-Cr KOLOID
UNTUK RADIOSINOVEKTOMI
Skripsi
Sebagai Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Sains
Program Studi Kimia
Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta
Oleh :
KINANTHY PUTRI ANDINI
NIM: 11150960000041
PROGRAM STUDI KIMIA
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
2020 M / 1441 H
v
PERNYATAAN
DENGAN INI SAYA MENYATAKAN BAHWA SKRIPSI INI ADALAH HASIL
KARYA SENDIRI DAN BELUM PERNAH DIAJUKAN SEBAGAI SKRIPSI
ATAU KARYA ILMIAH PADA PERGURUAN TINGGI ATAU LEMBAGA
MANAPUN.
Jakarta, Mei 2020
Kinanthy Putri Andini
11150960000041
vi
ABSTRAK
KINANTHY PUTRI ANDINI. Validasi Proses Formulasi Sediaan 32P-Cr Koloid
untuk Radiosinovektomi. Dibimbing oleh HENDRAWATI dan VERONIKA
YULIANTI SUSILO
Radiosinovektomi merupakan pengobatan alternatif untuk rheumatoid arthritis.
Radiosinovektomi berupa radiofarmaka pemancar sinar beta yang disuntikan ke
lapisan sendi untuk menghancurkan peradangan pada jaringan. Penelitian
sebelumnya menghasilkan proses formulasi 32P-Cr koloid yang optimum
menggunakan metode reduksi. Penelitian ini memvalidasi hasil pengukuran
kemurnian radionuklida, kemurnian radiokimia, pH dan distribusi ukuran partikel
formulasi 32P-Cr koloid berdasarkan pengendalian kualitas dan analisis presisi
(parameter keterulangan dan presisi antara) pada hasil pengukuran distribusi ukuran
partikel dan kemurnian radiokimia. Senyawa yang dihasilkan dianalisis distribusi
ukuran partikelnya menggunakan CoulterTM Countess dan mikroskop, analisis
kemurnian radionuklida dan kemurnian radiokimia dengan metode kromatografi
lapis tipis dan dideteksi menggunakan autoradiografi serta analisis pH dengan
kertas pH. Formulasi 32P-Cr koloid memiliki kemurnian radionuklida sebesar
99,84-99,92%, kemurnian radiokimia sebesar 96,68-99,25%, pH 5-6 dan distribusi
ukuran partikel 97,18-100% pada rentang 2-10 µm. Analisis presisi parameter
keterulangan pada hasil pengukuran distribusi ukuran partikel dan kemurnian
radiokimia memiliki nilai Relatif Standar Deviation (RSD) berturut-turut sebesar
0,49% dan 0,40%. Hasil tersebut memenuhi nilai keberterimaan presisi. Analisis
presisi parameter presisi antara pada hasil pengukuran distribusi ukuran partikel dan
kemurnian radiokimia memiliki nilai RSD berturut-turut sebesar 8,61% dan 1,33%.
Nilai RSD hasil pengukuran distribusi ukuran partikel belum memenuhi nilai
keberterimaan dan nilai RSD hasil pengukuran kemurnian radiokimia memenuhi
nilai keberterimaan presisi.
Kata kunci: 32P-Cr koloid, pengendalian kualitas, presisi
vii
ABSTRACT
KINANTHY PUTRI ANDINI. Validation Process of Formulation of 32P-Cr
Colloid to Radiosynovectomy. Guided by HENDRAWATI and VERONIKA
YULIANTI SUSILO
Radiosynovectomy is an alternative treatment of rheumatoid arthritis.
Radiosynovectomy is the radiopharmaceutical that emit beta rays to injected into
joints lining to destroy inflammatory tissue. Previous research has resulted optimum
formulation process of collodial 32P-Cr using reduction method. This research
validates the result of measurements of radionuclide purity, radiochemical purity,
pH and particle size distribution of the collodial 32P-Cr formulation with quality
control and precision analysis (repeatability and precision intermediate parameters).
The resulting compounds were analyzed and characterized by particle size
distribution with CoulterTM Countess and microscope, radionuclide purity and
radiochemical purity by thin layer chromatography method and detected using
autoradiography, and pH with pH paper. The collodial 32P-Cr has a radionuclide
purity of 99,84-99,92%, a radiochemical purity of 96,68-99,25%, a pH of 5-6 and
particle size distribution of 97,18-100% in the range 2-10 µm. The precision
analysis of repeatability the result of particle size distribution and radiochemical
purity has RSD 0,49% and 0,40%. The results fulfilled of value recovery precision.
The precision analysis of precision intermediate parameters the result of particle
size distribution has RSD of 8,61% and the result of the radiochemical purity has
RSD 1,33%. RSD of particle size distribution not yet fulfilled of value recovery and
RSD of chemical purity fulfilled of value recovery precision.
Key Words: 32P-Cr colloid, quality control, precision
viii
KATA PENGANTAR
Bismillaahirrohmaanirrohim
Assalamualaikum Warahmatullah Wabarakatuh
Segala puji dan syukur penulis haturkan ke hadirat Allah SWT, atas segala
nikmat-Nya sehingga penulis mampu menyelesaikan skripsi ini. Shalawat serta
salam semoga selalu dilimpahkan kepada junjungan kita nabi Muhammad SAW.
Skripsi ini berjudul Validasi Proses Formulasi Sediaan 32P-Cr Koloid untuk
Radiosinovektomi. Ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada semua pihak
yang telah membantu dan mendukung sehingga penulisan skripsi ini dapat
diselesaikan.
1. Dr. Hendrawati, M.Si selaku pembimbing I yang telah memberikan ilmu
pengetahuan, bimbingan, nasihat serta arahan dalam menyelesaikan
penelitian dan penulisan skripsi ini.
2. Veronika Yulianti Susilo, M.Farm selaku pembimbing II yang telah
memberikan ilmu pengetahuan, membimbing dan memberikan saran pada
penelitian dan penulisan skripsi.
3. Nurhasni, M.Si selaku dosen penguji I yang telah memberikan masukan pada
skripsi ini.
4. Nurmaya Arofah, SST, M.Eng selaku dosen penguji II yang telah
memberikan saran dan masukan pada skripsi ini.
5. Dr. La Ode Sumarlin, M.Si selaku ketua Program Studi Kimia, Fakultas Sains
dan Teknologi, UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
6. Prof. Dr. Lily Surayya Eka Putri, M.Env.Stud selaku Dekan Fakultas Sains
dan Teknologi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
7. Bunda dan Buya yang selalu memberikan dukungan materi dan moril selama
berlangsungnya penulisan skripsi.
Penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi kita semua.
Wassalaamu’alaikum, Wr. Wb.
Jakarta, Mei 2020
Kinanthy Putri Andini
ix
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ........................................................................................ viii
DAFTAR TABEL................................................................................................. xi
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xii
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xiii
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah .......................................................................................... 5
1.3 Hipotesis ........................................................................................................ 6
1.4 Tujuan Penelitian ........................................................................................... 6
1.5 Manfaat Penelitian ......................................................................................... 7
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................... 8
2.1 Rheumatoid Arthritis ..................................................................................... 8
2.2 Radiosinovektomi ........................................................................................ 10
2.3 Radioisotop 32P ............................................................................................ 13
2.4 Sediaan 32P-Cr Koloid ................................................................................. 16
2.5 Pengendalian Kualitas (Quality Control) .................................................... 20
2.6 Metode Analisis Presisi ............................................................................... 22
2.7 Karakterisasi 32P-Cr Koloid ......................................................................... 25
2.7.1 Analisis Distribusi Ukuran Partikel ................................................ 25
2.7.2 Analisis Kemurnian Radiokimia ..................................................... 27
BAB III METODE PENELITIAN .................................................................... 30
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ...................................................................... 30
3.2 Alat dan Bahan ............................................................................................ 30
3.2.1 Alat .................................................................................................. 30
3.2.2 Bahan............................................................................................... 30
3.3 Diagram Alir Penelitian ............................................................................... 31
3.4 Prosedur Penelitian ...................................................................................... 32
3.4.1 Formulasi 32P-Cr Koloid (Sukma, 2018) ........................................ 32
3.4.2 Karakterisasi Material ..................................................................... 32
x
3.4.3 Pengulangan Formulasi dan Validasi Prosedur 32P-Cr Koloid ....... 33
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................. 36
4.1 Formulasi Optimum 32P-Cr Koloid ............................................................. 36
4.2 Pengendalian Kualitas (Quality Control) .................................................... 43
4.3 Validasi Uji Presisi ...................................................................................... 46
BAB V PENUTUP ............................................................................................... 52
5.1 Kesimpulan .................................................................................................. 52
5.2 Saran ............................................................................................................ 52
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 53
LAMPIRAN ......................................................................................................... 59
xi
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Karakteristik Fisik dan Dosis Radioisotop untuk
Radiosinovektomi ..................................................................... 15
Tabel 2. Hasil Formulasi 32P-Cr Koloid .................................................. 35
Tabel 3. Hasil Pengukuran Distribusi Partikel Formulasi Optimum 32P-
Cr Koloid ................................................................................... 38
Tabel 4. Persentase Kemurnian Radiokimia Formulasi Optimum .......... 42
Tabel 5. Hasil Pengendalian Kualitas (Quality Control) 32P-Cr Koloid . 44
Tabel 6. Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid
menggunakan Countess dan Data Uji Presisi Parameter
Keterulangan ............................................................................. 47
Tabel 7. Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid
menggunakan Autoradiografi dan Data Uji Presisi Parameter
Keterulangan ............................................................................. 48
Tabel 8. Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid
menggunakan Countess dan Data Uji Presisi Parameter Presisi
Antara ........................................................................................ 50
Tabel 9. Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid
menggunakan Autoradiografi dan Data Uji Presisi Parameter
Presisi Antara ............................................................................ 51
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Penampang bentuk sendi normal dan Rheumatoid Arthritis 8
Gambar 2. Aplikasi Radiosinovektomi .................................................. 11
Gambar 3. Prosedur Autoradiografi ....................................................... 28
Gambar 4. Diagram Alir Penelitian........................................................ 31
Gambar 5. Perubahan Warna Larutan pada Proses Formulasi 32P-Cr
Koloid ................................................................................... 37
Gambar 6. Plat KLT pada Karakteristik Kemurnian Radiokimia .......... 39
Gambar 7. Radiokromatogram Hasil Analisis Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid dengan metode KLT menggunakan
Autoradiografi ...................................................................... 41
Gambar 8. Radiokromatogram Hasil Analisis Kemurnian Radiokimia 32P dengan metode KLT menggunakan Autoradiografi ....... 41
Gambar 9. Hasil Analisis Mikroskop F3 ................................................ 45
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Formulasi Sediaan 32P-Cr Koloid .................................... 60
Lampiran 2. Data Kemurnian Radiokimia menggunakan
Autoradiografi pada Formulasi 32P-Cr Optimum............. 61
Lampiran 3. Data Kemurnian Radiokimia menggunakan
Autoradiografi pada Standar 32P ...................................... 62
Lampiran 4. Data Kemurnian Radionuklida Pengendalian Kualitas
(Quality Control) ............................................................. 64
Lampiran 5. Data Kemurnian Radiokimia Pengendalian Kualitas
(Quality Control) ............................................................. 65
Lampiran 6. Data Distribusi Ukuran Partikel Pengendalian Kualitas
(Quality Control) ............................................................. 68
Lampiran 7. Keterangan Formulasi Uji Presisi .................................... 71
Lampiran 8. Perhitungan RSD Horwitz ............................................... 72
Lampiran 9. Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr
Koloid dan Analisis Presisi Parameter Keterulangan ...... 73
Lampiran 10. Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia dan Analisis
Presisi Parameter Keterulangan ....................................... 74
Lampiran 11. Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr
Koloid dan Analisis Presisi Parameter Presisi Antara ..... 79
Lampiran 12. Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid
dan Analisis Presisi Parameter Presisi Antara ................. 87
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Rheumatoid arthritis (RA) adalah penyakit kronis peradangan sendi pada
bagian sinovial (cairan yang berfungsi sebagai pelumas sendi) yang ditandai dengan
rasa sakit sehingga menyebabkan kerusakan progresif. Rheumatoid arthritis
menyerang 1% populasi penduduk di dunia yang mencakup segala umur dan tiga
kali lebih banyak terjadi pada wanita (CPPE, 2011). Akibat dari peradangan sendi
yang menahun antara lain adalah kerusakan tulang rawan sendi, tulang, tendon dan
ligamen, pengikisan tulang, dan kecacatan sendi yang mengganggu sistem
fungsional tubuh. Pasien penderita RA akan merasakan sakit, kaku dan
pembengkakan pada sendi. Sendi yang rusak akan membuat pasien tidak bisa
melakukan aktivitas sehari-hari dan menurunkan kualitas hidup (Das, 2007;
Rustendi et al., 2010).
Terapi yang dilakukan terhadap pasien bertujuan untuk mengurangi sakit,
peradangan, dan kerusakan sendi, serta memperbaiki fungsi sendi (Rustendi et al.,
2010). Bentuk terapi rheumatoid arthritis ada dua metode, yaitu dengan obat
(farmakologi) dan tanpa obat (non farmakologi). Terapi menggunakan obat
analgesik seperti parasetamol, obat antiinflamasi nonsteroid atau NSAIDs (Non-
Steroidal Anti-Inflammatory Drugs) seperti ibuprofen, DMARDs (Disease-
Modifying Antiheumatic Drugs) sebagai obat imunosupresan seperti methotrexate,
leflunomide, azathioprine, dan ciclosporin, dan obat golongan glukokortikoid atau
yang disebut juga kortikosteroid sebagai obat antiinflamasi steroid. Kelemahan dari
terapi menggunakan obat adalah memiliki efek samping dan toksisitas yang tinggi.
2
Terapi tanpa obat dapat dilakukan dengan operasi. Operasi sendi dapat dilakukan
ketika pasien sudah tidak responsif dengan terapi obat. Operasi dilakukan dengan
harapan dapat mengurangi rasa sakit dan meningkatkan fungsi sendi. Pertimbangan
operasi adalah dilakukan sebelum terjadi kerusakan sendi yang ireversibel termasuk
kemungkian pengganti sendi, penggabungan sendi dan rekonstruksi tendon (CPPE,
2011). Operasi juga memiliki risiko antara lain adalah pendarahan, infeksi pada
sendi artifisial, bekuan darah dan sendi artifisial yang tidak cocok. Pemulihan pasca
operasi membutuhkan waktu 2 minggu sedangkan untuk rehabilitasnya
membutuhkan waktu beberapa bulan (Darlina & Wahyuni, 2004).
Radiosinovektomi merupakan metode alternatif selain operasi sendi. Menurut
Das et al. (2004), prinsip dari radiosinovektomi adalah menyuntikkan sejumlah
kecil sediaan bertanda radioisotop ke dalam sendi. Radioisotop tersebut akan
memancarkan sinar beta yang menembus dan menghancurkan inflamasi jaringan
untuk mengurangi rasa sakit dan pembengkakan. Radioisotop yang digunakan
bersifat aman dan tidak menyebabkan kerusakan pada tulang rawan artikular
(tulang rawan yang kenyal, elastis dan keras) (Johnson et al., 1995). Kelebihan
radiosinovektomi adalah terapi yang aman dan efektif untuk pasien RA yang tidak
dapat disembuhkan dan/atau tidak memungkinkan terapi obat-obatan. Prosedur
terapi sederhana, risiko lebih kecil, tidak membutuhkan pemulihan rawat inap di
rumah sakit, pengobatan biaya yang lebih kecil dan terapi dapat diulang juga
merupakan kelebihan radiosinovektomi dibandingkan operasi (Darlina & Wahyuni,
2004).
Allah SWT berfirman dalam Al-Qur’an surah Asy-Syu’ara’ ayat 80 dan surah
Yunus ayat 57 mengenai kesembuhan dari sakit:
3
٠٨وإذا مرضت فهو يشفين
Artinya: dan apabila aku sakit, Dialah yang menyembuhkanku (QS. Asy-
Syu’ara’ [26]: 80).
أيها ب كم وشفاء ل ما في ٱلناس ي ن ر وعظة م دور قد جاءتكم م وهدى ٱلص
لمؤمنين ٧٥ورحمة ل
Artinya: Hai manusia, sesungguhnya telah datang kepadamu pelajaran dari
Tuhanmu dan penyembuh bagi penyakit-penyakit (yang berada) dalam dada dan
petunjuk serta rahmat bagi orang-orang yang beriman (QS. Yunus [10]: 57).
Firman Allah di atas menjelaskan bahwa kesembuhan dari segala penyakit
datangnya dari Allah SWT. Pengobatan dan perawatan dokter merupakan bentuk
usaha manusia untuk mencapai kesembuhan. Petunjuk serta rahmat mengenai
kesembuhan hanya akan diberikan kepada orang-orang yang beriman dan yang mau
berusaha. Salah satu metode alternatif untuk pengobatan dari penyakit RA adalah
dengan radiosinovektomi. Pengobatan menggunakan radiosinovektomi menurut
penelitian Silva et al. (2001) merupakan salah satu cara untuk penderita
haemophilic synovitis yang kronis. Berdasarkan penelitian tersebut, hemarthosis
(pendarahan pada sendi) yang terjadi dapat dikurangi selama lebih dari 8 tahun
setelah pengobatan.
Penelitian Prabhakar et al. (2001) memformulasikan sediaan 32P-Cr koloid
dengan hasil penelitian kemurnian radiokimia > 98%, ukuran partikel < 5 µm
dengan 99% partikel berukuran 0,6-2,5 µm, sediaan tetap stabil hingga 7 hari dan
hasil uji coba ke hewan menunjukkan adanya penyerapan di paru-paru hingga 70%
dikarenakan adanya ukuran partikel >10 µm. Penelitian Silva et al. (2001)
penggunaan sediaan 32P-Cr-Koloid juga dapat mengurangi pendarahan pada pasien
haemophilic dengan tingkat keberhasilan mencapai 70%. Penggunaan 32P-Cr-
4
Koloid juga telah dilakukan oleh Mortazavi et al. (2007) untuk menurunkan
frekuensi dari hemarthrosis. Pendarahan yang terjadi pada intra-artikular berhasil
dikurangi dengan radiofarmaka tersebut.
Penelitian mengenai sediaan radiofarmaka untuk radiosinovektomi di
Indonesia, sebelumnya telah dilakukan oleh Rustendi et al. (2010) dalam
pembuatan 186Re-Sn koloid dengan rasio mol SnCl2.2H2O terhadap Re sama dengan
1000:1, waktu pemanasan 90 menit dan kemurnian radiokimia 96,7%. Penelitian
Aziz (2012) mengenai pembuatan dan karakterisasi radioisotop 169ErCl3 dengan
cara iradiasi bahan sasaran erbium oksida diperkaya dengan pengayaan 168Er
sebesar 97,75% dengan hasil penelitian kemurnian radionuklida sebesar 99,84%
dan kemurnian radiokimia sebesar 99,51%. Penelitian Aziz dan Suherman (2013)
menggunakan radioisotop 175YbCl3 hasil iradiasi bahan sasaran iterbium oksida
dengan pengayaan isotop 174Yb sebesar 98,4% dengan hasil penelitian kemurnian
radionuklida sebesar 100% dan kemurnian radiokimia sebesar 99,66%.
Penelitian ini menggunakan sediaan kromik fosfat bertanda radioisotop 32P
(32P-Cr Koloid). Penggunaan radioisotop 32P dikarenakan radioisotop tersebut
mudah ditemukan dan lebih murah dibanding radioisotop itrium-90 (90Y) karena
berasal dari target sulfur yang berada di alam, merupakan radioisotop yang hanya
memancarkan sinar beta, memiliki waktu paruh 14 hari, cocok digunakan untuk
sendi besar seperti sendi lutut dengan ukuran partikel dan kemampuan penetrasi
pada jaringan yang sesuai untuk digunakan pada radiosinovektomi (Liepe et al.,
2011; Silva et al., 2001). Formulasi yang optimum pada radioisotop tersebut
menggunakan metode reduksi telah dilakukan pada penelitian Sukma (2018) dalam
penentuan kondisi optimum formulasi 32P-Cr berdasarkan prosedur formulasi dari
5
Liepe et al. (2011), Prabhakar et al. (2001) dan Turco & Pietra (1963). Tahap
berikutnya yang dilakukan dalam penelitian ini adalah memvalidasi proses
formulasi tersebut. Validasi proses formulasi 32P-Cr koloid yang optimum agar
diperoleh kinerja proses formulasi yang valid. Validasi dalam penelitian ini
memastikan hasil pengukuran karakterisasi kemurnian radionuklida, kemurnian
radiokimia, pH dan distribusi ukuran partikel 32P-Cr koloid sesuai dengan standar
pengendalian kualitas (quality control) radiofarmaka untuk radiosinovektomi
berdasarkan United States Pharmacopeia (USP) National Formulary (NF)
(USP30-NF25), International Atomic Energy Agency (IAEA) Technical Report
Series (2019) dan Pars Isotope. Validasi selanjutnya, menetapkan nilai
keberterimaan analisis presisi berdasarkan hasil pengukuran distribusi ukuran
partikel dan kemurnian radiokimia. Distribusi ukuran partikel 32P-Cr koloid
dikarakterisasi menggunakan mikroskop dan CoulterTM Counter, kemurnian
radionuklida dan radiokimia diuji dengan metode kromatografi lapis tipis dan
jumlah keradioaktifannya dicacah menggunakan autoradiografi, dan pH diuji
menggunakan kertas indikator pH.
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka rumusan masalah dalam penelitian
ini adalah sebagai berikut:
1. Apakah data hasil pengukuran kemurnian radionuklida, kemurnian
radiokimia, pH dan distribusi ukuran partikel 32P-Cr koloid sesuai dengan
standar pengendalian kualitas (quality control) radiofarmaka untuk
radiosinovektomi berdasarkan United States Pharmacopeia (USP) National
6
Formulary (NF) (USP30-NF25), International Atomic Energy Agency
(IAEA) Technical Report Series (2019) dan Pars Isotope?
2. Apakah hasil pengukuran distribusi ukuran partikel dan kemurnian
radiokimia formulasi 32P-Cr koloid memenuhi nilai keberterimaan uji
presisi parameter keterulangan dan presisi antara?
1.3 Hipotesis
Hipotesis dari penelitian yang akan dilaksanakan adalah sebagai berikut:
1. Data hasil pengukuran kemurnian radionuklida, kemurnian radiokimia, pH
dan distribusi ukuran partikel 32P-Cr koloid memenuhi standar pengendalian
kualitas (quality control) radiofarmaka untuk radiosinovektomi berdasarkan
United States Pharmacopeia (USP) National Formulary (NF) (USP30-
NF25), International Atomic Energy Agency (IAEA) Technical Report Series
(2019) dan Pars Isotope.
2. Data hasil pengukuran distribusi ukuran partikel dan kemurnian radiokimia
32P-Cr koloid memenuhi nilai keberterimaan analisis presisi parameter
keterulangan dengan nilai standar deviasi relatif (RSD) < 2,68% (RSD
Horwitz Presisi Keterulangan) dan presisi antara dengan nilai RSD < 4%
(RSD Horwitz Presisi Antara).
1.4 Tujuan Penelitian
7
Tujuan dari penelitian ini adalah:
1. Menjamin hasil pengukuran kemurnian radionuklida, kemurnian radiokimia,
pH dan distribusi ukuran partikel 32P-Cr sesuai dengan standar pengendalian
kualitas (quality control) radiofarmaka untuk radiosinovektomi.
2. Menetapkan nilai keberterimaan analisis presisi formulasi 32P-Cr koloid pada
hasil pengukuran distribusi ukuran partikel dan kemurnian radiokimia dengan
validasi uji presisi parameter keterulangan dan presisi antara.
1.5 Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalah sebagai sumber informasi dan sumber data
ilmiah untuk penelitian lanjutan mengenai 32P-Cr koloid untuk radiosinovektomi
yang valid sehingga dapat digunakan sebagai metode alternatif pengobatan
rheumatoid arthritis.
8
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Rheumatoid Arthritis
Rheumatoid arthritis (RA) adalah penyakit sistemik peradangan sendi pada
bagian sinovial (cairan berfungsi sebagai pelumas sendi) yang menyebabkan
kerusakan progresif. Penyakit ini biasanya menyerang sendi pergelangan tangan
dan sendi lutut (Das, 2007; CPPE, 2011). Peradangan pada bagian sinovial
menyebabkan terjadi pembengkakan sendi, rasa sakit dan kekakuan. Peradangan ini
berkelanjutan hingga terjadi pannus (jaringan granulasi mirip dengan jaringan
parut) yang menyebabkan pengikisan tulang (CPPE, 2011). Gambar 1
memperlihatkan pembentukan sendi sehat dan sendi pada pasien rheumatoid
arthritis (RA).
Gambar 1. Penampang bentuk sendi normal dan
rheumatoid arthritis (Musculoskeletal Australia)
Penyebab penyakit rheumatoid arthritis belum diketahui dengan pasti, tetapi
salah satu faktor penyebabnya adalah karena reaksi kekebalan pada proses di dalam
tubuh (autoimunitas). Tubuh menghasilkan antibodi yang menyerang sel-selnya
9
sendiri. Kompleks antigen-antibodi yang terbentuk dapat menurunkan imunitas
tubuh dan merusak jaringan, termasuk jaringan sendi (Wijayakusuma, 2008).
Peradangan sendi pada lapisan membran sinovial yang menghasilkan cairan yang
mengandung sel makrofag limfosit T dalam jumlah yang banyak. Sel makrofag
limfosit T tersebut dapat merusak tulang dan menekan cairan sinovial sehingga
menimbulkan rasa sakit (De Bois et al., 1995; Darlina & Wahyuni, 2004).
Gejala umum pada rheumatoid arthritis adalah terjadi pembengkakan, timbul
warna kemerahan, terasa hangat dan bila ditekan terasa sakit pada sendi. Gejala
tersebut bersifat hilang timbul (Darlina & Wahyuni, 2004). Penggunaan obat-
obatan pada pasien penderita rheumatoid arthritis bertujuan untuk mengurangi rasa
sakit, mengurangi peradangan dan menurunkan risiko terjadinya kerusakan sendi
(CPPE, 2011). Obat-obatan yang digunakan pada terapi pasien RA, antara lain
sebagai berikut (Darlina & Wahyuni, 2004; CPPE, 2011; Cartika, 2016):
1. Non-Steroidal Anti-Inflammatory Drugs (NSAID) adalah obat anti inflamasi
nonstreroid, seperti aspirin dan ibuprofen. Obat ini umumnya diberikan di
awal penyakit yang bertujuan untuk mengurangi sakit karena peradangan
sendi. Obat golongan NSAID tidak dapat melindungi tulang rawan maupun
tulang sendi dari proses peradangan. Sifat toksik dari obat NSAID adalah
gangguan pencernaan, gangguan fungsi hati dan ginjal.
2. Kombinasi beberapa obat untuk pengobatan rheumatoid arthritis yang
dikenal dengan terapi Desease-Modifying Antirheumatic Drug (DMARD),
contohnya seperti klorokuin, methotrexate, cyclosproin-A, dan D-
penisilillamin. Efek samping dari terapi ini adalah gangguan pencernaan,
fungsi hati dan ginjal.
10
3. Glukokortikoid atau kortikosteroid digunakan sebagai obat karena memiliki
efek antiinflamasi. Glukokortikoid berperan dalam metabolisme karbohidrat,
lipid dan protein di dalam tubuh. Fungsi lain dari glukokortikoid adalah
mempengaruhi fungsi kardiovaskular, sistem saraf dan otot rangka,
meregulasi ekpresi genetik pertumbuhan dan memiliki efek antiinflamasi dan
imunosupresif. Penggunaan obat glukokortiod dapat secara oral maupun
injeksi untuk pasien penderita rheumatoid arthritis.
Sistem kerja pada obat-obat di atas adalah dengan menstabilkan membran
sinovial, menghambat pelepasan dan aktivitas media peradangan (histamin,
serotonin dan enzim lisosomal), menghambat perpindahan sel ke tempat
peradangan, dan menghambat proliferasi sel, dan mengurangi rasa sakit (Darlina &
Wahyuni, 2004). Dampak rheumatoid arthritis dalam jangka panjang pada
kehidupan individu adalah rasa sakit, pembengkakan, sendi terasa kaku, kerusakan
tulang rawan, pengikisan tulang, dan kecacatan sendi yang mempengaruhi kualitas
hidup dan kemampuan untuk bekerja (Wijayakusuma, 2008; Das et al., 2007;
CPPE, 2011).
2.2 Radiosinovektomi
Radiosinovektomi adalah metode pengobatan dengan menyuntikkan
radioisotop pemancar sinar beta ke dalam sendi dalam jumlah kecil yang bertujuan
untuk menghancurkan inflamasi pada jaringan sehingga rasa sakit dan
pembengkakan berkurang (Das et al., 2004). Radiosinovektomi merupakan salah
satu cara pengobatan untuk penyakit sendi yang bersifat kronis. Pengobatan dengan
radiosinovektomi memiliki risiko efek samping yang rendah dan dapat
diaplikasikan pada pengobatan rawat jalan (Mödder, 2013). Pengobatan ini
11
bertujuan untuk meringankan rasa sakit dan meningkatkan mobilitas sendi (Soroa
et al., 2005).
Radioisotop yang dinjeksikan tersebar secara merata pada sendi dan
sepanjang permukaan sel dan terjadi penyerapan di jaringan sinovial (Johnson et
al., 1995). Pengaplikasian radioisotop pada jaringan sinovial akan mengalami
fagositosis dengan lokal iradiasi yang tinggi. Hal tersebut akan menyebabkan
proliferasi (pertumbuhan sel yang tidak normal) pada jaringan akan hancur dan
pembentukan senyawa yang menyebabkan peradangan akan dihentikan. Sendi akan
membentuk fibrosis (benang-benang halus) untuk membentuk jaringan sinovial
yang baru, sehat dan normal. Hasil dari proses tersebut adalah berkurangnya rasa
sakit pada peradangan, pembengkakan dan kerusakan sendi dapat dihentikan (Das
et al., 2004; Das, 2007; Liepe et al., 2011; Aziz, 2012). Gambar 2 menunjukkan
proses radiosinovektomi yang terjadi dalam sendi.
(a)
(b)
(c)
(d)
(a) proliferasi sinovial yang menyebabkan peradangan pada sendi
(b) aplikasi radiosinovektomi dengan penyuntikan di intra-artikular
(c) radioisotop berfagosit dalam jaringan
(d) peradangan pada jaringan berkurang dan jaringan berfibrosis untuk
membentuk jaringan yang baru
Gambar 2. Aplikasi Radiosinovektomi (Knut, 2015)
12
Jenis radioisotop yang dapat digunakan untuk radiosinovektomi antara lain
adalah fosfor-32 (32P), itrium-90 (90Y), renium-186 (186Re) dan renium-188 (188Re)
(IAEA, 2019). Radioisotop yang digunakan berbentuk radiokoloid, berupa
pemancar radiasi beta yang memiliki daya tembus pada jaringan 5-10 mm, memiliki
ukuran 2-10 m, waktu paruh (t½) yang pendek (dalam orde hari), tidak
memancarkan atau sedikit memancarkan sinar gamma, bersifat stabil dan homogen,
dan tidak menunjukkan gejala inflamasi (IAEA, 2001; Schneider et al., 2005;
Karavida & Notopoulos, 2010; Rustendi et al., 2010; Aziz, 2012).
Penyuntikan radioisotop untuk radiosinovektomi dilakukan dengan cara
intra-artikular atau langsung pada sendi. Sebelum penyuntikan dianjurkan untuk
memberikan anastesi lokal dengan menggunakan lidocaine 1%. Posisi jarum
dipastikan dengan bantuan fluoroscopic untuk menjamin posisi yang tepat. Cairan
yang berlebihan pada sendi dikeringkan terlebih dahulu. Sediaan diinjeksi,
kemudian akan melepaskan radiasi pengion (sinar ) yang akan menghancurkan
atau menguraikan zat-zat organik dalam cairan sendi. Hasil penguraian tersebut
akan dibuang melalui urin. Injeksi prilocaine dan glucocorticoids dilakukan setelah
penyuntikan sebagai anastesi, pencegahan kebocoran di ekstra-artikular dan
pencegah sinovitis. Setelah injeksi dilakukan, sendi dibebat selama 48 jam, untuk
mencegah terjadinya kebocoran radioisotop dari sendi (EANM, 2003; Darlina &
Wahyuni, 2004; Schneider et al., 2005; Koca et al., 2013; Atilgan et al., 2016).
Gambar Radiosinovektomi dapat diaplikasikan pada pasien penderita rheumatoid
arthritis, arthropathia psoriatica, poly-arthritis, haemophilic arthritis dan
osteoarthritis (EANM, 2003; Das, 2007; Knut, 2015).
13
Dosis pada radiosinovektomi tidak hanya ditentukan dari jenis radioisotop
dan besar radiasi beta yang dipancarkannya tetapi juga dilihat dari faktor lain seperti
ukuran rongga sendi, ketebalan cairan sinovial, distribusi radioisotop dalam cairan
sendi, dan aktivitas peradangan pada sendi (Das et al., 2004). Pemberian dosis yang
tepat untuk radiosinovektomi bertujuan agar radioisotop tidak merusak tulang
rawan dan jaringan disekitar sendi dan hanya bekerja di daerah inflamasi (Liepe et
al., 2011). Alat scintigraphy digunakan untuk memastikan bahwa tidak ada
kebocoran radioisotop yang keluar dari sendi (Koca et al., 2013). Efek samping
setelah radiosinovektomi pada intra-artikular memiliki risiko yang rendah (1
banding 35.000). Hal ini disebabkan karena konsentrasi tinggi dari radiasi beta yang
dipancarkan membunuh bakteri pada sendi dan radiasi tersebut hanya bekerja pada
daerah peradangan (Das et al., 2004; Knut, 2015).
Efek samping dari proses radiosinovektomi tidak ditemukan dalam fungsi
darah, urin dan hati setelah proses radiosinovektomi (Oka et al., 1971).
Radiosinovektomi merupakan metode pengobatan alternatif untuk penderita
rheumatoid arthritis yang tidak dapat disembuhkan dengan obat-obat dan/atau tidak
dapat mengonsumsi obat dalam jangka waktu lama. Kelebihan lainnya dalam
radiosinovektomi adalah memiliki prosedur yang sederhana, risiko yang
ditanggung pasien lebih kecil, tidak membutuhkan pemulihan rawat inap yang lama
di rumah sakit dan biaya pengobatan lebih kecil, serta terapi dapat diulang jika
dibutuhkan lagi (Darlina & Wahyuni, 2004).
2.3 Radioisotop 32P
Isotop adalah atom-atom yang memiliki jumlah proton sama (nomor atom
sama) akan tetapi mempunyai jumlah neutron yang berbeda (nomor massa
14
berbeda). Sumber isotop ada 2, yaitu isotop yang berasal dari alam dan isotop
buatan manusia yang berasal dari reaksi inti. Radioisotop atau isotop radioaktif
merupakan sumber radiasi. Radioisotop yang digunakan pada bidang kedokteran
dipilih secara hati-hati dan digunakan dengan cermat karena sasaran pemakaiannya
adalah manusia (Wardhana, 2007).
Syarat radioisotop dalam bidang kedokteran adalah radioisotop yang
digunakan harus memiliki waktu paruh yang pendek (orde hari), radioisotop mudah
dibuat dan disiapkan, sudah teruji secara klinis, radioisotop harus dapat segera
keluar melalui sistem sekresi, radioisotop aman tidak mengendap/menuju organ
kritis (Wardhana, 2007). Klasifikasi penggunaan radioisotop dapat dibedakan dari
ukuran sendi. Radioisotop dengan radiasi sinar yang lemah ( < 0,5 MeV)
digunakan untuk sendi yang berukuran kecil seperti sendi pada jari tangan atau kaki.
Contoh radioisotop sinar lemah diantaranya adalah 169Er dan 175Yb. Radioisotop
dengan radiasi sinar sedang (0,5-1 MeV), digunakan pada sendi berukuran lebih
besar seperti sendi pergelangan tangan, siku, bahu, pergelangan kaki dan pinggul.
Contoh radioisotop sinar sedang adalah 186Re. Radioisotop dengan radiasi sinar
besar (>1 MeV) digunakan untuk sendi lutut (Aziz, 2012) dan contoh radioisotop
yang memancarakan radiasi besar adalah 32P dan 90Y. Karakteristik fisik dan
dosis radioisotop untuk radiosinovektomi dapat dilihat pada Tabel 1.
15
Tabel 1. Karakteristik Fisik dan Dosis Radioisotop untuk Radiosinovektomi
Radionuklida
Waktu
paruh
(hari)
Daya tembus
jaringan
(mm)
Pancaran
sinar gamma
Sendi/Dosis
(mCi)
198Au 2,7 3,6 Ya Lutut/2,0 32P 14,3 3,7 Tidak Lutut/2,0 90Y 2,7 11,0 Tidak Lutut/4,0
186Re 3,8 3,7 Ya Tulang paha;
siku/2,5 166Ho 1,1 8,5 Ya Lutut/10,0 165Dy 0,1 5,7 Ya Lutut/270,0
(Ingrand, 1973; Darlina & Wahyuni, 2004; Rustendi et al., 2010)
Radioisotop fosfor-32 (32P) dapat diproduksi secara lokal dibeberapa negara
berkembang. Fosfor-32 (32P) dalam bentuk koloid cocok untuk digunakan dalam
terapi radiosinovektomi. Karakteristik dari fosfor-32 (32P) adalah memiliki waktu
paruh 14,3 hari, radiasi beta maksimum yang dipancarkan adalah 1,71 MeV, nilai
maksimum daya tembus jaringan adalah 7,9 mm dengan nilai rata-ratanya adalah
2,2 mm, aktivitas injeksi pada orang dewasa adalah 37-54 MBq (Anghileri &
Marqués, 1967; Winston et al., 1973; Liepe et al., 2011). Berdasarkan karakteristik
tersebut, penelitian ini menggunakan radioisotop fosfor-32 (32P) untuk terapi
rheumatoid arthritis yang dapat diaplikasikan di sendi lutut.
Kelebihan dari radioisotop 32P antara lain sebagai berikut (Jacobs, 1985; Silva
et al., 2001, IAEA, 2019):
1. Radiasi yang dipancarkan hanya radiasi beta sebesar 1,71 MeV yang cocok
untuk penggunaan radiosinovektomi pada sendi besar seperti sendi lutut.
2. Mempunyai batas penetrasi dalam jaringan sebesar 7,9 mm dengan rata-rata
2,2 mm sehingga tidak menyebar ke jaringan lain yang masih sehat.
3. Memiliki rata-rata ukuran partikel yang besar yaitu 4 µm dalam rentang 0,5-
10 µm yang sesuai dengan syarat distribusi ukuran partikel yaitu 2-10 µm
16
sehingga radioisotop mampu berfagosit ke daerah sinovial dan tidak terjadi
kebocoran dari sendi.
4. Memiliki waktu paruh selama 14 hari yang cukup untuk menghancurkan
peradangan pada sendi.
2.4 Sediaan 32P-Cr Koloid
Pengertian sediaan farmasi berdasarkan Undang-Undang Republik Indonesia
Nomor 26 Tahun 2009 tentang Kesehatan Pasal 1 adalah obat, bahan obat, obat
tradisional dan kosmetika. Pasal 98 ayat (1) menjelaskan bahwa sediaan farmasi
dan alat kesehatan harus aman, berkhasiat atau bermanfaat, bermutu dan terjangkau.
Pengertian obat dalam Undang-Undang Kesehatan adalah bahan atau paduan
bahan, termasuk produk biologi yang digunakan untuk mempengaruhi atau
menyelidiki sistem fisiologi atau keadaan patologi dalam rangka penetapan
diagnosis, pencegahan, penyembuhan, pemulihan, dan peningkatan kesehatan
untuk manusia (Rosilawati et al., 2017).
Sediaan radiofarmaka adalah sediaan radioisotop yang digunakan secara in
vivo bertujuan untuk diagnosis dan/atau terapi. Radiofarmaka tersebut akan
berkumpul atau terakumulasi di dalam organ tubuh tertentu setelah dimasukkan ke
dalam tubuh baik secara oral maupun injeksi, proses tersebut disebut lokalisasi
radiofarmaka. Radiofarmaka mengalami metabolisme dan terakumulasi pada
jaringan/atau organ normal setelah mengikuti aliran darah menuju organ/jaringan
tersebut melalui proses fisiologis normal (Soenarjo, 2014).
Syarat radiofarmaka untuk radiosinovektomi adalah efektif menempatkan
radioisotop pada lingkungan seluler dan harus mencapai sel target in-vivo dalam
jumlah yang optimal. Kualitas lainnya adalah memiliki ukuran partikel yang cukup
17
dan tetap stabil dalam ruang persendian selama waktu paruh radioisotop. Ukuran
partikel yang besar untuk mencegah terjadinya kebocoran dari ruang sendi (Darlina
& Wahyuni, 2004).
Senyawa radiofarmaka mempunyai struktur dengan gugus radioaktif tertentu
yang dapat berikatan secara spesifik dengan molekul penyusun atau permukaan
jaringan target, proses ini disebut mekanisme spesifik. Permukaan jaringan target
yang mengalami peradangan (inflamasi) membentuk membran dengan gugus
radioaktif yang spesifik yang dapat membentuk ikatan dengan substrat
radiofarmaka. Radiofarmaka ini disebut dengan radiofarmaka molekul terarah.
Sediaan farmaka pada penelitian menggunakan radioisotop fosfor-32 (32P) yang
merupakan radioisotop non-logam. Substrat yang berupa makromolekul, contohnya
protein, tidak mudah berikatan dengan radioisotop, sehingga memerlukan ligan
dengan gugus fungsi ganda dan/atau senyawa linker yang berfungsi sebagai
jembatan penghubung pada ikatan radioisotop dan substrat. Ikatan yang terjadi
dapat berupa pembentukan kompleks antigen-antibodi, enzim-substrat, dan ligan-
reseptor (Soenarjo, 2014).
Karakteristik dari kromium (Cr) adalah memiliki nomor massa 52; nomor
atom 24; densitas 7,2 g/cm3; titik lebur 1.907C; titik didih 2.672C; berbentuk
kristal yang berwarna abu-abu seperti baja, sangat keras dan memiliki nilai oksidasi
+2; +3; dan +6. Kromium (Cr) ditemukan dalam tubuh manusia, baik pada orang
dewasa maupun bayi yang baru lahir (Langard & Costa, 2007). Kromium (Cr)
dalam tubuh adalah sebagai mineral mikro yang berperan dalam metabolisme
karbohidrat, protein dan lemak. Peran mekanisme Cr lainnya adalah memfasilitasi
interaksi insulin dengan reseptor ketika gula masuk ke permukaan sel. Mekanisme
18
transport Cr adalah Cr disimpan dalam darah dengan diikat pada transferin,
kemudian kompleks transferin-kromium terhubung dengan reseptor transferin dan
masuk ke dalam sel, selanjutnya Cr akan dilepas kembali (Budiasih, 2011).
Kromium dikeluarkan melalui urin dan tinja (Langard & Costa, 2007). Berdasarkan
sifat Cr tersebut, maka pada penelitian ini Cr berperan sebagai ligan atau senyawa
pembawa.
Formulasi 32P-Cr koloid dilakukan dengan metode reduksi. Reduktor dalam
formulasi adalah natrium sulfit (Na2SO3) yang mereduksi ion krom dari bilangan
oksidasi Cr6+ menjadi Cr3+ agar membentuk koloid Cr3+PO4. Larutan berubah
warna dari kuning menjadi hijau setelah penambahan Na2SO3 yang menandakan
adanya Cr3+ pada larutan (Morales et al., 2015). Reduksi Cr6+ sensitif terhadap
perubahan pH larutan. pH larutan yang rendah memiliki kandungan Cr6+ yang
tinggi, penambahan Na2SO3 sebagai reduktor menyebabkan peningkatan pH larutan
(Pan et al., 2014).
Pembentukan sediaan 32P-Cr koloid berdasarkan reaksi redoks, dimana
larutan Na2SO3 sebagai reduktor (mengalami oksidasi dari S4+ menjadi S6+) dan
H2CrO4 sebagai oksidator (mengalami reduksi dari Cr6+ menjadi Cr3+) (Turco &
Pietra, 1963). Reduksi ion Cr bertujuan untuk membuat ikatan P-Cr yang stabil dan
aman, karena ion Cr3+ termasuk bentuk kromium yang paling tidak toksik dan aman
bagi tubuh. Toksisitas dari kromium hexavalen [Cr(VI)] menyebabkan kanker bagi
tubuh manusia (Langard & Costa, 2007). Penggunaan unsur Cr (VI) yang kemudian
direduksi hingga menjadi Cr (III) dalam penelitian ini dilakukan karena unsur Cr
(III) yang berbentuk kristal halus sulit dilarutkan dalam air/alkohol/asam. Bahan
dasar Cr (VI) oksida yang digunakan berupa padatan berwarna merah gelap.
19
Berikut persamaan reaksi dalam formulasi 32P-Cr koloid (Turco & Pietra, 1963,
Morales et al., 2015):
2H2CrO4 + 3Na2SO3 + 2H3PO4 2CrPO4 + 3Na2SO4 + 5H2O
Penelitian Jacobs (1958) menyatakan bahwa rata-rata ukuran partikel 32P-Cr
koloid adalah 4 m dalam rentang pengukuran 0,5-10 m. Sediaan 32P-Cr koloid
yang memiliki distribusi ukuran partikel >10 m dapat terjadi karena koloid
memiliki kecenderungan untuk membentuk agregat (Turco & Pietra, 1963).
Reduksi pada formulasi 32P-Cr koloid menyebabkan pembentukan senyawa tidak
larut Cr3+ berinteraksi dengan ion ortofosfat (PO43-) dan terjadi pembentukan
endapan (agregat). Hidrolisis berlanjut pada suhu kamar dengan Cr3+ yang tersisa
dalam larutan tidak bereaksi dengan ion fosfat (Morales et al., 2015).
Partikel agregat yang terbentuk memiliki bentuk yang berbeda dengan bentuk
asli partikel koloid. Proses pembentukan agregat disebut agregasi. Agregasi adalah
pembentukan sebuah molekuler yang terbentuk dari endapan koloid. Prinsip dari
agregasi adalah adanya gaya tarik menarik atau gaya Van der Waals antar partikel
koloid. Agregasi ini dapat terjadi karena substitusi pelarut yang tidak bagus,
pendinginan dan reaksi kimia. Agregat dapat terdispersi kembali dibantu dengan
pengadukan (Shaw, 1992).
Sediaan radiokoloid untuk radiosinovektomi harus memiliki ukuran partikel
2-10 m (IAEA, 2001; Schneider et al., 2005). Ukuran partikel radiokoloid pada
rentang tersebut cukup besar untuk berfagosit (menembus) organ target. Ukuran
partikel koloid yang berukuran < 1m akan menyebabkan terjadinya kebocoran dari
ruang sendi yang mengakibatkan terjadinya paparan radiasi pada organ lain seperti
hati, limpa dan kelenjar getah bening dan tidak dapat dikeluarkan dari dalam tubuh.
20
Radioisotop dengan ukuran besar dari ukuran kapiler akan menyebabkan
terakumulasi di dalam paru-paru setelah penyuntikan (Schneider et al., 2005;
Rustendi et al., 2010; Aziz dan Suherman, 2013; IAEA, 2015). Cara untuk
mendapatkan koloid yang memiliki ukuran partikel sesuai dengan standar (2-10
m) adalah dengan melakukan dialisis (Turco & Pietra, 1963; Anghileri &
Marqués, 1967, Liepe et al., 2011).
2.5 Pengendalian Kualitas (Quality Control)
Pengendalian kualitas adalah kegiatan yang mengawasi dan mengukur
karakteristik benda, proses, layanan, fasilitas dan pelaksanaan agar memenuhi
jaminan kualitas yang ditetapkan (BATAN). Radiofarmaka yang diberikan kepada
pasien harus aman, berkualitas dan efektif dalam penggunaannya. Uji pengendalian
kualitas perlu dilakukan sebelum produk digunakan. Uji pengendalian kualitas
merupakan validasi untuk menguji kualitas produk akhir radiofarmaka (IAEA,
2006).
Pengendalian kualitas partikel radiolabel mencakup spesifikasi, pengujian,
dokumentasi dan prosedur rilis yang memastikan bahwa uji yang dilakukan relevan
untuk keselamatan pengguna klinis (IAEA, 2019). Pengendalian kualitas pada
radiofarmaka untuk radiosinovektomi dibagi menjadi 3 bagian, yaitu (IAEA, 2006;
IAEA, 2019):
1. Pengendalian Kualitas pada Partikel
Densitas pada partikel yang digunakan dalam radiosinovektomi harus
memiliki densitas 0,7-2 gm/mL. Partikel yang digunakan harus berbentuk suspensi
yang tidak mudah mengendap. Analisis saringan adalah metode tertua yang paling
terkenal digunakan untuk mengkarakterisasi distribusi ukuran partikel.
21
2. Pengendalian Kualitas pada Radionuklida
Pengendalian kualitas pada radionuklida dibagi menjadi dua, yaitu kemurnian
radionuklida dan kemurnian radiokimia. Kemurnian radionuklida adalah rasio
(dalam bentuk persentase) radioaktivitas dari radionuklida dengan total
radioaktivitas sumber. Kemurnian radionuklida menunjukkan bahwa radionuklida
yang digunakan bebas dari kontaminan. Kemurnian radionuklida merupakan
parameter pengendalian kualitas yang penting dan pengotor radionuklida harus
berada dalam batas yang ditentukan.
Kemurnian radiokimia adalah perbandingan dari total aktivitas radionuklida
yang berikatan kimia. Kemurnian radiokimia merupakan salah satu faktor penting
dalam memformulasikan sediaan radiofarmaka. Uji kemurnian radiokimia
dilakukan untuk memastikan bahwa sediaan radiofarmaka sudah tercapai dengan
baik pada produk akhir, karena apabila kemurnian radiokimia tidak tercapai maka
akan menyebabkan biodistribusi yang tidak diinginkan (IAEA, 2006). Kemurnian
radiokimia untuk sediaan radiosinovektomi harus memberikan nilai kemurnian
radiokimia > 95% (IAEA, 2006; USP, 2007; Rustendi et al., 2010).
3. Pengendalian Kualitas pada Partikel Radiolabel
Radiolabel adalah senyawa apa pun yang bergabung dengan zat radioaktif.
Pengendalian kualitas pada partikel radiofarmaka harus dilakukan karena
perbedaan ukuran pada setiap formulasi. Ukuran partikel radiofarmaka tidak bisa
dikontrol selama pembentukan (Srivastava, 2004). Syarat partikel untuk
radiosinovektomi antara lain tidak toksik bagi tubuh, bersifat innert, tidak
menimbulkan respon peradangan, non-imunogenik, memiliki densitas yang sama
22
dengan darah, stabil secara kimiawi dan mudah disterilkan. Ukuran partikel yang
tepat untuk menghindari kebocoran dari ruang sendi adalah 2-10 µm.
2.6 Metode Analisis Presisi
Validasi metode adalah evaluasi dan pengujian pada suatu metode untuk
memastikan dan mengkonfirmasi bahwa metode tersebut mampu menghasilkan
data yang valid dan sesuai dengan tujuan. Validasi diperuntukkan pada metode
yang baru dibuat dan dikembangkan. Alasan validasi metode harus dilakukan yaitu
validasi metode merupakan bagian penting dari kontrol kualitas, validasi
memberikan jaminan bahwa pengukuran dapat diandalkan dan dalam beberapa
bidang validasi metode adalah persyaratan peraturan. Tujuan validasi adalah
menerima sampel individu sebagai anggota dari populasi yang diteliti, sebagai
pengakuan sampel pada proses pengukuran, meminimalkan pertanyaan tentang
keaslian sampel dan memberikan kesempatan untuk resampling bila dibutuhkan
(Riyanto, 2015).
Presisi adalah ukuran kedekatan hasil analisis yang diperoleh dari
serangkaian pengukuran ulangan dari ukuran yang sama. Pengujian ini
menunjukkan kesalahan acak yang terjadi dalam sebuah metode. Presisi mengukur
derajat kesesuaian antara hasil uji individu, diukur dengan penyebaran hasil
individu dari rata-rata prosedur yang diterapkan secara berulang pada sampel yang
diambil dari campuran yang homogen. Uji presisi dapat disimpulkan sebagai
kedekatan antar hasil uji pada pengujian yang sama untuk melihat sebaran di antara
nilai yang benar (Riyanto, 2015).
Presisi diukur dengan kondisi berulang dan direproduksi. Keterulangan
adalah keseksamaan metode jika diuji berulang kali. Kondisi pengulangan berarti
23
analis yang sama juga melakukan analisis sampel yang sama, hari dan instrumen
yang sama atau bahan di laboratorium yang sama. Uji keterulangan minimal
dilakukan sebanyak 6 kali (Riyanto, 2015; Srivastava & Kumar, 2017).
Reproduksibilitas adalah keseksamaan metode jika diuji pada kondisi yang
berbeda. Reproduksibilitas merupakan setiap variasi dari kondisi ini.
Reproduksibilitas harus dilakukan dalam standarisasi prosedur, khususnya dalam
prosedur farmakopis (Riyanto, 2015; Srivastava & Kumar, 2017).
Presisi dapat dinyatakan sebagai keterulangan (repeatability), ketertiruan
(reproducibility) dan presisi antara (intermediate precision). Parameter dari presisi
tersebut adalah (Riyanto, 2015; Srivastava & Kumar, 2017):
1. Keterulangan (Repeatability)
Keterulangan adalah ketelitian yang diperoleh dari hasil pengulangan
dengan menggunakan metode, operator, peralatan, laboratorium dan dalam
interval pemeriksaan waktu yang singkat. Tujuan dari pemeriksaan ini
adalah untuk mengetahui konsistensi analit, tingkat kesulitan metode dan
kesesuaian metode.
2. Ketertiruan (Reproducibility)
Ketertiruan adalah ketelitian yang dihitung dari hasil penetapan ulangan
dengan menggunakan metode yang sama, namun dilakukan oleh analis,
peralatan, laboratorium dan waktu yang berbeda.
3. Presisi Antara (Intermediate Precision)
Presisi antara adalah bagian dari presisi yang dilakukan dengan cara
mengulang pemeriksaan terhadap contoh uji dengan alat, waktu, analis yang
berbeda, namun dalam laboratorium yang sama. Presisi antara bergantung
24
pada kondisi pada prosedur yang digunakan untuk menetapkan efek
peristiwa acak. Hal tersebut dilakukan untuk mempelajari efek tersebut pada
ketelitian prosedur.
Presisi diukur sebagai koefisien variasi atau standar deviasi dari hasil analisis
yang diperoleh. Presisi diukur pada konsentrasi yang berbeda dalam rentang kerja,
biasanya di bawah, pertengahan dan bagian atas. Keterimaan presisi pada
konsentrasi yang lebih rendah adalah 2%. Faktor yang mempengaruhi presisi adalah
kesalahan acak (random error), seperti ketidakstabilan instrumen, variasi suhu atau
pereaksi, keragaman teknik dan operator yang berbeda (Riyanto, 2015).
Presisi dari metode uji ditentukan dengan rumus:
RSD = 𝑆𝐷
𝑥 x 100% ............................. (1)
Keterangan
SD : Standar Deviasi
x : Nilai Rata-rata
RSD : Relatif Standar Deviation
dengan nilai ketelitian metode/prosedur:
Nilai Ketelitian = 100% - % RSD ............................. (2)
dengan SD ditentukan dengan rumus:
SD = √
( 𝛴 (𝑥𝑖−𝑥𝑜)2
𝑛−1
............................. (3)
Keterangan
SD : Standar Deviasi
xi : Nilai pengujian
xo : Nilai rata-rata pengujian
n : Jumlah data
dengan nilai rata-rata ditentukan dengan rumus:
25
𝑥 = ∑ 𝑥𝑖
𝑛
𝑖=1
............................. (4)
𝑛
Keterangan:
xi : Nilai pengujian
n : Jumlah data
2.7 Karakterisasi 32P-Cr Koloid
2.7.1 Analisis Distribusi Ukuran Partikel
Analisis distribusi ukuran partikel dilakukan menggunakan mikroskop dan
countess. Mikroskop ditemukan oleh Zacharias Jansen pada tahun 1590. Antonie
van Leuwenhoek membuat mikroskop dengan satu lensa yang dapat memperbesar
objek yang diamati sampai 300 kali. Mikroskop berasal dari kata ‘mikro’ yang
berarti kecil dan ‘scopium’ yang berarti penglihatan (Suparti, 2010).
Bagian mikroskop dapat dikelompokkan menjadi 3 bagian, yaitu (Suparti,
2010):
1. Bagian Optik
Bagian optik berkaitan dengan lensa yang memperbesar bayangan. Ada dua
macam lensa yaitu lesan okuler dan lensa objektif. Lensa okuler adalah
lensa yang dekat dengan pengamat dan lensa objektif adalah lensa yang
dekat dengan benda/objek yang diamati.
2. Bagian Penerangan
Preparat atau sediaan dapat diamati dengan jelas dengan pencahayaan ang
cukup. Mikroskop dilengkapi dengan cermin untuk menangkap dan
memantulkan cahaya yang masuk. Cermin yang digunakan memiliki 2 sisi,
yaitu sisi datar dan cekung. Permukaan yang datar digunakan jika sumber
26
cahaya cukup terang dan permukaan yang cekung digunakan bila cahaya
kurang terang. Bagian diafragma yang berfungsi mengatur banyaknya
cahaya yang masuk. Semakin kecil diafragma, maka semakin kecil pula
cahaya yang masuk, begitu pula sebaliknya.
3. Bagian Mekanis
Bagian mekanis berguna untuk menggerakkan dan memudahkan
penggunaan mikroskop terdiri dari landasar/dasar/kaki mikroskop,
pegangan mikroskop dan pengatur fokus.
Jenis mikroskop yang digunakan dalam penelitian ini adalah mikroskop
digital, yaitu mikroskop yang dapat tersambung langsung dengan perangkat
komputer. Mikroskop digital menggunakan lensa optik dan CCD. Kamera CCD
merupakan media untuk merekam data mikroskop, pemrosesan dan penyimpanan
gambar (Faruqi & Subramaniam, 2000).
Metode Coulter digunakan untuk mengukur dan menghitung partikel
didasarkan pada perubahan terukur pada hantaran listrik yang dihasilkan oleh
partikel non-konduktif dalam elektrolit. Prinsip alat Coulter Counter adalah partikel
yang tersuspensi dalam larutan elektrolit melewati celah elektroda sebagai tempat
arus listrik mengalir. Di zona penginderaan (sensing zone) setiap partikel
mengindikasikan ukurannya (volume) dalam larutan elektrolit. Ukuran partikel
diukur sebagai pulsa tegangan, tinggi setiap pulsa tegangan sebanding dengan
ukuran partikel. Setiap pulsa tegangan dihitung dan diukur untuk mendapatkan data
distribusi ukuran partikel (IAEA, 2019). Hasil Coulter Counter akurat dalam ± 10%
dari ukuran partikel. Nilai yang diberikan adalah kombinasi rentang instrumen dan
rentang partikel.
27
2.7.2 Analisis Kemurnian Radiokimia
Analisis kemurnian radiokimia merupakan salah satu analisis yang penting
dalam produksi sediaan radiofarmaka. Kemurnian radiokimia untuk sediaan
radiosinovektomi harus memberikan nilai kemurnian radiokimia > 95% (IAEA,
2006; USP, 2007; Rustendi et al., 2010). Kemurnian radiokimia dalam penelitian
ini dianalisis dengan menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT). Kromatografi
lapis tipis pertama kali dikembangkan oleh Izmailov dan Shraiber, dengan teknik
sederhana yang hanya membutuhkan sampel dan sorben yang sedikit yaitu
memisahkan ekstrak tanaman menggunakan alumunium oksida yang disebar pada
lapisan kaca. Sorben diletakkan pada objek glass mikroskop sebagai lapisan padat
yang berair dengan tebal sekitar 2 mm. Sampel di teteskan ke dalam lapisan,
kemudian pelarut (metanol) diteteskan sedikit demi sedikit dari atas. Lapisan sorben
yang diperoleh berbentuk serangkaian cincin melingkar yang berbeda warna.
Percobaan sederhana tersebut menciptakan teknik baru KLT yang juga disebut drop
kromatografi. Peralatan yang dibutuhkan pada KLT yaitu bejana tertutup (chamber)
yang berisi pelarut dan lempeng KLT (Wulandari, 2011).
Plat KLT dikeringkan dan diidentifikasi kemurnian radiokimianya
menggunakan alat autoradiografi. Autoradiografi merupakan alat yang digunakan
untuk mendeteksi radioaktif dengan menggunakan film fotografis X-ray.
Autoradiografi digunakan untuk mendeteksi bahan yang memiliki sifat radioaktif
(Khan, 2017). Prinsip kerja autoradiografi dapat dilihat pada Gambar 3.
28
Gambar 3. Prosedur Autoradiografi (Bio Rad)
1. Emulsi film dibersihkan dari sisa residu.
2. Sampel dipaparkan ke emulsi film
3. Proses scanning
4. Proses analisis dan output hasil pengukuran.
Pengukuran pada autoradiografi digunakan untuk mengetahui distribusi
posisi sumber radiasi dalam materi yang dibuat dengan meletakkan materi tersebut
dekat pada sistem perekam gambar (film), misal untuk mengetahui lokasi
radioisotop atau perunut radioaktif dalam sampel logam atau sampel biologi
(BATAN).
Plat KLT yang memiliki radioaktivitas dipaparkan ke film yang menangkap
dan menyimpan aktivitas sampel (Perkin Elmer). Radiasi dari radioisotop pada film
yang mengandung perak halogen (AgX) menyebabkan ionisasi pada atom dan
molekul yang membentuk elektron bebas, ion positif, dan spesi tereksitasi. Proses
ini akan mereduksi ion perak menjadi partikel hitam yang mudah dideteksi. Sifat
radiasi berbeda dengan sinar tampak dan tidak bisa dilihat dengan mata telanjang,
oleh karena itu kekuatan radiasi pada obyek yang tidak dapat diketahui dengan
teknik pemotretan dapat diketahui dengan cara mengukur efek ionisasi atau sinar
fluoresensi (BATAN). Fluoresensi meningkatkan sensivitas autoradiografi yang
29
mengubah emisi radioaktif menjadi cahaya yang menembus film sehingga mudah
dideteksi (Khan, 2017).
Proses pemotretan pada autoradiografi dilakukan dalam ruangan gelap yang
kedap cahaya. Penanganan film dilakukan tanpa mengotori atau melipatnya agar
hasil tidak cacat. Film dilapisi dengan bahan membran seperti kertas hitam untuk
menghindari sinar fluorosensi. Waktu pemaparan obyek harus disesuaikan dengan
tujuan pemotretan, kemudian dibiarkan sejenak dalam ruang gelap sampai
diperoleh hasil berupa gambar. Rentang waktu pemaparan ditentukan oleh jenis dan
besarnya energi radiasi, jenis dan tebal bahan percobaan, sensitivitas emulsi film,
kondisi pencucian, serta jarak antara sumber radiasi dengan emulsi.
Film dipindai oleh laser dan gambar laten dideteksi dan dibuat gambar
beresolusi tinggi. Analisis autoradiogram menggunakan analisis gambar software
OptiQuantTM (Perkin Elmer; Johnström et al., 2012). Data diidentifikasi dengan
digambar region-of-interest (ROI). Alat menggambar pada software dapat
berbentuk persegi panjang, elips, atau gambar berbentuk tidak teratur untuk
mengukur radioaktivitas secara keseluruhan atau dalam diskrit struktur bagian
jaringan. Data akan dinyatakan sebagai Digital Line Unit (DLU) atau DLU/mm2.
Hasil foto autoradiografi diamati dan dievaluasi dengan cara sebagai berikut
(BATAN):
1. Metode penentuan derajat kehitaman secara makroskopik menggunakan
pengukur kehitaman (makro-autoradiografi).
2. Metode penentuan derajat kehitaman secara mikroskopik menggunakan
mikroskop (mikro-autoradiografi).
3. Metode penentuan jejak dengan menggunakan mikroskop (autoradiografi-
jejak).
30
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret sampai September 2019 di Pusat
Teknologi Radioisotop dan Radiofarmaka (PTRR), Gedung 11 – BATAN, kawasan
PUSPIPTEK, Setu, Tangerang Selatan.
3.2 Alat dan Bahan
3.2.1 Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah neraca analitik denver
precision balance TP-4101, alat pemanas yellow line MAG HS 10/Vision VS-
130SH-E/ IKA® C-MAG HS10/Scilogex MS-H280-Pro, autoradiografi
Cyclone®Plus Imaging System Storage Phosphor System Autoradiography,
countess Invitrogen, mikroskop INVERSO TC100, pengaduk magnetic, pipet
mikro (Thermo & Eppendorf) berbagai ukuran, termometer dan peralatan gelas.
3.2.2 Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain asam fosfat (H3PO4)
merck non-radioaktif dan radioaktif fosfor-32 dalam H332PO4 (PTRR), asam kromat
(H2CrO4) sigma aldrich, natrium sulfit (Na2SO3) sigma aldrich, gelatin 2% merck,
aqua bidest steril IPHA, larutan KH2PO4 merck, kertas indikator pH merck, strip
PEI-Cellulose merck.
31
3.3 Diagram Alir Penelitian
1,75 mL H3PO4 1% +
3 mL H2CrO4
1,25 mL H3PO4 1% + 0,5 mL
H332PO4 1% + 3 mL H2CrO4
+ 3,25 mL H2O
+ Na2SO3 20% sampai
pH 5
+ 0,5 mL Gelatin 2%
Formulasi dilakukan dengan kecepatan
pengadukan 750 rpm dan suhu 80°C
Uji Karakterisasi Distribusi Ukuran
Partikel (CoulterTM Counter dan
Mikroskop) pada F1-F16
Uji Kemurnian Radiokimia (KLT dan
Autoradiografi) pada F1-F3 dan F9-F11
Pengendalian Kualitas Kemurnian
Radionuklida dan Kemurnian Radiokimia
(F1-F3)
Analisis Presisi
(Parameter
Keterulangan dan
Presisi Antara)
pada Hasil
Pengukuran
Distribusi Ukuran
Partikel pada F1-
F16
Formulasi 32P-Cr Koloid Non- Radioaktif Formulasi 32P-Cr Koloid Radioaktif
Analisis Presisi (Parameter Keterulangan
dan Presisi Antara)
pada Hasil Pengukuran Kemurnian
Radiokimia pada F1-F3 dan F9-F11
Pengulangan Formulasi (F1-F3 dan F9-F11
kondiri radioaktif; F4-F8 dan F12-F16
kondisi non-radioaktif)
Pengendalian
Kualitas Distribusi
Ukuran Partikel
(F1-F3)
Gambar 4. Diagram Alir Penelitian
32
3.4 Prosedur Penelitian
3.4.1 Formulasi 32P-Cr Koloid (Sukma, 2018)
Sintesis 32P-Cr koloid dalam kondisi non-radioaktif menggunakan 1,75 mL
larutan H3PO4 1%, sedangkan dalam kondisi radioaktif menggunakan 1,25 mL
H3PO4 1% dan 0,5 mL H332PO4 sebagai sumber radioisotop pemancar beta.
Sebanyak 3 mL larutan H2CrO4 1% (1 gram CrO3 dalam 100 mL air) sebagai
sumber senyawa ligan (Cr) dicampurkan ke dalam labu bulat pada penangas air.
Sebanyak 3,25 mL air ditambahkan dan ditunggu 2-3 menit hingga panas campuran
stabil. Reagen Na2SO3 ditambahkan dengan konsentrasi 20% dan pH diatur hingga
5, lalu ditambahkan 0,5 mL larutan gelatin 2%. Campuran yang terbentuk
dipanaskan selama 20 menit dengan kecepatan pengadukan sebesar 750 rpm dan
suhu 80C setelah itu campuran didiamkan pada suhu kamar.
3.4.2 Karakterisasi Material
Karakterisasi Distribusi Ukuran Partikel (Prabhakar et al., 2001 ; Sukma,
2018)
Setelah pendinginan pada suhu kamar, sediaan 32P-Cr koloid diuji distribusi
ukuran partikelnya dengan menggunakan mikroskop dan CoulterTM Counter
dengan melihat ukuran yang terbentuk harus sesuai dengan syarat kriteria obat.
Penggunaan mikroskop pada penelitian ini untuk pengukuran distribusi ukuran
partikel secara kualitatif, sedangkan CoulterTM Counter untuk pengukuran partikel
secara kuantitatif untuk melihat rentang penyebaran ukuran partikel yang terbentuk.
Syarat distribusi ukuran partikel pada sediaan radiofarmaka untuk
radiosinovektomi adalah 2-10 m (IAEA, 2001; Schneider et al., 2005). Sediaan
yang dianalisis berada dalam kondisi non-radioaktif dan radioaktif.
33
Karakterisasi Kemurnian Radiokimia (Rustendi et al., 2010; Sukma, 2018)
Setiap formulasi dari berbagai uji validasi diuji kemurniannya menggunakan
metode kromatografi lapis tipis (KLT) dengan fasa diam PEI-cellulose dan fasa
gerak larutan KH2PO4 0,5M pH 3,5. Uji kemurnian dilakukan dengan menotolkan
0,1 L koloid pada bagian bawah (2 cm dari batas bawah) strip kertas PEI-cellulose.
Strip PEI-cellulose dielusi dengan fasa gerak KH2PO4 hingga batas atas (2 cm dari
batas atas kertas). Kertas PEI-cellulose kemudian dikeringkan dan diidentifikasi
keradioaktifannya dengan autoradiografi untuk menentukan persentase kemurnian
radiokimianya.
Plat KLT yang diidentifikasi pada autoradiografi memiliki 2 titik dengan
radioaktivitas masing-masing. Perhitungan persentase kemurnian radiokimia
berdasarkan rumus (IAEA, 2019):
Kemurnian Radiokimia A (%) = ( A
) x 100 ............................. (5) A + B
Keterangan:
A = Radioaktivitas di titik A
B = Radioaktivitas di titik B
3.4.3 Pengulangan Formulasi dan Validasi Prosedur 32P-Cr Koloid
Prosedur Pengendalian Kualitas (Quality Control) (Mathews et al., 2019)
32P-Cr koloid dalam kondisi radioaktif diformulasi kembali sebanyak 3 kali
untuk pengendalian kualitas (quality control). Prosedur pengendalian kualitas
dilakukan berdasarkan persyaratan 32P-Cr koloid untuk radiosinovektomi yang
tercantum pada United States Pharmacopeia (USP) National Formulary (NF)
(USP30-NF25) (2007), IAEA Technical Report Series (2019) dan Pars Isotope
(Iran). Pengendalian kualitas yang dilakukan dalam penelitian ini meliputi
kemurnian radionuklida dan kemurnian radiokimia yang diidentifikasi
34
menggunakan autoradiografi, nilai pH sediaan diidentifikasi menggunakan kertas
pH, dan distribusi ukuran partikel yang diidentifikasi menggunakan mikroskop dan
CoulterTM Counter.
Presisi (Widayati et al., 2017)
Presisi adalah ukuran kedekatan hasil analisis yang diperoleh dari
serangkaian pengukuran ulangan dari ukuran yang sama. Penentuan presisi untuk
parameter keterulangan dan presisi antara dilakukan minimal 6 kali pengulangan
formulasi 32P-Cr koloid yang telah dikarakterisasi distribusi ukuran partikel dan
kemurnian radiokimianya kemudian dihitung RSD dengan rumus sebagai berikut:
RSD (%) = 𝑆𝐷
𝑥 x 100% ............................. (1)
Keterangan
SD : Standar Deviasi
x : Nilai Rata-rata
RSD : Relatif Standar Deviation
Penentuan presisi parameter keterulangan dilakukan dengan 8 kali
pengulangan prosedur formulasi 32P-Cr koloid yang dilakukan oleh 1 analis di
laboratorium Radiofarmaka untuk kondisi non-radioaktif pada tanggal 24 Juli 2019
dan laboratorium Radioisotop untuk kondisi radioaktif pada tanggal 11 April 2019.
Penentuan presisi parameter presisi antara dilakukan dengan 8 kali pengulangan
dalam laboratorium Radiofarmaka (non-radioaktif) dan Radioisotop (radioaktif)
yang dilakukan dalam rentang waktu Maret sampai Juli 2019 oleh 3 analis berbeda
dengan 4 alat hotplate berbeda.
Nilai RSD yang memenuhi nilai keberterimaan pada penentuan presisi
ditentukan dari (Harmita, 2004; Riyanto 2015; Apostol et al., 2012):
35
Presisi Parameter Keterulangan = % RSD < (% RSD Horwitz x 0,67) ......(6)
Presisi Parameter Presisi Antara = % RSD < % RSD Horwitz ......(7)
RSD Horwitz ditentukan berdasarkan rumus:
% RSD Horwitz = 21-(0,5 x log C) ...... (8)
dimana C adalah konsentrasi analit
Hasil formulasi didapatkan sampel untuk divalidasi. Formulasi sediaan 32P-
Cr koloid dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Formulasi 32P-Cr Koloid
Sampel Validasi
Formulasi Optimum -
F1 Quality Control dan
Presisi Antara F2
F3
F4
Presisi Keterulangan
F5
F6
F7
F8
F9
F10
F11
F12
Presisi Antara
F13
F14
F15
F16
36
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Formulasi Optimum 32P-Cr Koloid
Formulasi sediaan 32P-Cr koloid dilakukan dengan metode reduksi sesuai
dengan penelitian Sukma (2018) dalam kondisi radioaktif. Bahan baku berupa
H3PO4 1% sebanyak 1,25 mL (non-radioaktif) dan 0,5 mL H332PO4 sebagai sumber
radioisotop pemancar beta dan 3 mL larutan H2CrO4 (1 gram CrO3 dalam 100 mL
air) sebagai sumber senyawa ligan (Cr) dicampurkan ke dalam labu bulat pada
penangas air dengan suhu 80C dan kecepatan pengadukan 750 rpm.
Sebanyak 3,25 mL air ditambahkan dan ditunggu 2-3 menit hingga panas
campuran stabil. Warna larutan pada proses ini adalah kuning cerah, nilai pH 1,5
dan belum terbentuk koloid. Reagen Na2SO3 20% ditambahkan ke dalam formulasi
hingga pH larutan mencapai 5. Warna larutan pada proses ini berubah dari kuning
cerah menjadi hijau dan terbentuk partikel koloid. Setelah pH mencapai 5, lalu
ditambahkan 0,5 mL larutan gelatin 2% yang berfungsi untuk mempertahankan
bentuk koloid dalam sediaan (Turco & Pietra, 1963). Campuran yang terbentuk lalu
dipanaskan selama 20 menit setelah itu didinginkan dalam suhu ruang. Reaksi yang
terjadi pada proses formulasi 32P-Cr koloid adalah (Turco & Pietra, 1963, Morales
et al., 2015):
2H2CrO4 (aq) + 2H3PO4 (aq) + 3Na2SO3 (aq) 2CrPO4 (aq) + 3Na2SO4 (aq) + 5H2O (l)
Sediaan 32P-Cr koloid dihasilkan dari reaksi redoks, dimana Na2SO3 sebagai
reduktor (mengalami oksidasi dari S4+ menjadi S6+) dan H2CrO4 sebagai oksidator
(mengalami reduksi dari Cr6+ menjadi Cr3+) (Turco & Pietra, 1963). Reduksi ion Cr
37
bertuuan untuk membuat ikatan P-Cr yang stabil dan aman karena ion Cr3+ adalah
kromium yang tidak toksik dan aman bagi tubuh.
Proses awal formulasi dimana larutan masih berwarna kuning dengan pH 1,5
dan belum terbentuk koloid mengindikasi bahwa krom (Cr) masih dalam bentuk
Cr6+ yang sewarna dengan bahan baku H2CrO4. Peningkatan pH oleh Na2SO3
disertai dengan perubahan warna larutan menjadi hijau dan terbentuk koloid
mengindikasi bahwa Cr telah tereduksi oleh Na2SO3 menjadi Cr3+ dan berikatan
dengan PO43- (Pan et al., 2014; Morales et al., 2015). Perubahan warna sediaan 32P-
Cr koloid pada saat formulasi dapat dilihat pada Gambar 5.
(a) Proses formulasi sebelum
ditambahkan Na2SO3 20%
(b) Proses formulasi sesudah
ditambahkan Na2SO3 20%
Gambar 5. Perubahan Warna Larutan pada Proses Formulasi 32P-Cr Koloid
Produk samping dari hasil reaksi adalah terbentuknya Na2SO4 dengan
konsentrasi yang kecil karena Na2SO3 yang digunakan hanya sedikit sekali (± 300
µL). MSDS mengklasifikasikan Na2SO4 sebagai bahan tidak berbahaya. Percobaan
dengan kelinci, Na2SO4 menyebabkan iritasi ringan pada mata, tidak mengiritasi
kulit dan toksisitas pada tubuh tidak diidentifikasi.
38
Karakteristik Distribusi Ukuran Partikel
Sediaan 32P-Cr koloid dari hasil formulasi dikarakterisasi distribusi ukuran
partikelnya menggunakan CoulterTM Counter. Hasil pengukuran distribusi ukuran
partikel formulasi optimum 32P-Cr koloid menggunakan CoulterTM Counter dapat
dilihat pada Tabel 3. Total konsentrasi partikel (/mL) menunjukkan banyaknya
konsentrasi partikel pada setiap mL, rata-rata ukuran partikel adalah rata-rata
ukuran partikel sampel dalam rentang ukuran partikelnya (m) dan total partikel
terhitung menunjukkan ± 10% banyaknya partikel yang terhitung pada alat.
Tabel 3. Hasil Pengukuran Distribusi Partikel Formulasi Optimum 32P-Cr Koloid
Sampel Rata-rata Ukuran
Partikel (m)
Distribusi Ukuran
Partikel (%)*
Formulasi Optimum 3,5 100
Sukma (2018) 3,6 100
*Distribusi Ukuran Partikel berada pada Rentang 2-10 m
Hasil tersebut menunjukkan bahwa pada formulasi 32P-Cr koloid dalam
penelitian ini memiliki dan rata-rata ukuran partikel sebesar 3,5 m dengan
distribusi ukuran partikel 100% berada pada rentang 2-10 µm. Penelitian Sukma
(2018) memiliki rata-rata ukuran partikel sebesar 3,6 m dengan distribusi ukuran
partikel 100% pada rentang 2-10 µm. Formulasi pada penelitian ini dan penelitian
Sukma (2018), keduanya memiliki distribusi ukuran partikel yang sama, yaitu
berada pada rentang 2-10 m. Rata-rata ukuran partikel formulasi optimum dan
literatur (Jacobs, 1985) berturut-turut sebesar 3,5 dan 4 m. Hasil tersebut dapat
berbeda karena ukuran partikel radiofarmaka tidak bisa dikontrol selama
pembentukan (Srivastava, 2004). Formulasi 32P-Cr koloid telah memenuhi syarat
39
distribusi ukuran partikel radiofarmaka untuk radiosinovektomi yaitu memiliki
ukuran 2-10 µm (IAEA, 2001; Schneider et al., 2005).
Karasteristik Kemurnian Radiokimia
Karakteristik yang diuji selanjutnya adalah kemurnian radiokimia dengan
metode kromatografi lapis tipis (KLT). Sediaan 32P-Cr koloid dan larutan 32P
(sebagai kontrol) ditotolkan pada fase diam PEI Cellulose sebanyak 0,1 L pada
jarak 2 cm dari batas bawah kertas. Kemudian dielusikan menggunakan fase gerak
KH2PO4 0,5M pH 3,5 hingga 2 cm dari batas atas kertas. Strip PEI Cellulose
kemudian dikeringkan dan keradioaktifannya diuji menggunakan autoradiografi
lalu dibuktikan hasil persen kemurnian dengan radiokromatogram. Plat KLT yang
diidentifikasi dengan autoradiografi dapat dilihat pada Gambar 6.
(a) (b)
(a) Plat KLT 32P-Cr Koloid
(b) Plat KLT Standar 32P
Gambar 6. Plat KLT pada Karakteristik Kemurnian Radiokimia
Rf = Jarak yang ditempuh substansi
Jarak yang ditempuh pelarut
Rf a.1 = 0,66
= 0,04 15,68
Rf a.2 =
13,16 = 0,8
15,68
Titik Penotolan Rf a.1
Rf a.2
Titik Penotolan
Rf b.1
0,6
6 c
m
13,1
6 c
m 15,6
8 c
m
11,5
4 c
m 15,0
3 c
m
40
Rf b.1 = 11,54
= 0,8 15,03
Plat KLT yang sudah dikeringkan dipaparkan ke emulsi film kemudian
diidentifikasi menggunakan autoradiografi. Radiasi dari radioisotop 32P
menyebabkan ionisasi pada emulsi film yang mengandung perak halogen (AgX)
yang mereduksi ion perak menjadi partikel hitam yang mudah dideteksi. Plat KLT
32P-Cr koloid (a) memiliki 2 noda hitam pada 2 titik yang berbeda. Hal tersebut
menunjukkan adanya 2 nilai Rf. Titik 1 sediaan 32P-Cr koloid memiliki nilai Rf a.1
= 0,04 yang dianggap sama dengan 0 (nol) yang juga ditunjukkan pada noda hitam
berada pada titik penotolan sediaan di fase diam. Titik 2 sediaan 32P-Cr koloid
memiliki nilai Rf a.2 = 0,8. Plat KLT larutan standar 32P (b) memiliki 1 noda hitam
yang menunjukkan waktu retensi pada Rf b.1 = 0,8.
Nilai Rf a.1 = 0 menandakan bahwa sediaan 32P-Cr koloid telah terbentuk
karena 32P telah berikatan dengan kompleks kromat. Nilai Rf a.2 = 0,8 menandakan
adanya radioisotop pengotor pada hasil formulasi. Radioisotop pengotor tersebut
adalah 32P-bebas yang diidentifikasi dari nilai Rf a.2 sama dengan nilai Rf b.1 yaitu
standar 32P. Hal tersebut sesuai dengan hasil percobaan Turco & Pietra (1963)
bahwa Rf dari 32P berada pada rentang 0,6 - 0,8 dalam bentuk senyawa ortofosfat
(PO43-) dan koloid 32P-Cr koloid yang terbentuk memiliki nilai Rf = 0.
Kromatogram kemurnian hasil formulasi optimum 32P-Cr koloid dapat dilihat
berdasarkan Gambar 7 dan 8. Jarak migrasi (sumbu x) mewakili panjang garis fase
gerak (KH2PO4) yang mengalami gaya tarik kohesi dengan fase diam (PEI
Cellulose). Aktivitas (sumbu y) mewakili banyaknya cacahan sinyal radioaktif per
detik. Autoradiografi mengidentifikasi aktivitas dengan satuan Digital Line Unit
41
(DLU). Besarnya aktivitas yang dihasilkan dapat menentukan tinggi atau tidak
kemurnian dari senyawa atau sediaan yang diidentifikasi.
Gambar 7. Radiokromatogram Hasil Analisis Kemurnian Radiokimia 32P-Cr
Koloid dengan metode KLT menggunakan Autoradiografi
Kromatogram sediaan 32P-Cr koloid dapat dilihat pada Gambar 7, memiliki 2
puncak yang berbeda. Puncak pertama berada pada jarak 0,66 cm (sesuai dengan
jarak Rf a.1) dan puncak kedua pada jarak 13,16 cm (Rf a.2). Hal tersebut
menunjukkan bahwa sediaan 32P-Cr koloid (Rf a.1) memiliki radioaktivitas yang
tinggi sebesar 15.961.733,55 DLU tetapi masih diidentifikasi adanya pengotor yaitu
32P-bebas (Rf a.2) dengan radioaktivitas sebesar 734.728,30 DLU yang relatif kecil
jika dibandingkan dengan radioaktivitas kompleks 32P-Cr koloid.
Gambar 8. Radiokromatogram Hasil Analisis Kemurnian Radiokimia 32P dengan
metode KLT menggunakan Autoradiografi
0.66; 15,961,733.55
13.16;
734,728.30
0
2,000,000
4,000,000
6,000,000
8,000,000
10,000,000
12,000,000
14,000,000
16,000,000
18,000,000
-5 0 5 10 15 20
Akti
vit
as (
DL
U)
Migrasi (cm)
0.47, 134,875.60
11.54, 245,775,397.35
0
50,000,000
100,000,000
150,000,000
200,000,000
250,000,000
300,000,000
-5 0 5 10 15 20
Akti
vit
as (
DL
U)
Migrasi (cm)
42
Kromatogram standar 32P dapat dilihat pada Gambar 8 yang hanya
memiliki 1 puncak yang berada pada jarak 11,54 cm (sesuai dengan Rf b.1). Hal
tersebut menunjukkan bahwa standar 32P (Rf b.1) memiliki radioaktivitas yang
tinggi sebesar 245.775.397,3 DLU. Alat autoradiografi mendeteksi adanya
radioaktivitas lain di plat KLT standar 32P yaitu pada jarak 0,47 cm dengan
radioaktivitas sebesar 134.875,60 DLU. Radioaktivitas ini terlalu kecil yang
dibuktikan dengan tidak adanya noda hitam pada plat KLT standar 32P pada jarak
0,47 cm (Gambar 6 (b)).
Hasil deteksi radioaktivitas menggunakan autoradiografi berdasarkan
Gambar 7 dan 8 dihitung untuk mendapatkan nilai kemurnian (%) sediaan 32P-
Cr koloid dan standar 32P dengan hasil pada Tabel 4. Perhitungan kemurnian
radionuklida dan radiokimia dapat dilihat pada Lampiran 2 dan 3.
Tabel 4. Persentase Kemurnian Radiokimia Formulasi Optimum
Sampel Kemurnian Radiokimia (%) 32P 32P-Cr Koloid
Formulasi Optimum 99,95 95,60
Sukma (2018) 99,56 97,85
Hasil analisis kemurnian radiokimia menggunakan autoradiografi, formulasi
optimum 32P-Cr koloid menunjukkan hasil kemurnian radiokimia sebesar 95,60%
dengan kemurnian 32P sebesar 99,95%. Hasil kemurnian radiokimia 32P-Cr koloid
sesuai dengan syarat kemurnian radiokimia untuk radiosinovektomi yaitu > 95%
(IAEA, 2006; USP, 2007; Rustendi et al., 2010). Hasil kemurnian radionuklida 32P
sesuai dengan syarat kemurnian radionuklida yaitu > 99% (Pars Isotope). Hasil
kemurnian radiokimia dan radiokimia memenuhi syarat untuk radiosinovektomi,
maka hasil formulasi 32P-Cr koloid dikatakan murni.
43
Kemurnian radiokimia sediaan 32P-Cr koloid lebih rendah dibandingkan
dengan penelitian Sukma (2018) dikarenakan adanya pengotor 32P-bebas.
Penambahan Na2SO3 pada saat formulasi harus dilakukan dengan hati-hati dan teliti
karena dapat memengaruhi hasil sediaan. Na2SO3 berfungsi sebagai reduktor dalam
proses formulasi. Jumlah Na2SO3 yang tidak mencukupi akan menggangu proses
reduksi Cr6+ sehingga pembentukan ikatan antara Cr dan 32P tidak sempurna. Hal
ini dapat menyebabkan terlepasnya 32P dari ikatan Cr dan mengakibatkan menjadi
pengotor 32P-bebas sehingga persentase kemurnian radiokimia 32P-Cr koloid
semakin rendah.
4.2 Pengendalian Kualitas (Quality Control)
Pengendalian kualitas (quality control) merupakan validasi yang dilakukan
untuk memastikan kualitas dari radiofarmaka dan memperhitungkan semua aspek
persiapan yang menjamin sediaan memiliki kualitas atau syarat yang dibutuhkan
untuk radiosinovektomi. Sediaan 32P-Cr koloid diformulasikan sebanyak 3 kali
dengan radioaktivitas sebesar 1 mCi. Setiap sediaan dianalisis berdasarkan syarat
radiosinovektomi yang tercantum pada United States Pharmacopeia (USP)
National Formulary (NF) (USP30-NF25) (2007), IAEA Technical Report Series
(2019) dan Pars Isotope (Iran) dengan hasil seperti pada Tabel 5. Perhitungan
kemurnian radionuklida, radiokimia dan distribusi ukuran partikel pada
pengendalian kualitas dapat dilihat pada Lampiran 4, 5 dan 6.
44
Tabel 5. Hasil Pengendalian Kualitas (Quality Control) 32P-Cr Koloid
Analisis Spesifikasi Pengulangan
F1 F2 F3
Kemurnian
Radionuklida > 99% 99,88% 99,92% 99,84%
Kemurnian
Radiokimia ≥ 95% 97,62% 96,68% 99,25%
pH 3-5 5,5 6 5
Distribusi
Ukuran
Partikel
100%* 100%* 100%* 97,18%*
* Berada pada Rentang Ukuran 2-10 µm
Kemurnian radionuklida dan radiokimia dikarakterisasi menggunakan
metode KLT yang diidentifikasi menggunakan autoradiografi. Kemurnian
radionuklida adalah pengendalian kualitas yang wajib dilakukan untuk memastikan
pengotor pada radionuklida berada dalam batas yang ditentukan (IAEA, 2006).
Hasil pengukuran menunjukkan bahwa kemurnian radionuklida pada pengulangan
sebanyak 3 kali memenuhi syarat kemurnian radionuklida untuk radiosinovektomi
dengan nilai 99,84%-99,92%. Hasil tersebut menunjukkan bahwa radionuklida 32P
bebas dari kontaminan.
Kemurnian radiokimia menunjukkan rasio dari radioaktivitas radionuklida
(32P) yang berikatan dengan zat kimia dalam sediaan 32P-Cr koloid. Hasil
pengukuran kemurnian radiokimia pada pengulangan formulasi 32P-Cr koloid
sebanyak 3 kali memiliki nilai sebesar 96,68%-99,25%. Hasil tersebut memenuhi
syarat kemurnian radiokimia berdasarkan IAEA (2001) karena memiliki nilai ≥
95%.
Kemurnian radiokimia memiliki nilai yang berbeda dikarenakan pH pada
formulasi berbeda pula. Sampel F1 sampai F3 memiliki rentang pH 5-6. Penelitian
45
Morales et al., (2015) pada sintesis 32P-Cr koloid dengan pH 5,8 menjelaskan
bahwa ion ortofosfat dan pembentukan endapan memengaruhi proses reduksi dan
hidrolisis. Konsentrasi Cr6+ yang tinggi pada campuran sediaan membuat
terbentuknya polimer (senyawa lain). Hasil MRI menunjukkan bahwa hidrolisis
terus berlanjut pada suhu kamar dengan sisa kromium (Cr) tidak bereaksi dengan
H3PO4. Hal tersebut membuat adanya 32P-bebas sebagai pengotor pada sediaan
dengan persentase berbeda tergantung pada pH sediaan yang menyebabkan
kemurnian radiokimia setiap pengulangan formulasi berbeda. Hasil formulasi 32P-
Cr koloid dengan rentang pH 5-6 masih memiliki kemurnian radiokimia yang
memenuhi syarat radiofarmaka yaitu ≥ 95%.
Distribusi ukuran partikel pada sediaan 32P-Cr koloid dikarakterisasi
menggunakan CoulterTM Counter. Hasil pengukuran memenuhi syarat pada F1 dan
F2 karena tidak diidentifikasi adanya partikel berukuran > 10 µm. Sampel F3
diidentifikasi adanya partikel yang berukuran > 10 µm. Hal tersebut membuat
sediaan F3 diidentifikasi menggunakan mikroskop untuk melihat penyebaran
distribusi partikelnya secara kualitatif. Hasil identifikasi menggunakan mikroskop
pada F3 32P-Cr koloid dapat dilihat pada Gambar 9.
Gambar 9. Hasil Analisis Mikroskop F3
Hasil uji dengan mikroskop menunjukkan terbentuknya agregat koloid yang
menyebabkan sampel memiliki partikel berukuran > 10 µm. Turco & Pierta (1963)
Agregat Koloid
46
menyatakan bahwa 32P-Cr koloid memang memiliki kecenderungan untuk
membentuk agregat koloid. Penyebab terbentuknya partikel agregat koloid adalah
rusaknya gelatin karena suhu pada saat formulasi tidak stabil dan karena proses
pendinginan setelah formulasi. Fungsi penambahan gelatin pada formulasi adalah
sebagai pelindung bentuk koloid (Turco & Pietra, 1963). Gelatin dapat rusak
apabila dipanaskan dalam waktu lama dengan suhu di atas 40ºC dan pH ekstrem
(GMIA, 2019). Agregat koloid dapat terdispersi kembali dengan pengadukan
(Shaw, 1992).
4.3 Validasi Uji Presisi
Presisi adalah ukuran kedekatan hasil analisis dari serangkaian pengukuran
untuk menentukan kesalahan acak dalam sebuah metode (Riyanto, 2015).
Penentuan presisi dibagi menjadi 2 parameter yaitu keterulangan dan presisi antara.
Setiap parameter dilakukan dengan cara mengulang formulasi 32P-Cr koloid
sebanyak 8 kali sehingga mendapatkan 8 sampel dimana sampel-sampel tersebut
dikarakteristik distribusi ukuran partikel dan kemurnian radiokimianya (hanya
sampel dalam kondisi radioaktif). Hasil pengukuran akan dihitung nilai rata-rata,
standar deviasi (SD), relatif standard deviation (RSD) dan nilai ketelitiannya.
Keterulangan (Repeatability)
Keterulangan merupakan bagian dalam uji presisi (Srivastava & Kumar,
2017). Parameter presisi keterulangan adalah hasil dari pengulangan metode,
operator, peralatan, laboratorium dan dalam interval waktu pemeriksaan yang
singkat (Riyanto, 2015). Prosedur formulasi 32P-Cr koloid dilakukan dalam 2
kondisi yaitu non-radioaktif dan radioaktif. Nilai presisi yang memenuhi nilai
keberterimaan (% RSD < (% RSD Horwitz x 0,67)) menunjukkan bahwa prosedur
47
formulasi memiliki kestabilan yang baik dalam pengulangan. Pengukuran distribusi
ukuran partikel sediaan 32P-Cr koloid menggunakan CoulterTM Countess dan data
uji presisi parameter keterulangan dapat dilihat pada Tabel 6. Perhitungan analisis
presisi parameter keterulangan pada hasil pengukuran distribusi ukuran partikel
dapat dilihat pada Lampiran 9.
Tabel 6. Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid menggunakan
Countess dan Data Uji Presisi Parameter Keterulangan
Sampel Kondisi Distribusi Ukuran
Partikel (%)*
F4
Non-Radioaktif
100
F5 99,66
F6 99,52
F7 99,32
F8 98,97
F9
Radioaktif
98,75
F10 100
F11 100
Nilai
Rata-rata Distribusi Ukuran Partikel = 99,53
SD = 0,48
RSD (%) = 0,49
Ketelitian (%) = 99,51
RSD (%) Horwitz Presisi Keterulangan = 2,68
*Distribusi ukuran partikel dominan berada pada rentang ukuran 2-10 µm
Nilai standar deviasi (SD) dihitung berdasarkan penyebaran dominan pada
sampel F4 sampai F11 yaitu berada pada rentang ukuran 2-10 m dilihat dari
persentase distribusi ukuran partikel > 98%. Distribusi ukuran partikel sampel F4
sampai F11 memiliki nilai rata-rata sebesar 99,53%. Persentase terkecil distribusi
ukuran partikel (rentang 2-10 m) memiliki nilai 98,75% pada F9 dan persentase
terbesar memiliki nilai 100% pada F4, F10 dan F11. Nilai SD dan RSD berturut-
turut sebesar 0,48 dan 0,49%. Nilai ketelitian pada uji ini sebesar 99,51%. Hasil
48
tersebut menunjukkan bahwa prosedur formulasi yang digunakan memenuhi nilai
keberterimaan uji presisi karena % RSD < 2,68 (% RSD Horwitz Presisi
Keterulangan).
Pengulangan prosedur formulasi dalam 2 kondisi yaitu kondisi non-radioaktif
dan radioaktif memenuhi nilai keterimaan uji presisi. Hal tersebut menunjukkan
formulasi yang digunakan memiliki kestabilan dalam pengulangan prosedur
formulasi yang baik pada karakteristik distribusi ukuran partikel. Semua sampel
memiliki distribusi ukuran partikel yang dominan berada pada rentang 2-10 m
yang sesuai dengan syarat radiofarmaka untuk radiosinovektomi (IAEA, 2001;
Schneider et al., 2005; Aziz dan Suherman, 2013).
Tabel 7. Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid menggunakan
Autoradiografi dan Data Uji Presisi Parameter Keterulangan
Sampel Kemurnian Radiokimia (%)
F9 97,12
F10 97,59
F11 96,81
Nilai
Rata-rata (%) = 97,18
SD = 0,39
RSD (%) = 0,40
Ketelitian (%) = 99,60
RSD (%) Horwitz Presisi Keterulangan = 2,68
Pengukuran kemurnian radiokimia menggunakan autoradiografi sediaan 32P-
Cr koloid uji presisi parameter keterulangan dapat dilihat pada Tabel 7. Perhitungan
analisis presisi parameter keterulangan pada hasil pengukuran kemurnian
radiokimia dapat dilihat pada Lampiran 10. Kemurnian radiokimia sampel F9
sampai F11 memiliki rata-rata sebesar 97,18% dengan nilai kemurnian radiokimia
terkecil pada F11 sebesar 96,81% nilai kemurnian radiokimia terbesar pada F10
sebesar 97,59%. Nilai SD dan RSD berturut-turut sebesar 0,39 dan 0,4% dengan
49
nilai ketelitian 99,6%. Hasil % RSD < 2,68% (RSD Horwitz Presisi Keterulangan)
menunjukkan bahwa prosedur formulasi telah memenuhi nilai keterimaan uji
presisi dan memiliki kestabilan yang baik dalam pengulangan prosedur formulasi
karakteristik kemurnian radiokimia. Semua sampel dalam kondisi radioaktif (F9
sampai F11) memiliki kemurnian radiokimia yang memenuhi syarat radiofarmaka
untuk radiosinovektomi yaitu > 95% (IAEA, 2006; USP, 2007; Rustendi et al.,
2010).
Presisi Antara (Precision Intermediate)
Presisi antara merupakan bagian dari uji presisi yang dilakukan pada
laboratorium yang sama namun dilakukan dengan alat, waktu, analis yang berbeda
(Riyanto, 2015; Srivastava & Kumar, 2017). Prosedur formulasi 32P-Cr koloid
dilakukan dalam 2 kondisi yaitu non-radioaktif dan radioaktif. Nilai presisi yang
memenuhi nilai keterimaan (% RSD < 2%) menunjukkan bahwa prosedur formulasi
memiliki kestabilan yang baik pada presisi antara.
Prosedur formulasi dalam kondisi non-radioaktif dilakukan di laboratorium
Radiofarmaka (PTRR – BATAN, Tangerang Selatan), menggunakan 4 alat hotplate
merk berbeda dan 1 thermomixer, dilakukan oleh 3 analis berbeda dalam kurun
waktu dari Maret sampai Juli 2019. Prosedur formulasi dalam kondisi radioaktif
dilakukan di laboratorium Radioisotop (PTRR – BATAN, Tangerang Selatan),
menggunakan hotplate yang sama, dilakukan oleh 3 analis yang berbeda dalam
kurun waktu April sampai Juni 2019. Penggunaan alat yang berbeda pada kondisi
radioaktif tidak bisa dilakukan karena alat yang digunakan khusus untuk formulasi
kondisi radioaktif. Pengukuran distribusi ukuran partikel sediaan 32P-Cr koloid
menggunakan CoulterTM Counter dan data uji presisi parameter keterulangan dapat
50
dilihat pada Tabel 8. Perhitungan analisis presisi parameter presisi antara pada hasil
pengukuran distribusi ukuran partikel dapat dilihat pada Lampiran 11.
Tabel 8. Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid menggunakan
Countess dan Data Uji Presisi Parameter Presisi Antara
Sampel Kondisi Distribusi Ukuran
Partikel (%)*
F12
Non-Radioaktif
100
F13 100
F14 100
F15 99,63
F16 100
F1
Radioaktif
100
F2 100
F3 97,18
Nilai
Rata-rata Distribusi Ukuran Partikel = 99,60
SD = 0,99
RSD (%) = 0,99
Ketelitian (%) = 99,01
RSD (%) Horwitz Presisi Antara = 4
*Distribusi ukuran partikel dominan berada pada rentang ukuran 2-10 µm
Sampel F12-F16 dan F1-F3 memiliki distribusi atau penyebaran yang
dominan berada pada rentang ukuran 2-10 m dilihat dari persentase distribusi
ukuran partikel > 97%. Distribusi ukuran partikel sampel F1 sampai F8 memiliki
nilai rata-rata sebesar 99,60%. Persentase terkecil distribusi ukuran partikel
memiliki nilai 97,18% pada F3 dan persentase terbesar memiliki nilai 100% pada
F1-F2, F12-F14 dan F16. Nilai SD dan RSD berturut-turut sebesar 0,99 dan 0,99%.
Nilai ketelitian pada uji ini sebesar 99,01%. Hasil % RSD < 4% (RSD Horwitz
Presisi Antara) menunjukkan bahwa prosedur formulasi telah memenuhi nilai
keterimaan uji presisi. Semua sampel memiliki distribusi ukuran partikel yang
dominan berada pada rentang 2-10 m yang sesuai dengan syarat radiofarmaka
untuk radiosinovektomi (IAEA, 2001; Schneider et al., 2005; Aziz dan Suherman,
51
2013). Sampel yang memiliki ukuran partikel > 10 m dapat hilangkan dengan
melakukan dialisis setelah prosedur formulasi dilakukan (Turco & Pietra, 1963;
Anghileri & Marqués, 1967, Liepe et al., 2011).
Tabel 9. Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid
menggunakan Autoradiografi dan Data Uji Presisi Parameter
Presisi Antara
Sampel Kemurnian Radiokimia (%)
F1 97,62
F2 96,68
F3 99,25
Nilai
Rata-rata (%) = 97,85
SD = 1,30
RSD (%) = 1,33
Ketelitian (%) = 98,67
RSD (%) Horwitz Presisi Antara = 4
Pengukuran kemurnian radiokimia menggunakan autoradiografi sediaan 32P-
Cr koloid uji presisi parameter presisi antara dapat dilihat pada Tabel 9. Perhitungan
analisis presisi parameter presisi antara pada hasil pengukuran kemurnian
radiokimia dapat dilihat pada Lampiran 12. Kemurnian radiokimia sampel F14
sampai F16 memiliki nilai rata-rata sebesar 97,84% dengan nilai kemurnian
radiokimia terkecil pada F17 sebesar 96,68% nilai kemurnian radiokimia terbesar
pada F18 sebesar 99,25%. Nilai SD dan RSD berturut-turut sebesar 1,3 dan 1,33%
dengan nilai ketelitian 98,67%. Semua sampel (F14 sampai F16) memiliki
kemurnian radiokimia > 95% yang menunjukkan semua sampel memenuhi syarat
kemurnian radiokimia untuk radiosinovektomi (IAEA, 2006; USP, 2007; Rustendi
et al., 2010). Hasil % RSD < 4% (RSD Horwitz Presisi Antara) menunjukkan
bahwa prosedur formulasi telah memenuhi nilai keterimaan uji presisi dan memiliki
kestabilan yang baik dalam pengulangan prosedur formulasi karakteristik
kemurnian radiokimia.
52
BAB V
PENUTUP
5.1 Kesimpulan
1. Kesesuaian formulasi 32P-Cr koloid dengan pengendalian kualitas (quality
control) radiofarmaka untuk radiosinovektomi adalah kemurnian
radionuklida dengan nilai sebesar 99,84-99,92% (> 99%), kemurnian
radiokimia dengan nilai sebesar 96,68-99,25% (> 95%), pH dengan rentang
5-6 dan distribusi ukuran partikel 97,18-100% pada rentang ukuran 2-10 µm.
2. Analisis presisi parameter keterulangan formulasi 32P-Cr koloid pada hasil
pengukuran distribusi ukuran partikel dan kemurnian radiokimia memiliki
nilai RSD berturut-turut sebesar 0,49% dan 0,40%. Hasil tersebut memenuhi
nilai keberterimaan presisi karena nilai RSD < 2,68% (RSD Horwitz Presisi
Keterulangan). Analisis presisi parameter presisi antara pada hasil
pengukuran distribusi ukuran partikel dan kemurnian radiokimia memiliki
RSD berturut-turut sebesar 0,99% dan 1,33%. Hasil tersebut memenuhi nilai
keberterimaan presisi karena nilai RSD < 4% (RSD Horwitz Presisi Antara).
5.2 Saran
Pengukuran distribusi ukuran partikel menggunakan Particle Size Analyzer
(PSA) pada semua sampel sangat disarankan agar mengetahui indeks
polidispersitas. Peningkatan aktivitas radioisotop dan uji distribusi sediaan pada
hewan uji coba untuk menentukan dosis obat juga disarankan untuk penelitian lebih
lanjut. Dialisis sebaiknya dilakukan sebelum aplikasi radiosinovektomi untuk
menghilangkan agregat koloid sehingga distribusi ukuran partikel sesuai dengan
syarat ketentuan.
53
DAFTAR PUSTAKA
Anghileri LJ & Marqués R. 1967. New collodial chromic radiophosphate (P32) for
local irradiation of the central nervous system. The International Journal of
Applied Radiation and Isotopes, 18(2), 97-100. doi: 10.1016/0020-
708X(67)90038-5
Atilgan HI, Sadic M, Koca G, Korkmaz M. 2016. Radiosynovectomy: Current
Status and Clinical Utility. International Journal of Health Sciences &
Research, 6(May), 324–336.
Aziz A dan Suherman N. 2013. Penentuan Kondisi Optimum Penandaan Partikel
Hidroksiapatit dengan Sediaan Radioisotop 175YbCl3 Hasil Iradiasi Bahan
Sasaran 174Yb diperkaya. Indonesian Journal of Nuclear Science and
Technology. 14(2), 103-106.
Aziz A. 2012. Pembuatan dan Karakterisasi Sediaan Radioisotop 169ErCl3 Hasil
Iradiasi Bahan Sasaran Erbium-168 Diperkaya 97,75%. Indonesian Journal
of Nuclear Science and Technology, 13(2), 95–108.
Apostol I, Krull I & Kelner D. 2012. Analytical Method Validation for
Biopharmaceuticals. Analytical Chemistry Intech Open, 115-134. doi:
10.5772/52561
BATAN. Ensiklopedia. [diunduh 19 Juni 2019] Tersedia pada:
http://www.batan.go.id/ensiklopedi/08/01/02/04/08-01-02-04.html
BATAN. Glosarium. [diunduh 17 Juni 2019] Tersedia pada:
http://www.batan.go.id/index.php/id/glosarium2
Bio Rad. [diunduh pada 21 Januari 2020] Tersedia pada: https://www.bio-
rad.com/webroot/web/pdf/lsr/literature/4000054.pdf
Budiasih KS. 2011. Studi Spesies Ion Kromium Trivalen dalam Aktivitas
Hipoglikemia. In Prosiding Seminar Nasional “Meneguhkan Peran
Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat dalam Memuliakan Martabat
Manusia” (pp. 983–988).
Cartika H. 2016. Modul Bahan Ajar Cetak Farmasi: Kimia Farmasi. Jakarta (ID):
Kementrian Kesehatan Republik Indonesia
Center for Pharmacy Postgraduate Education. 2011. Rheumatoid arthritis CPPE.
[diunduh pada 23 Desember 2018] Tersedia pada:
https://www.cppe.ac.uk/learningdocuments/pdfs/fp_ra_book1.pdf
54
Darlina & Wahyuni S. 2004. Radiosinovektomi Alternatif Pengobatan Radang
Sendi Tanpa Operasi. Buletin Alara, 5(2&3), 129–134.
Das BK, Pradhan PK, Shukla AK, Misra R. 2004. Role of radiosynovectomy in
rheumatoid arthritis. J Indian Rheumatol Assoc, 12, 98–103.
Das BK. 2007. Role of radiosynovectomy in the treatment of rheumatoid arthritis
and hemophilic arthropathies. Biomedical Imaging and Intervention Journal,
3(4), 2–6. doi: 10.2349/biij.3.4.e45
De Bois M, Pauwels E, Breedveld F. 1995. New agents for scintigraphy in
rheumatoid arthritis. European Jpurnal of Nuclear Medicine, 22(11), 1339–
1346. doi: 10.1007/BF00801624
Europea Association of Nuclear Medicine (EANM). 2003. Procedure Guidelines
for Radiosynovectomy. Eur J Nucl Med 30:BP12-BP16, 30(3).
Gelatin Manufacturers Intitute of America (GMIA). 2019. Gelatin Handbook.
Gelatin Manufacturers Institute of America. New York.
Harmita. 2004. Petunjuk Pelaksanaan Validas Metode dan Cara Perhitungannya.
Majalah Ilmu Kefarmasian, I(3), 117–135. Tersedia pada:
https://www.msk.org.au/rheumatoid-arthritis/
IAEA. 2006. Nuclear Medicine Resources Manual. International Atomic Energy
Agency.
IAEA-TECDOC-1228. 2001. Therapeutic Applications of Radiopharmaceuticals.
International Atomic Energy Agency.
IAEA Technical Report Series. 2019. Production, Quality Control and Clinical
Applications of Radiosynovectomy Agents. International Atomic Energy
Agency.
Ingrand J. 1973. Characteristics of radio-isotopes for intra-articular therapy. Annals
of the Rheumatic Diseases, 32(Supplement), 3–9.
Jacobs ML. 1958. Radioactive Colloidal Chromic Phosphate To Control Pleural
Effusion and Ascites. Journal of the American Medical Acosiation, 166(6),
597-599
Johnson L, Yanch J, Shrtkroff S, Barnes C, Spitzaer A, Sledge C. 1995. Beta-
particle dosimetry in radiation synovectomy. European Journal of Nuclear
Medicine, 22((9)), 977–988. doi: 10.1126/science.147.3659.761
55
Johnström P, Bird JL & Davenport AP. 2012. Quantitative Phospor Imaging
Autoradiography of Radioligands for Positron Emission Tomography.
Receptor Binding Techniques, Methods in Molecular Biology, Vol: 897, 205-
220. doi: 10.1007/978-1-61779-909-9_10
Karavida N & Notopoulus A. 2010. Radiation Synovectomy: An effective
alternative treatment for inflamed small joints. Hippokratia, 14(1), 22–27.
Retrieved from http://link.springer.com/10.1007/174_2013_823
Khan NT. 2017. Autoradiography: Detection and Analysis of Radioactive Entities.
Journal of Biometrics & Biostatistics, 8(4), 1-2. doi: 10.4172/2155-
6180.1000361
Knut L. 2015. Radiosynovectomy in the Therapeutic Management of Arthritis.
World J Nucl Med, 14(1), 10–16. doi: 10.4103/1450-1147.150509
Koca G, Ozsoy H, Atilgan HI, Ozyurt S. 2013. A Low Recurrence Rate is Possible
With a Combination of Surgery and Radiosynovectomy for Diffuse
Pigmented Villonodular Synovitis of the Knee. Clinical Nuclear Medicine,
38(8), 608–615. doi: 10.1097/RLU.0b013e318292efdf
Kurniawati D. 2018. Menggunakan Mikroskop di Laboratorium. Surakarta (ID):
Aksara Sinergi Media.
Langard S & Costa M. 2007. Chromium. In Handbook on the Toxicology of Metals
(pp. 487–510). doi: 10.1016/B978-012369413-3/50079-3
Liepe K, Zaknun JJ, Padhy A, Barrenechea E, Soroa V, Shrikant S, Dondi M. 2011.
Radiosynovectomy using yttrium-90, phosphorus-32 or rhenium-188
radiocolloids versus corticoid instillation for rheumatoid arthritis of the knee.
Annals of Nuclear Medicine, 25(5), 317–323. doi: 10.1007/s12149-011-
0467-1
Mathews WB, Wu Y, Horti AG, Naik R, Hall AW, Holt DP, Dannals RF. 2019.
Radiosynthesis and Validation of [5-cyano-N-(4-(4-[11C]methylpiperazin-1-
yl)-2-(piperidin-1-yl)phenyl)furan-2-carboxamide] ([11C]CPPD), a PET
radiotracer for imaging CSF1R, a microglia-spesific marker. Journal of
Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals. 62(13), 903-908.
Mödder G. 2013. Radionuclide Therapy of Inflammatory Joint Diseases (Radiation
Synovectomy, Radiosynoviorthesis). In Therapeutic Nuclear Medicine (Vol.
7, pp. 459–493). doi: 10.1007/174_2013_823
Morales AC, Reyes DN, Matínez MB, Delgado TT, Arencibia JC, Zorrilla JM. 2015.
Reacción de reducción de Cr(VI) a Cr(III) por iones sulfito en presencia de
56
iones fosfato. Nucleus (Havana) (57), 19-25.
Mortazavi SMJ, Asadollahi S, Farzan M, Shahriaran S, Aghili M, Izadyar S, Lak
M. 2007. 32P Colloid Radiosynovectomy in Treatment of Chronic
Haemophilic Synovitis: Iran Experience. Haemophilia, 13(2), 182–188. doi:
10.1111/j.1365-2516.2006.01424.x
Musculoskeletal Australia. [diunduh pada 14 Januari 2019] Tersedia pada:
https://www.msk.org.au/rheumatoid-arthritis/
Oka M, Rekonen A, Ruotsi A, Seppälä O. 1971. Intra-Articular Injection of Y-90
Resin Colloid in the Treatment of Rheumatoid Knee Joint Effusions. Acta
Rheumatologica Scandinavicq, 17(1–4), 148–160. doi:
10.3109/rhe1.1971.17.issue-1-4.20
Pan JJ, Jiang J, Xu RK. 2014. Removal of Cr(VI) from aqueous by Na2SO3/FeSO4
combined with peanut straw biochar. Chemosphere 101, 71-76. doi:
http://dx.doi.org/10.1016/j.chemosphere.2013.12.026
Pars Isotope. Katalog General. [diunduh 16 September 2019] Tersedia pada:
http://www.parsisotope.com/pages/?action=service&ke=151
Perkin Elmer. [diunduh pada 21 Januari 2020] Tersedia pada:
https://www.perkinelmer.com/Content/relatedmaterials/productnotes/prd_cy
cloneplusstoragephosphor.pdf
Prabhakar G, Mehra KS & Ramamoorthy N. 2001. Studies on the Preparation and
Evaluation of Colloidal Chromic Phosphate 32-P for Possible Therapeutic
Use (No. IAEA-TECDOC—1228).
Riyanto. 2015. Validasi & Verifikasi Metode Uji:: Sesuai dengan ISO/IEC 17025,
Laboratorium Pengujian dan Kalibrasi (1st ed.). Yogyakarta (ID):
deepublish. doi: 10.15713/ins.mmj.3
Rosilawati NE, Nasution I, Wahyu T. 2017. Penggunaan Radiofarmaka Untuk
Diagnosa Dan Terapi Di Indonesia Dan Asas Keamanan Penggunaan Obat.
SOEPRA Jurnal Hukum Kesehatan, 3(1), 60–73.
Rustendi CT, Ramli M, Subur M. 2010. Pembuatan 186Rn-Sn Koloid untuk Terapi
Radiosinovektomi. Jurnal Radioisotop Dan Radiofarmaka, 13(2), 89–96.
Schneider P, Farahati J, Reines C. 2005. Radiosynovectomy in Rheumatology,
Orthopedics, and Hemophilia. Journal of Nuclear Medicine, 46(1), 48–55.
Shaw DJ. 1992. Introduction to Colloid and Surface Chemistry (Fourth Edition).
57
Oxford: Butterworth-Heinemann.
Silva M, Luck JV, Siegel M. 2001. 32P chromic phosphate radiosynovectomy for
chronic haemophilic synovitis. Haemophilia, 7 (Suppl.2(Haemophilia), 40–
49. doi: 10.1046/j.1365-2516.2001.00109.x
Soenarjo S. 2014. Mekanisme Lokalisasi Sediaan Radiofarmaka pada Organ
Target. Jurnal Radioisotop Dan Radiofarmaka, Vol 17 No(ISSN 1410-8542),
15–26.
Soroa VE. Velázquez Espeche M del H, Giannone C, Caviglia H, Galatros G,
Fernández D, Nicolini JO. 2005. Effects of Radiosynovectomy with P-32
Colloid Therapy in Hemophilia and Rheumatoid Arthritis. Cancer Biotherapy
& Radiopharmaceuticals, 20(3), 344–348. doi: 10.1089/cbr.2005.20.344
Srivastava RK & Kumar SS. 2017. An Updated Review: Analytical Method
Validation. European Journal of Pharmaceitical and Medical Research,
4(09), 1–6.
Srivastava SC. 2004. Treatment of Bone and Joint Pain with Electron Emitting
Radiopharmaceuticals. Indian J Nucl Med, 19(3): 89-97.
Sukma TT. 2018. Formulasi dan Stabilitas 32P-Cr Koloid untuk Radiosinovektomi
[skripsi]. Jakarta (ID): UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
Suparti. 2010. Mikroskop. Semarang (ID): ALPRIN
Turco AMD & Pietra R. 1963. Preparation of Collodial Chromic Phosphate (32P)
for Medical Use. Pergamon Press Ltd. 14, 279-283.
United States Pharmacopeia (USP). 2007. Chromic Phosphate P 32 Suspension.
30nd edition of the United States Pharmacopeia (USP) National Formulary
(NF) (USP3-NF25) 27(6): 2945.
Wardhana WA. 2007. Teknologi Nuklir: Proteksi Radiasi dan Aplikasinya.
Bandung (ID): Penerbit Andi.
Widayati P, Ariyanto A, Triningsih T, Susilo VY & Lestari W. 2017. Validasi Kit
Radioimmunoassay Aflatoksin B1. Jurnal Radioisotop dan Radiofarmaka
18(1) 2017.
Wijayakusuma H. 2008. Atasi Asam Urat & Rematik ala Hembing. Jakarta (ID):
Niaga Swadaya.
58
Wulandari L. 2011. Kromatografi Lapis Tpis (Cetakan pertama). Jember (ID): PT.
Taman Kampus Presindo.
59
LAMPIRAN
60
Lampiran 1. Formulasi Sediaan 32P-Cr Koloid
Hasil Formulasi 32P-Cr Koloid
61
Lampiran 2. Contoh Hasil Pengukuran dengan CoulterTM Counter
Hasil Pengukuran Formulasi Optimum
(a) (b)
Hasil Pengukuran F3
(a) (b)
Hasil Pengukuran F13
(a) (b)
Keterangan:
(a) Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel
(b) Keterangan Jumlah dan Rata-rata Ukuran Partikel
62
Lampiran 3. Data Kemurnian Radiokimia menggunakan Autoradiografi pada Formulasi 32P-Cr Optimum
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total
Migrasi (cm) Migrasi (cm) Aktivitas
(DLU) Kemurnian (%) Migrasi (cm)
Aktivitas
(DLU) 32P Bebas (%)
1 0,81 15.864.029,60 95,61 13,05 728.133,70 4,39
15,68 2 0,51 16.059.437,50 95,59 13,27 741.322,90 4,41
Rata-rata 0,66 95,60 13,16 4,40
Rf 0,04 0,8
Contoh Perhitungan Kemurnian
Kemurnian = (Aktivitas Titik 1
(Aktivitas Titik 1+Aktivitas Titik 2)) × 100% = (
15.864.029,60
(15.864.029,60 + 728.133,70 )) × 100% = 95,61%
Contoh Perhitungan 32P-Bebas
Kemurnian = (Aktivitas Titik 2
(Aktivitas Titik 1+Aktivitas Titik 2)) × 100% = (
728.133,70
(15.864.029,60 + 728.133,70 )) × 100% = 4,39%
Contoh Perhitungan Nilai Rf
Nilai Rf Titik 1 = Jarak yang ditempuh substansi
= Rata-rata Migrasi Titik 1
= 0,66
= 0,04 Jarak yang ditempuh pelarut Total Migrasi 15,68
Nilai Rf Titik 2 = Jarak yang ditempuh substansi
= Rata-rata Migrasi Titik 2
= 13,16
= 0,8 Jarak yang ditempuh pelarut Total Migrasi 15,68
63
64
Lampiran 4. Data Kemurnian Radionuklida menggunakan Autoradiografi pada Standar 32P
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total
Migrasi
(cm) Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
Kemurnian
(%)
Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
32P Bebas
(%)
1 0,5 141.809,60 0,06 11,78 252.825.854,40 99,94 15,03
2 0,44 127.941,60 0,05 11,3 238.724.940,30 99,95
Rata-rata 0,47 0,05 11,54 99,95
Rf 0,03 0,8
65
Lampiran 5. Data Kemurnian Radionuklida Pengendalian Kualitas (Quality Control)
1. Kemurnian Radionuklida F1
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total
Migrasi
(cm) Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
Kemurnian
(%)
Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
32-P
Bebas (%)
1 0,96 225.938,00 0,14 14,26 159.296.514,00 99,86 17,2
2 0,76 145.336,70 0,10 11,64 143.656.625,70 99,90
Rata-rata 0,86 0,12 12,95 99,88
Rf 0,05 0,8
66
2. Kemurnian Radionuklida F2
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total
Migrasi
(cm) Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
Kemurnian
(%)
Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
32-P
Bebas (%)
1 0,88 18.422,70 0,08 12,56 23.534.476,20 99,92 15,64
2 1,04 17.900,40 0,07 12,41 24.876.471,80 99,93
Rata-rata 0,96 0,08 12,49 99,92
Rf 0,06 0,8
67
3. Kemurnian Radionuklida F3
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total
Migrasi
(cm) Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
Kemurnian
(%)
Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
32-P
Bebas (%)
1 1,3 132.705,90 0,15 12,31 88.642.936,80 99,85 15,27
2 1,43 176.269,60 0,17 12,3 104.617.501,70 99,83
Rata-rata 1,365 0,16 12,31 99,84
Rf 0,09 0,8
Kinanthy
68
Lampiran 6. Data Kemurnian Radiokimia Pengendalian Kualitas (Quality Control)
1. Kemurnian Radiokimia F1
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total
Migrasi
(cm) Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
Kemurnian F1
(%)
Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
32-P
Bebas (%)
1 0,86 11.665.842,30 97,62 12,29 284.292,30 2,38 14,95
2 0,89 10.685.651,90 97,62 12,09 260.268,30 2,38
Rata-rata 0,875 11.175.747,10 97,62 12,19 272280,30 2,38
Rf 0,06 0,8
69
2. Kemurnian Radiokimia F2
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total
Migrasi
(cm) Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
Kemurnian F2
(%)
Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
32-P
Bebas (%)
1 0,68 12.894.733,90 97,08 12,9 388.471 2,92 15,64
2 0,72 7.207.744,10 96,29 12,23 277.451,10 3,71
Rata-rata 0,7 96,68 12,57 3,32
Rf 0,04 0,8
70
3. Kemurnian Radiokimia F3
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total
Migrasi
(cm) Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
Kemurnian F3
(%)
Migrasi
(cm) Aktivitas (DLU)
32-P
Bebas (%)
1 1,12 35.730.913,70 99,35 12,14 232.351 0,65 15,27
2 1,24 32.318.659,90 99,14 12,35 278.921,40 0,86
Rata-rata 1,18 99,25 12,25 0,75
Rf 0,08 0,8
71
Lampiran 7. Data Distribusi Ukuran Partikel Pengendalian Kualitas (Quality
Control)
Sampel Rata-rata Ukuran
Partikel (m)
Distribusi Ukuran Partikel (%)
2-10 m > 10 m
F1 4,6 100 0
F2 3,5 100 0
F3 4,7 97,18 2,82
72
Lampiran 8. Keterangan Formulasi Uji Presisi
1. Presisi Keterulangan
Sampel Kondisi Tanggal
Formulai Analis Laboratorium Alat
F4
Non-
Radioaktif 24-07-2019
1 Radiofarmaka Yellowline
F5 1 Radiofarmaka Yellowline
F6 1 Radiofarmaka Yellowline
F7 1 Radiofarmaka Yellowline
F8 1 Radiofarmaka Yellowline
F9
11-03-2019
1 Radioisotop Scilogex
F10 Radioaktif 1 Radioisotop Scilogex
F11 1 Radioisotop Scilogex
2. Presisi Antara
Sampel Kondisi Tanggal
Formulai Analis Laboratorium Alat
F11
Non-
Radioaktif
12-03-2019 1 Radiofarmaka Yellowline
F12 17-06-2019 2 Radiofarmaka Yellowline
F13 25-06-2019 3 Radiofarmaka Yellowline
F14 18-06-2019 1 Radiofarmaka Vision
F15 26-07-2019 1 Radiofarmaka IKA® C-
MAG HS10
F1
Radioaktif
1-04-2019 1 Radioisotop Scilogex
F2 15-04-2019 1 Radioisotop Scilogex
F3 17-06-2019 2 Radioisotop Scilogex
73
Lampiran 9. Perhitungan RSD Horwiz
Konsentrasi analit (H3PO4) = 1% g/mL = 0,01 g/mL
1. Presisi Parameter Keterulangan
Nilai keberterimaan = % RSD < (% RSD Horwitz x 0,67)
% RSD Horwitz Presisi Keterulangan = (21-(0,5 x log C)) x 0,67
= (21-(0,5 x log 0,01)) x 0,67
= (21-(0,5 x (-2))) x 0,67
= (21-(-1)) x 0,67
= (22) x 0,67
= (4) x 0,67
= 2,68
2. Presisi Parameter Presisi Antara
Nilai keberterimaan = % RSD < % RSD Horwitz
% RSD Horwitz Presisi Antara = (21-(0,5 x log C))
= (21-(0,5 x log 0,01))
= (21-(0,5 x (-2)))
= (21-(-1))
= (22)
= 4
74
Lampiran 10. Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid dan Analisis Presisi Parameter Keterulangan
Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid menggunakan CoulterTM Countess
Sampel Kondisi Rata-rata Ukuran
Partikel (m)
Total Partikel
Terhitung
Keterangan Distribusi Ukuran
Partikel (%)
Jumlah Partikel Rentang Ukuran
Partikel (m) 2-10 m > 10 m
F4
Non-
Radioaktif
3,4 462 462 2-10
100 0,00 0 > 10
F5 3,8 291 290 2-10
99,66 0,34 1 > 10
F6 3,6 418 416 2-10
99,52 0,48 2 > 10
F7 4,2 147 146 2-10
99,32 0,68 1 > 10
F8 3,8 194 192 2-10
98,97 1,03 2 > 10
F9
Radioaktif
3,7 80 79 2-10
98,75 1,25 1 > 10
F10 4,6 21 21 2-10
100 0 0 > 10
F11 4,1 15 15 2-10
100 0 0 > 10
75
Contoh Perhitungan Distribusi Ukuran Partikel Rentang 2-10 m (%)
Distribusi Ukuran Partikel (%) F5 = ( Jumlah Partikel Rentang Ukuran 2-10 m
) x 100% = ( 290
) x 100% = 99,66% Jumlah Partikel 291
Contoh Perhitungan Distribusi Ukuran Partikel Rentang < 10 m (%)
Distribusi Ukuran Partikel (%) F5 = ( Jumlah Partikel Rentang Ukuran < 10 m
) x 100% = ( 1
) x 100% = 0,34% Jumlah Partikel 291
76
Hasil Analisis Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid Presisi Parameter Keterulangan
Sampel Distribusi Ukuran
Partikel (%)
Rata-rata Distribusi
Ukuran Partikel (%) SD RSD Ketelitian
F4 100
99,53 0,48 0,49 99,51
F5 99,66
F6 99,52
F7 99,32
F8 98,97
F9 98,75
F10 100
F11 100
Total Sampel = 8 Total Distribusi Ukuran
Partikel (%) = 796,22
Contoh Perhitungan Rata-rata Distribusi Ukuran Partikel
𝑥 =
∑ 𝑥𝑖
𝑛
𝑖=1
= 796,22 = 99,53
𝑛 8
Keterangan:
xi : Nilai pengujian
n : Jumlah data
77
Contoh Perhitungan Standar Deviasi (SD)
Sampel Distribusi Ukuran
Partikel (%) (xi) xi – xo (xi – x0)2 ∑(𝐱𝐢 – 𝐱𝐨)𝟐
( 𝜮 (𝒙𝒊 − 𝒙𝒐)𝟐
𝒏 − 𝟏 √
( 𝜮 (𝒙𝒊 − 𝒙𝒐)𝟐
𝒏 − 𝟏
F4 100 0,47 0,22
1,65 0,24 0,48
F5 99,66 0,13 0,02
F6 99,52 -0,01 0,00
F7 99,32 -0,21 0,04
F8 98,97 -0,56 0,31
F9 98,75 -0,78 0,60
F10 100 0,47 0,22
F11 100 0,47 0,22
n = 8 xo = 99,53
n – 1 = 7
( 𝜮 (𝒙𝒊 − 𝒙𝒐)𝟐
𝒏 − 𝟏 =
1,65 =
0,24 7
Keterangan:
SD : Standar Deviasi
xi : Nilai Pengujian
xo : Nilai Rata-rata Pengujian
n : Jumlah Data
√( 𝜮 (𝒙𝒊 − 𝒙𝒐)𝟐
𝒏 − 𝟏 = √0,24 =
0,48
78
Contoh Perhitungan Relative Standar Deviation (RSD)
% RSD = 𝑆𝐷
𝑥 x 100% =
0,48
99,53 x 100% = 0,49
Keterangan
SD : Standar Deviasi
x : Nilai Rata-rata
RSD : Relatif Standar Deviation
Contoh Perhitungan Ketelitian
Nilai Ketelitian = 100% - % RSD = 100% - 0,49% = 99,51%
79
Lampiran 11. Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid dan Analisis Presisi Parameter Keterulangan
Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia menggunakan Autoradiografi
1. Sampel F9
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total Migrasi
(cm) Migrasi (cm) Aktivitas
(DLU)
Kemurnian F6
(%) Migrasi (cm)
Aktivitas
(DLU) 32P Bebas (%)
1 0,84 4.295.772,90 97,26 11,68 121.237 2,74 14,22
2 0,82 4.804.539,10 96,99 11,69 149.078,90 3,01
Rata-rata 0,83 97,12 11,69 2,88
Rf 0,06 0,8
80
2. Sampel F10
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total Migrasi
(cm) Migrasi (cm) Aktivitas
(DLU)
Kemurnian F7
(%) Migrasi (cm)
Aktivitas
(DLU) 32-P Bebas (%)
1 0,89 7.975.362,00 97,67 10,88 190.107,80 2,33 14,22
2 0,92 9.944.379,70 97,52 10,97 253.195,30 2,48
Rata-rata 0,905 97,59 10,93 2,41
Rf 0,06 0,8
81
3. Sampel F11
Plat KLT
Titik 1 Titik 2 Total Migrasi
(cm) Migrasi (cm) Aktivitas
(DLU)
Kemurnian F8
(%) Migrasi (cm)
Aktivitas
(DLU) 32-P Bebas (%)
1 0,87 12.134.091,10 96,88 10,85 391.421,10 3,12 14,22
2 0,82 10.302.461,90 96,75 10,4 345.848,50 3,25
Rata-rata 0,845 96,81 10,63 3,19
Rf 0,06 0,7
82
Analisis Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid Uji Presisi Parameter Keterulangan
Sampel Kemurnian Radiokimia (%) Rata-rata SD RSD (%) Ketelitian (%)
F9 97,12
97,18 0,39 0,40 99,60 F10 97,59
F11 96,81
Total 3 291,53
Contoh Perhitungan Rata-rata Distribusi Ukuran Partikel
𝑥 =
∑ 𝑥𝑖
𝑛
𝑖=1
= 291,53 = 97,18
𝑛 3
Keterangan:
xi : Nilai pengujian
n : Jumlah data
83
Contoh Perhitungan Standar Deviasi (SD)
Sampel Distribusi Ukuran
Partikel (%) (xi) xi – xo (xi – x0)2 ∑(𝐱𝐢 – 𝐱𝐨)𝟐
( 𝜮 (𝒙𝒊 − 𝒙𝒐)𝟐
𝒏 − 𝟏 √
( 𝜮 (𝒙𝒊 − 𝒙𝒐)𝟐
𝒏 − 𝟏
F9 97,12 -0,05 0,003
0,31 0,15 0,39 F10 97,59 0,42 0,17
F11 96,81 0,36 0,13
n = 3 xo = 97,18
n – 1 = 2
( 𝜮 (𝒙𝒊 − 𝒙𝒐)𝟐
𝒏 − 𝟏 =
0,31 =
0,15 2
Keterangan:
SD : Standar Deviasi
xi : Nilai Pengujian
xo : Nilai Rata-rata Pengujian
n : Jumlah Data
√( 𝜮 (𝒙𝒊 − 𝒙𝒐)𝟐
𝒏 − 𝟏 = √0,15 =
0,39
84
Contoh Perhitungan Relative Standar Deviation (RSD)
% RSD = 𝑆𝐷
𝑥 x 100% =
0,39
97,18 x 100% = 0,40
Keterangan
SD : Standar Deviasi
x : Nilai Rata-rata
RSD : Relatif Standar Deviation
Contoh Perhitungan Ketelitian
Nilai Ketelitian = 100% - % RSD = 100% - 0,49% = 99,51%
85
Lampiran 12. Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid dan Analisis Presisi Parameter Presisi Antara
Hasil Pengukuran Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid menggunakan CoulterTM Countess
Sampel Kondisi Rata-rata Ukuran
Partikel (m)
Total Partikel
Terhitung
Keterangan Distribusi Ukuran
Partikel (%)
Jumlah Partikel Rentang Ukuran
Partikel (m) 2-10 m > 10 m
F12
Non-
Radioaktif
4,7 10 10 2-10
100 0 0 > 10
F13 4,1 187 187 2-10
100 0 0 > 10
F14 3,8 35 35 2-10
100 0 0 > 10
F15 3,6 271 270 2-10
99,63 0,37 1 > 10
F16 4,0 221 171 2-10
77,38 22,62 50 > 10
F1
Radioaktif
4,6 21 21 2-10
100 0 0 > 10
F2 3,5 10 10 2-10
100 0 0 > 10
F18 4,7 177 172 2-10
97,18 2,82 5 > 10
86
Analisis Distribusi Ukuran Partikel 32P-Cr Koloid Uji Presisi Parameter Presisi Antara
Sampel
Rata-rata
Ukuran
Partikel (m)
Persentase Distribusi Ukuran
Partikel (%)
Rata-rata Persentase
Dsitribusi Ukuran (%) SD RSD (%) Ketelitian
(%) 2-10 m > 10 m 2-10 m > 10 m
F12 4,7 100 0
96,77 3,23 7,90 8,16 91,84
F13 4,1 100 0
F14 3,8 100 0
F15 3,6 99,63 0,37
F16 4 77,38 22,62
F1 4,6 100 0
F2 3,5 100 0
F3 4,7 97,18 2,82
87
Lampiran 12. Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid dan Analisis Presisi Parameter Presisi Antara
Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid menggunakan Autoradiografi
Hasil Pengukuran Kemurnian Radiokimia dapat dilihat di Lampiran 5.
Analisis Kemurnian Radiokimia 32P-Cr Koloid Uji Presisi Parameter Presisi Antara
Sampel
Kemurnian
Radiokimia
(%)
Rata-rata SD RSD (%) Ketelitian
(%)
F1 97,59
97,84 1,30 1,33 98,67 F2 96,68
F3 99,25