uji sitotoksik ekstrak etanol daun beluntas …eprints.ums.ac.id/48626/3/halaman depan.pdf · untuk...

13
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.), CIPLUKAN (Physalis angulata L.), DAN KENIKIR (Cosmos caudatus Kunth.) TERHADAP SEL T47D SKRIPSI Oleh: ANISA WIDYARATNA K100130071 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2016

Upload: phungthuan

Post on 09-Aug-2019

227 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS

(Pluchea indica L.), CIPLUKAN (Physalis angulata L.), DAN

KENIKIR (Cosmos caudatus Kunth.) TERHADAP SEL T47D

SKRIPSI

Oleh:

ANISA WIDYARATNA

K100130071

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA

2016

Page 2: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

i

UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS

(Pluchea indica L.), CIPLUKAN (Physalis angulata L.), DAN

KENIKIR (Cosmos caudatus Kunth.) TERHADAP SEL T47D

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat

Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

di Surakarta

Oleh:

ANISA WIDYARATNA

K100130071

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA

2016

Page 3: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

ii

Page 4: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir
Page 5: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Warohmatullahi Wabarokatuh

Puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat serta hidayah-Nya penulis

mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul UJI SITOTOKSIK EKSTRAK

ETANOL DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.), CIPLUKAN (Physalis

angulata L.), DAN KENIKIR (Cosmos caudatus Kunth.) TERHADAP SEL

T47D

Penyusunan penelitian ini dimaksudkan untuk memenuhi salah satu syarat

dalam memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas

Muhammdiyah Surakarta. Dalam kesempatan ini, perkenankan penulis untuk

menyampaikan rasa terimakasih dan penghargaan kepada:

1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt yang terhormat, selaku Dekan Fakultas

Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, pembimbing akademik dan

dosen penguji I.

2. Ibu Maryati, Ph.D., Apt selaku pembimbing utama dan penguji III.

3. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc., selaku dosen penguji II

4. Bapak/ibu dosen serta seluruh staf Fakultas Farmasi yang telah membantu

jalannya penelitian ini.

5. Ibu dan adikku tercinta serta seluruh keluarga besar yang senantiasa

membimbing, mendoakan dan memberikan semangat, dukungan yang tak

terhingga selama proses penulisan skripsi ini

6. Sahabat-sahabat tercinta, terima kasih untuk semuanya, atas semangat,

dukungan, doa dan kekompakannya.

7. Semua pihak yang telah membantu penulis dalam penyelesaian skripsi ini

yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu.

Wasalamu’alaikum Warohmatullahi Wabarokatuh

Surakarta, 29 November 2016

Penulis

Page 6: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

v

DAFTAR ISI

Halaman

PENGESAHAN SKRIPSI ...................................................................................... ii

DEKLARASI ......................................................................................................... iii

KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv

DAFTAR ISI ........................................................................................................... v

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ vii

DAFTAR TABEL ................................................................................................ viii

DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... ix

DAFTAR SINGKATAN ........................................................................................ x

ABSTRAK ............................................................................................................. xi

ABSTRACT ............................................................................................................ xii

BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1

A. Latar Belakang ............................................................................................... 1

B. Rumusan Masalah .......................................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ........................................................................................... 2

D. Tinjauan Pustaka ............................................................................................ 3

1. Tanaman beluntas (Pluchea indica l.) ...................................................... 3

a. Klasifikasi .......................................................................................... 3

b. Kandungan Kimia .............................................................................. 3

c. Aktivitas Farmakologi ....................................................................... 3

2. Tanaman Ciplukan (Physalis angulata L.) ............................................... 4

a. Klasifikasi .......................................................................................... 4

b. Kandungan Kimia .............................................................................. 4

c. Aktivitas Farmakologi ....................................................................... 5

3. Tanaman Kenikir (Cosmos caudatus Kunth.) ........................................... 5

a. Klasifikasi .......................................................................................... 5

b. Kandungan Kimia .............................................................................. 5

c. Aktivitas Farmakologi ....................................................................... 5

4. Kanker ....................................................................................................... 6

E. Landasan Teori .............................................................................................. 7

F. Hipotesis ......................................................................................................... 8

BAB II METODE PENELITIAN ........................................................................... 9

A. Kategori Penelitian ........................................................................................ 9

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasionalnya .......................................... 9

C. Alat dan Bahan ............................................................................................ 10

1. Alat penelitian ......................................................................................... 10

2. Bahan penelitian...................................................................................... 10

Page 7: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

vi

D. Tempat Penelitian ........................................................................................ 11

E. Rencana Penelitian....................................................................................... 11

1. Penyiapan Bahan ..................................................................................... 11

2. Ekstraksi .................................................................................................. 11

3. Uji Kandungan Senyawa dengan KLT ................................................... 12

4. Uji Sitotoksik .......................................................................................... 12

a. Pemanenan Sel ................................................................................. 12

b. Pembuatan larutan uji ...................................................................... 13

c. Uji Sitotoksik ................................................................................... 13

F. Analisis Data ................................................................................................ 15

BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................... 16

BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 24

A. Kesimpulan .................................................................................................. 24

B. Saran ............................................................................................................ 24

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 26

Page 8: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

vii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur senyawa dari ekstrak beluntas. ................................................ 3

Gambar 2. Struktur senyawa dari ekstrak ciplukan ................................................ 4

Gambar 3. Struktur senyawa dari ekstrak kenikir ................................................... 5

Gambar 4. Uji Sitotoksik....................................................................................... 14

Gambar 5. Reaksi reduksi garam MTT membentuk formazan ............................. 17

Gambar 6. Morfologi sel T47D ............................................................................. 18

Gambar 7. Grafik hubungan konsentrasi versus %sel hidup ................................ 19

Gambar 8. Profil KLT ekstrak etanol daun beluntas............................................. 22

Gambar 9. Profil KLT ekstrak etanol daun ciplukan ............................................ 22

Gambar 10. Profil KLT ekstrak etanol daun kenikir............................................. 23

Page 9: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

viii

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Regimen kemoterapi kanker payudara dengan HER2 (-) ......................... 7

Tabel 2. Definisi Operasional ................................................................................. 9

Tabel 3. Hasil ekstraksi tanaman .......................................................................... 16

Tabel 4. Seri konsentrasi sampel uji dan % sel hidup setelah perlakuan .............. 18

Tabel 5. Persamaan regresi linier masing-masing sampel dan IC50 ...................... 20

Tabel 6. Deteksi golongan senyawa dengan berbagai pereaksi semprot .............. 23

Page 10: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

ix

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Gambar Tanaman Beluntas, Ciplukan dan Kenikir .......................... 29

Lampiran 2. Perhitungan sel dan larutan seri konsentrasi ekstrak ........................ 30

Lampiran 3. Perhitungan hasil IC50 ....................................................................... 32

Page 11: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

x

DAFTAR SINGKATAN

DMSO : Dimethyl Sulfoxide

ELISA : Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay

ER : Estrogen Receptor

FBS : Foetal Bovine Serum

IC50 : Inhibitory Concentration 50

KLT : Kromatografi Lapis Tipis

LAF : Laminar Air Flow

MK : Media Kultur

MTT :3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromide

PBS : Phospate Buffered Saline

PR : Progesteron Receptor

Rf : retardation factor

RPMI : Roswell Park Memorial Institute

SDS : Sodium Dodecyl Sulfate

UV : Ultraviolet

Page 12: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

xi

ABSTRAK

Kanker payudara merupakan salah satu kanker penyebab kematian

terbesar pada wanita. Saat ini penemuan agen-agen sitotoksik dari bahan alam

terus dikembangkan. Beluntas (Pluchea indica L.), Ciplukan (Physalis angulata

L.) dan Kenikir (Cosmos caudatus Kunth.) merupakan tanaman-tanaman yang

berpotensi untuk dikembangkan sebagai agen sitotoksik. Penelitian ini bertujuan

untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan

kenikir terhadap sel kanker payudara T47D serta mengetahui golongan senyawa

yang terkandung didalamnya.

Ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir diuji efek

sitotoksik nya pada sel T47D dengan menggunakan metode MTT. Metode MTT

didasarkan pada pembentukan kristal formazan karena reduksi dari garam MTT

oleh enzim dehidrogenase suksinat. Proses nya terjadi di jalur respirasi

mitokondria sel hidup.

Dari hasil penelitian diperoleh IC50 pada ekstrak etanolik daun ciplukan

yaitu 176,6 µg/mL dan pada ekstrak etanolik daun beluntas dan kenikir masing-

masing memiliki IC50 >200 µg/mL. Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan

ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir memiliki efek sitotoksik yang

lemah terhadap sel T47D. Hasil uji KLT menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun

beluntas, ciplukan dan kenikir mengandung tanin dan flavonoid.

Kata kunci: Pluchea indica L., Physalis angulata L., Cosmos caudatus Kunth.,

sitotoksik, IC50, T47D

Page 13: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS …eprints.ums.ac.id/48626/3/HALAMAN DEPAN.pdf · untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir

xii

ABSTRACT

Breast cancer is one of leading cause of cancer death in women around

the world. One of the strategy to prevent breast cancer based on cytotoxic agent by

natural products are now being developed. Beluntas (Pluchea indica L.), Ciplukan

(Physalis angulata L.) and Kenikir (Cosmos caudatus Kunth.) are the potential

plants for being developed as cytotoxic agent. This study aimed to know cytotoxic

effect of beluntas, ciplukan and kenikir leaves ethanolic extract on T47D breast

cancer cell and to know classes of the compound that contain in extracts.

The extracts are tested its cytotoxic effect on T47D cancer cells using

MTT assay.MTT assay is based on the formation of formazan crystal because the

reduction of salt MTT by enzyme succinate dehydrogenase. Its occurs in

respiration pathway of mitochondrial living cell.

This research shows that ciplukan leaves ethanolic extract had cytotoxic

effect on T47D cancer cell with IC50 176,6 µg/mL and beluntas and kenikir leaves

ethanolic extract had cytotoxic effect on T47D cancer cell with IC50 >200 µg/mL.

From this research can be concluded that beluntas, ciplukan and kenikir leaves

ethanolic extract had less potential effect on T47D cells. The result shows that

beluntas leaves ethanolic extract, ciplukan leaves ethanolic extract and kenikir

leaves ethanolic extract contain of tanin and flavonoid.

Keywords: Pluchea indica L., Physalis angulata L., Cosmos caudatus Kunth.,

cytotoxic, IC50, T47D