USULAN PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

Uji Pendahuluan Formulasi Pembuatan Permen Jeli dari Ekstrak

Kulit Buah Delima sebagai Diet Sehat Penurun Berat Badan

BIDANG KEGIATAN:

PKM PENELITIAN

Diusulkan Oleh:

Ketua : Rismayanti (0661 11 064)

Anggota : Sri wulandari (0661 12 056)

(0661 12 070)

Vina Ramdiani (0661 12 072)

UNIVERSITAS PAKUAN

BOGOR

2013

i

ii

DAFTAR ISI

PENGESAHAN USULAN PKM-PENELITIAN ................................................. i

DAFTAR ISI ....................................................................................................... ii

RINGKASAN ...................................................................................................... 1

A. JUDUL PROGRAM ....................................................................................... 2

B. LATAR BELAKANG MASALAH ................................................................ 3

C. PERUMUSAN MASALAH ............................................................................ 3

D. TUJUAN PROGRAM ..................................................................................... 3

E. LUARAN YANG DIHARAPKAN ................................................................. 3

F. KEGUNAAN PROGRAM .............................................................................. 3

G. TINJAUAN PUSTAKA .................................................................................. 3

1. Delima ....................................................................................................... 3

Ekstrak Kulit Delima sebagai Pelangsing ................................................... 4

2. Tanin .......................................................................................................... 4

Sifat-sifat Tanin Tumbuhan ....................................................................... 5

Proses Pemisahan Tanin............................................................................. 6

3. Permen Jeli ................................................................................................ 6

H. METODE PENELITIAN ................................................................................ 7

Populasi ........................................................................................................ 7

Pre Formulasi ................................................................................................. 7

Formulasi ....................................................................................................... 8

Metode Penelitian ......................................................................................... 8

Metode Pengujian .......................................................................................... 9

I. BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN .............................................................. 9

Anggaran Biaya ............................................................................................. 9

Jadwal Kegiatan ........................................................................................... 10

J. DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 11

K. LAMPIRAN-LAMPIRAN ........................................................................... 16

1

RINGKASAN

Kegemukan adalah suatu keadaan dimana terdapatnya penimbunan lemak

berlebihan yang diperlukan untuk fungsi tubuh manusia. Kegemukan ini

merupakan faktor resiko untuk terjadinya berbagai jenis penyakit degeneratif,

misalnya DM, hipertensi, penyakit jantung koroner dan berbagai jenis penyakit

kanker. Oleh karena resiko yang ditimbulkan dari kegemukan ini sangat

berbahaya bagi kesehatan tubuh, maka sudah seharusnya para penderita

kegemukan ini mengatasi masalah kegemukan yang mereka alami. Salah satu cara

yang dapat dilakukan dalam usaha menurunkan berat badan adalah dengan

menggunakan buah delima. Buah delima adalah salah satu buah yang secara

empiris sudah terbukti dapat menurunkan berat badan.

Delima atau glima merupakan tanaman perdu berbatang kayu dengan

ketinggian mencapai 2-5 m dan mempunyai banyak cabang serta berduri pada

ketiak daunnya. Daun berwana hijau dengan permukaan mengkilap dan berbentuk

lonjong. Buahnya berbentuk bulat yang mempunyai diameter antara 5-12 dan

berwarna hijau kekuningan.

Sudah sejak lama delima dipercaya memiliki berbagai khasiat bagi

kesehatan tubuh. Khasiat tersebut antara lain adalah sebagai antelmintik, obat

batuk dan diare. Selain itu, sudah sejak lama juga manusia memanfaatkan delima

ini sebagai bahan penurun berat badan atau pelangsing tubuh.

Khasiat delima sebagai pelangsing ini tak lepas dari kandungan delima

yang terdiri dari senyawa tanin. Tanin ini mengandung senyawa astringen yang

dapat memperkecil pori-pori mukosa usus sehingga mengurangi penyerapan

makanan. Dengan berkurangnya jumlah kalori yang terserap maka tubuh terpaksa

akan mengambilnya dari cadangan lemak, sehingga berat badan menjadi

menurun.

Dalam proposal ini kami mengajukan usulan program penelitian berupa

Uji Pendahuluan Formulasi Pembuatan Permen Jeli dari Ekstrak Kulit Buah

Delima sebagai Diet Sehat Penurun Berat. program ini

adalah untuk menentukan cara yang tepat untuk mengekstraksi kulit delima dan

mengelola ekstrak tersebut menjadi permen jeli supaya dihasilkan permen jeli

yang berkhasiat untuk melangsingkan tubuh.

Pembuatan permen jeli ini diawali dengan mengiekstraksi kulit delima

dengan menggunakan metode meserasi. Pada metode meserasi kulit buah delima

ini digunakan etanol 96 % sebagai pelarutnya agar didapatkan ekstrak biji delima

dengan kualitas yang baik. Setelah ekstrak didapatkan kemudian dilanjutkan

dengan pembuatan jeli. Pada pembuatan ini digunakan metode yang sederhana,

meliputi pengadukan, pemanasan, pencetakan dan yang terakhir aadalah

pendinginan.

Hasil akhir yang kami harapkan dari program ini adalah menghasilkan

permen jeli yang enak dan sehat, dengan memanfaatkan kulit delima yang

mengandung tanin sebagai astringen yang nantinya dapat digunakan sebagai diet

sehat untuk mengurangi tingkat obesitas atau kegemukan.

2

A. JUDUL PROGRAM

Uji Pendahuluan Formulasi Pembuatan Permen Jeli dari Ekstrak Kulit Buah

Delima sebagai Diet Sehat Penurun Berat

B. LATAR BELAKANG MASALAH

Tanaman delima berasal dari Timur Tengah, tersebar di daerah subtropik

sampai daerah tropik, dari dataran rendah sampai dibawah 1.000 m dpl. Tanaman

delima ini dapat tumbuh 5-8 m di tanah gembur yang tidak terendam air, dengan

air tanah yang tidak dalam. Delima sering ditanam di kebun-kebun sebagai

tanaman hias, tanaman obat atau karena buahnya yang dapat dimakan.

Biji buah delima juga mengandung zat samak sebanyak 25-28%, tanin 22-

25%, alkaloid pelletierin, pseudopelletierin dan lendir sebanyak 30%. Tanin pada

biji buah delima ini juga memiliki sifat sebagai astrigen yang dapat dimanfaatkan

sebagai pelangsing.

Permen jeli merupakan permen yang dibuat dari air atau sari buah dan

bahan pembentuk gel, yang berpenampilan jernih transparan serta mempunyai

tekstur dengan kekenyalan tertentu. Bahan pembentuk gel yang biasa digunakan

antara lain gelatin, karagenen dan agar. Penambahan bahan pengawet diperlukan

untuk memperpanjang waktu simpannya (Malik, 2010).

Permen jeli mempunyai tekstur dengan kekenyalan tertentu. Permen ini

memiliki karakteristik umum chewy yang bervariasi, dari agak lembut hingga

agak keras (Kurniasari, 2010).

Permen jeli merupakan suatu makanan/cemilan yang sampai saat ini masih

menjadi primadona dan disukai baik oleh anak-anak maupun orang tua. Salah satu

penyebab permen jeli ini disukai adalah karena rasanya bermacam-macam dan

dapat diaplikasikan dengan berbagai jenis bahan. Misalnya saja dalam percobaan

ini digunakan ekstrak kulit buah delima sebagai bahan tambahan dalam

pembuatan permen jeli. Selain dapat digunakan sebagai cemilan sehat, permen

agar kering dari ekstrak kulit buah delima ini juga dapat digunakan sebagai

pelangsing yang tidak saja enak tetapi juga praktis.

Dengan adanya agar kering dari ekstrak kulit buah delima ini diharapkan

dapat membantu mereka yang memiliki masalah kegemukan dan ingin

menurunkan berat badan dengan melakukan diet sehat dan menyenangkan.

3

C. PERUMUSAN MASALAH

Dari uraian latar belakang diatas rumusan masalah yang akan dibahas

agaimana pengolahan ekstrak kulit buah delima menjadi permen jeli

yang dapat diguanakan sebagai pelangsing?

D. TUJUAN PROGRAM

Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah untuk untuk menentukan cara

pengolahan jeli yang tepat untuk menghasilkan permen jeli supaya dapat

digunakan sebagai cemilan pelangsing.

E. LUARAN YANG DIHARAPKAN

Dari penelitian ini diharapkan diperoleh luaran berupa cemilan sehat dari

kulit delima yang dapat dimanfaatkan untuk menurunkan berat badan dan

digunakan sebagai salah satu metode diet yang sehat.

F. KEGUNAAN PROGRAM

1. Memanfaatkan kandungan astringent dalam kulit buah delima sebagai

pelangsing.

2. Menciptakan permen jeli yang kaya dengan tanin yang dapat digunakan

sebagai pelangsing.

3. Membantu proses diet penderita kegemukan agar penderita kegemukan

tersebut dapat menurunkan barat badannya dengan cara yang menyenangkan.

G. TINJAUAN PUSTAKA

1. Delima

Delima putih (Punica granatum L.) merupakan tanaman yang berasal dari

negeri Persia, dan kemudian menyebar ke segala penjuru dunia. Tanaman ini

tersebar di daerah subtropik sampai tropik, dari dataran rendah sampai di bawah

1.000 m. (IPTEKc, 2005). Tanaman ini termasuk ke dalam famili Lythraceae dan

genus Punica.

Tanaman delima merupakan tanaman tahunan yang mempunyai akar

tunggang dan sistem perakaran yang cukup dalam. Batang tanaman berkayu keras,

tegak lurus dan dapat tumbuh setinggi 2 m 4 m. Tanaman memiliki banyak

4

percabangan dan kadang-kadang ditumbuhi duri-duri yang agak besar. Daun-daun

tanaman berukuran kecil, berbentuk memanjang dan berwarna hijau tua sampai

hijau tua. Tanaman delima dapat berbunga dan berbuah sepanjang tahun.

Buah delima berbentuk bulat sampai bundar dan bergelantungan dalam

tandan. Buah muda berwarna hijau sampai hijau kemerah-merahan dan berubah

kecoklatan jika sudah matang. Daging buahnya merupakan kulit biji yang

menebal dan tersusun secara padat. Daging buah inilah yang dikonsumsi bersama

bijinya.

Delima mengandung tanin sekitar 2225 %, alkaloid peletierin,

metilpeletierin, pseudopeletierin dan isopeletierin (Mursito, 2012). Kandungan

tanin yang besar dalam delima ini berfungsi mengerutkan pori-pori (astrigen),

dengan demikian buah delima banyak dimanfaatkan sebagai bahan pelangsing.

Ekstrak Kulit Delima sebagai Pelangsing

Delima Terhadap Nafsu Makan dan Berat Badan Tikus Putih Jantan dengan Uji

masak dengan daging buah putih kekuningan mampu menurunkan nafsu makan

tikus putih jantan galur wistar yang ditandai dengan penurunan jumlah konsumsi

makanan, berat badan, dan kadar leptin selama 14 hari percobaan.

Riset itu memperlihatkan kelompok yang diberikan ekstrak kulit delima 3

g/kg berat badan (BB) dengan konsentrasi 30% menurunkan jumlah konsumsi

pakan tikus dari semula 7,94 g menjadi 5,59 g. Pengulangan sebanyak 2 kali

memperlihatkan penurunan konsumsi pakan di atas 50%. Singkat kata penelitian

tersebut membuktikan tanin pada ekstrak kulit delima dengan pelarut etanol 96%

berperan baik sebagai antiobesitas alias mencegah kegemukkan dengan

mempengaruhi nafsu makan.

2. Tanin

Tanin merupakan salah satu senyawa metabolit sekunder yang terdapat

pada tanaman dan disintesis oleh tanaman. Tanin tergolong senyawa polifenol

dengan karakteristiknya yang dapat membentuk senyawa kompleks dengan

makromolekul lainnya (Waghorn & McNabb, 2003; Westendarp, 2006). Tanin

merupakan senyawa polifenol dengan bobot molekul tinggi (1000-20000) yang

mengandung gugus hidroksil dan gugus lainnya (Cannas, 2001; Norton, 2000).

5

Di dalam tanin terdapat suatu senyawa yang memiliki rasa pahit dan dapat

mengikat serta mengendapkan atau menyusutkan protein. Senyawa tersebut

dinamakan astringent yang merupakan zat yang menyebabkan jaringan biologis

berkontraksi atau mengkerut. Ketika diterapkan pada jaringan hidup, astringent

menyebabkan jaringan untuk mengikat sehingga menjadi menyusut (mengkerut).

Zat astringent dari tannin menyebabkan rasa kering dan puckery (kerutan) di

dalam mulut setelah mengkonsumsi teh pekat, anggur merah atau buah yang

mentah (Ismarani, 2012).

Dengan adanya senyawa astringent ini menyebabkan terjadinya

mengendapkan mukosa protein di permukaan usus halus sekaligus mengurangi

penyerapan makanan sehingga proses obesitas menjadi terhambat.

Sifat-sifat Tanin Tumbuhan

Menurut Browning (1966) sifat utama tanin tumbuh-tumbuhan tergantung

pada gugusan phenolik -OH yang terkandung dalam tanin dan sifat tersebut secara

garis besar dapat diuraikan sebagai berikut:

a. Sifat Kimia Tanin

1) Tanin memiliki sifat umum, yaitu memiliki gugus phenol dan bersifat

koloid, sehingga jika terlarut dalam air bersifat koloid dan asam lemah.

2) Umumnya tanin dapat larut dalam air. Kelarutannya besar dan akan

meningkat apabila dilarutkan dalam air panas. Begitu juga tanin akan larut

dalam pelarut organik seperti metanol, etanol dan aseton.

3) Tanin akan terurai menjadi pyrogallol, pyrocatechol dan phloroglucinol bila

dipanaskan sampai suhu 210oF - 215

oF (98,89

oC - 101,67

oC).

4) Tanin dapat dihidrolisa oleh asam, basa dan enzim.

5) Ikatan kimia yang terjadi antara tanin-protein atau polimer-polimer lainnya

terdiri dari ikatan hidrogen, ikatan ionik dan ikatan kovalen.

b. Sifat Fisik Tanin

1) Umumnya tanin mempunyai berat molekul tinggi dan cenderung mudah

dioksidasi menjadi suatu polimer, sebagian besar tanin bentuknya amorf dan

tidak mempunyai titik leleh.

2) Tanin berwarna putih kekuning-kuningan sampai coklat terang, tergantung

dari sumber tanin tersebut.

6

3) Tanin berbentuk serbuk atau berlapis-lapis seperti kulit kerang, berbau khas

dan mempunyai rasa sepat (astrigent).

4) Warna tanin akan menjadi gelap apabila terkena cahaya langsung atau

dibiarkan di udara terbuka.

5) Tanin mempunyai sifat bakterostatik, fungistatik dan merupakan racun.

Proses Pemisahan Tanin

Tanin dapat diekstrak dengan menggunakan campuran pelarut atau pelarut

tunggal. Tanin biasanya diekstrak dari kayu dan kulit kayu pada jenis-jenis pohon

tertentu, untuk tujuan penelitian dalam menentukan struktur kimia, kualitas dan

kuantitasnya serta pemanfaatannya. Umumnya tanin diekstrak dengan

menggunakan pelarut air, karena lebih murah dengan hasil yang relatif cukup

tinggi, tetapi tidak menjamin jumlah senyawa polifenol yang ada dalam bahan

tannin tersebut (Hathway, 1962).

Browning (1966) menjelaskan bahwa untuk memperoleh ekstrak dengan

kualitas dan kuantitas yang tinggi, maka umumnya digunakan etanol atau aseton

dengan perbandingan volume air yang sebanding.

3. Permen Jeli

Permen jeli merupakan permen yang dibuat dari air atau sari buah dan

bahan pembentuk gel, yang berpenampilan jernih transparan serta mempunyai

tekstur dengan kekenyalan tertentu. Bahan pembentuk gel yang biasa digunakan

antara lain gelatin, karagenen dan agar. Penambahan bahan pengawet diperlukan

untuk memperpanjang waktu simpannya (Malik, 2010).

Kekerasan dan tekstur permen agar banyak bergantung pada bahan gel

yang digunakan. Jeli gelatin mempunyai konsistensi yang lunak dan bersifat

seperti karet sedangkan jeli agar-agar bersifat lunak dan agak rapuh. Pektin

menghasilkan gel yang sama dengan agar-agar, tetapi gelnya lebih baik pada pH

rendah, sedangkan karagenan mengasilkan gel yang bersifat larut air (Buckle et al

1987).

Permen jeli memiliki kecendrungan menjadi lengket karena sifat

higroskopis dari gula pereduksi yang membentuk permen, sehingga perlu

ditambahkan bahan pelapis. Permen jeli umumnya memerlukan bahan pelapis

berupa campuran tepung tapioka dengan tepung gula. Pelapisan ini berguna untuk

7

membuat permen tidak melekat satu sama lain dan juga untuk menambah rasa

manis (Kemenristek 2010).

H. METODE PENELITIAN

Populasi

Populasi (subjek penelitian) dari program ini adalah kulit delima dengan

kandungan taninnya untuk pelangsing dan dibuat permen jeli.

Pre Formulasi

1. Gula Tebu

Gula tebu adalah gula yang diperoleh dari tebu (Saccharum officinarum

L). Gula ini tidak mengandung zat kimia tambahan, berbentuk kristal tidak

berwarna, terdiri dari kristal putih bubuk, tidak berbau dan rasanya manis.

2. Gula Aren

Gula aren tersedia dalam bentuk kristal atau atau butiran pasir, warnanya

yang cenderung coklat kekuningan dan memiliki rasa yang manis.

3. Gula Jagung

Gula jagung tidak berbau, rasa manis, kristal berwarna atau sebagai kristal

jernih atau bubuk granular.

4. Gelatin

Gelatin berwarna putih kuning gading sampai berwarna kuning samar,

seperti kaca, padat rapuh. Tidak berbau dan tidak berasa dan tersedia sebagai

lembaran dan butiran transparan, atau sebagai serbuk.

5. Metil Paraben

Metil paraben merupakan kristal tidak berwarna atau serbuk kristal jernih.

Tidak berbau atau hampir tidak berbau dan memiliki rasa sedikit terbakar.

6. Asam Sitrat

Hablur bening, tidak berwarna atau serbuk hablur granul sampai halus,

putih; tidak berbau atau praktis tidak berbau; rasa sangat asam. Bentuk hidrat

mekar dalam udara kering.

Formulasi

Jika tikus putih membutuhkan ekstrak kulit delima sebanyak 3 g/kg BB,

maka manusia dengan berat badan 56 kg membutuhkan ekstrak kulit delima

8

sebanyak 9,8 gram dalam 1 hari. Dan untuk menghasilkan efek melangsingkan

maka harus dikonsumsi selama 14 hari.

Berat permen jeli 1 buah : 15 gram

Pembuatan untuk : 40 buah

Bahan F1 (Gula Tebu) F2 (Gula Aren) F3 (Gula Jagung)

Kulit buah delima 65 % 65 % 65 %

Gelatin 11 % 11 % 11 %

Gula 10 % 10 % 10 %

Metil paraben 0,05 % 0,05 % 0,05 %

Asam sitrat 0,05 % 0,05 % 0,05 %

Essens qs qs qs

Air 15 g 15 g 15 g

Metode penelitian

1. Pembuatan Ekstraksi Kulit Delima dengan Pelarut Etanol

Dengan menggunakan cara ekstraksi dengan pelarut etanol untuk

pemisahan, proses pembersihan kemudian langsung diblender tanpa

ditambahkan etanol. Setelah semua bahan diblender, kemudian dimasukkan ke

dalam erlenmeyer dan ditambahkan etanol. Perbandingan antara bahan dan

pelarut sama dengan ekstraksi menggunakan aquades. Larutan yang diperoleh

kemudian dimaserasi pada suhu ruang dengan kecepatan 35 rpm. Proses

maserasi adalah proses ekstraksi dengan cara perendaman dan pengadukan

secara terus-menerus selama 24 jam pada suhu ruang. Setelah satu malam,

larutan tersebut disaring menggunakan pompa vakum yang diberi kertas

saring Whatman No. 1 pada bagian atasnya. Hasil saringan yang diperoleh

kemudian dipekatkan menggunakan rotary vacuum evaporator pada suhu

55oC sehingga diperoleh ekstrak pekat.

2. Pembuatan Permen Jeli

Pada tahap ini dilakukan persiapan bahan-bahan dan alat-alat yang diperlukan

Bahan : Buah delima, agar-agar bubuk putih, gelatin, gula (gula jagung,

gula aren dan gula tebu), metil paraben, asam sitrar, air, air es dan tepung

tapioka secukupnya.

Alat-alat : Wadah plastik, kompor, panci, pengaduk, tempat cetakan,

blende, kemasan, dll.

Tahap tahap pembuatan agar kering secara garis besar adalah sebagai

berikut:

1. Aduk dan rendam gelatin, air es dan agar-agar bubuk selama 10 menit.

9

2. Kemudian cairkan dengan cara ditim diatas air panas.

3. Masak gula dan sampai gula mencair dan air mendidih.

4. Masukkan metil paraben, aduk rata dan kecilkan api.

5. Masukkan campuran gelatin dan essens, aduk sampai tercampur rata.

6. Biarkan permen kenyal yang sudah masak selama 15-30 menit dalam suhu

ruangan.

7. Cetak sesuai selera dan simpan dalam lemari pendingin dengan suhu 0-4oC

selama 12 jam.

8. Keluarkan dari cetakan dan lumuri dengan tapioka. Kemudian bungkus

dengan plastik kedap udara dan simpan di tempat yang kering.

Metode Pengujian

Uji Hedonik

Uji hedonik atau uji kesukaan yaitu uji organoleptik yang menunjukkan

derajat kuantitas kesukaan atau ketidaksukaan dari produk. Dalam penilaian uji

hedonik terdapat skala yang menunjukan tingkatan kesukaan panelis.

Pada penelitian ini akan dilakukan uji hedonik untuk mengetahui tingkat

kesukaan dari tiga permen jeli yang dibuat dengan gula yang berbeda. Pada uji ini

akan diikutsertakan 10 orang panelis yang akan melakukan uji coba terhadap 3

sample permen jeli. Dari 10 panelis tersebut akan dimintai pendapat permen jeli

mana yang paling disukai.

I. BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN

Anggaran Biaya

No Jenis Pengeluaran Biaya (Rp)

1 Peralatan Penunjang, ditulis sesuai kebutuhan (15-25%) 2.162.000

2 Bahan habis pakai, ditulis sesuai kebutuhan (20-35%) 984.000

3 Perjalanan, jelaskan kemana dan untuk tujuan apa (15-25%) 1.150.000

4 Lain-lain: administrasi, publikasi, seminar, laporan, lainnya

sebutkan (Maks. 15%)

1.550.000

Jumlah 5.846.000

10

Jadwal Kegiatan

No. Rincian Kegiatan Program

Pelaksanaan Bulan Ke-

1 2 3

1 Persiapan pelaksanaan program

2 Pemisahan biji delima, pembuatan ekstrasi,

pembuatan agar kering serta analisis data

3 Pembuatan laporan

11

J. DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 2013. Kulit Buah Delima Bikin Langsing.

. Diakses pada

13 Oktober 2013.

Ismarani. 2012. Potensi Senyawa Tanin dalam Menunjang Produksi Ramah

Lingkungan. . Diakses pada 13 Oktober 2013.

Jayanegara, A. dan A. Sofyan. 2008. Penentuan Aktivitas Biologis Tanin

Beberapa Hijauan secara in Vitro Menggun

dengan Polietilen Glikol Sebagai Determinan. . Diakses pada 14

Oktober 2013.

Krismawati, Agnes. 2007. Pengaruh Ektrak Tanaman Ceremai, Delima Putih,

Jati Belanda, Kecombrang, dan Kemuning Secara In Vitro Terhadap

Profilaksi Sel Limfosit Manusia. . Diakses pada 13

Oktober 2013.

Mursito, Bambang. 2012. Ramuan Tradisional Untuk Pelangsing Tubuh. Jakarta:

Penebar Swadaya.

Rowe, Raymon C., dkk. _____. Handbook of Pharmaceutical Exipied Fourth

Edition. London: Pharmaceutical Press.

Rukmana, Rahmat. 2003. Tabulampot: Delima. Yogyakarta: Kanisius.

Setyo, Adinda Virginia Dwi. 2010. Formulasi Sediaan Permen Kenyal dengan

Nanopartikel Propolis (Trigona spp) sebagai Antiplak Gigi. Bogor:

Universitas Pakuan.

Soesilo, Slamet, dkk. 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia.

http://www.ejournal-unisma.net/ojs/index.php/cefar/article/%20viewFile/659/591http://www.ejournal-unisma.net/ojs/index.php/cefar/article/%20viewFile/659/591http://journal.ipb.ac.id/%20index.php/mediapeternakan/article/view/1115/289http://journal.ipb.ac.id/%20index.php/mediapeternakan/article/view/1115/289http://repository.ipb.ac.id/bitstream/%20handle/123456789/2540/F07akr.pdf?sequence=4http://repository.ipb.ac.id/bitstream/%20handle/123456789/2540/F07akr.pdf?sequence=4