UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

UJI EFEKTIVITAS SEDIAAN GEL GETAH JARAK CINA (Jatropha multifida Linn.) UNTUK PENGOBATAN LUKA

BAKAR PADA TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR Sprague Dawley

SKRIPSI

FIKA FEBIATI NIM : 1112102000039

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA SEPTEMBER 2016

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

UJI EFEKTIVITAS SEDIAAN GEL GETAH JARAK CINA (Jatropha multifida Linn.) UNTUK PENGOBATAN LUKA

BAKAR PADA TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR Sprague Dawley

SKRIPSI

FIKA FEBIATI NIM : 1112102000039

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA SEPTEMBER 2016

iii

iv

v

vi

ABSTRAK

Nama : Fika Febiati

Program Studi : Farmasi

Judul :Uji Efektivitas Sediaan Gel Getah Jarak Cina (Jatropha

multifida Linn.) untuk Pengobatan Luka Bakar Pada Tikus

(Rattus norvegicus) Jantan Galur Sprague Dawley

Indonesia memiliki bermacam-macam tanaman obat tradisional untuk mengobati

luka bakar. Getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) adalah bahan alam yang

memiliki kandungan aktif seperti saponin, flavonoid, tanin dan iodin. Senyawa ini

dapat membantu mempercepat proses penyembuhan luka bakar. Penelitian ini

bertujuan untuk menguji efektivitas pemberian gel getah jarak cina untuk

pengobatan luka bakar derajat dua pada tikus putih (Rattus norvegicus) jantan

galur Sparague Dawley. Variasi gel yang digunakan dengan 3 konsentrasi berbeda

yaitu UKR (1%), UKS (3%) dan UKT (5%). Penelitian ini menggunakan tikus

putih (Rattus norvegicus) jantan galur Sparague Dawley yang dibagi dalam lima

kelompok yaitu KKP yang diberikan gel Bioskin

, KKN yang diberikan basis gel

dan tiga kelompok lain yang diberikan gel getah jarak cina dilakukan 2 kali

selama 21 hari. Tikus dilakukan perlakuan dan sampel kulit diambil untuk

pemeriksaan histopatologi setelah perlakuan hari ke-7 dan 14. Pemberiaan UKS

(3%) dua kali sehari sudah mampu mempercepat proses penyembuhan luka bakar

karena memiliki persentase penyembuhan luka sebesar 100% (p0,05).

Permukaan luka bakar pada hari ke-21, pemberian UKS (3%) dua kali sehari

sudah mampu menutupi permukaan luka secara sempurna dan terdapat bulu yang

menutupi luka. Perubahan fisiologis luka bakar pada UKS (3%) sudah mampu

mempercepat pembentukan dan pengelupasan keropeng. Secara mikroskopis pada

UKS (3%) sudah mampu menunjukkan peningkatan skor angiogenesis, fibroblas

dan re-epitelisasi serta menunjukkan penurunan skor sel radang setelah

penyembuhan luka bakar pada hari ke-7 dan hari ke-14 (p0,05).

Kata kunci : gel getah jarak cina, getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.),

dan luka bakar.

vii

ABSTRACT

Name : Fika Febiati

Program Study : Pharmacy

Title : The Effectiveness of Test Preparation Gel of Jarak Cina

Sap (Jatropha multifida Linn.) for the Treatment of Burn

Wound In Rats (Rattus norvegicus) Sprague Dawley Strain

Indonesia has a variety of traditional medicine plants to treat burn injuries. Jarak

cina sap (Jatropha multifida Linn.) is a natural material which has active

compounds such as saponins, flavonoids, tanins and iodines. Those compounds

are suspected to accelerate on burn wounds healing process. The aim of this

research is to know the effectiveness gel of jarak cina sap on 2nd

degree burns

healing in rats (Rattus norvegicus) Sprague Dawley strain. The variations gel

using three different concentration are UKR (1%), UKS (3%) and UKT (5%). The

research were used thirty rats who were divided into 5 groups; KKP that was

treated with the Bioskin

gel, KKN that was treated with the gel base, and three

other groups were treated with the gel of jarak cina sap were applied twice a day

during 21 days. Rats performed clinical measurements and skin samples taken for

histopathology examination after 7 and 14 days of treatment. The UKS (3%) were

applied twice a day already be able to accelerate on burn wounds healing process

with value 100% (p0,05). The surfaced burn wounds at 21 days, The UKS (3%)

were applied twice a day already be able to fill in surface wounds in a complete

and be found feather to fill in wounds. Transformation physiological burn wounds

on UKS (3%) already be able to accelerate formation and peeling the scab. As

microscopis on UKS (3%) already be able to showed increases angiogenesis,

fibroblast, and re-epithelialization, with decrease inflammatory cells more better

than other groups after 7 and 14 days of treatment burn wound (p0,05).

Keywords :gel of jarak cina latex, jarak cina latex (Jatropha multifida Linn.), and

burn wound.

viii

KATA PENGANTAR

Assalamualaikum Warahmatullahi Wabarakatuh.

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah S.W.T karena berkat

Rahmat dan Karunia-NYA penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi ini.

Shalawat beserta salam semoga senantiasa terlimpah curahkan kepada Nabi

Muhammad S.A.W., kepada keluarganya, para sahabatnya, hingga kepada

umatnya hingga akhir zaman, amiin.

Penulisan skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat

Memperoleh gelar Sarjana pada Program Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu

Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Judul yang

penulis ajukan adalah Uji Efektivitas Sediaan Gel Getah Jarak Cina (Jatropha

multifida Linn.) untuk Pengobatan Luka Bakar Pada Tikus Putih (Rattus

norvegicus) Jantan Galur Sprague Dawley.

Dalam penulisan skripsi ini tentunya tidak lepas dari kekurangan, baik

aspek kualitas maupun aspek kuantitas dari materi penelitian yang disajikan.

Semua ini didasarkan dari keterbatasan yang dimiliki penulis.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari sempurna sehingga penulis

membutuhkan kritik dan saran yang bersifat membangun. Selanjutnya dalam

penulisan skripsi ini penulis banyak diberi bantuan oleh berbagai pihak. Dalam

kesempatan ini penulis dengan tulus hati mengucapkan terimakasih kepada :

1. Allah S.W.T., Tuhan yang maha esa dimana penulis selalu berlindung dan

memohon atas petunjuk-Nya.

2. Puteri Amelia, M. Farm., Apt sebagai dosen pembimbing materi pertama

dan Dr. Azrifitria, M. Si., Apt sebagai dosen pembimbing materi kedua

yang selalu memberikan arahan serta meluangkan waktu, tenaga, dan juga

pikiran dalam penelitian dan penyusunan skripsi ini.

ix

3. Rr. Ayu Fitri Hapsari, Mbiomed yang telah membantu dan memberikan

arahan dalam proses pengamatan histologi.

4. Prof. Dr. H. Arif Sumantri, M. Kes selaku Dekan Fakultas Kedokteran dan

Ilmu Kesehatan, Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah

Jakarta.

5. Dr. Nurmeilis, M. Si., Apt selaku Ketua Program Studi Farmasi Fakultas

Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

6. Bapak/Ibu dosen yang telah memberikan ilmunya selama penulis

menempuh pendidikan di UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

7. Para staf karyawan dan laboran Program Studi Farmasi yang telah banyak

membantu berlangsungnya penelitian ini.

8. Orang tua penulis, Bapak Khuzaeni dan Ibu Trias Wigati yang selalu

memberikan support dalam penulisan skripsi ini dan doa mereka yang

tiada henti-hentinya. Kepada adik penulis, Arfianto Darmawan yang selalu

menghibur dan memberikan semangat serta doa.

9. Tania Rizki Amelia sebagai rekan yang berjuang bersama dalam

berlangsungnya penelitian ini.

10. Teman-teman Farmasi angkatan 2012 BD yang tidak membuat penulis

menyesal telah menjadi bagian dari kalian.

11. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah

membantu penulis selama ini.

Semoga Allah S.W.T memberikan balasan yang berlipat ganda kepada

semuanya. Akhirnya, hanya kepada-Nya penulis serahkan segalanya dan mudah-

mudahan dapat bermanfaat khususnya bagi penulis umumnya bagi kita semua.

Ciputat, 26 September 2016

Penulis

x

xi

DAFTAR ISI

Halaman HALAMAN SAMPUL .......................................................................................... i HALAMAN JUDUL .............................................................................................ii HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS .............................................. iii HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................iv HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. v ABSTRAK ........................................................................................................... vi ABSTRACT ........................................................................................................ vii KATA PENGANTAR ....................................................................................... viii HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH ...................... x DAFTAR ISI ........................................................................................................ xi DAFTAR GAMBAR ..........................................................................................xiv DAFTAR TABEL ................................................................................................xv DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................xvi BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1 1.1. Latar Belakang ............................................................................................ 1 1.2. Rumusan masalah ........................................................................................ 2 1.3. Tujuan Penelitian ........................................................................................ 3 1.4. Hipotesis ...................................................................................................... 3 1.5. Manfaat Penelitian ...................................................................................... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................... 5 2.1. Tanaman Jarak Cina ................................................................................... 5 2.1.1. Deskripsi Tanaman Jarak Cina .................................................................. 5 2.1.2. Klasifikasi Jarak Cina ............................................................................... 6 2.1.3. Habitat ....................................................................................................... 6 2.1.4. Kandungan Kimia ..................................................................................... 6 2.2. Freeze Drying ............................................................................................. 7 2.2.1. Pengertian Freeze Drying ........................................................................... 7 2.2.2. Prinsip Kerja Freeze Drying ...................................................................... 7 2.2.3. Cara Kerja Freeze Drying .......................................................................... 8 2.3. Tinjauan Hewan Percobaan ........................................................................ 8 2.3.1. Klasifikasi Tikus Putih ............................................................................... 8 2.3.2. Biologis Tikus Putih ................................................................................... 9 2.4. Gel ............................................................................................................ 10 2.4.1. Pengertian Gel .......................................................................................... 10 2.4.2. Klasifikasi Gel .......................................................................................... 10 2.4.3. Preformulasi Bahan Gel ........................................................................... 11 2.5. Luka Bakar ............................................................................................... 14 2.5.1. Pengertian Luka Bakar ............................................................................. 14 2.5.2. Derajat Luka Bakar .................................................................................. 14 2.5.3. Penyembuhan Luka Bakar ....................................................................... 15

xii

2.6. Berbagai Penelitian Mengenai Tanaman Jarak Cina................................18

BAB III METODOLOGI PENELITIAN ......................................................... 22 3.1. Tempat dan Waktu Penelitian .................................................................. 22 3.2. Waktu pengambilan getah ........................................................................ 22 3.3. Alat dan Bahan Penelitian ........................................................................ 22 3.3.1. Alat Penelitian .......................................................................................... 22 3.3.2. Bahan Penelitian ....................................................................................... 23 3.3.3. Hewan Uji ................................................................................................ 23 3.4. Rancangan Penelitian ............................................................................... 23 3.5. Kegiatan Penelitian .................................................................................. 25 3.5.1. Pemeriksaan Simplisia (Determinasi) ...................................................... 25 3.5.2. Penyiapan Simplisia ................................................................................. 25 3.5.3. Metode Pengeringan Freeze Drying ......................................................... 26 3.5.4. Skrining Fitokimia Ekstrak ...................................................................... 26 3.5.5. Pengujian Parameter Spesifik dan Non Spesifik ...................................... 27 3.5.6. Pembuatan Gel ekstrak getah jarak cina .................................................. 29 3.5.7. Evaluasi Fisik Sediaan Gel ....................................................................... 30 3.5.8. Uji Stabilitas Fisik Sediaan Gel ............................................................... 31 3.5.9. Penyiapan Hewan Uji ............................................................................... 31 3.5.10. Pembuatan Luka Bakar Derajat Dua ........................................................ 31 3.5.11. Pemberian Bahan Uji ............................................................................... 32 3.5.12. Pengamatan Secara Makroskopis ............................................................. 32 3.5.13. Persentase penyembuhan Luka Bakar ...................................................... 32 3.5.14. Perlakuan dan Pengamatan ...................................................................... 33 3.5.15. Pembuatan Preparat Histopatologi ........................................................... 33 3.5.16. Pengamatan Secara Mikroskopis ............................................................. 34 3.5.17. Skor Pembuluh Darah Baru (Angiogenesis) ............................................ 34 3.5.18. Skor Keberadaan Sel Radang (Limfosit, Neutrofil dan Makrofag) .......... 35 3.5.19. Skor Keberadaan Jaringan Ikat (Fibroblas)............................................... 35 3.5.20. Skor Re-epitelisasi .................................................................................... 35 3.5.21. Analisis Data Statistik .............................................................................. 36 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................37 4.1. Hasil Penelitian ........................................................................................37 4.1.1. Determinasi Tanaman .............................................................................. 37 4.1.2. Penyiapan Simplisia ................................................................................. 37 4.1.3. Pengeringan dengan Freeze Drying........................................ ................. 37 4.1.4. Hasil Skrining Fitokimia..........................................................................38 4.1.5. Hasil Penentuan Parameter Spesifik dan Non Spesifik............................38 4.1.6. Hasil Evaluasi Sediaan Gel........................................ .............................. 40 4.1.7. Hasil Evaluasi Uji Stabilitas Gel .............................................................. 40 4.1.8. Hasil Pengukuran Berat Badan Tikus..................................................... 42 4.1.9. Hasil Pengamatan Penyembuhan Luka Bakar......................................... 43 4.1.10. Hasil Pengamatan Secara Makroskopis................................................... 45 4.1.11. Hasil Pengamatan Secara Mikroskopis.................................................... 50

xiii

4.2. Pembahasan..............................................................................................64 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN..............................................................81 5.1. Kesimpulan...............................................................................................81 5.2. Saran.........................................................................................................81 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 83

xiv

DAFTAR GAMBAR

Halaman Gambar 2.1. Jarak Cina (Jatropha multifida Linn.)...............................................5 Gambar 2.2. Struktur Kimia Karbopol.................................................................11 Gambar 2.3. Struktur Kimia Gliserin...................................................................11 Gambar 2.4. Struktur Kimia TEA........................................................................12 Gambar 2.5. Struktur Kimia Natrium Metabisulfit..............................................12 Gambar 2.6. Struktur Kimia Metil Paraben ........................................................13 Gambar 2.7. Struktur Kimia Propil Paraben ......................................................13 Gambar 2.8. Derajat Luka Bakar.........................................................................15 Gambar 2.9. Fase Inflamasi.................................................................................16 Gambar 2.10. Fase Fibroblas.................................................................................16 Gambar 2.11. Fase Remodelling............................................................................17

xv

DAFTAR TABEL

Halaman Tabel 2.1. Data Biologis Tikus .............................................................................. 9 Tabel 3.1. Pembagian Kelompok Hewan Uji Berdasarkan Perlakuan ................. 24 Tabel 3.2. Formulasi Basis Gel Karbopol 940 ..................................................... 29 Tabel 3.3. Formulasi Gel Uji 15 gram ................................................................. 29 Tabel 4.1. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Getah Jarak Cina ........................... 38 Tabel 4.2. Hasil Penentuan Parameter Spesifik dan Parameter Non Spesifik ..... 39 Tabel 4.3. Hasil Evaluasi Fisik Sediaan Gel ....................................................... 40 Tabel 4.4. Hasil Uji Stabilitas Fisik Sediaan Gel ................................................ 41 Tabel 4.5. Hasil Rerata Berat Badan Tikus Selama Perlakuan ........................... 42 Tabel 4.6. Hasil Analisis one way ANOVA Berat Badan Tikus .......................... 42 Tabel 4.7. Rerata Persentase Penyembuhan Luka Bakar .................................... 43 Tabel 4.8. Hasil Analisis Kruskall-Wallis Persentase Penyembuhan Luka ........ 44 Tabel 4.9. Hasil Analisis Post Hoc Persentase Penyembuhan Luka ................... 44 Tabel 4.10. Pengamatan Luka Bakar Pada Hari Ke-21 ........................................ 46 Tabel 4.11. Hasil Pengamatan Visual Fisiologis Luka Bakar ............................... 48 Tabel 4.12. Pengamatan Visual Fisiologis Luka Bakar ........................................ 49 Tabel 4.13. Pengamatan Angiogenesis Perbesaran 100 ...................................... 51 Tabel 4.14. Hasil Skor Parameter Angiogenesis Hari Ke-7 dan Hari Ke-14 ......... 52 Tabel 4.15. Hasil Analisis one way ANOVA Skor Angiogenesis .......................... 52 Tabel 4.16. Hasil Analisis Post Hoc Skor Angiogenesis Hari Ke-7 ...................... 53 Tabel 4.17. Hasil Analisis Post Hoc Skor Angiogenesis Hari Ke-14 .................... 53 Tabel 4.18. Pengamatan Sel Radang Perbesaran 200 ......................................... 54 Tabel 4.19. Hasil Skor Parameter Sel Radang Hari Ke-7 dan Hari Ke-14 ............ 55 Tabel 4.20. Hasil Analisis one way ANOVA Skor Sel Radang ............................. 55 Tabel 4.21. Hasil Analisis Post Hoc Skor Sel Radang Hari Ke-7 ......................... 56 Tabel 4.22. Hasil Analisis Post Hoc Skor Sel Radang Hari Ke-14 ....................... 56 Tabel 4.23. Pengamatan Fibroblas Perbesaran 200 ............................................ 57 Tabel 4.24. Hasil Skor Parameter Fibroblas Hari Ke-7 dan Hari Ke-14 ............... 58 Tabel 4.25. Hasil Analisis one way ANOVA Skor Fibroblas ................................ 58 Tabel 4.26. Hasil Analisis Post Hoc Skor Fibroblas Hari Ke-7 ............................ 59 Tabel 4.27. Hasil Analisis Post Hoc Skor Fibroblas Hari Ke-14 .......................... 60 Tabel 4.28. Pengamatan Re-epitelisasi Perbesaran 100....................................... 61 Tabel 4.29. Hasil Skor Parameter Re-epitelisasi Hari Ke-7 dan Hari Ke-14 ......... 61 Tabel 4.30. Hasil Analisis one way ANOVA Skor Re-epitelisasi .......................... 62 Tabel 4.31. Hasil Analisis Post Hoc Skor Re-epitelisasi Hari Ke-7 ...................... 62 Tabel 4.32. Hasil Analisis Post Hoc Skor Re-epitelisasi Hari Ke-14 .................... 63

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Prosedur kerja .................................................................................. 91 Lampiran 2. Determinasi Tanaman Jatropha multifida Linn. ............................. 92 Lampiran 3. Sertifikat Tikus Putih Jantan Galur Sprague Dawley ...................... 93 Lampiran 4. Ethical Clearance Komite Etik Penelitian Kesehatan FKUI .......... 94 Lampiran 5. Perhitungan Rendemen .................................................................... 95 Lampiran 6. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Getah Jarak Cina ........................ 96 Lampiran 7. Pemeriksaan Parameter Non Spesifik ............................................. 98 Lampiran 8. Tahapan Pengukuran Luas Luka Bakar .......................................... 99 Lampiran 9. Data Persentase Penyembuhan Luka Bakar ................................. 100 Lampiran 10. Hasil Analisis Statistik Persentase Penyembuhan Luka Bakar .... 101 Lampiran 11. Hasil Analisis Statistik One way ANOVA Berat Badan Tikus ...... 111 Lampiran 12. Hasil Analisis Statistik One way ANOVA Skor Parameter Luka...122

1

BAB I PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Luka bakar merupakan respon kulit pada jaringan subkutan terhadap

trauma suhu/termal (Grace, 2006). Luka bakar pada tubuh dapat terjadi oleh dua

penyebab yaitu kondisi panas langsung dan radiasi elektromagnetik (Moenadjat,

2003). Luka bakar termasuk kecelakaan yang sering terjadi dalam kehidupan

sehari-hari khususnya dirumah tangga dan sering ditemukan adalah luka bakar

derajat dua (Ulfa, 2015). Penyembuhan luka bakar dapat dipercepat dengan cara

mencegah terjadinya infeksi, memacu pembentukan serabut kolagen dan

mengupayakan agar sisa-sisa sel epitel dapat berkembang dengan baik sehingga

dapat menutup permukaan luka (Sjamsuhidajat, 2004).

Luka bakar banyak alternatif pengobatannya, yaitu dapat menggunakan

industri obat farmasi ataupun dengan cara pengobatan tradisional melalui

pemanfaatan jenis tanaman yang tersedia di alam. Meskipun terdapat kemajuan

yang luar biasa dalam industri obat farmasi, ketersediaan obat yang mampu

merangsang proses perbaikan luka masih terbatas. Pengobatan tradisional banyak

dilakukan karena lebih murah, mudah didapatkan, dan memberi efek samping

relatif lebih rendah (Kumar, 2007).

Eksplorasi lebih lanjut dari salah satu jenis tanaman yang bernama jarak

cina (Jatropha multifida Linn.) dapat digunakan sebagai obat luka. Berdasarkan

pengalaman empiris, getah jarak cina digunakan sebagai obat luar seperti luka

baru dan untuk mengobati berbagai jenis infeksi dengan langsung mengoleskan

getah jarak cina pada luka tersebut (Hariana, 2013). Kajian etnobotani jarak cina

sebagai tanaman obat telah dilakukan oleh masyarakat Aceh untuk mengobati

luka baru di Kabupaten Pidie (Agustina, 2008). Tanaman jarak cina mengandung

aktivitas antiinflamasi dan aktivitas antibiotik yang dapat digunakan sebagai

penyembuhan luka. Senyawa flavonoid, saponin, dan tanin memiliki aktivitas

antiinflamasi yang digunakan untuk penyembuhan luka dalam kecepatan

terbentuknya keropeng (Suarsini E., 2006). Senyawa tanin yang memiliki aktivitas

sebagai antibiotik juga dapat menyembuhkan luka karena terjadi proses

2

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

pengendapan protein darah sehingga terjadi gumpalan yang dapat menghambat

aliran darah (Fehlin, 2003).

Penelitian terdahulu menggunakan getah jarak cina dapat mempercepat

proses menutupnya luka sayat dibandingkan tanpa perlakuan dan setara dengan

pemberian povidone iodine 10% pada mencit betina galur Swiss Webster (Aditya,

2007). Penelitian lain menyebutkan bahwa pemberian ozon yang diberikan selama

5 menit lebih baik dalam mempercepat proses penyembuhan luka sayat

dibandingkan getah jarak cina dan povidone iodine 10% secara topikal pada

mencit betina galur Swiss Webster (Dewiyanti, 2009). Getah jarak cina juga

memiliki potensi yang sama dengan betadin dalam waktu terbentuknya keropeng

pada luka (Syarfati, 2011). Sediaan krim getah jarak cina pada luka sayat yang

terinfeksi bakteri Staphylococcus aureus pada kelinci (Orytolagus cuniculus)

dapat mempercepat waktu penyembuhan luka, terbentuknya keropeng (scab),

hingga hilangnya nanah, dan terjadi proses penutupan luka (Miryam Ch.

Muntiaha, 2014). Penelitian ini menggunakan sediaan gel getah jarak cina pada

luka bakar derajat dua pada kulit tikus putih (Rattus norvegicus) jantan galur

Sprague Dawley. Pembuatan luka bakar derajat dua menggunakan metode

Akhoondinasab dengan menggunakan plat besi 42 cm pada air mendidih selama

5 menit dan ditempelkan pada kulit punggung tikus selama 10 detik dengan

tekanan yang sama. Penelitian ini berupa pengamatan penyembuhan luka,

pengamatan luka secara makroskopis dan pengangamatan luka secara

mikroskopis.

1.2. Rumusan masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka dapat disusun perumusan

masalah sebagai berikut:

1. Bagaimana pengaruh pemberiaan berbagai konsentrasi (1%, 3% dan 5%)

gel getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) terhadap penyembuhan luka

bakar derajat dua pada kulit tikus putih secara makroskopis?

2. Bagaimana pengaruh pemberiaan berbagai konsentrasi (1%, 3% dan 5%)

gel getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) terhadap penyembuhan luka

bakar derajat dua pada kulit tikus putih secara mikroskopis?

3

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

1.3. Tujuan Penelitian

1.3.1. Tujuan umum

Berdasarkan perumusan masalah di atas, maka tujuan umum penelitian ini

adalah untuk menguji pemberiaan berbagai konsentrasi (1%, 3% dan 5%) gel

getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) terhadap efektivitas penyembuhan luka

bakar derajat dua pada kulit tikus putih.

1.3.2. Tujuan khusus

Berdasarkan perumusan masalah di atas, maka tujuan khusus penelitian ini

adalah:

1. Untuk menguji pemberian berbagai konsentrasi (1%, 3% dan 5%) gel

getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) secara makroskopis terhadap

persentase penyembuhan luka, permukaan luka bakar pada hari ke-21, dan

perubahan fisiologis luka bakar pada kulit tikus putih.

2. Untuk menguji pemberian berbagai konsentrasi (1%, 3% dan 5%) gel

getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) secara mikroskopis terhadap

angiogenesis, sel radang, fibroblas, dan re-epitelisasi pada kulit tikus putih.

1.4. Hipotesis

Berdasarkan tujuan penelitian di atas, maka hipotesis penelitian ini adalah:

1. Pemberian konsentrasi 3% gel getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.)

secara makroskopis dapat mempercepat penyembuhan luka bakar derajat

dua pada kulit tikus putih.

2. Pemberian konsentrasi 3% gel getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.)

secara mikroskopis dapat meningkatkan angiogenesis, fibroblas, dan re-

epitelisasi, serta mengurangi sel radang pada kulit tikus putih.

4

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

1.5. Manfaat Penelitian

Hasil penelitian ini dapat memberikan manfaat antara lain:

1. Menambah informasi kepada masyarakat sebagai pilihan dalam tata

laksana awal menggunakan getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.)

dalam mempercepat penyembuhan luka bakar.

2. Memberikan informasi dalam pengembangan ilmu pengetahuan tentang

terapi getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) yang dapat digunakan

untuk pengobatan luka bakar.

3. Menjadi bahan referensi atau pustaka untuk dapat dikembangkan dalam

penelitian selanjutnya.

5

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Tanaman Jarak Cina

2.1.1. Deskripsi Tanaman Jarak Cina

Tanaman jarak cina (Jatropha multifida Linn.) digunakan sebagai bahan

utama dalam pengobatan tradisional, baik dari buah, biji, daun, akar, dan

getahnya. Getah tanaman jarak ini dapat digunakan sebagai bahan pembantu

dalam penyembuhan luka-luka (V. Alekhya, 2013).

Tinggi tanaman jarak cina dapat mencapai 2 meter. Batangnya berbentuk

bulat, berkayu yang membesar pada bagian pangkalnya, memiliki getah dan

tampak jelas bekas menempelnya daun. Jika batang masih muda berwarna hijau

dan jika batang menjadi tua berwarna putih kehijauan. Daun yang masih muda

belum terlihat bentuk gerigi diujungnya. Jarak cina berdaun tunggal berwarna

hijau yang tersebar, berbentuk hati dengan ujung runcing, pangkal yang

membulat, memiliki panjang 15-20 cm, lebar 2,5-4 cm, bercanggap, pertulangan

daun yang menjari dan tepi rata. Berbunga majemuk dan berbentuk malai,

bertangkai, tumbuh di setiap ujung cabang, jika masih muda berwarna hijau,

sedangkan setelah tua berwarna coklat (Kandowangko, 2011).

Gambar 2.1. Jarak Cina (Jatropha multifida Linn.)

Sumber : www. darsatop.lecture.ub.ac.id

6

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.1.2. Klasifikasi Jarak Cina

Dalam taksonomi, kedudukan Jatropha multifida Linn. dapat

diklasifikasikan sebagai berikut :

Kingdom : Plantae

Subkingdom : Tracheobionta

Superdivision : Spermatophyta

Division : Magnoliophyta

Class : Magnoliopsida

Order : Euphorbiales

Family : Euphorbiaceae

Genus : Jatropha

Spesies : Jatropha multifida Linn.

(Sumber : http://plants.usda.gov/core/profile?symbol=JAMU)

2.1.3. Habitat

Jarak cina merupakan tanaman hias di Australia Utara dan Afrika

Tenggara, terdapat juga di Filipina dan Srilanka terutama Pulau Jawa dan

Sulawesi (Sabandar). Jarak cina hidup pada iklim tropis dengan curah hujan

tahunan sekitar 944 dan 3121 mm. Jarak cina dapat hidup pada daerah yang

kurang subur asalkan pH tanahnya 6-7 dan drainasenya baik, sebab akar jarak cina

tidak tahan terhadap genangan air. Jarak ini merupakan tanaman yang tumbuh

pada ketinggian 0-800 m diatas permukaan laut, tingginya mencapai 2-3 m

(Haryanto, 2009).

2.1.4. Kandungan Kimia

Jarak cina memiliki rasa agak pahit dan bersifat netral. Beberapa bahan

kimia yang terkandung dalam jarak cina, diantaranya amirin, kampesterol, 7--

diol, stimasterol, -sitosterol, dan HCN. Selain itu, batangnya mengandung

alkaloid, saponin, flavonoid, dan tanin (Hariana, 2013).

7

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.2. Freeze Drying

2.2.1. Pengertian Freeze Drying

Freeze drying merupakan suatu alat pengeringan. Alat pengeringan ini

termasuk kedalam conduction dryer/indirect dryer karena proses perpindahan

terjadi secara tidak langsung yaitu antara bahan yang akan dikeringkan (bahan

basah) dan media pemanas terdapat dinding pembatas sehingga air dalam bahan

basah/lembab yang menguap tidak terbawa bersama media pemanas (Ansel,

1989). Freeze drying merupakan jenis dehidrasi untuk memisahkan air dari bahan

hayati, dengan cara membekukan bahan itu kemudian diletakkan dalam ruang

vakum sehingga es menguap (bersublimasi) ke dalam ruang hampa meninggalkan

bahan sisa yang tidak rusak (Hadyana, 2003). Pengeringan menggunakan alat

freeze drying lebih baik dibandingkan dengan menggunakan alat oven karena

memiliki kadar air yang lebih rendah. Pengeringan menggunakan alat freeze

drying juga lebih aman terhadap resiko terjadinya proses degradasi senyawa

dalam ekstrak. Hal ini disebabkan suhu yang digunakan pada alat feeze drying ini

cukup rendah untuk mengeringkan ekstrak (Muchtadi, 1992).

2.2.2. Prinsip Kerja Freeze Drying

Freeze drying menggunakan prinsip kerja berdasarkan proses liofilisasi.

Tahapan-tahapan yang terjadi pada alat freeze drying ada empat yaitu :

a. Pembekuan : Produk yang akan dikeringkan, sebelumnya dibekukan

terlebih dahulu.

b. Vakum : Setelah beku, produk ini ditempatkan dibawah vakum. Hal

ini memungkinkan pelarut beku dalam produk untuk sublimasi.

c. Panas : Panas diterapkan pada produk beku untuk mempercepat

terjadinya sublimasi.

d. Kondensasi : Kondensor dengan suhu rendah akan menghapus pelarut

yang menguap diruang vakum dengan mengubahnya kembali ke fase padat

(Kurniawan, 2012).

8

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.2.3. Cara Kerja Freeze Drying

Pertama-tama produk didinginkan di bawah suhu bekunya. Produk ini

harus beku, dikeringkan pada temperatur sedikit lebih rendah dari pendinginnya,

yang diperlukan untuk menyelesaikan pengeringan primer. Setelah produk ini

cukup beku, sistem ini diproses menggunakan pompa vakum. Pada proses ini

disebut pengeringan primer.

Sistem vakum sangat penting selama pengeringan beku karena tekanan

harus dipertahankan pada tingkat rendah untuk memastikan aliran uap air yang

cukup untuk produknya. Pengukur tekanan vakum digunakan untuk memonitor

tekanan dalam sistem selama proses pengeringan. Pompa vakum tersebut juga

akan menyedot pelarut yang telah beku menjadi uap (Anonim, 2010).

2.3. Tinjauan Hewan Percobaan

2.3.1. Klasifikasi Tikus Putih

Klasifikasi tikus putih (Rattus norvegicus) adalah sebagai berikut (Krinke,

2000) :

Kingdom : Animalia

Phylum : Chordata

Subphylum : Vertebrata

Class : Mammalia

Ordo : Rodensia

Family : Muridae

Subfamily : Murinae

Genus : Rattus

Spesies : Rattus norvegicus

9

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.3.2. Biologis Tikus Putih

Hewan percobaan merupakan setiap hewan yang dipergunakan pada

sebuah penelian biologis dan biomedis yang dipilih berdasarkan syarat atau

standar dasar yang diperlukan dalam penelitian tersebut (Smith dan

Mangkoewidjojo, 1988).

Tikus tergolong hewan mamalia, oleh karena itu mungkin tidak jauh

berbeda dibanding dengan mamalia lainnya terhadap suatu perlakuan. Selain itu,

penggunaan tikus sebagai hewan percobaan didasarkan pada harga yang ekonomis

dan kemampuan hidup tikus hanya berkisar 2-3 tahun dengan lama produksi 1

tahun. Dalam penelitian ini digunakan galur Sparague Dawley dengan memiliki

ciri-ciri bulu yang berwarna putih, memiliki kepala kecil dan ekor lebih panjang

daripada badannya (Smith dan Mangkoewidjojo, 1988). Keuntungan

menggunakan tikus ini adalah ketenangan dan kemudahan dalam proses

penanganannya (Kusumawati,2014).

Tabel 2.1. Data Biologis Tikus (Smith dan Mangkowidjojo, 1988)

Lama hidup 2-3 tahun, dapat sampai 4 tahun

Lama produksi ekonomis 1 tahun

Lama bunting 20-22 hari

Umur dewasa 40-60 hari

Umur dikawinkan 8-10 minggu (jantan dan betina)

Siklus kelamin Poliestrus

Siklus estrus 4-5 hari

Lama estrus 9-20 jam

Perkawinan Pada waktu estrus

Ovulasi 8-11 jam sesudah timbul estrus, spontan

Fertilisasi 7-10 jam sesudah kawin

Berat dewasa 300-400 g jantan; 250-300 g betina

Suhu (rektal) 360-390C (rata-rata 37,50C)

Konsumsi makanan 15-30 g/hari (dewasa)

Konsumsi minuman 20-45 l/hari (dewasa)

10

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.4. Gel

2.4.1. Pengertian Gel

Gel kadang-kadang disebut jeli. Gel merupakan sistem semipadat terdiri

dari suspensi yang dibuat dari partikel anorganik yang kecil atau melekul organik

yang besar, terpenetrasi oleh suatu cairan (FI IV, 1995).

Pertimbangan harga dapat menyebabkan pilihan jatuh pada zat pembentuk

gel yang mampu dalam konsentrasi rendah dan menghasilkan karakteristik yang

diinginkan. Gel seharusnya hanya menunjukkan perubahan viskositas yang relatif

kecil pada variasi normal temperatur kamar dan pemakaian (Agoes & Darijanto,

1993).

2.4.2. Klasifikasi Gel

Berdasarkan sifat fase koloidal klasifikasi gel dapat dikelompokkan

menjadi gel organik dan anorganik. Magma bentonit merupakan contoh dari gel

anorganik, sedangkan gel organik merupakan polimer sebagai pembentuk gel.

Gom alam seperti gom arab, karagen dan gom xantan adalah polisakarida anionik

sejumlah selulosa yang merupakan hasil sintesa, merupakan pembentuk gel yang

efektif seperti hidroksipropil selulosa dan metil hidroksipropil selulosa. Sifat

pelarut dapat menentukan apakah gel merupakan hidrogel (dasar air) atau organo

gel (dengan pelarut bukan air). Sebagai contoh adalah magma bentonit dan gelatin

merupakan hidrogel, sedangkan organo gel adalah plastibase yang merupakan

polietilen berbobot molekul rendah yang dilarutkan dalam minyak mineral dan

didinginkan secara cepat. Gel padat dengan konsentrasi pelarut rendah dikenal

sebagai xero gel, sering dihasilkan dengan cara penguapan pelarut, sehingga

menghasilkan kerangka gel (Lieberman, 1996).

11

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.4.3. Preformulasi Bahan Gel

a. Karbopol

Gambar 2.2. Struktur Kimia Karbopol

(Sumber : Rowe, 2003)

Serbuk putih, bersifat asam, higroslopis dengan bau khas, polimer asam

akrilat yang mempunyai ikatan sambung silang dengan polialkenil

eter/divinil glikol. Dapat larut dalam air dan larut dalam etanol 95% dan

gliserin. pH 2,5-3. Konsentrasi 0,5-2%. Dapat larut dalam air membentuk

koloid bersifat asam dengan viskositas rendah dan setelah dinetralkan

dapat larut dengan etanol 95% dan gliserin serta viskositasnya meningkat.

Zat untuk menetralkan yaitu asam amino, KOH, natrium bikarbonat,

NaOH, dan TEA. Dapat disimpan dalam wadah yang tertutup rapat

ditempat sejuk, kering, dan resisten terhadap zat korosif (Wade, 2013).

b. Gliserin

Gambar 2.3. Struktur Kimia Gliserin

(Sumber : HOPE, 2000)

Gliserin tidak berwarna, tidak berbau, kental, cairan higroskopis, memiliki

rasa manis, kira-kira 0,6 kali dari sukrosa. Gliserin murni tidak rentan

terhadap oksidasi oleh suasana di bawah kondisi penyimpanan biasa, tetapi

terurai pada pemanasan. Campuran gliserin dengan air, etanol (95%), dan

propilen glikol bersifat stabil. Pada sediaan topikal gliserin digunakan

sebagai emolien dan humektan (Rowe, 2003). Fungsi sebagai penambahan

bahan higroskopis. Konsentrasi gliserin sebagai humektan dan emolient

12

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

yaitu sebesar 30% (HOPE, 2000). Bersifat higroskopis. Jika disimpan

beberapa lama pada suhu rendah dapat memadat membentuk massa hablur

tidak berwarna yang tidak melebur hingga suhu mencapai lebih kurang

200C (FI III, 1979).

c. TEA

Gambar 2.4. Struktur kimia TEA

(Sumber : HOPE, 2000)

Trietanolamina adalah bersih, sedikit berwarna kuning pucat kental cair,

memiliki bau sedikit amonia. Trietanolamina dapat berubah coklat pada

paparan udara dan cahaya. Trietanolamina harus disimpan dalam wadah

kedap udara dan terlindung dari cahaya, sejuk dan kering. Fungsi sebagai

alkalizing agent dan zat pengemulsi (HOPE, 2000). TEA dapat digunakan

pada sediaan topikal karena dapat membentuk emulsi (Rowe, 2003).

Trietanolamina adalah campuran dari trietanolamina, dietanolamina dan

monoetanolamina. Mengandung tidak kurang dari 99,0% dan tidak lebih

dari 107,4% dihitung terhadap zat anhidrat sebagai trietanolamina. Mudah

larut dalam air dan dalam etanol 95%, larut dalam kloroform.

Penyimpanan dalam wadah tertutup rapat terlindung dari cahaya (FI III,

1979).

d. Natrium metabisulfit

Gambar 2.5. Struktur Kimia Natrium Metabisulfit

(Sumber : FI III, 1979)

Kristal prisma tidak berwarna/serbuk kristalin putih dan mempunyai bau

khas sulfur dioksida. Untuk penggunaan antioksidan yang digunakan

sebagai topikal memili

dalam etanol 95% dan larut dalam air (1 bagia

(Rowe, 2006). Penyimpanan dalam wadah tertutup baik (FI III, 1979).

e. Metil paraben

Nipagin atau metil paraben merupakan serbuk kristal putih atau tidak

berwarna dan tidak berbau. Larut dalam etanol dan propilen glikol, sedikit

larut dalam air. Memiliki aktivitas sebagai pengawet antimikroba untuk

sediaan kosmetik, makanan dan

yang besar dan mempunyai spektrum antimikroba yang luas meskipun

lebih efektif terhadap jamur dan kapang. Campuran paraben digunakan

untuk mendapatkan pengawet yang efektif. Konsentrasi yang digunakan

untuk sediaan

f. Propil paraben

Nipasol atau propil paraben merupakan serbuk kristal putih atau tidak

bewarna dan tidak berbau. Larut dalam etanol dan

larut dalam air. Propil paraben yang memiliki aktivitas sebagai

antimikroba, umumnya digunakan sebagai pengawet untuk sediaan

farmasi, kosmetik dan makanan. Konsentrasi yang digunakan untuk

sediaan topikal adalah 0,01

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

sebagai topikal memiliki rentang konsentrasi 0,01-0,1% b/v. Agak larut

dalam etanol 95% dan larut dalam air (1 bagian dalam 1,9 bagian air)

, 2006). Penyimpanan dalam wadah tertutup baik (FI III, 1979).

Metil paraben

Gambar 2.6. Struktur Kimia Metil Paraben

(Sumber : FI III, 1979)

Nipagin atau metil paraben merupakan serbuk kristal putih atau tidak

berwarna dan tidak berbau. Larut dalam etanol dan propilen glikol, sedikit

larut dalam air. Memiliki aktivitas sebagai pengawet antimikroba untuk

sediaan kosmetik, makanan dan sediaan farmasi. Efektif pada rentang pH

yang besar dan mempunyai spektrum antimikroba yang luas meskipun

lebih efektif terhadap jamur dan kapang. Campuran paraben digunakan

untuk mendapatkan pengawet yang efektif. Konsentrasi yang digunakan

topikal adalah 0,02-0,3% (Wade & Weller, 2013

Propil paraben

Gambar 2.7. Struktur Kimia Propil Paraben

(Sumber : FI III, 1979)

Nipasol atau propil paraben merupakan serbuk kristal putih atau tidak

bewarna dan tidak berbau. Larut dalam etanol dan propilen glikol, sedikit

larut dalam air. Propil paraben yang memiliki aktivitas sebagai

antimikroba, umumnya digunakan sebagai pengawet untuk sediaan

farmasi, kosmetik dan makanan. Konsentrasi yang digunakan untuk

sediaan topikal adalah 0,01-0,6% (Wade & Weller, 2013).

13

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

% b/v. Agak larut

n dalam 1,9 bagian air)

, 2006). Penyimpanan dalam wadah tertutup baik (FI III, 1979).

Nipagin atau metil paraben merupakan serbuk kristal putih atau tidak

berwarna dan tidak berbau. Larut dalam etanol dan propilen glikol, sedikit

larut dalam air. Memiliki aktivitas sebagai pengawet antimikroba untuk

sediaan farmasi. Efektif pada rentang pH

yang besar dan mempunyai spektrum antimikroba yang luas meskipun

lebih efektif terhadap jamur dan kapang. Campuran paraben digunakan

untuk mendapatkan pengawet yang efektif. Konsentrasi yang digunakan

0,3% (Wade & Weller, 2013).

Nipasol atau propil paraben merupakan serbuk kristal putih atau tidak

propilen glikol, sedikit

larut dalam air. Propil paraben yang memiliki aktivitas sebagai

antimikroba, umumnya digunakan sebagai pengawet untuk sediaan

farmasi, kosmetik dan makanan. Konsentrasi yang digunakan untuk

14

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.5. Luka Bakar

2.5.1. Pengertian Luka Bakar

Luka bakar merupakan respon kulit dan jaringan subkutan terhadap trauma

suhu/termal. Luka bakar dengan ketebalan parsial merupakan luka bakar yang

tidak merusak epitel kulit maupun hanya merusak sebagian dari epitel. Biasanya

dapat pulih dengan penanganan konservatif. Luka bakar dengan ketebalan penuh

merusak semua sumber-sumber pertumbuhan kembali epitel-epitel kulit dan bisa

membutuhkan eksisi dan cangkok kulit jika luas (Grace, 2006).

2.5.2. Derajat Luka Bakar

Derajat luka bakar dinyatakan dengan beratnya luka yang bergantung pada

kedalaman, luas dan letak luka. Kedalaman luka bakar ditentukan oleh tingginya

suhu dan lamanya pajanan suhu tinggi (Sjamsuhidajat, 2004).

a. Luka bakar derajat 1 : Pada luka bakar derajat ini hanya mengenai

epidermis dan ditandai dengan adanya pembengkakan, eritema, dan nyeri

(serupa dengan terbakar matahari ringan). Kerusakan pada jaringan ini

biasanya minimal dan tanpa bulla. Nyeri menghilang selama 48-72 jam

dan pada sebagian kecil pada penderita ini terdapat kerusakan pada epitel

dan akan terkelupas, tetapi tidak meninggalkan jaringan parut (Nelson,

2000).

b. Luka bakar derajat 2 : Pada luka bakar derajat ini mengenai seluruh

epidermis dan sebagian lapisan dermal. Pada luka bakar ini terdapat

pembentukan vesikula dan bulla (Nelson, 2000).

c. Luka bakar derajat 3 : Luka bakar ini meliputi kerusakan seluruh

epidermis dan dermis, tanpa meninggalkan sisa-sisa sel epidermis untuk

mengisi kembali daerah yang rusak. Tidak dapat terjadi epitelisasi luka,

sehingga luka ini dapat sembuh dengan kontraksi luka atau cangkok kulit.

Hilangnya rasa sakit dan pengisian kapiler menunjukkan kehilangan

elemen saraf dan kapiler (Nelson, 2000).

15

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Gambar 2.8. Derajat Luka Bakar

(Sumber : https://www.histology-world.com)

2.5.3. Penyembuhan Luka Bakar

Penyembuhan luka adalah proses dari bentuk usaha untuk memperbaiki

kerusakan yang dialami korban. Fisiologi penyembuhan luka secara alami akan

mengalami fase-fase seperti dibawah ini :

a. Fase inflamasi

Respon inflamasi terhadap terjadinya cedera mencakup hemostasis

pelepasan histamin dan mediator lain dari sel yang rusak, dan migrasi sel

darah putih (Leukosit Polimorfonuklear dan makrofag) ke tempat yang

rusak tersebut. Setelah terjadinya luka, pembuluh darah yang putus akan

mengalami konstriksi dan retraksi disertai reaksi hemostasis karena

agregasi trombosit yang bersama jala fibrin membekukan darah.

Komponen hemostasis ini akan melepaskan dan mengaktifkan sitokin yang

meliputi Epidermal Growth Factor (EGF), Insulin-like Growth Factor

(IGF), Plateled-derived Growth Factor (PDGF) dan Transforming Growth

Factor beta (TGF-) yang dapat berfungsi untuk terjadinya kemotaksis

netrofil, makrofag, mast sel, sel endotelial dan fibroblas. Keadaan ini

disebut fase inflamasi. Kemudian terjadi vasodilatasi dan akumulasi

Leukosit Polimorfonuklear (PMN). Trombosit akan mengeluarkan

mediator kimia yang dapat dikeluarkan oleh inflamasi Transforming

Growth Factor beta 1 (TGF 1) yang akan mengaktivasi fibroblas untuk

proses sintesis oleh makrofag. Reaksi inflamasi lokal, terjadi karena

adanya penyumbatan fibrin pada pembuluh limfe. Dalam waktu dua hari,

16

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

fibronektin (suatu glikoprotein) bertumpuk dan menimbulkan perlekatan

fibroblast, fibrin, dan kolagen, sehingga memungkinkan reaksi lokalisata

permanen.

Gambar 2.9. Fase Inflamasi

(Sumber : Grabbs and Smiths, 2007)

b. Fase fibroblas atau proliferasi

Selama masa reaksi vaskular dan selular yang hebat, epitelium dengan

cepat beregenerasi untuk mengembalikan fungsi pelindungnya. Dalam 48

jam, selapis tipis epitelium akan menutupi luka. Proses ini dimulai dari

mitosis sel basal epidermis dan diikuti dengan perpindahan epitelium

kebawah tepi luka serta melewati tepi luka serta pada saat pembuluh darah

baru, yang diperkuat oleh jaringan ikat. Fase ini disebut sebagai fase

fibrolas yang berfungsi sebagai pembersihan jaringan yang mati dan yang

mengalami devitalisasi oleh Leukosit Polimorfonuklear dan makrafag.

Fibroblas mengalami proliferasi dan mensintesis kolagen. Serat kolagen

yang terbentuk dapat menyebabkan adanya kekuatan untuk bertautnya tepi

luka. Pada fase ini mulai terjadi granulasi, kontraksi luka dan epitelialisasi.

Gambar 2.10. Fase Fibroblas

(Sumber : Grabbs and Smiths, 2007)

17

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

c. Fase remodelling atau maturasi

Fase ini merupakan fase yang terakhir dan terpanjang pada proses

penyembuhan luka dan mencakup re-epitelisasi, konstraksi luka dan

reorganisasi jaringan ikat. Terjadi proses yang dinamis berupa remodelling

kolagen, kontraksi luka dan pematangan parut. Aktivitas sintesis dan

degradasi kolagen berada dalam keseimbangan. Dalam 24 jam, karena

rangsang PDGF, fibroblas dalam jaringan subkutis berpindah, dari tepi

luka sepanjang benang-benang fibrin di luka. Setelah itu, kolagen

dikeluarkan, dimulai proses ikatan, dan proses ke arah penggabungan yang

kuat antara tepi-tepi luka. Untuk melakukan remodelling berkas kolagen

yang sudah ada akan dilarutkan oleh kolagenase jaringan, berkas baru

terbentuk dan tersusun untuk menahan garis tegangan melewati luka.

Anyaman dan ikatan antar berkas dan dengan tepi-tepi luka menimbulkan

penyembuhan yang baik (Sabiston, 1987).

Gambar 2.11. Fase Remodelling

(Sumber : Grabbs and Smiths, 2007)

18

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.6. Berbagai Penelitian Mengenai Tanaman Jarak Cina

No Uji Etnobotani Metode Kesimpulan 1 Pengetahuan dan

PemanfaatanTumbuhan Obat di Sabang - Pulau Weh, Nangroe Aceh Darussalam (Susiarti, 2006)

Getah (latex) Pohon Yodium (Jatropha multifida Linn.) Euphorbiaceae di Sabang-Pulau Weh, Nangroe Aceh Darussalam

-Lokasi Penelitian dilakukan di desa Iboih, Sabang, NAD berada di sekitar kawasan konservasi Taman Wisata Alam dan Taman Wisata Laut Pulau Weh-Sabang. -Pengambilan data lapangan dilakukan dengan cara survei Eksploratif

Digosokkan langsung pada daerah luka

2 Kajian Etnobotani Tumbuhan Obat Etnis Melayu di Desa Sungai Baru dan Desa Sempadian Kabupaten Sambas (Indra, 2016)

Getah (latex) Pohon Betadin (Jatropha multifida Linn.) Euphorbiaceae di Desa Sungai Baru Dan Desa Sempadian Kabupaten Sambas

-Penelitian ini dilaksanakan di dua Desa yaitu Desa Sungai Baru Kecamatan Teluk Keramat dan Desa Sempadian Kecamatan Tekarang Kabupaten Sambas. -Pengumpulan data dilakukan dengan metode wawancara yang melalui pendekatan emik.

Luka

3 Kajian Etnobotani Suku Kaili Tara di Desa Binangga Kecamatan Parigi Tengah Kabupaten Parigi Moutong Sulawesi Tengah (Zulfiani, 2013)

Getah (latex) Pohon Jarak Tintir (Jatropha multifida Linn.) Euphorbiaceae di Desa Binangga Kecamatan Parigi Tengah Kabupaten Parigi Moutong Sulawesi Tengah

-Penelitian ini telah dilakukan di desa Binangga pada suku Kaili Tara di kecamatan Parigi Tengah kabupaten Parigi Moutong. -Pengumpulan data pemanfaatan jenis tumbuhan berguna dilakukan dengan teknik wawancara In depth.

Obat luka

4 Ethnic Study of Traditional Medicinal Plants of Buton (Jahidin, 2014)

Getah (latex) Pohon Jarak Cina (Jatropha multifida Linn.) Euphorbiaceae

-Metode penelitian adalah survey eksploratif dengan teknik wawancara dan pengamatan langsung

-Cara meramu : dahan dipatahkan, penampungan getah, diteteskan pada luka.

19

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

di Buton dilapangan. -Pengumpulan organ tumbuhan dilakukan melalui pembuatan herbarium dan pendokumentasian gambar bagian organ tumbuhan menggunakan kamera.

-Digunakan untuk obat luka

5 Keragaman Jenis Tumbuhan Berkhasiat Obat Tradisional di Masyarakat Desa Talion dan Desa Sarapeang Kecamatan Rembon Kabupaten Tana Toraja (Layukan, 2016)

Getah dari tangkai daun (latex) Pohon Jarak Cina (Jatropha multifida Linn.) Euphorbiaceae di Masyarakat Desa Talion dan Desa Sarapeang Kecamatan Rembon Kabupaten Tana Toraja

-Jenis penelitian ini adalah eksploratif yang bersifat deskriptif. - Observasi lapangan dengan metode jelajah dan dilakukan penentuan informan.

-Menghentikan pendarahan saat luka -Dijumpai di Desa Sapeang tetapi tidak dijumpai di Desa Talion

6 Kajian Etnobotani Tanaman Obat Oleh Masyarakat Kabupatan Bonebolango Provinsi Gorontalo (Kandowangko, 2011)

Getah dari batang (latex) Pohon Yodium (Jatropha multifida Linn.) Euphorbiaceae di Kabupatan Bonebolango Provinsi Gorontalo

-Survei eksploratif dan metode Participatory Rural Appraisal dengan teknik wawancara semi Struktural

Tanaman ini dimanfaatkan getahnya untuk pengobatan luka Baru.

7 Kajian Jenis Tumbuhan Obat yang Dimanfaatkan oleh Masyarakat Pengunungan di Kabupaten Pidie (Agustina, 2008)

Getah (latex) Pohon Jarak Cina (Jatropha multifida Linn.) Euphorbiaceae di Kabupaten Pidie

Dengan teknik wawancara langsung kepada masyarakat

Langsung diambil dari tanamannya banyak digunakan oleh masyarakat Aceh untuk mengobati luka baru.

8 Isolasi dan Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Daun Tumbuhan Jatropha

Daun (folium) Jarak Cina (Jatropha mulitifida Linn.)

-Uji aktivitas antimikrobial menggunakan metode difusi agar

-Ekstrak heksana, etil asetatdan metanol tidak aktif terhadap spesies

20

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

multifida Linn. (Abdullah, 2006)

Euphorbiaceae di masyarakat Riau

-Uji sitotoksik menggunakan metode Brine Shrimp Lethality

bakteri dan jamur yang duji -Ekstrak etil asetat memperlihatkan sitoksisitas yang tinggi dengan LC 50=52 ppm.

9 Pengaruh Pemberian Gel Dari Ekstrak Metanol Daun Jarak Tintir (Jatropha multifida Linn.) Terhadap Kepadatan Serabut Kolagen dan Jumlah Angiogenesis Dalam Proses Penyembuhan Luka (Yuhernita, 2014)

Daun (folium) Jarak Cina (Jatropha mulitifida Linn.) Euphorbiaceae di Kabupaten Pidie

-Prosedur pembuatan gel metanol daun (Jatropha multifida Linn) -Pembuatan luka -Pembuatan Sediaan histologis Parameter yang dinilai yaitu angiogenesis dan kepadatan serabut kolagen

Penilaian histologi pada ekstrak metanol daun jarak tintir konsentrasi 5% paling bagus terhadap kepadatan serabut kolagen dan jumlah angiogenesis dari jaringan kulit tikus memiliki efek untuk meningkatkan pembentukan serabut kolagen dan pertumbuhan darah baru pada hari ke-3.

10 Formulasi Sediaan Spray Gel Serbuk Getah Jarak Cina (Jatropha multifida Linn.) dengan Variasi Jenis Polimer Pembentuk Film dan Jenis Plasticizer (Shafira, 2015)

Getah (latex) Pohon Jarak Cina (Jatropha multifida Linn.) Euphorbiaceae di Manoko, Lembang

Formulasi basis gel dilakukan tahap orientasi untuk memilih basis yang bagus membuat sediaan spray gel, setelah itu dilakukan uji stabilitas dipercepta pada suhu 400C selama 28 hari.

Formula sediaan spray gel yang mengandung poloxamer 407 0,1% sebagai pembentuk film, propilenglikol 0,25% sebagai plasticizer dan serbuk getah jarak cina 3% sebagai bahan aktif memenuhi persyaratan farmasetika selama uji stabilitas dipercepat.

11 Ethnobotanical Leaflets (Olowokudejo, 2008)

Daun (folium) Jarak Cina (Jatropha mulitifida Linn.) Euphorbiaceae di Nigeria Afrika Barat

Jenis penelitian ini adalah eksploratif yang bersifat deskriptif.

Untuk pengobatan oral thrush, konstipasi, hipertensi dan demam

21

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

12 Fitoterapia (Aiyelaagbe, 2001)

Getah dari tangkai daun (latex) dan akar (radix) Jarak Cina (Jatropha mulitifida Linn.) Euphorbiaceae di Pemerintahan area lokal Utara dari dataran tinggi, Nigeria

Jenis penelitian ini adalah eksploratif yang bersifat deskriptif.

Antelmintik, pengobatan infeksi luka dan kondisi inflamasi kulit

13 Chemical Characterization, Antiinflamatory and Analgesic Propertiesd of Jatropha multifida Root Bark (Abiodun, 2013)

Akar (radix) Jarak Cina (Jatropha mulitifida Linn.) Euphorbiaceae di Pemerintahan area lokal Owan Barat, Nigeria

-Uji antiinflamasi : Induksi dengan menggunakan karagenan -Uji analgesik : Induksi asam asetat

-Jarak cina memiliki potensi sebagai antiiflamasi dan aktivitas analgesik sesuai dengan masyarakat biasa gunakan. Tanaman jarak cina dapat meningkatkan prostanoid secara umum.

22

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

3.1. Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan April hingga Juni 2016. Proses

determinasi tanaman jarak cina (Jatropha multifida Linn.) dilakukan oleh

Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Kebun Raya Bogor, sedangkan

pembelian tanaman jarak cina (Jatropha multifida Linn.) di Gunung Sindur,

Bogor Jawa Barat. Pembuatan ekstrak serbuk getah jarak cina (Jatropha multifida

Linn.) dilakukan oleh Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Cibinong.

Pembuatan sediaan gel, pemeliharaan dan perlakuan hewan uji dilakukan di

Laboratorium Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Islam Negeri

Syarif Hidayatullah Jakarta. Pembuatan preparat histopatologi jaringan kulit tikus

dilakukan di Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.

3.2. Waktu pengambilan getah

Pengambilan getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) dimulai jam

04.00 sampai jam 07.00 WIB.

3.3. Alat dan Bahan Penelitian

3.3.1. Alat Penelitian

Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah timbangan analitik (AND

GH-202 dan Wiggen Hauser), batang pengaduk, lumpang, alu, spatula, kapas,

gunting, alat pencukur bulu, tabung reaksi, pipet tetes, oven (Memmert), tanur

(Thermo Scientific), waterbath, alumunium foil, stik pH universal, alat freeze

drying, botol coklat, cawan penguap, cawan krusibel, timbangan hewan (Ohauss),

kandang tikus beserta tempat makanan dan minum, spuit 1 cc, sarung tangan,

masker, wadah pembiusan, plat logam besi 42 cm, alkohol swab, kaca objek dan

23

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

penutupnya, hot plate, cawan penguap, mikroskop cahaya (Olympus SZ61) dan

termometer.

3.3.2. Bahan Penelitian

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu getah jarak cina

(Jatropha multifida Linn.), etanol 95%, amonia pekat, asam sulfat 2N, pereaksi

Mayer, pereaksi Bouchardat, NaCl 10%, gelatin 1%, etanol, pita Mg, HCl pekat,

larutan KI, aquadest, karbopol 940, TEA, gliserol, natrium metabisufit, metil

paraben, propil paraben, gel Bioskin (Tea tree oil, Aloe vera, dan Centellae

herba extract), krim Veet, cairan injeksi Ketamin-hameln 50 mg/ml, alkohol

70%, eter, pewarna Hematoxylin-Eosin, larutan alkohol 70%, 80%, 90%, dan

100% (absolut), larutan xylol I dan II, parafin cair, sekam dan pellet.

3.3.3. Hewan Uji

Hewan uji yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih

(Rattus norvegicus) jantan galur Sprague Dawley yang sehat berumur 2 3 bulan

dengan berat badan 100-200 gram yang diperoleh dari Fakultas Kedokteran

Hewan Institut Pertanian Bogor.

3.4. Rancangan Penelitian

Penelitian ini bersifat eksperimental rancangan acak lengkap untuk melihat

efektivitas gel getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) terhadap penyembuhan

luka bakar pada tikus putih jantan (Rattus norvegicus) galur Sparague Dawley.

Penelitian ini terbagi dalam 5 kelompok perlakuan dengan masing-masing terdiri

dari 6 ekor tikus (Rattus norvegicus) jantan galur Sparague Dawley (WHO,

2000). Jumlah total tikus yang digunakan 30 ekor, dimana 3 ekor tikus di gunakan

untuk pengamatan secara visual dan 3 ekor dari masingmasing kelompok

diambil untuk pengamatan histopatologi. Lima kelompok tersebut terdiri dari

kelompok kontrol positif yang diberikan gel Bioskin (Tea tree oil, Aloe vera, dan

Centellae herba extract), kelompok kontrol negatif yang diberikan basis gel tanpa

pemberian ekstrak getah jarak cina dan kelompok uji konsentrasi yang diberikan

24

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

gel getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) dengan 3 konsentrasi yang berbeda

yaitu UKR (1%), UKS (3%), dan UKT (5%) sebesar 400 mg dua kali sehari

secara topikal selama 21 hari.

Tabel 3.1. Pembagian Kelompok Hewan Uji Berdasarkan Perlakuan

Kelompok Jumlah

Tikus

Perlakuan Hari Parameter

KKN 5 Kelompok 1, diberikan basis

gel tanpa pemberian ekstrak

getah jarak cina sebanyak

dua kali sehari.

21

hari

1. Angiogenesis

2. Sel radang

3. Fibroblas

4. Re-epitelisasi

KKP 5 Kelompok 5, diberikan gel

Bioskin (Tea tree oil, Aloe

vera, dan Centellae herba

extract) sebanyak dua kali

sehari.

21

hari

1. Angiogenesis

2. Sel radang

3. Fibroblas

4. Re-epitelisasi

UKR 5 Kelompok 2, diberikan gel

getah jarak cina dengan

konsentrasi 1% sebanyak

dua kali sehari.

21

hari

1. Angiogenesis

2. Sel radang

3. Fibroblas

4. Re-epitelisasi

UKS 5 Kelompok 3, diberikan gel

getah jarak cina dengan

konsentrasi 3% sebanyak

dua kali sehari.

21

hari

1. Angiogenesis

2. Sel radang

3. Fibroblas

4. Re-epitelisasi

UKT 5 Kelompok 4, diberikan gel

getah jarak cina dengan

konsentrasi 5% sebanyak

dua kali sehari.

21

hari

1. Angiogenesis

2. Sel radang

3. Fibroblas

4. Re-epitelisasi

Keterangan : KKN : Kelompok Kontrol Negatif UKS : Uji Konsentrasi Sedang 3% KKP : Kelompok Kontrol Positif UKT : Uji Konsentrasi Tinggi 5% UKR : Uji Konsentrasi Rendah 1%

25

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.5. Kegiatan Penelitian

3.5.1. Pemeriksaan Simplisia (Determinasi)

Sebelum dilakukan penelitian, Jatropha multifida Linn. terlebih dahulu di

determinasi di Herbarium Bogoriense Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-

LIPI Bogor untuk memastikan kebenaran simplisia.

3.5.2. Penyiapan Simplisia

Pengambilan getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) berada di

Leuwiliyang-Bogor, Jawa Barat yang berusia 6 tahun. Pohon jarak cina biasanya

dapat disadap sesudah berumur 5-6 tahun karena semakin bertambahnya umur

tanaman, semakin meningkatkan produksi getahnya (Santosa, 2007). Diameter

tanaman jarak cina yang berusia 6 tahun yaitu 16 cm. Bagian yang diambil dari

tanaman jarak cina (Jatropha multifida Linn.) adalah getah yang berasal dari kulit

batang (Shafira, 2015). Cara penyadapan dilakukan dengan cara menyayat bagian

kulit batangnya sampai batas kambium dengan ketebalan 0,1 cm, sudut

kemiringan 300, dan jarak antar penyadapan 3 cm. Getah ditampung kedalam

botol yang kering dan berwarna gelap dengan 0,1 ml etanol 96% (Osoniyi &

Onajobi, 2003). Getah diberikan 0,1 ml etanol 96% untuk mencegah getah

menjadi kecoklatan dan teroksidasi (Osoniyi & Onajobi, 2003). Penambahan

etanol 96% juga dapat digunakan untuk mencegah terbentuknya busa pada getah

karena didalam getah jarak cina mengandung senyawa saponin (Rahman, 2013).

Getah jarak cina dapat disimpan dalam kulkas pada suhu 00C dan wadah ditutup

dengan alumunium foil untuk menjaga stabilitas getah agar tidak teroksidasi.

Jumlah sampel getah segar ditimbang dengan menggunakan timbangan analitik.

Sampel yang dikumpulkan kemudian dibawa ke LIPI Cibinong untuk dilakukan

proses pengeringan dengan metode freeze drying.

26

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.5.3. Metode Pengeringan Freeze Drying

Getah simplisia yang telah didapatkan, kemudian dikeringkan dengan

metode freeze drying (Shafira, 2015). Hasil yang didapatkan berupa serbuk. Untuk

menjadi serbuk getah jarak cina dikeringkan dengan freeze drying selama 24 jam

dengan suhu -490C dan tekanan vakum sebesar 12 Pa. Ekstrak yang diperoleh

ditimbang dan dicatat beratnya untuk menghitung % rendemennya. Selanjutnya

ekstrak serbuk getah kering dihaluskan dan disimpan dalam wadah yang tertutup

sebelum digunakan untuk perlakuan.

3.5.4. Skrining Fitokimia Ekstrak

a. Identifikasi Alkaloid

Sebanyak 1 ml ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambah

dengan 5 tetes amoniak pekat. Setelah itu, disaring kemudian ditambahkan

2 ml asam sulfat 2N dan dikocok hingga memberi lapisan atas dan bawah.

Larutan dibagi menjadi 3 bagian, pada tabung pertama ditambahkan 1 tetes

pereaksi Mayer, adanya alkaloid di tandai dengan adanya endapan. Pada

tabung kedua di tambah 1 tetes pereaksi Bouchardat dan terbentuknya

endapan menandakan adanya alkaloid (Harbone, 1987).

b. Identifikasi Tanin

Sebanyak 1 ml ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi. Kemudian

ditambah 5 tetes NaCl 10%, lalu dikocok sampai homogen. Setelah itu

disaring, filtrat yang dihasilkan ditambah dengan gelatin 1% dan NaCl

10%. Terbentuknya endapan menandakan adanya tanin (Harbone, 1987).

c. Identifikasi Flavonoid

Sebanyak 1 ml ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian

ditambah dengan 5 tetes etanol, lalu dikocok sampai homogen. Setelah itu

ditambah dengan pita Mg dan 5 tetes HCl pekat. Jika menghasilkan warna

kuning, orange, dan merah menandakan adanya flavonoid (Harbone,

1987).

27

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

d. Identifikasi Saponin

Sebanyak 1 ml ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi. Kemudian

ditambahkan 2 ml aquadest, lalu dikocok sampai homogen. Setelah itu,

dipanaskan selama 2-3 menit. Dinginkan, setelah dingin dikocok dengan

kuat. Adanya busa yang stabil selama 30 detik menunjukkan sampel

mengandung saponin (Harbone, 1987).

e. Identifikasi Iodine

Sebanyak 1 ml ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi. Kemudiaan

ditambahkan larutan KI. Jika menghasilkan warna merah bata

menandakan adanya iodine.

3.5.5. Pengujian Parameter Spesifik dan Non Spesifik

a. Parameter Spesifik

a.1. Identitas

Deskripsi tata nama

- Nama ekstrak

- Nama lain tumbuhan

- Bagian tumbuhan yang digunakan

- Nama Indonesia tumbuhan

a.2. Organoleptik

- Bentuk : Padat, serbuk-kering, kental, cair.

- Warna : Putih susu, coklat, putih kemerahan dll.

- Bau : Aromatik, tidak berbau, dll.

- Rasa : Pahit, manis, kelat, asam dll.

28

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

b. Parameter Non Spesifik

b.1. Penetapan Kadar Air

Sejumlah 1 gram ekstrak ditimbang dalam botol timbang bertutup yang

sebelumnya telah dipanaskan pada suhu 105C selama 30 menit dan

telah ditara. Ekstrak dikeringkan dengan tutup terbuka pada suhu 105C

selama 5 jam dan ditimbang. Kemudian botol timbang dalam keadaan

tertutup dibiarkan dan mendingin dalam desikator hingga suhu kamar,

bobot yang diperoleh dicatat. Pengeringan dilanjutkan dan ditimbang

pada jarak 1 jam sampai bobot tetap. Kemudian dicatat bobot tetap yang

diperoleh untuk menghitung kadar air (Depkes RI, 2000). Jarak

pengeringan 1 jam ditimbang sampai perbedaan antara 2 penimbangan

berturut-turut tidak lebih dari 0,25%.

Kadar air=

x 100%

Keterangan :

W0 = Bobot wadah kosong yang telah ditara

W1 = Bobot ekstrak + wadah sebelum pemanasan

W2 = Bobot ekstrak + wadah setelah pemanasan

b.2. Penetapan Kadar Abu

Penetapan kadar abu dimulai dengan mengonstankan krusibel porselin

kosong dikonstankan dengan pemanasan pada suhu 100-105oC selama

2 jam lalu didinginkan dalam desikator. Sebanyak 1 gram ekstrak

ditimbang seksama (W1) dimasukkan dalam krus silikat yang

sebelumnya telah dipijarkan dan ditimbang (W0). Setelah itu ekstrak

dipijar dengan menggunakan tanur secara perlahan-lahan (dengan suhu

dinaikkan secara bertahap hingga 600 25C) selama 6 jam (Depkes

RI, 1980 dalam Arifin et al, 2006) hingga arang habis. Kemudian

dilanjutkan pengeringannya dengan suhu 1000C dan ditimbang hingga

bobot tetap (W2).

29

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Kadar Abu Total =

x 100%

Keterangan :

W0 = bobot cawan kosong (gram)

W1 = bobot cawan + ekstrak sebelum diabukan (gram)

W2 = bobot cawan + ekstrak setelah diabukan (gram)

3.5.6. Pembuatan Gel Getah Jarak Cina

Tabel 3.2. Formulasi Basis Gel Karbopol 940 (Yuhernita, 2014) :

Nama bahan Konsentrasi

Karbopol 940 1,25%

TEA 1,25%

Gliserol 12,5%

Natrium metabisulfit 0,5%

Metil paraben 0,18%

Propil paraben 0,2%

Aquadest add. 100 ml

Sediaan gel yang akan digunakan mengandung konsentrasi ekstrak serbuk

getah jarak cina yang digunakan yaitu getah 1%, getah 3%, dan getah 5%. Gel

dibuat 3 hari sekali sebanyak 15 gram agar menjaga kestabilan gel.

Tabel 3.3. Formulasi Gel Uji 15 gram

Nama bahan Getah 1% Getah 3% Getah 5%

Ekstrak serbuk getah jarak cina 0,15 gram 0,450 gram 0,750 gram

Karbopol 940 0,1875 gram 0,1875 gram 0,1875 gram

TEA 0,1875 gram 0,1875 gram 0,1875 gram

Gliserol 1,875 gram 1,875 gram 1,875 gram

Natrium metabisulfit 0,075 gram 0,075 gram 0,075 gram

Metil paraben 0,027 gram 0,027 gram 0,027 gram

Propil paraben 0,030 gram 0,030 gram 0,030 gram

Aquadest add.15 ml add. 15 ml add. 15 ml

30

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Karbopol 940 dikembangkan dalam aquadest 700C sebanyak 20 kali berat

dari karbopol 940 di dalam lumpang dan alu, lalu digerus hingga terbentuk

dispersi yang homogen. Setelah mengembang ditambahkan natrium metabisulfit,

metil paraben dan propil paraben yang telah dilarutkan di dalam gliserol hingga

homogen. Kemudian ditambahkan ekstrak getah jarak cina (Jatropha multifida

Linn.) dan aquadest sampai volume yang diinginkan dengan pengadukan perlahan

secara kontinyu sampai membentuk gel yang homogen. Lalu ditambahkan dengan

TEA tetes demi tetes sampai pH yang diinginkan (Sari & Isadiartuti, 2006). Gel

disimpan dalam wadah gel pada suhu ruangan. Prosedur yang sama juga

dilakukan pada ekstrak getah kering dengan konsentrasi 3% dan 5%.

3.5.7. Evaluasi Fisik Sediaan Gel

a. Uji Organoleptik

Uji organoleptik dilakukan untuk melihat tampilan fisik sediaan dengan

cara melakukan pengamatan terhadap bentuk, warna dan bau dari

sediaan yang telah dibuat (Anief, 1997).

b. Uji Homogenitas

Uji homogenitas dilakukan untuk melihat apakah sediaan yang telah

dibuat homogen atau tidak. Caranya, gel dioleskan pada kaca transparan

dimana sediaan diambil 3 bagian yaitu atas, tengah dan bawah.

Homogenitas ditunjukkan dengan tidak adanya butiran kasar (Ditjen POM,

2000).

c. Uji pH

Uji pH dilakukan untuk melihat tingkat keasaman sediaan gel untuk

menjamin sediaan gel tidak menyebabkan iritasi pada kulit. pH

sediaan gel diukur dengan menggunakan stik pH universal. Stik pH

universal dicelupkan ke dalam sampel gel yang telah diencerkan,

diamkan beberapa saat dan hasilnya disesuaikan dengan standar pH

universal.

31

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.5.8. Uji Stabilitas Fisik Sediaan Gel

Sediaan disimpan pada suhu 280C dan suhu 400C. Uji ini dilakukan selama

1 bulan, dan kemudian dilakukan kembali pemeriksaan organoleptis,

homogenitas, dan pH (Chandira, 2010).

3.5.9. Penyiapan Hewan Uji

Hewan uji yang digunakan yaitu tikus putih jantan Sprague Dawley

berumur 2 3 bulan dengan berat badan 100200 gram sebanyak 30 ekor. Tikus

putih jantan diaktimasi dengan lingkungan tempat penelitian selama 7 hari

sebelum percobaan dengan diberikan pakan dan minuman ad libitium agar dapat

menyesuaikan dengan lingkungannya. Selama proses adaptasi, dilakukan

pengamatan kondisi umum dan penimbangan berat badan. Kemudian, setiap ekor

tikus diberi tanda pengenal agar tidak salah dalam perlakuan. Pemeliharaan hewan

uji dilakukan di dalam kandang individu. Seluruh hewan uji diperlakukan sesuai

dengan aturan Ethical Clearance Komite Etik Penelitian Kesehatan FKUI.

3.5.10. Pembuatan Luka Bakar Derajat Dua

Masing-masing tikus dianastesi menggunakan sediaan injeksi ketamin

(dosis obat pada manusia 6,5-10 mg/kgBB dan konsentrasi larutan obat 50 mg/ml)

(Ketamin Hameln Injection, 2011) secara intramuskular. Hewan uji dicukur

bulunya dibagian dorsal 3 cm dari auris dengan gunting, kemudian dioleskan

dengan krim depilatori (krim Veet) selama 3-5 menit dan dicukur sampai licin

dengan menggunakan alat pencukur bulu. Lalu area kulit yang akan dibuat luka

bakar didesinfeksi dengan menggunakan alkohol 70%. Kemudian luka bakar

derajat dua diinduksi menggunakan plat besi 42 cm pada air mendidih selama 5

menit dan ditempelkan pada kulit punggung tikus selama 10 detik dengan tekanan

yang sama (Akhoondinasab et. al, 2014).

32

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.5.11. Pemberian Bahan Uji

Sebanyak 30 ekor tikus putih jantan galur Sprague Dawley digunakan

dalam penelitian dan diberikan 5 perlakuan yang berbeda. Masing-masing

perlakuan terdiri atas 6 ekor tikus putih jantan yaitu kontrol positif yang diberikan

gel Bioskin (Tea tree oil, Aloe vera, dan Centellae herba extract), kelompok

kontrol negatif yang diberikan basis gel tanpa pemberian ekstrak serbuk getah

jarak cina dan kelompok uji konsentrasi yang diberikan gel getah jarak cina

(Jatropha multifida Linn.) dengan 3 konsentrasi yang berbeda 1%, 3%, dan 5%.

Gel dioleskan 400 mg sebanyak dua kali sehari pada luka bakar setiap tikus, yaitu

pada jam 07.00 dan 17.00 WIB selama 21 hari setelah pembuatan luka.

3.5.12. Pengamatan Secara Makroskopis

Penyembuhan pada luka bakar adalah waktu yang dibutuhkan luka bakar

sehingga mencapai penutupan secara sempurna sampai tidak dijumpai adanya

bekas keropeng (scab). Pengamatan ini berupa persentase penyembuhan luka

bakar, permukaan kulit tikus pada hari ke-21, dan pengamatan visual fisiologis

luka bakar.

3.5.13. Persentase penyembuhan Luka Bakar

Pemberian bahan uji dilakukan setelah pembuatan luka bakar yaitu pada

hari ke-0. Luas luka bakar diamati pada hari ke-1 dan hari ke-21 dengan

menggunakan aplikasi ImageJ. Data yang dihasilkan kemudian dilakukan

perhitungan persentase penyembuhan luka bakar (Tavares Pereira et al., 2012).

Rumus Persentase Penyembuhan Luka = (

%)

33

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.5.14. Perlakuan dan Pengamatan

Pengamatan pada luka bakar sebelum pemberian dan sesudah perlakuan

sampai menunjukkan adanya tanda-tanda kesembuhan dan mengukur panjang

luka dengan penggaris skala cm. Dari kelima kelompok diambil masing-masing 1

ekor tikus pada hari ke-7 dan ke-14, pengambilan dilakukan setelah tikus

dieuthanasi dengan larutan eter secara inhalasi. pertama-tama disiapkan toples

kaca yang telah diberikan kapas dan dilumuri dengan larutan eter, kemudian

dimasukkan tikus kedalamnya, tutup mulut toples dan biarkan tikus tersebut

hingga mati. Daerah dorsal yang akan diambil jaringan kulitnya dibersihkan dari

bulu yang mulai tumbuh kembali, jaringan kulit diambil dengan ketebalan 3 mm

hingga lapisan subkutis dan sekitar 2 cm dari tepi luka. Jaringan kulit yang

diperoleh kemudian difiksasi dengan larutan formalin 10% agar organ yang

diawetkan diperoleh hasil yang maksimal dan proses pengawetannya merata

sehingga jaringannya tidak ada yang rusak dan disimpan. Kemudian tikus

dibungkus rapat dengan plastik dan dikubur ditempat yang telah ditentukan.

3.5.15. Pembuatan Preparat Histopatologi

Pembuatan preparat jaringan kulit yang telah difiksasi dengan larutan

formalin 10%. Kemudian dibilas dengan air mengalir sebanyak 3 5 kali. Lalu

dilakukan trimming organ dan dimasukkan ke dalam cassette tissue dari plastik.

Tahap selanjutnya dilakukan proses dehidrasi alkohol bertingkat yaitu alkohol

70%, 80%, 90%, alkohol absolut I, alkohol absolut II. Alasan penggunaan

konsentrasi alkohol dari yang rendah ke yang tinggi yaitu agar proses

dehidrasi tidak terlalu cepat yang akan merusak mukosa (jaringan lunak) dan

tidak menimbulkan artefak yang akan mengganggu proses diagnosis. Kemudian

dilakukan penjernihan untuk membersihkan sisa alkohol, menggunakan xylol I

dan xylol II selama. Proses pencetakan atau parafinisasi dilakukan menggunakan

parafin I dan parafin II. Kemudian sediaan dimasukkan ke dalam alat pencetak

yang berisi parafin setengah volume dan sediaan diletakkan ke arah vertikal dan

horizontal sehingga potongan melintang melekat pada dasar parafin. Hindari

34

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

terjadinya gelembung udara. Setelah parafin mulai membeku, parafin

ditambahkan kembali hingga alat pencetak penuh dan dibiarkan sampai parafin

mengeras yang dimasukkan kedalam lemari pendingin. Selanjutnya, mengiris

blok parafin dengan menggunakan mikrotom. Mikrotom diatur sedemikian rupa

hingga diperoleh potongan-potongan jaringan yang tipis dengan ketebalan 5

mikrometer. Hasil potongan yang berbentuk pita (ribbon) tersebut dibentangkan

diatas air hangat yang bersuhu 46C dan langsung diangkat untuk menghilangkan

parafin dan meregangkan potongan agar tidak berlipat. Sediaan tersebut kemudian

diangkat dan diletakkan di atas gelas objek dan dikeringkan dalam inkubator

bersuhu 60C. Kemudian sediaan diwarnai dengan pewarnaan Hematoxyllin-

Eosin (HE) untuk pemeriksaan mikroskopik (Balqis et. al, 2014).

3.5.16. Pengamatan Secara Mikroskopis

Pengamatan secara mikroskopis dilakukan pada preparat jaringan kulit.

Pengamatan dilakukan pada hari ke-7 dan ke-14 yang dilakukan dengan

menggunakan mikroskop cahaya (Olympus SZ61) pada pembesaran 100x dan

200 dengan 5 kali lapang pandang. Pengamatan parameter luka bakar seperti

jumlah pembuluh darah baru (angiogenesis), keberadaan sel radang (limfosit,

neutrofil dan makrofag), pertumbuhan jaringan ikat (fibroblas), dan jumlah re-

epitelisasi.

3.5.17. Skor Pembuluh Darah Baru (Angiogenesis)

Pengamatan ini dilakukan dengan metode skoring jumlah pembuluh darah

baru berdasarkan jumlah pembuluh kapiler. Skoring untuk jumlah pembuluh

darah baru (Hazrati, 2009) :

0 : Tidak ada angiogenesis

1 : 1-2 angiogenesis

2 : 3-4 angiogenesis

3 : 5-6 angiogenesis

4 : >7 angiogenesis

35

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.5.18. Skor Keberadaan Sel Radang (Limfosit, Neutrofil dan Makrofag)

Pengamatan ini dilakukan dengan metode skoring keberadaan sel radang

berdasarkan jumlah limfosit, neutrofil dan makrofag. Skoring untuk keberadaan

sel radang (Hazrati, 2009) :

0 : 13-15 sel inflamasi per lapang pandang

1 : 10-13 sel inflamasi per lapang pandang

2 : 7-10 sel inflamasi per lapang pandang

3 : 4-7 sel inflamasi per lapang pandang

4 : 1-4 sel inflamasi per lapang pandang

3.5.19. Skor Keberadaan Jaringan Ikat (Fibroblas)

Pengamatan ini dilakukan dengan metode skoring keberadaan jaringan ikat

berdasarkan jumlah sel fibroblastik. Skoring untuk pertumbuhan jaringan ikat

(fibroblas) (Duarte, 2010) :

0 : Tidak adanya fibroblas

1 : Terdapat beberapa fibroblas

2 : Terdapat fibroblas yang teratur

3 : Terdapat fibroblas yang sejajar dengan permukaan luka

3.5.20. Skor Re-epitelisasi

Pengamatan ini dilakukan dengan metode skoring jumlah re-epitelisasi

berdasarkan kondisi jaringan epitel pada daerah luka. Skoring untuk jumlah re-

epitelisasi (Hazrati, 2009) :

0 : Tidak ada proliferasi epitel 70 % dari jaringan kulit.

1 : Struktur epidermis yang kurang 60 % dari jaringan kulit

2 : Struktur epidermis yang tidak lengkap 40 % dari jaringan kulit

3 : Proliferasi epitel yang sedang 60 % dari jaringan kulit

4 : Struktur epidermis yang lengkap 80 % dari jaringan kulit

36

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.5.21. Analisis Data Statistik

Data hasil percobaan dianalisis untuk melihat persentase penyembuhan

luka bakar dan skor parameter histopatologi. Data dianalisis menggunakan

program pengolahan data statistik SPSS 16. Data persentase penyembuhan luka

menggunakan uji nonparametrik yaitu Uji Kruskall-Wallis dan dilanjutkan dengan

menggunakan Post Hoc Test (Mann-Whiteney). Data skor parameter histopatologi

menggunakan uji parametrik yaitu Uji one way ANOVA dan dilanjutkan dengan

menggunakan Post Hoc Test (LSD). Data statistik berbeda signifikan pada nilai

p

37

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Hasil Penelitian

4.1.1. Determinasi Tanaman

Determinasi tanaman dilakukan di Herbarium Bogoriense, Pusat Penelitian

Biologi LIPI, Bogor, Jawa Barat. Hasil determinasi menunjukkan bahwa tanaman

ini adalah jarak cina/ jarak tintir (Jatropha multifida Linn.) famili Euphorbiaceae

terdapat pada Lampiran 2.

4.1.2. Penyiapan Simplisia

Bagian yang diambil dari tanaman jarak cina (Jatropha multifida Linn.)

adalah getah yang berasal dari kulit batang (Shafira, 2015). Pengambilan getah

dilakukan dengan cara mengiris kulit batang secara horizontal. Waktu penyadapan

getah dapat dilakukan pada jam 04.00 sampai jam 07.00 WIB. Getah ini

berbentuk larutan berwarna cokelat. Getah jarak cina yang didapatkan sebanyak

50,19 gram ditampung kedalam botol yang kering dan berwarna gelap dengan 0,1

ml etanol 96%. Getah ini dapat disimpan dalam kulkas pada suhu 00C dan wadah

ditutup dengan alumunium foil.

4.1.3. Pengeringan dengan Freeze Drying

Getah jarak cina dikeringkan dengan metode freeze drying dengan suhu

-490C dan tekanan vakum sebesar 12 Pa selama 38 jam hingga getah menjadi

serbuk yang kering. Serbuk kering yang diperoleh sebanyak 13,31 gram.

Rendemen yang didapatkan adalah 26,52%. Hasil rendemen ini telah memenuhi

rendemen yang baik yaitu hasil rendemennya lebih dari 10% (Depkes, 2000).

38

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

4.1.4. Hasil Skrining Fitokimia

Kandungan metabolit sekunder pada ekstrak getah jarak cina (Jatropha

multifida Linn.) diidentifikasikan dengan cara skrining fitokimia. Kandungan

senyawa metabolit sekunder yang diuji antara lain golongan alkaloid, tanin,

flavonoid, saponin, dan iodine. Hasil skrining fitokimia yang dilakukan terhadap

ekstrak getah jarak cina (Jatropha multifida Linn.) dapat dilihat pada tabel 4.1. :

Tabel 4.1. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Getah Jarak Cina