totipotensi & regenerasi
TRANSCRIPT
TOTIPOTENSI:TOTIPOTENSI:
KEMAMPUAKEMAMPUAN REGENERASIN REGENERASI
ApakahApakah semuasemua selsel totipotentotipoten??
ApakahApakah selsel dewasadewasa –– berintiberinti masihmasihtotipotentotipoten? ?
PERUBAHAN GENOM MENYERTAI DIFERENSIASI PERUBAHAN GENOM MENYERTAI DIFERENSIASI & & PERTUMBUHANPERTUMBUHAN SEL SEL
EndopoliploidiEndopoliploidi: : sintesissintesis DNA DNA nukleusnukleus--pembelahanpembelahan kromatidkromatid, , tanpatanpa mitosismitosis
poliploidipoliploidiEndoreduplikasiEndoreduplikasi: : sintesissintesis DNA DNA nukleusnukleus--tanpatanpapembelahanpembelahan kromatidkromatid, , tanpatanpa mitosismitosis
Giant chromosome = Giant chromosome = politenpoliten
politenipoliteni
PERUBAHAN GENOMPERUBAHAN GENOM-- jamakjamak terjaditerjadi padapada tumbuhantumbuhan
PoliploidiPoliploidi & & politenipoliteni-- DiferensiasiDiferensiasi dlmdlm keadaankeadaan diploid (normal) diploid (normal)
hanyahanya dialamidialami beberapabeberapa keluargakeluargatumbuhantumbuhan ((AsteraceaeAsteraceae, , ApiaceaeApiaceae))
-- PoliploidiPoliploidi & & politenipoliteni mencirikanmencirikan bahwabahwajaringanjaringan tsbtsb tidaktidak melanjutkanmelanjutkan
pembelahanpembelahan selsel lagilagi ((empulurempulur, , parenkimaparenkimaxilemxilem))
ContohContoh::
MurashigeMurashige & Nakano (1967):& Nakano (1967):
PlanletPlanlet tembakautembakau diploid: diploid: 15.515.5--22.5 cm 22.5 cm drdr apeksapeks
9% diploid9% diploid70% 70% tetraploidtetraploid16% 16% octaploidoctaploid5% 5% aneuploidaneuploid
SintesisSintesis DNA yang DNA yang beragamberagam
-- UnderreduplicationUnderreduplication-- Gene amplificationGene amplification
-- DNA lossDNA loss-- JumlahJumlah DNA organ DNA organ vegetatifvegetatif berbedaberbeda dg dg
organ organ generatifgeneratif / / fasefase juwanajuwana vsvs fasefasedewasadewasa
Kritis saat fase peralihan itu
VariasiVariasi somaklonalsomaklonal
-- UmumUmum terjaditerjadi padapada tumbuhantumbuhan ((explantexplant) ) -- FrekuensiFrekuensi bertambahbertambah padapada kulturkultur asalasal
kaluskalus ((protoplasprotoplas, , suspensisuspensi selsel))-- PerubahanPerubahan strukturstruktur kromosomkromosom
((pseudodiploidipseudodiploidi: : translokasitranslokasi) )
SumberSumber variasivariasi genetikgenetik potensialpotensial= = variasivariasi somaklonalsomaklonal (Larkin & (Larkin & SnowcroftSnowcroft, 1981), 1981)
MutasiMutasi gen: gen: mendelianmendelian mutants mutants –– diturunkanditurunkan secarasecarameiotikmeiotikVarVar epigenetikepigenetik: : toleransitoleransi thdthd suhusuhu, , herbisidaherbisida, , garamgaram dlldll..Chromosome structural rearrangementChromosome structural rearrangementTransposisiTransposisiSomatic crossingSomatic crossing--overoverGene amplification (Gene amplification (poliploidpoliploid, , politenpoliten, , aneuploidaneuploid))
BaikBaik padapada genomgenom intiinti maupunmaupun genomgenomsitoplasmiksitoplasmik ((mitokondriamitokondria))
FaktorFaktor yang yang mengendalikanmengendalikanregenerasiregenerasi
KontrolKontrol genetikgenetik: : adaada gengen--gen gen tertentutertentuKontrolKontrol epigenetikepigenetik: : tidaktidak stabilstabil--tidaktidak diturunkanditurunkan secarasecarameiotikmeiotikKontrolKontrol fisiologisfisiologis::
HormonHormon: : jenisjenis, , konsentrasikonsentrasi, , rasiorasioZatZat tambahantambahan: air : air kelapakelapa, , kaseinkasein hidrolisathidrolisat, , amidaamida dlldll..
Ada/tidaknyaAda/tidaknya zatzat ygyg menghambatmenghambatTahapTahap perkembanganperkembangan & & kondisikondisi histologishistologis eksplaneksplan
KondisiKondisi lingkunganlingkungan fisikfisik kulturkultur: : suhusuhu, , cahayacahaya, , bentukbentukmedia, media, gravitasigravitasi
KAPASITAS MORFOGENETIK HILANG KAPASITAS MORFOGENETIK HILANG ((setelahsetelah dikulturkandikulturkan))
PERUBAHAN PLOIDI SEL PARAH (poliploidi, aneuploidi)
&
USIA KULTUR
ADA 3 KEMUNGKINANADA 3 KEMUNGKINAN
HAMBATAN GENETIK HAMBATAN GENETIK –– TIDAK TOTIPOTEN: LACK OF TIDAK TOTIPOTEN: LACK OF SOME GENETICALLY DETERMINED FEATURESOME GENETICALLY DETERMINED FEATURE
HAMBATAN EPIGENETIK HAMBATAN EPIGENETIK –– TIDAK KOMPETEN: RELATIF TIDAK KOMPETEN: RELATIF STABIL STABIL –– POTENTIALLY REVERSIBLE. PERLU PEMICU POTENTIALLY REVERSIBLE. PERLU PEMICU
HORMONAL/SINYAL LAIN UTK FUNGSI GENHORMONAL/SINYAL LAIN UTK FUNGSI GEN
HAMBATAN FISIOLOGIS: PERLU KOMBINASI KIMIAWI & HAMBATAN FISIOLOGIS: PERLU KOMBINASI KIMIAWI & FISIK YG TEPAT (genetically capable of responding to FISIK YG TEPAT (genetically capable of responding to
morphogenetic signals & may lack epigenetic constraints morphogenetic signals & may lack epigenetic constraints to gene action)to gene action)
AsalAsal daridari variasivariasi genetikgenetik padapada kulturkulturin vitroin vitro
JenisJenis & & kondisikondisi eksplaneksplan((Helianthus Helianthus annuusannuus, H , H tuberosustuberosus, , LiliumLilium
longiflorumlongiflorum, Eucalyptus, Eucalyptus –– stabilstabil diploid; diploid; pseudodiploidpseudodiploid??)??)
SubkulturSubkultur berulangberulang & & usiausia kulturkultur
KandunganKandungan media media kulturkultur ((zptzpt, , zatzat lain)lain)
ContohContoh fenomenafenomena EPIGENETIK vs. EPIGENETIK vs. MORFOGENESIS MORFOGENESIS in vitroin vitro
EmpulurEmpulur tembakautembakau perluperlu sitokininsitokinin..JaringanJaringan daunnyadaunnya tumbuhtumbuh lambatlambat tanpatanpasitokininsitokinin..JaringanJaringan korteksnyakorteksnya tumbuhtumbuh cepatcepat tanpatanpasitokininsitokinin
SeleksiSeleksi thdthd varianvarian akibatakibat perlakuanperlakuan toksintoksin, , herbisidaherbisida, , antibiotikaantibiotika, , salinitassalinitas, , dlldll..
AnalisisAnalisis thdthd variasivariasi genetikgenetik
Penghitungan/pengamatanPenghitungan/pengamatan kromosomkromosom
AnalisisAnalisis isozimisozim
AnalisisAnalisis polapola DNA: DNA polymorphismDNA: DNA polymorphismRAPDRAPDRLFPRLFP
DNA sequencingDNA sequencing
tambahantambahan:: PengaruhPengaruh mikromikro--gravitasigravitasi
PertumbuhanPertumbuhan protoplasprotoplas (rapeseed(rapeseed--BrassicaBrassicanapusnapus) 56%, ) 56%, wortelwortel 82% 82% daridari kontrolkontrol..AktivitasAktivitas peroksidaseperoksidase & & sintesissintesis protein protein lebihlebihrendahrendah..ProduksiProduksi selulosaselulosa 54% pd rapeseed, 71% pd 54% pd rapeseed, 71% pd wortelwortel..HemiselulosaHemiselulosa lebihlebih sedikitsedikit..KalusKalus tumbuhtumbuh lambatlambat, , bahkanbahkan saatsaat sudahsudah dididaratdarat..