SKRIPSI

RAHMAT IBRAHIM

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI

n-HEKSANA KULIT BUAH Citrus reticulata

TERHADAP BAKTERI Escherichia coli

DENGAN METODE DIFUSI CAKRAM

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2018

ii

LEMBAR PENGESAHAN

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI

n-HEKSANA KULIT BUAH Citrus reticulate

TERHADAP BAKTERI Escherichia coli

DENGAN METODE DIFUSI CAKRAM

SKRIPSI

Dibuat untuk memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada

Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang

2018

Oleh:

RAHMAT IBRAHIM

201310410311024

Disetujui Oleh:

Pembimbing I Pembimbing II

Siti Rofida, S. Si, M. Farm., Apt Ahmad Shobrun Jamil, S. Si., MP

NIP UMM: 11408040453 NIP UMM: 11309070469

iii

LEMBAR PENGUJIAN

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI n-

HEKSANA KULIT BUAH Citrus reticulate TERHADAP

BAKTERI Escherichia coli

DENGAN METODE DIFUSI CAKRAM

SKRIPSI

Telah diuji dan dipertahankan di depan tim Penguji

Pada tanggal 29 Oktober 2018

Oleh :

RAHMAT IBRAHIM

201310410311024

Disetujui Oleh :

Penguji I Penguji II

Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., MP

NIP UMM. 11408040453 NIP UMM. 11309070469

Penguji III Penguji IV

Enggrid Juni Astuti, M. Farm., Apt Raditya Weka N, M. Farm., Apt.

NIP UMM. 11216120589 NIP UMM. 1402240519990

iv

KATA PENGANTAR

Bismillahirrahmanirrahim.

Assalamu’alaikum Warohmatullahi Wabarokaatuh

Alhamdullillah, puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala limpahan

Rahmat, Taufik, serta Hidayah-Nya dan Shalawat serta salam semoga tercurahkan

kepada Nabi Muhammad SAW beserta seluruh keluarga dan sahabatnya.

Sehingga tugas akhir yang berjudul “Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi n-Heksana

Kullit Buah Citrus reticulata terhadap Bakteri Escherichia coli Dengan Metode

Difusi Cakram dapat diselesaikan. Tugas akhir ini merupakan syarat terakhir yang

harus ditempuh untuk menyelesaikan pendidikan pada jenjang Strata Satu (S1),

pada Jurusan Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah

Malang.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dan dukungan dari semua pihak,

skripsi ini tidak akan terselesaikan. Oleh karena itu pada kesempatan ini penulis

ingin mengucapkan banyak terimakasih kepada :

1. Terutama kepada Allah SWT yang telah memberikan kesehatan, kecerdasan

dan juga kelancaran dalam menyelesaikan skripsi ini.

2. Ibu Siti Rofida, S. Si., M. Farm., Apt selaku dosen pembimbing I yang

dengan penuh kesabaran memberikan bimbingan, arahan, dukungan,

motivasi serta doa kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

3. Bapak Ahmad Shobrun Jamil, S. Si., M.P selaku dosen pembimbing II dan

dosen wali yang telah memberikan arahan, dukungan, bimbingan serta

motivasi spiritual kepada penulis agar dapat menyelesaikan skripsi ini.

4. Enggrid Juni Astuti, M.Farm., Apt selaku dosen penguji I dan Kepala

Program Studi S1 Farmasi atas segala kritik dan saran untuk

menyempurnakan skripsi ini, serta ketersediaannya yang telah mengijinkan

menggunakan fasilitas yang ada.

5. Raditya Weka Nugraheni,M.Farm., Apt selaku dosen penguji II dan kepala

Laboratorium farmasi atas segala kritik dan saran serta motovasi untuk

menulis naskah yang rapi untuk menyempurnakan skripsi ini.

6. Bapak Faqih Ruhyanudin, M. Kep., Sp. Kep. MB selaku Dekan Fakultas

Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

v

7. Dra. Roimil Latifa selaku Kepala Biologi UMM yang telah mengijinkan

penulis melakukan penelitian di Laboratorium tersebut .

8. Para dosen Program Studi Farmasi, para dosen dari Fakultas Kedokteran

serta dosen Keperawatan yang telah memberikan ilmu dan pengetahuan

kepada penulis, semoga ilmu- ilmu tersebut dapat berguna dan barokah bagi

diri penulis dan juga orang lain.

9. Laboran dari Laboratorium Biologi Kampus 3, mbak Fitroh laboran dari

Laboratorium Biomedik, Pak Joko, atas kesabarannya dalam memberikan

bimbingan dan arahan selama penulis melakukan penelitian.

10. Ayahanda Salmin dan Ibunda Amalia Mahtelu tercinta yang sangat penulis

sayangi, atas doa yang tiada henti-hentinya, atas bimbingan dan dukungan

baik secara moral, spiritual maupun materil, atas kerja keras demi

pendidikan dan masa depan penulis serta kasih sayang dan motivasi yang

tiada henti.

11. Susi Ernawati tercinta yang sangat penulis banggakan, , atas pengertian,

doa, kasih sayang dan dukungan yang selalu diberikan.

12. Kakak serta adik-adik yang sangat penulis hormati dan kasihi, atas

pengertian, motivasi, bantuan doa dan finansial serta tidak pernah lelah

mendengarkan keluh kesah penulis.

13. Teman-teman seperjuangan dan Sekelompok yang selalu menemani dan

membantu dalam pengerjaan skripsi

14. Teman-teman kontrakan Ari Fauzan, Alif Reza, Yanwar Sasamita, dan

Yudha, yang telah ikut membantu mensupport penulis.

15. Serta semua pihak baik dari dalam maupun dari luar yang tak dapat

dituliskan satu persatu yang telah membantu penulis menyelesaikan skripsi

ini.

Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi ini masih banyak

kekurangan. Oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan saran yang

membangun untuk kesempurnaan skripsi ini.

vi

Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca serta ilmu pengetahuan

terutama dalam bidang farmasi.

Malang, 03 Oktober 2018

Penulis

vii

RINGKASAN

Penyakit infeksi merupakan penyakit yang disebabkan oleh

mikroorganisme seperti bakteri, virus, fungi maupun prozoa. Mikroorganisme

tersebut bisa ditemukan dimanapun baik di udara, tanah maupun air. Seseorang

dapat terinfeksi melalui sentuhan, makan, minum maupun udara yang

terkontaminasi mikroorganisme tersebut. Infeksi juga dapat menyebar melalui

hewan dan gigitan serangga hingga hubungan seksual (medline, 2016). Bakteri

Escherichia coli dapat menyebabkan penyakit pada saluran pencernaan, bisa juga

menyebabkan diare, dan jika sampai parah bisa sampai perdarahan usus (Romas

Amin et al, 2015).

Penyakit infeksi sudah dikenal sejak zaman dahulu. Setiap tahun dilaporkan

angka penderita yang terkena penyakit infeksi semakin meningkat. Pada tahun

2009 dan 2010 Indonesia penyebab penakit infeksi sekitar 3,38% (Romas Amin

et al, 2015). Berdasarkan Antimicrobial Resistance: Global Report on

Surveillence dari WHO (2014), menyatakan bahwa kasus resistensi Escherichia

coli terutama terhadap sefalosporin generasi ketiga adalah terutama diberikan oleh

enzim yang dikenal sebagai extended spektrum beta-laktamase (ESBL); enzim ini

menghancurkan banyak obat antibakteri beta-laktam, Mirip dengan perlawanan

terhadap generasi ketiga sefalosporin, ada laporan tentang resistensi

fluoroquinolone pada Escherichia coli melebihi 50%.

Penggunaan ekstrak dari bagian tanaman dan fitokimia dari sifat

antimikroba yang diketahui sangat penting dalam perawatan terapi antibiotik.

Dalam beberapa tahun terakhir, beberapa penelitian telah dilakukan di berbagai

negara untuk membuktikan efisiensi dalam perawatan antibiotik. Sekitar 90%

populasi dunia masih bergantung sepenuhnya pada tumbuhan herba sebagai obat-

obatan. Penelitian ilmiah terhadap tanaman obat telah dimulai di banyak negara

karena kontribusinya terhadap perawatan kesehatan. Manfaat utama penggunaan

obat-obatan yang berasal dari tanaman relatif lebih aman daripada alternatif

sintetis (Pamila,U.A & Karpagam,S., 2017).

Pada penelitian sebelumnya telah dilakukan studi aktivitas antibakteri kulit

buah Citrus reticulata secara invitro melalui proses ekstraksi destilasi hidrolik

didapatkan minyak esensial dari kulit buah. Dengan metode difusi cakram

diproleh hasil berupa daya hambat sebesar 21mm (Sari et al,2013), Pengujian Aktivitas antibakteri dengan menggunakan metode difusi cakram.

Konsentrasi yang digunakan 4mg/disk, 8mg/disk dan 20mg/disk, kontrol negatif

uji antibakteri DMSO 2% dalam aquadest dan kontrol positif kloramfenikol 30

µg/disk. Larutan uji dipenetrasikam pada blank disk kosong sebnyak 10 kemudian

dioven selama 10 µl menit pada suhu 40°C, Langkah tersebut direplikasi

sebanyak 8 kali. Kemudian dituang media agar kedalam cawan kurang lebih 20 ml

ditunggu sampai media memadat. Disiapkan suspensi bakteri lalu digorekan

dengan cotton bud di media agar secara merata disemua sisi media agar. Larutan

uji konsentrasi 4mg/disk, 8mg/disk, dan 20mg/disk, kontrol negatif DMSO 2%

dan kontrol positif kloramfenikol 30 µg/disk diletakkan diatas media yang telah

digorsekan bakteri menggunakan pinset, pengujian antibakteri dilakukan di LAF.

kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.

Hasil yang diproleh dari uji atktivitas antibakteri farksi n-heksana kulit buah

Citrus reticulata menhasilkan zona hambat konsentrasi 4mg/disk sebesar 9,22

viii

mm,8 mg/disk 11,03 mm, dan 20 mg/disk didapatkan hasil 10,98 mm. sehingga

dapat disimpulkan fraksi n-heksana kulit buah Citrus reticulata memiliki aktivitas

antibakteri terhadap bakteri Escherichia coli dengan terbentuknya zona bening

disekitar disk.

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI

n-HEKSANA KULIT BUAH Citrus reticulate TERHADAP BAKTERI Escherichia

coli

DENGAN METODE DIFUSI CAKRAM

Rahmat Ibrahim*, Siti Rofida, Ahmad Shobrun Jamil

Program Pendidikan Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan,

Universitas Muhammadiyah Malang

*Email: psanduan@gmail.com

Latar Belakang: Kulit buah Citrus reticulata terbukti dapat menghambat

pertumbuhan bakteri Escherichia coli, senyawa yang bertanggung jawab dalam

aktivitas antibakteri adalah favonoid, alkaloid, polifenol, dan antrakinon.

Tujuan: Tujuan penelitian ini untuk melihat zona hambat dari fraksi kulit buah

Citrus reticulata terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli dengan berbagai

macam konsentrasi.

Metode: Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan menggunakan metode difusi

cakram. Fraksi n-heksana yang digunakan pada penelitian ini didapatkan dari

penelitian sebelumnya. Selanjutnya dilakukan uji aktivitas antibakteri.

Konsentrasi fraksi n-heksana yang digunakan 5%; 10%; 50%. Disk yang berisi

larutan uji, kontrol negatif dan kontrol positif ditempelkan diatas plate yang telah

berisi bakteri Escherichia coli dan media MHA, kemudian diinkubasi dengan

suhu 37°C selama ±24 jam dan zona bening yang terbentuk diukur diameternya.

Hasil dan Kesimpulan: Hasil identifikasi metabolid sekunder pada penelitian

sebelumnya menunjukan farkasi n-heksana kulit buah Citrus reticulata

mengandung flavonoid, alkaloid, polifenol, dan antrakinon. Hasil pengujian

aktivitas antibakteri diameter zona hambat dengan konsentrasi 4mg/disk sebesar

9,22 mm,8 mg/disk 11,03 mm, dan 20 mg/disk didapatkan hasil 10,98 mm. Hasil

tersebut menunjukan fraksi n-heksana kulit buah Citrus reticulata dapat

menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dilihat dari zona bening

disekitar blank disk.

Kata Kunci: Fraksi n-heksana, Kulit buah Citrus reticulata, Antibakteri, Difusi

Cakram, Escherichia coli

mailto:psanduan@gmail.com

x

ABSTRACT

FRACTION ANTIBAKTERIAL ACTIVITY n-Heksana PEEL FRUIT Citrus

reticulata. Escherichia coli Bacteria with Disc Diffusion Method

Rahmat Ibrahim*, Siti Rofida, Ahmad Shobrun Jamil

Program Pendidikan Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan,

Universitas Muhammadiyah Malang

*Email: psanduan@gmail.com

Background: Citrus reticulata fruit peel is proved to inhibit the growth of

Escherichia coli bacteria, the compounds responsible for antibacterial activity are

favonoid, alkaloids, polyphenols, and anthrides.

Objective: The objective of this study was to look at the inhibitory zone of the

Citrus reticulata fruit peel fraction on the growth of Escherichia coli bacteria with

various concentrations.

Methods: Antibacterial activity test was performed using a disk diffusion method.

The n-hexane fraction used in this study was obtained from previous

studies.Furthermore, the antibacterial activity test was performed. the

concentration of fraction of n-hexane used 5%; 10%; 50%. The disc containing

test solution, negative control and positive control were placed on the plate

containing Escherichia coli and MHA media, then incubated at 37C for 18 hours

and the clear zone formed was measured in diameter.

Results and Conclusions: The results of secondary metaabolid identification in

previous studies showed pharkation of n-hexane Citrus reticulata fruit buds

containing flavonoids, alkaloids, polyphenols and anthrons. Results of

antibacterial activity of inhibitory zone diameter with concentration of 4 mg / disk

was 9.22 mm, 8 mg / disk 11.03 mm, and 20 mg / disk obtained 10.98 mm.. These

results show the fracture of n-hexane skin of Citrus reticulata can inhibit the

growth of Escherichia coli bacteria seen from the clear zone around the blank disk.

Keywords: n-hexane fraction, Citrus reticulata fruit peel, Antibacterial, Disc

diffusion, Escherichia coli.

mailto:psanduan@gmail.com

xi

DAFTAR ISI

LEMBAR PENGESAHAN .......................................................................................... ii

KATA PENGANTAR ................................................................................................. iv

RINGKASAN ............................................................................................................. vii

ABSTRAK ................................................................................................................... ix

ABSTRACT .................................................................................................................. x

DAFTAR ISI ................................................................................................................ xi

DAFTAR GAMBAR .................................................................................................. xv

DAFTAR TABEL ...................................................................................................... xvi

DAFTAR BAGAN ................................................................................................... xvii

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................ xviii

BAB I PENDAHULUAN ............................................................................................ 1

1.1 Latar Belakang ........................................................................................................ 1

1.2 Rumusan Masalah ............................................................................................... 4

1.3 Tujuan penelitian ................................................................................................. 4

1.4 Manfaat Penelitian ............................................................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................................... 5

1.1 Tinjauan Tentang Jeruk Keprok (Citrus reticulata/nobilis L.) ........................... 5

1.1.1 Klasifikasi ..................................................................................................... 5

1.1.2 Nama tumbuhan ...................................................................................... 5

1.1.3 Morfologi tumbuhan ............................................................................... 6

1.1.4 Khasiat Tanaman ..................................................................................... 6

1.1.5 Kandungan Senyawa Citrus reticulata ................................................... 6

1.1.6 Aktivitas Antibakteri Kulit Buah Citrus reticulate ................................. 7

1.2 Tinjauan Umum Escherichia coli ................................................................... 7

1.2.1 Taksonomi ............................................................................................... 8

1.2.2 Morfologi Dan Sifat ................................................................................ 8

1.2.3 Patogenisis Bakteri Escherichia Coli ...................................................... 9

1.2.4 Macam- Macam Bakteri Escherichia Coli ........................................... 10

1.3 Tinjauan Identifikasi E.coli Dengan pewarnaan .......................................... 12

1.4 Tinjauan Umum Infeksi ................................................................................ 12

xii

1.5 Tinjauan Tentang Antibiotik ........................................................................ 13

2.5.1 Mekanisme Kerja Kloramfenikol .......................................................... 13

2.6 Tinjauan Tentang Ekstrak dan Pelarut ......................................................... 15

2.6.1 Ekstrak................................................................................................... 15

2.6.2 Tinjauan pelarut .................................................................................... 16

2.7 Tinjauan Tentang Uji Kepekaan Terhadap Antimikroba Secara In vitro..... 18

1. Metode penyebaran (Diffusion Method) ....................................................... 18

2. Metode Pengenceran (Dilution Method) ...................................................... 18

3. Metode bioautografi ..................................................................................... 19

2.8 Tinjauan Tentang Metode Difusi.................................................................. 19

1. Disc diffusion method .................................................................................. 20

2. E-test ............................................................................................................. 20

3. Ditch-plate technique ................................................................................... 20

4. Cup-plate technique ...................................................................................... 21

5. Gradient-plate technique .............................................................................. 21

2.9 Tinjauan Kromatografi Lapis Tipis .............................................................. 22

2.10 Tinjauan Tentang DMSO ............................................................................. 23

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ..................................................................... 27

3.1 Bagan Kerangka ........................................................................................... 27

3.2 Uraian Kerangka Konseptual ....................................................................... 27

BAB IV METODE PENELITIAN ............................................................................. 28

4.1 Bahan Uji ...................................................................................................... 28

4.2 Objek Penelitian dan Tempat Penelitian ...................................................... 28

4.3 Alat dan Bahan ............................................................................................. 28

4.3.1 Alat Penelitian ....................................................................................... 28

4.3.2 Sampel Bakteri ...................................................................................... 28

4.3.3 Pengujian Difusi Cakram ...................................................................... 29

4.4 Variabel Penelitian ....................................................................................... 29

4.4.1 Variabel Bebas ...................................................................................... 29

4.4.2 Variabel Terikat .................................................................................... 29

4.5 Sterilisasi Alat dan Bahan ............................................................................ 29

4.5.1 Sterilisasi Kering ................................................................................... 29

xiii

4.5.2 Sterilisasi Basah .................................................................................... 30

4.6 Metode Penelitian ......................................................................................... 30

4.6.1 Rancangan Penelitian ............................................................................ 30

4.6.2 Kerangka Operasional ........................................................................... 30

4.7 Prosedur Kerja .............................................................................................. 31

4.7.1 Tahapan Persiapan ................................................................................ 31

4.7.2 Tahapan Pengujian ................................................................................ 34

4.8 Analisis Data ................................................................................................ 35

BAB V HASIL PENELITIAN ................................................................................... 36

5. 1 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ....................................................................... 36

5.1.1 Hasil Pengecekan Pewarnaan Bakteri Uji Sebelum Uji aktivitas

Antibakteri ........................................................................................................... 36

5.1.2 Hasil Pengujian Difusi Cakram .................................................................. 36

5.1.3 Hasil Pewarnaan Pada Cawan Petri Uji Setelah Uji Aktivitas

Antibakteri ........................................................................................................... 38

BAB VI PEMBAHASAN ........................................................................................... 41

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................... 44

7.1 Kesimpulan ........................................................................................................ 44

7.2 Saran .................................................................................................................. 44

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................. 45

xiv

DAFTAR SINGKATAN

µg = mikrogram

µL = mikroliter

ATP = Adenosina Trifosfat

BaCl2 = Barium Klorida

BHI = Brain Heart Infussion

CFU = Coloni Forming Unit

DMSO = Dimethyl Sulfoxide

DNA = Deoxyribonucleic Acid

g = Gram

H2SO4 = Asam sulfat

HDL = High Density Lipoprotein

KBM = Kadar Bunuh Minimal

KHM = Kadar Hambat Minimal

KLT = Kromatografi Lapis Tipis

L = liter

LAF = Laminar Air Flow

mg = miligram

MHA = Mueller Hinton Agar

MHB = Mueller Hinton Broth

mL = mililiter

mm = milimeter

NaCl = Natrium Klorida

pH = potensial Hidrogen

RNA = Ribonucleic Acid

UV = Ultra Violet

WHO = World Health Organization

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Buah Jeruk Keprok (Citrusreticulata/nobil……………………………………6

2.2 Escherichia coli (Jawetz et al., 2013)………………….……..………………..9

2 3 Stuktur Kloramfenikol (Carrol,2013)……………….. …….………………...16

2 4 Struktur Kimia n-Heksan (Martindale p.2024)…………………..……….….18

5.1 Pewarnaan Bakteri Peremajaan E.coli dengan ( pembesaran 1000×)……......39

5.2 Hasil rata-rata Diameter Zona Hambat Aktivitas Antibakeri terhadap

Bakteri Escherichia coli………………..………………………………...……40

5.3 Diagram Perbandingan Zona Hambat Pada Masin-masing Konsentrasi

Larutan Uji 4mg/disk, 8mg/disk dan 20mg/disk…………………..……..……....41

5.4 Hasi Pengujian Difusi Cakram terhadap Bakteri Escherichia coli

replikasi 1,2 dan 3…………………………………………..…………….……41

5.5 Pewarnaan Bakteri E. coli (Perbesaran 1000x) setelah Pengujian

Aktivitas Antibakteri a) Cawan petri 1, Replikasi 1; b) Cawan Petri 2,

Replikasi 2; c) Cawan Petri 3, Replikasi 3…………………….………..…..42

xvi

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II. 1 sifat fisika kimia n-heksan: .......................................................................... 19

IV. 1 Standart Penggunan Mcfarland (Dalynn Biologicals, 2012). .................... 35

xvii

DAFTAR BAGAN

Bagan Halaman

3 1 Kerangka Konsep .................................................................................................. 27

4 1 Skema Kerangka Operasional ............................................................................... 33

xviii

DAFTAR LAMPIRAN

Tabel Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup…………………………………………………………… 54

2 Skema Pembuatan Fraksi N-heksan Kulit Buah Citrus reticulata………………. 55

3 Surat Determinasi Tanaman……………………………………………………. 56

4 Nilai Sensitivitas Kloramfenikol dalam CLSI…………………………………. 57

5 Surat Keterangan Melakukan Penelitian……………………………………….. 59

6 Hasil Skrining Fitokimia ……………………………………………………….. 62

7 Perhitungan Konsenrasi Seiap Disk…………………………………………….. 65

8 Alat dan Bahan…………………………………………………………………… 66

45

DAFTAR PUSTAKA

Aniszewki, T. (2007). Alkaloid-secrets of life. Belanda: Elsevier.

Alhaj, N., Mariana, N, S., Raha, A, R., and Ishak, Z., 2007. Prevalence Antibiotic

Resistence among Escherichia coli from Different Sources in Malaysia.

Research Journal of Pharmacology. Vol.1 No.2, pp. 44-49

Backer, C.A.1965. Biological control by natural enemies. Edit N.V.P, Noordhoff

In Flora of Java,Vol. II. 1979. London: Cambridge University Press. 323

pp.

Chutia, M., Bhuyan, D. P., Pathak, M. G., Sarma, T. C.,Boruah P. 2009.

Antifungal Activity and Chemical Composition of Citrus reticulate Blanco

Essential Oil Againts Phytopathogens from North East India. Food Science

and Technology. 42(2009).p.777-780.

Clinical and Laboratory Standart Institutie (CLSI). 2017. Performance Standart

for Antimicrobial Suspectibility Testing 27th ed. CLSI supplement M100.

Wayne, Pennylsylavinia, USA.

Dalynn Biologicals. 2014. McFarland Standards for In Vitro Use Only.Catalogue

No. TM50-TM60. Canada.

Departemen Kesehatan RI. 2000. Parameter Standard Umum Ekstrak Tumbuhan

Obat. Jakarta: Direktorat Jendral Pengawalan Obat dan Makanan.

Dzen, S.M., Roekistiningsih., Santoso S., Winarsih S., Sumarno.,

IslamS.,Noorhamdani A.S., Murwani S., Santosaningsih D., 2003.

Bakteriologi Medik. Malang: Bayumedia Publishing: 131-139.

Enwa et al., 2016. Antibacterial Screening of the Ethanol and Aqueous

Extract of the Fruit Peel of Persea Americana Mill against Selected

Enteric Bacteria. Department of Pharmaceutical Microbiology, Faculty of

Pharmacy, Delta State University,PMB 1, Abraka, Delta State, Nigeria

Etebu, E., & Nwauzoma, A. B. (2014). A review on sweet orange (Citrus sinensis

L Osbeck): health, diseases and management. American Journal of

Research Communication, 2(2), 33-70.

46

Fadilla, W, N., Kiki, M, Y., Livia, S., 2015. Identifikasi Senyawa Aktif

Antibakteri Dengan Metode Bioautografi Klt Trerhadap Ekstrak Etanol

Tangkai Daun Talas (Colocasia Esculenta (L.) Schoot). Prosiding Penelitian

Spesia Unisba., ISSN: 2460-6472.

Hafsan et al. 2015. Penuntun Praktikum Mikrobiologi. LaboratoriumMikrobiologi

Fakultas Sains Dan Teknologi. Universitas Islam NegeriAlauddin Makassar.

Makassar.

Harliana, H., Weaniati, W., Muslimin, M., & Suwastika, I. N. (2013).

Organogenesis Tanaman Jeruk Keprok (CITRUS NOBILIS LOUR.) Secara

In Vitro Pada Media MS Dengan Penambahanberbagai Konsentrasi IAA

(INDOLE ACETID ACID) Dan BAP (BENZYL AMINO PURIN). Natural

Science: Journal of Science and Technology, 1(1).

Hidayat Rahmat,2018. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etanol Kulit Buah Citrus

reticulate Terhadap Pertumbuhan Staphylococcusc aureus Menggunakan

Metode Difusi Cakram. Skripsi. Program Studi Farmasi,Fakultas Ilmu

Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Malang, Indonesia.

Intekhab, J., & Aslam, M. (2009). Isolation of a flavonoid from the roots of Citrus

sinensis. Malaysian Journal of Pharmaceutical Sciences, 7(1), 1-8.

Jawetz, E., Melnick, J. L., & Adelberg, E. A. (2013). Medizinische Mikrobiologie.

Springer-Verlag.

Jawetz, Melnick, dan Adelberg. 2016. Medical Microbiology 27th Edition.

USA: McGraw-Hill Education

Kumalasari, E., Arsyad, M., & Rahman, R. N. (2017). Uji Daya Hambat Perasan

Buah Jeruk Siam Banjar (Citrus reticulata) terhadap pertumbuhan shigella

dysenteriae. Jurnal Ilmiah Ibnu Sina (JIIS): Ilmu Farmasi dan Kesehatan,

2(2), 254-262.

Manning, S. D., 2005. Escherichia Coli Infections. Cetakan Pertama.

Philadelphia: Chelsea House Publishers, p. 15-23.

47

Melliawati, R. (2015). Escherichia coli dalam kehidupan manusia. BioTrends,

4(1), 10-14.

Nataro, J.P.,dan Kaper, J.B. 1998. Diarrheagenic Escherichia coli.

ClinicalMicrobiology Reviews. 11(1): 142–201.

Ngaisah, S. (2010). Identifikasi dan Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Daun

Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav.) Asal Magelang (Doctoral

dissertation, Universitas Sebelas Maret).

Okwu, D. E., 2008. Citrus Fruits: A Rich Source of Phytochemicals and Their

Roles in Human Health. Int. J. Chem. Sci, Vol. 6 No. 2, p. 451-471.

Pamila, U. A., & Karpagam, S. (2017). Antimicrobial Activity Of Alternanthera

Bettzickiana (Regel) G. Nicholson And Its Phytochemical Contents.

International Journal Of Pharmaceutical Sciences And Research, 8(6),

2594-2599.

Rahardi, F. (2004). Mengurai benang kusut agribisnis buah Indonesia. Penebar

Swadaya.

Rahim, Rika, 2018. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etanol Bunga Averrhoa

bilimbi dengan Metode Difusi Cakram (Pengujian aktivitas antibakteri

terhadap bakteri Staphylococcusc aureus dan Escherichia coli. Skripsi.

Program Studi Farmasi,Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas

Muhammadiyah Malang, Indonesia.

Rahayu, M. P., Rahmawati, I., Listiantoro, W., & Chrisantoso, W. (2015).

ANTIBACTERIAL AND ANTIFUNGAL ACTIVITIES OF

KRANGEAN‟S STEM BARK (Litsea cubeba Pers.). Journal of Indonesian

Pharmaceutical, 12(2), 190-200.

Rao, S., 2006. Gram‟s Staining,

http://www.microrao.com/micronotes/pg/Gram%20stain.pdf, Diakses pada

tanggal 21 Mei 2018.

Putra, I. N. K., 2010. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcina

Mangostana L.) Serta Kandungan Senyawa Aktivnya. J. Teknol. dan

Industri Pangan, Vol 21. No. 1, 2010.

http://www.microrao.com/micronotes/pg/Gram%20stain.pdf

48

Pratiwi T, S., 2008. Mikrobiologi Farmasi. Penerbit Erlangga : Jakarta

Rosyidah, D. U., Aziz, M. A., & Romas, A. (2015). Uji Aktivitas Antibakteri

Ekstrak Etanol Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana l) terhadap

Bakteri Escherichia coli ATCC 11229 dan Staphylococcus Aureus ATCC

6538 Secara In Vitro.

Sari, R, Mustari, FNA, & Wahdaningsih, S, 2013, „Aktivitas Antibakteri Minyak

Atsiri Kulit

Jeruk Pontianak Terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli‟,

Traditional

Medicine Journal, vol. 18, no. 2, hal. 121-126

Sidana, J., Vipin, S., Sumitra, D., Parminder, N., and Suman, B., 2013. A Review

on Citrus – “The Boon of Nature”. Int. J. Pharm. Sci. Rev. Res., Vol. 18 No.

2, p. 20-27.

Soleha, Tri Umiana. 2015. Uji Kepekaan Terhadap Antibiotik. Juke Unila.5(9):

119-123.

Sultana, H. S., Mohammed, A., Bibhu, P. P., 2012. Influence of volatile

constituents of fruit peels of Citrus reticulata Blanco on clinically isolated

pathogenic microorganisms under In-vitro. Asian Pacific Journal of Tropical

Biomedicine. ELSIVIER., S, 1299-1302, 2012.

Suparno, 2013. Hubungan Kondisi Pencetakan dan Kontaminasi Escherichia coli

pada Pengolahan Dangke Susu Sapi di Kecamatan Cendana Kabupaten

Enrekang. Skripsi. Fakultas Peternakan Universitas Hasanuddin Makassar.

Makassar.

Taufiq, S., Umi, Y., Siti, H., 2015. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Biji

Buah Pepaya (Carica Papaya L.) Terhadap Escherecia Coli dan Salmonella

Typhi. Proseding Penelitian Spesia Unisba. ISSN 2460-6472.

Tjay, T. H., Rahardja, K., 2007. Obat-Obat Penting. Edisi ke-6. Cetakan pertama.

Jakarta: Gramedia. Hal. 85-88.

49

Torres, A. G., Arenas-Hernandes, M. MP, Martines-Laguna, Y., 2010. Pathogenic

Escherichia coli in Latin America. In: Torres, A. G. (Ed.). Overview of

Escherichia coli. United State of America: Bentham e Books, pp. 1.

Tri N., Henri, et al., 2015. Skrining Nypa frutican sebagai Anti Bakteri Bacillus

subtillis, Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. )Program Studi Ilmu

Kelautan, FMIPA, Universitas Sriwijaya, Indralaya, Indonesia. MASPARI

JOURNAL, 8(2):83-90

World Health Organization (WHO), 2014. Global Report for Research on

Infectious Diseases of Poverty.

Yuhana, S. A., Kusdarwati, R., & Meles, D. K. (2011). DAYA ANTIBAKTERI

EKSTRAK DAUN KEMANGI (Ocimum sanctum L.) TERHADAP

BAKTERI Streptococcus iniae SECARA IN VITRO. Fakultas Perikanan

dan Ilmu Kelautan Universitas Air Langga. Surabaya.

Yulianti,Indah Sri, Khasiat Sirsak, Penerbit Tibun Media : Surabaya, 2011