SKRIPSI

NOVELIA

UJI AKTIFITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK CAIR

STRAWBERRY (Fragaria x ananassa) DI PASARAN

DENGAN METODE DPPH

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2018

ii

iii

iv

KATA PENGANTAR Puji syukur Alhamdulillah penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala

limpahan rahmat dan hidayat serta karunia-Nya, sehingga penulis dapat

menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Aktifitas Antioksidan Ekstrak Cair

Strawberry (Fragaria x ananassa) di Pasaran dengan metode DPPH” untuk

memenuhi salah satu persyaratan akademik dalam menyelesaikan program sarjana

Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Muhammadiyah Malang.

Dalam proses penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari berbagai

pihak yang memberikan bimbingan, bantuan serta doa sehingga penulis dapat

menyelesaikan dengan baik. Untuk itu penulis penyampaikan rasa terimah kasih

yang sebesar-besar nya kepada :

1. Allah SWT, Tuhan semesta alam yang selalu memberikan rahmat dan

hidayah-Nya kepada seluruh umat dan Rasulullah SAW yang telah menuntun

kita menuju jalan yang lurus serta memberikan kelancaran dalam setiap

langkah sehingga dapat terselesaikannya skripsi ini.

2. Kedua orang tua saya. Papah Suharto dan mama Netty Suharti yang dengan

penuh kasih saying, ketulusan, dan kesabaran selalu memberikan semangat,

nasihat, dukungan moral, dan materi, serta yang paling utama adalah do’a

yang berlimpah sehingga saya dapat menjalani studi Farmasi dengan baik dan

menyelesaikan skripsi dengan lancar.

3. Kepada adik saya tersayang Muhammad Hidayat, terimakasih telah

memberikan dukungan, semangat, dan doa demi kelancaran skripsi saya.

4. Kepada pasangan saya M. Rizqan El Hafazi, terimakasi sudah menemani saya

dan terus memberikan semangat dari Ramadhan 2016 sampai sekarang dan

seterusnya.

5. Kepada Bapak Faqih Ruhyanudin, M, Kep., Sp. Kep. MB selaku Dekan

Fakultas Ilmu Kesehatan yang telah memberikan kesempatan untuk menimba

ilmu di Fakultas ini.

6. Dian Ermawati, M. Farm., Apt selaku Ketua Program Studi Farmasi yang

selalu mengarahkan dan memberikan motivasi.

7. Engrid Juni Astuti, M.Farm., Apt selaku dosen pembimbing I yang penuh

semangat dan kesabaran dalam mendukung, mengarahkan, dan membimbing

serta memberi motivasi dalam menyelesaikan skripsi ini.

v

8. Dra. Uswatun Chasanah, M.Kes., Apt selaku dosen pembimbing II yang

penuh kesabaran dan selalu berkenan membimbing penulis.

9. Drs. H. Achmad Inoni, Apt selaku dosen penguji I yang telah memberikan

kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini.

10. Dian Ermawati, M. Farm., Apt selaku dosen penguji II yang telah

memberikan kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini.

11. Ika Ratna Hidayati, S.Farm., Apt., M.Sc selaku dosen wali yang telah

memberikan asuhan akademik, bimbingan moral, dan nasehat selama

menjalankan studi farmasi di Universitas Muhammadiyah Malang.

12. Untuk semua dosen Program Studi Farmasi yang telah meluangkan waktu,

memberikan ilmu pengetahuan dan pengalaman yang luar biasa, serta

motivasi kepada kami selaku mahasiswa.

13. Para Laboran Laboraturium Program Studi Farmasi serta para staf Tata

Usaha, terimakasih atas segala bantuan selama penulis menimba ilmu.

14. DPPH Squad Aprilia Kartika Putri, terimakasih atas kerjasamanya,

perjuangan yang luar biasa dengan banyak kendala. Alhamdulillah semua

bisa terlewati.

15. Tim “Hedon” Anis Khoirun Sauma dan Aprilia Kartika Putri, terimakasih

atas kerjasama dan segala dukungannya. Teman dari awal masuk kuliah

hingga sekarang.

Dengan segala kerendahan hati penulis menyadari bahwa skripsi ini masih

jauh dari kesempurnaan. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak,

khususnya bagi penulis dan para pembaca pada umumnya.

Aamiin Ya Rabbal ‘Alamain..

ix

DAFTAR ISI

Lembar Pengesahan ............................................. Error! Bookmark not defined.

Lembar Pengujian ................................................................................................ iii

KATA PENGANTAR .......................................................................................... iii

ABSTRAK ............................................................................................................ vi

ABSTRAC ............................................................................................................ vii

RINGKASAN ..................................................................................................... viii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... ix

DAFTAR TABEL................................................................................................ xii

DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xv

DAFTAR SINGKATAN .................................................................................... xvi

BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ............................................................................................ 1

1.2 Rumusan Masalah ....................................................................................... 2

1.3 Tujuan Penelitian ......................................................................................... 2

1.4 Hipotesis ...................................................................................................... 2

1.5 Manfaat Penelitian ....................................................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................... 4

2.1 Tinjauan Tentang Strawberry ...................................................................... 4

2.1.1 Klasifikasi Strawberry ............................................................................. 4

2.1.2 Morfologi Strawberry .............................................................................. 5

2.1.3 Kandungan Senyawa Kimia Strawberry ................................................. 5

2.1.4 Manfaat Strawberry ................................................................................. 6

2.2 Tinjauan Tentang Ekstraksi ......................................................................... 7

2.2.1 Metode Ekstraksi dengan Menggunakan Pelarut .................................... 7

2.2.2 Proses Pembuatan Ekstrak ....................................................................... 8

2.2.3 Macam-Macam Ekstrak ......................................................................... 10

2.3 Tinjauan Tentang Radikal Bebas .............................................................. 10

2.4 Tinjauan tentang Antioksidan ................................................................... 11

2.4.1 Definisi Antioksidan .............................................................................. 11

x

2.4.2 Mekanisme Kerja Antioksidan .............................................................. 12

2.4.3 Klasifikasi Antioksidan ......................................................................... 12

2.5 Tinjauan Tentang Metode Uji Antioksidan ............................................... 14

2.5.1 Tinjauan Tentang ORAC ....................................................................... 14

2.5.2 Tinjauan Tentang TRAP ........................................................................ 14

2.5.3 Tinjauan Tentang TEAC ....................................................................... 15

2.5.4 Tinjauan Tentang FRAP ........................................................................ 15

2.5.5 Tinjauan Tentang DPPH ........................................................................ 15

2.6 Tinjauan Tentang Spektrofotometri UV-Vis ............................................. 17

2.6.1 Prosedur Umum Spektrofotometer UV-Vis .......................................... 18

2.6.2 Instrumen Spektrofotometer UV-Vis .................................................... 19

2.7 Tinjauan Tentang Vitamin C ..................................................................... 20

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................ 22

BAB IV METODE PENELITIAN .................................................................... 24

4.1 Tempat Penelitian ...................................................................................... 24

4.2 Waktu Penelitian ....................................................................................... 24

4.3 Bahan Penelitian ........................................................................................ 24

4.3.1 Bahan Ekstrak ........................................................................................ 24

4.3.2 Penapisan Fitokimia .............................................................................. 24

4.3.3 Analisis Antioksidan.............................................................................. 24

4.4 Alat Penelitian ........................................................................................... 24

4.5 Rancangan Penelitian ................................................................................ 25

4.5.1 Desain Penelitian ................................................................................... 25

4.5.2 Variabel Penelitian ................................................................................ 25

4.6 Penapisan Fitokimia .................................................................................. 25

4.6.1 Identifikasi Senyawa Golongan Flavonid.............................................. 25

4.6.2 Identifikasi Senyawa Golongan Polifenol dan Tanin ............................ 26

4.7 Evaluasi Uji Antioksidan .......................................................................... 26

4.7.1 Pembuatan Larutan ................................................................................ 26

4.7.2 Pembuatan Larutan Blanko ................................................................... 27

4.7.3 Pembuatan Larutan Uji .......................................................................... 27

xi

4.7.4 Pembutan Larutan Kontrol Positif (Vitamin C) .................................... 29

4.7.5 Proses Inkubasi ...................................................................................... 30

4.7.6 Pengukuran Absorbansi ......................................................................... 30

4.8 Analisis Data ............................................................................................. 30

4.8.1 Data Absorbansi .................................................................................... 30

4.8.2 Perhitungan Inhibisi ............................................................................... 30

4.8.3 Perhitungan IC50 .................................................................................... 30

BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................... 32

5.1 Hasil Uji Penapisan Fitokimia Ekstrak Cair Strawberry ........................... 32

5.1.1 Identifikasi Senyawa Flavonoid dengan Penapisan Fitokimia .............. 32

5.1.2 Identifikasi Senyawa Polifenol dengan Penapisan Fitokimia................ 34

5.2 Hasil Pengukuran Aktifitas Antioksidan dengan Metode DPPH Secara

Spektrofotometri ........................................................................................ 35

5.2.1 Hasil Pengukuran Larutan DPPH dengan Metanol p.a Secara

Spektrofotometri ............................................................................................. 35

5.2.2 Hasil Pengukuran Aktifitas Vitamin C dengan Metode DPPH pada

Spektrofotometri UV-Vis ................................................................................ 36

5.2.3 Hasil Pengukuran Aktifitas Antioksidan Ekstrak Cair Strawberry dengan

Metode DPPH pada Spektrofotometri UV-Vis ............................................... 36

BAB VI PEMBAHASAN .................................................................................... 39

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 41

7.1 Kesimpulan ................................................................................................ 41

7.2 Saran .......................................................................................................... 41

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 42

LAMPIRAN…………………...…...……………………………………………46

xii

DAFTAR TABEL

Tabel 2. 1 Tingkat Kerusakan Antioksidan dengan Metode DPPH……………...17

Tabel 5. 1 Hasil Penapisan Fitokimia dari Ekstrak Cair Strawberry .................... 35

Tabel 5. 2 Pengukuran Panjang Gelombang Maksimum Menggunakan DPPH dan

Metanol p.a Secara Spektrofotometri ................................................. 35

Tabel 5. 3 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Vitamin C dengan metode

DPPH pada Panjang Gelombang 515 nm .......................................... 36

Tabel 5. 4 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak Cair Strawberry dengan

metode DPPH pada Panjang Gelombang 515 nm .............................. 37

xiii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2. 1 Fragaria x ananassa .......................................................................... 4

Gambar 2. 2 Rumus Molekul DPPH ..................................................................... 16

Gambar 2. 3 Rumus Bangun Vitamin C ............................................................... 20

Gambar 3. 1 Kerangka Konseptual........................................................................23

Gambar 4. 1 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan DPPH...................................27

Gambar 4. 2 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan Blanko ................................. 27

Gambar 4.3 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan Uji Aktivitas Antioksidan

Ekstrak Cair Strawberry .................................................................. 28

Gambar 4. 4 Bagan Alur Kerja Pembutan Larutan Kontrol Positif (Vitamin C) .. 29

Gambar 5. 1 Hasil Penapisan Fitokimia Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid

pada PT. A (1) Sebagai Blanko, (2) Hasil Uji Bate-Smith dan Metclaf,

(3) Hasil Uji Wilstater……………………………………………...32

Gambar 5. 2 Hasil Penapisan Fitokimia Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid

pada PT. B (1) Sebagai Blanko, (2) Hasil Uji Bate-Smith dan Metclaf,

(3) Hasil Uji Wilstater ……………………………………………33

Gambar 5. 3 Hasil Penapisan Fitokimia Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid

pada PT. C (1) Sebagai Blanko, (2) Hasil Uji Bate-Smith dan Metclaf,

(3) Hasil Uji Wilstater………………………………......................33

Gambar 5. 4 Hasil Penapisan Fitokimia Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol

dan Tanin pada PT. A (1) Sebagai Blanko, (2) Hasil UjI Gelatin, (3)

Hasil Uji Ferri Klorida......................................................................34

Gambar 5. 5 Hasil Penapisan Fitokimia Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol

dan Tanin pada PT. B (1) Sebagai Blanko, (2) Hasil UjI Gelatin, (3)

Hasil Uji Ferri Klorida......................................................................34

Gambar 5. 6 Hasil Penapisan Fitokimia Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol

dan Tanin pada PT. C (1) Sebagai Blanko, (2) Hasil UjI Gelatin, (3)

Hasil Uji Ferri Klorida......................................................................35

Gambar 5. 7 Grafik Hubungan Ekstrak Cair Strawberry dengan % Inhibisi terhadap

Radikal DPPH ……………………………………………………38

xiv

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Daftar Riwayat Hidup ....................................................................... 46

Lampiran 2. Surat Pernyataan ............................................................................... 47

Lampiran 3. Surat Kerja Skripsi……………...…………………………………..48

Lampiran 4 Jadwal Penelitian ............................................................................... 48

Lampiran 5. Perhitungan Konsentrasi……………………........…………………50

Lampiran 6. Perhitungan Nilai Antioksidan (IC50)……………………....………53

Lampiran 7. Hasil Pengukuran Absorbansi………………………………......….56

Lampiran 8. Certificate of Analysis……………………………………………...58

Lampiran 9. Hasil Deteksi Plagiasi……………………………………………....60

Lampiran 10. Bahan dan alat…………………..………………………………...61

xvi

DAFTAR SINGKATAN

ORAC : Oxygen Radical Absorbance Capacity method

TRAP : Total Radical-Trapping Antioxidant Parameter method

TEAC : Trolox EquivalentAntioxidant Capacity method

FRAP : Ferric Reducing/Antioxidant Power method

DPPH : 2,2-diphenylpicrylhydrazyl

IC50 : Inhibitory Concentration 50%

Ppm : Parts-Per Millions

ROS : Reactive Oxygen Species

BI : Baku Induk

BK : Baku Kerja

UV-Vis : Ultraviolet Visible

42

DAFTAR PUSTAKA

Antolovich, M., Prenzler, P. D., Patsalides, E., McDonald, S., & Robards, K. 2002.

Methods for Testing Antioxidant Activity. Analyst. 127: 183-198.

Arnao, M.B. 2000. Some Methodological Problems in The Determination of

Antioxidant Activity Using Chromogen Radicals: A Practicecase. Tr Food

Sc Tehnol. 11(11) : 419 - 421.

Ayala-Zavala, J.F., Wang, S.Y., Wang, C.Y., dan Gonzalez-Aguilar, G.A. 2004.

Effect of storage temperatures on antioxindant capacity and aroma

compounds in strawberry fruit. Lebensm-Wiss.u.-Technol, 37:687-695.

Barhe, T.A. and Tchouya, G.R., 2014. Comparative Study of the Anti-Oxidant

Activity of the Total Polyphenols Extracted from Hibiscus Sabdariffa L.,

Glycine max L. Merr., Yellow Tea and Red Wine through Reaction with

DPPH Free Radical. Arabian Journal of Chemistry.

Belleville-Nabet, F. 1996. Zat Gizi Antioksidan Penangkalan Senyawa Radikal

Pangan dalam Sistem Biologis. Dalam: Prosiding Seminar Senyawa Radikal

dan Sistem Pangan. Reaksi Biomolekuler, Dampak terhadap Kesehatan dan

Penangkalan. CFNS-IPB dan Kedutaan Besar Prancis, Jakarta.

Budiman, S. dan Saraswati, D., 2005, Berkebun Stroberi Secara Komersial.

Jakarta: Penebar Swadaya.

Chanda, S., & Dave, R. 2009. In vitro models for antioxidant activity evaluation

and some medicinal plants possessing antioxidant propertes: An overview.

Afr. J. Microbiol. Res, 3. 981-996.

Darwis, V. 2007. Budidaya, Analisis Usahatani, dan Kemitraan Stroberi

Tabanan, Bali. Jakarta: Pusat Analisis Sosial Ekonomi dan Kebijakan

Pertanian.

Demple, B. Dan L. Harrison. 1994. Repair of Oxidative Damage to DNA:

Enzymology and Biology. Annual Review Biochemistry. 63: 915-948.

Depkes RI. 1995. Farmakope Indonesia, Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan

Republik Indonesia.

Depkes RI. 2004. Farmakope Indonesia, Edisi V.Jakarta: Departemen Kesehatan

Republik Indonesia.

Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:

Departemen Kesehatan Republik Indonesia.

43

Edawati, Z., 2012. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Ascidia Didemnum

sp. Dari Kepulauan Seribu Dengan Metode 1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil

(DPPH) dan Identifikasi Golongan Senyawa Dari Fraksi Teraktif. Depok:

Skripsi Sarjana Farmasi.

Friedberg, E.C., G.C. Walker, and W. Siede. 1995. DNA Repair and Mutagenesis.

American Society and Microbiology. Washington DC.

Gandjar, G.I., Rohman. A., 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka

Pelajar.

Gordon, M., 1990. The Mechanism of Antioxidant Action in Vitro. Di dalam:

Hudson, B. J. F. (Ed.) Food Antioxidant. Elsevier Applied Science. New

York. Hal: 1-18

Ionita, P. 2003. Is DPPH Stable Free Radical a Good Scavenger for Oxygen Active

Species?. Chem. Pap.Vol. 59, No. 1 : 11-16.

Karadag, A., Ozcelik, B. and Saner, S., 2009. Review of Methods to

DetermineAntioxidant Capacities. Food Anal. Methods.

Lampe, JW. 1999. Health Effect of Vegetables and Fruit Assesing Mechanism Of

Action In Human Experimental Studies. The American Journal Of Clinical

Nutrition, 70 Suppl :475 S-490 S

Langseth, L., 1995.Oxidant, Antioxidant, and Desease Prevention. International

Life Science Institute press, Belgium.

Lee, K.I., Kim, Y.J., Lee, H.J., and Lee, C.H., 2003.Cocoa Has More Phenolic

Phytochemical and Higher Antioxidant Capacity than Theas and Red Wine.

J. Agric. Food Chem., 51, 7292-7295.

Magalhaes, L.M., Segundo, M.A., Reis, S., Lima, and Jose L.F.C., 2008,

Methodological Aspects about in Vitro Evaluation of Antioxidant Propertie.

J. Anal.Chim.Acta.

Molyneux, P., 2004. The use of the stable free radical diphenylpicryl-hydrazyl

(DPPH) for estimating antioxidant activity. Journal of Science and

Technology, 26: 211-219.

Muchtadi, D., 2013. Antioksidan dan Kiat Sehat di Usia Produktif. Bandung:

Alfabeta

44

Ou, B., Huang, D.J., Woodill, M.H., Flanagan, J.A., and Deemer, E.K. 2002.

Analysis of Antioxidant Activities of Common Vegetables Employing

Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC) and Ferric Reducing

Antioxidant Power (FRAP) Assays: A Comparative Study. J. Agric. Food

Chem.

Purwaningsih, S., 2012. Aktivitas Antioksidan dan Komposisi Kimia MatahMerah

(Cerithldea obtusa). Bogor: Ilmu Kelautan, Vol. 17 (1) 39-48.

Rukmana, R., 1998, Stroberi Budidaya dan Pasca Panen. Yogyakarta: Kanisius.

Sandhiutami, D., Rahayu, L., Oktaviani, T., Sari, L.Y. Uji Aktivitas Antioksidan

Rebusan Daun Sambang Getih (Hemigraphis bicoolar Boerl.) dan

Sambang Solok (Aerva sanguinolenta (L.) Blume) Secara In Vitro.

Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila.

Setiani, A., 2007. Budidaya dan Analisis Usaha Stroberi. Jakarta: CV. Sinar

Cemerlang Abadi.

Soemadi W, 1997. Stroberi Di Pot dan Kebun. Yogyakarta: Aneka.

Sona, et al. 2015. Bioactive Compound and Antioxidant Activity in Different Types

of Berries. International Journal of Molecular Sciences.

Sunarni, T., Pramono, S. & Asmah, R., 2007.Flavonoid antioksidan penangkap

radikal dari daun kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook f. & Th.).

Majalah Farmasi Indonesia,18(3).

Syukur, R., Alam, G., Mufidah, Rahim, A., Tayeb, R., 2011. Aktivitas Antiradikal

Bebas Beberapa Ekstrak Tanaman Familia Fabaceae. JST Kesehatan,

Vol.1No.1 : 61-67

Teow, C.C., Truong, V., McFeeters, R.F., Thompson, R.L., Pecota, K.V. and

Yencho, G.C., 2007. Antioxidant Activities, Phenolics, and β–Carotene

Contents of Sweet Potato Genotypes with Varying Flesh Colours. J.Food

Chem.

Trilaksani, W., 2003. Antioksidan: Jenis, Sumber, Mekanisme Kerja dan Peran

terhadap Kesehatan. Institue Pertanian Bogor.Bogor. Hal 1-12.

Van Duin, C.F. 1947. Buku Penuntun Ilmu Resep Dalam Praktek Dan Teori.

Penerjemah K. Satiadarma Apt. Jakarta: Pecenongan.

45

Watson,G David. 2007. Analisis Farmasi Edisi-2. Penerbit : Buku Kedokteran

EGC.

Widyastuti, dkk. 2016.Aktivitas Antioksidan dan Tabir Surya Ekstrak Etanol

Daun Stroberi (Fragaria x ananassa A.N. Duchesne). Sumatera Barat:

Ikatan Apoteker Indonesia.

Wikipedia. Strawbeery. https://en.wikipedia.org/wiki/Strawberry. [online].

Diakses tanggal 13 Desember 2017.

Winarsi,H. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta: Kanisius.

Wiryawan, A., Ririni Retnowati, Akhmad Sabarudin. 2007. Kimia Analitik.

Malang: Direktorat Pembinaan Sekolah Menengah Kejuruan.

Yuniastuti, A., 2008. Gizi dan Kesehatan. Yogyakarta: Cetakan I. Graha Ilmu.