7/22/2019 ptek00-8

1/6

52

KULTURMED KTERSUT RM

Balaf Penefdan Vet er i ner J LREMartad nata30Bogor 16114RNGK S N

Med a adal ah seamsubst am yang komposi si nya terdi n dan nut r i s i tertentu yangdi per l ukan unt uk menumbuhkanden mempel aj ar i s i f a t s i f a t bakten Komposi si nut r i s i medi ayang kompl i t mengandung somber karbon, ni t rogen, bel erang, f o s f a t l ogammkro, vi tamn,penyubur , NaCl den a i r Kri stal v i o l e t bn wngreen, b i l e s a l t nat ri ums e l e n i t a n t i b i o t i k dena n t i j amur f ungi zon adal ah bahanpenghambat/pembunuh bakter i / j amur yang tak di mgi nkanpads waktui s o l a s i yang sexi ng di t ambahkankedal ammed aFenol reed neut ral reed brwnthi nrolbl ue adal ah zat penunj uk i ndi katar yang sexi ng di pakai di antaranya unt uk mempel aj ar if ermentasi karbohi drat- Lebi h d a r i 90 macammeda yang sudah di buat dapat di gol ongkanmmad 6 k l a s i f i k a s i berdasmkan a s a l somber n u t r i s i bent uk f i s i k komponen ki mawi ,perbedaan pertumbuban bakteri , dapat t i dal mya menyel eksi bakt en den dapat t i daknynmenumbuhkanbakt ei yangr ewel Kate nunct Medi a, n u l r i a i babema t pengbambat zat pasuVU L

PEN HULU N

TeewTebds Fungsiarroi ronPenkd2000

Semua bent uk kehi dupan, mul ai dari j asad reni k m kroorgani sme sampaikepada manusi a mempunyai per samaan dal ampersyaratan n u t r i s i tertentu dal ambentuk zat- zat k im a yang di per l ukan unt uk per t umbuhan den f ungsi nya yang nor malLESTARI 1998 D l aboratori ummkrobi ol ogubakter i ol ogi unt ukmenumbuhkandenmempel aj ar i s i f a t s i f a t satu bakteri di perl ukan suatu subs

7/22/2019 ptek00-8

2/6

Secaraul tur medi a bakteri hares mengandung sumber karbon,ni t r ogen sul f ur fosfat vi tamnatau bahanfi ahanyangdapat mendorongpertumbuhanbakten seperti ekstrak dagingatau ragi Ekstrakdagingmengandungpeptondanasamasamamno Pepton di pakai dal amkul t ur media sebagai sumber ni t rogen banyaksenyawa ni t rogen sederhanatedcandungdal ampept on sehi nggamudahdi l epas unsurni trogennya Sel ai n i t u bakteri j uga adayangmembutuhkan penyubur seperti darahserumserta l ogam dari garamgaramanorgani k sebagai trace elements / elemenmkro seperb Ca, Mn Na, Mg Zn, Co, Fe, Cu ANONM1994, COLLINdanLYNE1987)

Dari macaw-macawmedi ayang sudah di l wat bai k yangdi ramu maupunbentuk si ap pakai untuk keperl uan i s o l a s i i denti f i kasi dan pemel i l waan bakteridi pedukanbahan-bahannutr i si sebagai beri l att1 Energi

Untuk keperl uan pertumbuhanbakteri pada medi a di per l ukan energi yangdi perol ehdanoksidawsenyawaorgani kyangterkandungdal ammedi at ers ebut sepert ikar bohi dr at danprotei n 2 Sumber karbon C)

Sumber C bi sa di perol eh dari senyawa organi k protei n dan karbohi dr at Protei n di perol eh msal uya dari ekstrak daging atau pept on sedangkan kar bohi dr atmsal nya gl ukosa l aktosa sukrosa3 N trogenN)

PERSYARATANNUTRSITestyTab- Prngai aaMRPewh62000

Sumberntuk kebutuhan nutr i si ada 2 yanu erasal dari ni t rogenanorgani kdanari ni t r ogen organi k Kebutuhanari ni t rogen anorgamc bi asanyadi pakai amomumni trat NH4NO3) atauamoni umul f at NH4)2SO4, sedangkanarini t r ogenorgani kdi per ol eh dari protei n/ pepton atau asamasamamno4 Bel erang S

Sumber Suntuk kebutuhan nutr i si ada 2 yai tu Syangberasal dansenyawaanorgani kdanSdari senyawaorgani k KebutuhanS dari senyawaanorgani k bi asanyadi pakai amoniumul fat NH4)2SO4, sedangkankebutuhan S dan senyawaorgani kdi per ol eh dal ammolekul protei n/ pepton atau asamasamamno

53

7/22/2019 ptek00-8

3/6

6 Unsur l ogamanorgani k

Tens T ek e i s F S e n gs l o n a l nonP en dt l i 2

5 FosfatFosf at di pakai bi asanya dal ambentuk garam e p e r t i kal i umdi hi drogen f o s f a t

KH2PO4 , di kal i umhi drogenf osf at 2HP04), nat r i umdi hi drogen f o s f a t NaH2PO4)dan di nat r i umhi drogenf osf at a2HP04)

Beber apa spesi es bakteri ada yangmmrl ukan unsur l ogame r t e n t u unsur-unsur andi perl ukan danberguna untuk mengaktAanenz i m supaya reaksi bi oki nuawdal am s e l berj al an l ancar Unsur l ogam i n i pemakai annya s e d i k i t s e k a l i danmrupakanel emenmkro Unsur - unsur l ogam t u di perol eh dari senyawaan gar amnyayai tu

1 Vi tamn

Ca dip garamCaC12Mn di pakai garamMnC12Cu di pakai garamCUS04-5H20Na dip pramNaClMg di pakai pramMgSO-7x2Zn dip garamZnSO4. 7H20Co dip pramCo NO3)2. 6H20Fe di pakai pramNH43Fe CH 0 3

Vi tam n di perl ukan unt uk mengakt i f f i an enzi m banyak spesi es bakteri yangdapat meusi nt esa sendi ri vi tam n yang di budrhkannya Be)empa vi tam n yangbi asa/ seri ng di gunakan adal * vi tam n B vi tam n B6 vi tam n C dan vi tam n Bkompl ek 2 Penyubur

Untuk menumbuhkan bakteri yang revel s u l i t di t ambahkan per l udi t ambahkan penyubur kedal ammdi a Penyubur yangbi asa di pakai antar a l ai n dar ahdomba/ sapi serumayam sapukuda dan supl emen tertentu3 N CI

Sel ai n sebagai el emen mkro pramNACI di perl ukan unt uk menai kkantekanan osmosa dankesei mbanpn f i s i k o khems s e l bakteri yang tumbuhdal ammedi atersebut

54

7/22/2019 ptek00-8

4/6

4 Agar-agarUntuk medi a bentuk padat/ sem padat di tambabkan agar-agar sebagai

pemadat 5 A r

Ar mutl akdi peri ukan sel ai n sebagai pel ar ut babas medi a umumnyabal ct er isenang/ l ebi h subur tumbuhnya dengan kandungan a i r , denbi asanya digunakan ai rsti ng( aquadest )

Sel ai n babas-babas nut ri si yang di syar at kan bagi permmbahan battedadepul e kedal ammedia tcrtenmdi tambahkan bahan-bahan l dmWandbi drk tMentadenganmaksud unl i nk menghambat/memb~u~h bakt er i f r amur yang tak di i ngi nkan,terutama pada vakta i s o l a s i , sects penambahan r at penun uk ( i adi kam) , aWakmempel a ari /mndetdcsi msai nya f ermentasi karbohi drmyang ads datummedi aBaba-bahanpengbambat yangbi asadi pakai ant ar a l a i n kri stal vi l et , bri bes grambi l e sak natri umsel eni t, becbagai macamanLbioQden and j amur ( f ungi zon)sedangkan zat pemmuk yang sermg di pakai ada ah ed, neutr al reddonbromhimol bf i e Sel ai n per syar at an nut ri si denpenambahanbabas penghambat adzpul e beberapa kondi si f i s i l yang dapat mempengaruhi pettumbubanbakun sepe: t isuhu, keadaanudaradender aj at keammanl pHTabel 1

Tabel 1 Kondi si f i s t yangmempengaruhi pertumbahanbeberi ~~

ber LESTARI ( 1998 COLLINdonLYNE( 1987)

TswmTsb FwWowdrawPewf2

55

Kondi si F i s i k Ti pe Bakt er i Kondi si Bi a>mol i nl aabesi- FSI I I D OM

Suhu - Mesof i l U - 30 C- Termof i l - obhgat 25 - 47 - f akuhat i f 45 - 75C25 - 55 C- Aerob 02bebasmudakperm

Oksi gm - Anaerob Matt bi l eadsOZbebas- Fakul t at i f anaerob Tumbuhbai k adsO2 dak- Mi kroaerof i l i k Tumbuhbai k desi gnsedi ki t O2bebas

pH - Bakter i pads hewnden pHoptimum6, 57, 5tumuhanCahaya - Foto s i n t e t i k f o t o t r o f Meshadssumber cahaya

7/22/2019 ptek00-8

5/6

KL SI FIK SIDi t i nj au dar i sudut keper l uan/ penggunaan dan s i f a t - s i f a t n y a da r i l e b i h 90

macawmedi a yang t e l a h di buat dapat di gol ongkan menj adi k l a s i f i k a s i berdasarkansumber nut r i s i ny a, bent uk f i s i k komposi si k i m a , perbedaan per t umbuhan b ak t e r i n y a,dapat t i daknya menyel eks i / menghambat b a k t e r i yang t ak di i ngi nkan s e r t a dapatt i daknya mnumbuhkan b a k t e r i yang r evel Tabel 2Tabel Hasi l Kl aci f i kaci Medi a

TemmT. km Fungsi onal noMe-sn

Beberapa cont ohJewmedi a yang di gunakan khumsnya pads i s o l a s i b a k t e r idapat d i l i h a t pads Tabe13

Dasar K l as i f i kkas i S i f at Medi a ContohSumber n u f i s i al amah S u s u , t l u r k en t an g bua tan Nut r i e n Aga r , T r y p t i c Soy

Aga r , Hear t I nf u s i on Agar Bent uk f i s i k c a i rs e t e ng ah pa . s end s ol i d Nut nen b r o t h , T r i p t o s a b r o t hpadat Ar i es T r a n s p o r t Medi umS t u a r t Tmnspor t Medi nn Nwimga r , T r i p t o s a Agar Komposi si ki ma kompl ek Meul er Hi nt on Aga r , Numens i n t e t i k Agar Dor set Henl ey Perbedasn per t umbuhan membedakan d i f er e ns i al Eosi n Me t h i l e ne Bl ue Agar ,

McConkey Agar S e l e k s i meml i h s e l eW B r i f i a n t Gr een Aga r ,

Sal neonel l a Shi gel l a Aga r ,Bi smut h S u l f i t e Agar Rewm f as t i di o us di p er k a y a Bl ood ar , SerumAgar

7/22/2019 ptek00-8

6/6

Tabel 3 Contohmedi ayangbi asadi pakai untuk i sol asi bakt eri

Sumber Anoni m994 komuui kasi pri badi

KESIIVPUL N

Tens Tekni s Fungsi onal nvnPencha 2000

Dal ammeml i h dan menggunakan medi a yang cocok dan ef i si en per l umengetahui s i f at s i f at dan kel ompok kel ompok bakt eri yang akan di pel aj ari dengandi bant u pengal amandanperti mbanganyangr asi onal

D FT RPUST KNONMOUS1982 The Oxoi d Manual of Cul t ur e Medi a I ngr edi ent s and otherLaboratory Ser vi ce, Fi f t h edi t i on asii~Engl and

NONMOUS1994 Df oo Manual of Debydrated Cul t ur e Medi a and Reagents f orM cr o bi o l o gi cal and Cl i ni cal Laboratory Prosedures Tenth edi t i o nDet roi t Mchi ganUSCOLLI N CH and PLYNE 1987 M cr o bi o l o gi cal Method Fi f t h edi t i on But t erwor t hs LondonCOW N. T 1975 CowanandSt eel s Manual f or I dent i f i c at i on of Medi cal Bact eri aSecondedi t i o n Cambri dge Uni versi t y Press Cambri dgeLEST RI Y998 Persi apan DanPengenal an Bahan Laboratori umM kr obi o l ogi Pel at i han Peni ngkatanPengetahuanDanKeterampi l anTekni si Li t kayasaPert ani an, I PB Bogor

Medi a BW der iBoodAgar Haemophi l us, Pasteurel l a, Staphyl ococcus, Streptococcus,Ant= Cl ostr i di umMacConkeyAgar Ecol i , P r o t e s t s Pseudomonas , Shi gel l a, Sal monel l aEosi n Methi l eneBl ue Agar Proteus, Pseudomonas, Col i f o m Sal monel l a, Shi gel l aBri l i ant GreenAgarTrypte SoyAgar Sal monel l a

Brucel l a, L i s t e r i a Pasteurel l a, P r o t e s t s Pseudomonas,Wut r i enAgar Staphyl ococcusSal monel l a Shi gel l aAgar Antm Staphyl ococcusCookedMeat Medi um Sal monel l a, Shi gel l aTri ptoseAgar Cl ostr i di umBi smut h S u l f i t e Agar Brucel l a, Pasteurel l a

Sal monel l a