PENGARUH PEMBERIAN SEDUHAN BUBUK KAYU MANIS

(Cinnamomum burmannii) TERHADAP NEUROPATI DIABETIK PADA

TIKUS WISTAR HIPERGLIKEMI YANG DIINDUKSI ALOKSAN

PROPOSAL PENELITIAN

Oleh :

Budiono

NIM 112010101053

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS JEMBER

2014

2

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Diabetes melitus (DM) merupakan gangguan endokrin yang ditandai

dengan hiperglikemia dan perubahan metabolisme karbohidrat, lipid dan protein.

Hal ini disebabkan oleh kekurangan produksi insulin oleh sel beta pankreas dan

penurunan sensitivitas insulin (Bisht & Sisodia, 2011). Data WHO menyebutkan

pasien diabetes melitus pada tahun 2011 dengan usia lebih dari 20 tahun mencapai

366 juta orang. Sedangkan Indonesia merupakan negara urutan ke-7 dengan

prevalensi diabetes tertinggi di bawah China, India, USA, Brazil, Rusia dan

Meksiko (Unwin et al., 2012).

Komplikasi dari hiperglikemia dibagi menjadi komplikasi makrovaskuler

seperti penyakit jantung koroner dan penyakit pembuluh darah perifer dan

komplikasi mikrovaskuler seperti nefropati diabetik, neuropati, dan retinopati

(Fowler, 2008). Neuropati adalah komplikasi yang paling umum dari diabetes

melitus (DM), hal ini terjadi pada 60% pasien dan mempengaruhi kualitas hidup.

Gejala klinis yang terkait dengan neuropati diabetik antara lain hiperalgesia,

parestesia dan nyeri spontan yang dapat menjalar dari jari kaki ke kaki hingga

tungkai dan dapat juga terjadi pada jari-jari dan tangan (Farmer et al., 2012).

Penanganan diabetes melitus meliputi pembatasan kalori, olahraga teratur,

gaya hidup, dan pemberian antidiabetes oral, tetapi penggunaan klinis obat

antidiabetes biasanya disertai dengan efek samping seperti perut tidak nyaman,

hipoglikemia berat, asidosis laktat, dan edema perifer (Niu, 2014). Oleh karena

itu, pencarian antidiabetes baru dengan efektivitas yang lebih baik dan efek

samping yang lebih rendah terus dikembangkan, diantaranya melalui efek

antidiabetes dari beberapa tanaman obat yang telah didukung oleh hasil dari

percobaan hewan ataupun uji klinis (Ghorbani et al., 2013). Pengobatan alternatif

dengan menggunakan tanaman tradisional telah menunjukkan efek hipoglikemik

dan penurunan resiko terhadap komplikasi sekunder dari diabetes seperti

kerusakan ginjal, stress oksidatif, dan fatty liver (Juarez Rojop et al., 2012).

3

Diabetes melitus dikaitkan dengan komplikasi jangka panjang berupa

nyeri perifer, dimana keluhan yang muncul berupa nyeri spontan, alodinia, dan

hiperalgesi. Hasil studi terhadap pasien neuropati diabetik menunjukkan bahwa

tingkat nyeri yang dirasakan berhubungan dengan kadar glukosa darah yang tidak

terkontrol dan perubahan biokimia akut dalam jaringan saraf muncul akibat

hiperglikemi berkepanjangan dan hal ini beresiko terhadap perkembangan dari

neuropati diabetik. Terdapat empat mekanisme yang terlibat dalam kerusakan

pembuluh darah akibat hiperglikemi yaitu peningkatan polyol pathway,

peningkatan advance glycation end-product (AGE) formation, aktivasi protein

kinase C (PKC), dan peningkatan hexosamine pathway. Penelitian klinis dan

eksperimental menunjukkan bahwa reactive oxygen species (ROS) memainkan

peran penting dalam patofisiologi nyeri neuropati diabetik (Morani and

Bodhankar, 2007). Pada kondisi tersebut, antioksidan seluler gagal

mempertahankan sistem perlindungan tubuh melalui efek penghambat

pembentukan radikal bebas sehingga diperlukan antioksidan eksogen untuk

meredam kerusakan oksidatif (Kaleem, 2006).

Salah satu tanaman obat yang memiliki efek hipoglikemi dan antioksidan

antara lain kayu manis (Cinnamomum burmannii). Sebenarnya bubuk kayu manis

dari kulit spesies Cinnamomum telah lama digunakan dalam obat-obatan di Cina

sebagai antidiabetes (Cheng et al., 2012). Hasil studi yang dilakukan oleh Iyer et

al. (2009) menunjukkan bahwa pemberian ekstrak kayu manis yang mengandung

cinnamaldehyde dengan dosis 5-20 mg/kgBB/hari mampu menurunkan glukosa

darah dan meningkatkan insulin pada tikus yang diinduksi. Selain itu berdasarkan

penelitian yang dilakukan oleh Soni and Bhatnagar (2009) menyatakan bahwa

mengkonsumsi 2 gram bubuk kayu manis (Cinnamomum cassia) pada pria

dewasa penderita DM tipe 2 selama 40 hari dapat menurunkan kadar glukosa

darah puasa sebesar 18,87%. Pada kulit kayu manis (Cinnamomum zeylanicum)

menghasilkan minyak atsiri yang berfungsi sebagai antioksidan (El-Baroty, 2010),

studi lainnya menunujukkan bahwa ekstrak kulit kayu manis (Cinnamomum

burmannii) mampu menghambat lipopolisakarida dan memiliki peran sebagai

antioksidan (Al-Dhubiab, 2012). Sedangkan efek kayu manis (Cinnamomum

4

burmannii) terhadap komplikasi diabetes melitus belum pernah dilakukan

penelitian.

Berdasarkan latar belakang tersebut, maka peneliti ingin mengetahui

pengaruh seduhan bubuk kayu manis (Cinnamomum burmannii) terhadap

neuropati diabetik pada tikus wistar hiperglikemi yang diinduksi aloksan.

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang tersebut, maka dapat dirumuskan permasalahan

penelitian sebagai berikut: bagaimana pengaruh seduhan bubuk kayu manis

(Cinnamomum burmannii) terhadap neuropati diabetik pada tikus wistar

hiperglikemi yang diinduksi aloksan.

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

Untuk mengetahui pengaruh seduhan bubuk kayu manis (Cinnamomum

burmannii) terhadap neuropati diabetik pada tikus wistar hiperglikemi yang

diinduksi aloksan.

1.3.2 Tujuan Khusus

Menganalisis efek pemberian seduhan bubuk kayu manis terhadap reaksi

tikus wistar hiperglikemi dengan komplikasi neuropati diabetik yang diinduksi

aloksan.

1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Manfaat Ilmiah

Sebagai informasi ilmiah mengenai potensi seduhan bubuk kayu manis

terhadap komplikasi diabetes melitus berupa neuropati diabetik.

1.4.2 Manfaat Praktis

Dapat digunakan sebagai dasar pengembangan penanggulangan

antidiabetik di masa mendatang.

5

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Diabetes Melitus

2.1.1 Definisi

Diabetes melitus adalah suatu penyakit karena tubuh tidak mampu

mengendalikan jumlah glukosa dalam aliran darah. Ini menyebabkan

hiperglikemia, suatu keadaan gula darah yang tinggi sudah membahayakan.

Faktor utama pada diabetes melitus ialah insulin, suatu hormon yang dihasilkan

oleh kelompok sel beta di pankreas. Insulin memberi sinyal kepada sel tubuh agar

menyerap glukosa. Insulin, bekerja dengan hormon pankreas lain yang disebut

glukagon yang juga mengendalikan jumlah glukosa dalam darah. Apabila tubuh

menghasilkan terlampau sedikit insulin atau jika sel tubuh tidak menanggapi

insulin dengan tepat terjadilah diabetes. Diabetes biasanya dapat dikendalikan

dengan makanan yang rendah kadar gulanya, obat antidiabetes maupun suntikan

insulin secara teratur. Diabetes melitus dapat menyebabkan komplikasi seperti

kebutaan dan stroke (Setiabudi, 2008).

2.1.2 Epidemiologi

Data WHO menyebutkan pasien diabetes melitus pada tahun 2011 dengan

usia lebih dari 20 tahun mencapai 366 juta orang. Sedangkan Indonesia

merupakan negara urutan ke-7 dengan prevalensi diabetes tertinggi di bawah

China, India, USA, Brazil, Rusia dan Meksiko (Unwin et al., 2012). DM lebih

banyak ditemukan pada wanita dibanding pria serta pada golongan tingkat

pendidikan dan status sosial yang rendah. Kelompok usia terbanyak DM adalah

55-64 tahun yaitu 13.5%. Beberapa hal yang dihubungkan dengan faktor resiko

DM adalah obesitas, hipertensi, kurangnya aktivitas fisik dan rendahnya konsumsi

sayur dan buah-buahan (Riskesdas, 2007).

2.1.3 Etiologi

Penyebab diabetes melitus sampai sekarang belum diketahui dengan pasti,

kekurangan insulin adalah penyebab utama dan faktor herediter memegang

peranan penting. Berdasarkan penyebabnya, diabetes melitus dibagi dua, yaitu:

a. Insulin Dependent Diabetes Melitus (IDDM)

6

Insulin Dependent Diabetes Melitus (IDDM) sering terjadi pada usia

sebelum 30 tahun, disebut juga juvenille diabetes yang ditandai dengan adanya

meningkatnya kadar glukosa darah dalam tubuh atau hiperglikemia (Bare &

Suzanne, 2002). Faktor genetik dan lingkungan merupakan faktor pencetus

IDDM. Oleh karena itu insidensi lebih tinggi akibat adanya infeksi virus (dari

lingkungan) misalnya coxsackievirus B dan streptococcus sehingga pengaruh

lingkungan dipercaya mempunyai peranan dalam terjadinya DM (Bare &

Suzanne, 2002). Virus atau mikroorganisme akan menyerang pulaupulau

langerhans pankreas yang membuat kehilangan produksi insulin. Dapat pula

akibat respon autoimun, dimana antibodi sendiri akan menyerang sel beta

pankreas. Faktor herediter juga dipercaya memainkan peran munculnya penyakit

ini (Bare & Suzanne, 2002).

b. Non Insulin Dependent Diabetes Melitus (NIDDM)

Non Insulin Dependent Diabetes Melitus (NIDDM) terjadi akibat

penurunan sensitivitas terhadap insulin (resistensi insulin) atau akibat penurunan

jumlah produksi insulin. Resistensi insulin adalah berkurangnya kemampuan

insulin untuk merangsang pengambilan glukosa oleh jaringan perifer dan untuk

menghambat produksi glukosa oleh hati. Dalam hal ini, sel tidak mampu

mengimbangi resistensi insulin sepenuhnya, sehingga terjadi defisiensi relatif

insulin. Kondisi ini menyebabkan sel mengalami desensitisasi terhadap glukosa.

Untuk mengatasi resistensi insulin dan mencegah terbentuknya glukosa dalam

darah harus terdapat peningkatan insulin yang disekresikan. Pada penderita

toleransi glukosa terganggu, keadaan ini terjadi akibat sekresi insulin yang

berlebihan dan kadar glukosa akan dipertahankan pada tingkat yang normal.

Namun, jika sel-sel tidak mampu mengimbangi peningkatan kebutuhan insulin

maka kadar glukosa akan meningkat dan terjadi diabetes tipe 2 atau Non Insulin

Dependent Diabetes Melitus (NIDDM) (Bare & Suzanne, 2002).

2.1.4 Manifestasi Klinis

a. Poliuria

Kekurangan insulin untuk mengangkut glukosa melalui membran dalam

sel menyebabkan hiperglikemia sehingga serum plasma meningkat atau

7

hiperosmolaritas menyebabkan cairan intrasel berdifusi kedalam sirkulasi atau

cairan intravaskuler, aliran darah ke ginjal meningkat sebagai akibat dari

hiperosmolaritas dan akibatnya akan terjadi diuresis osmotik (poliuria) (Bare &

Suzanne, 2002).

b. Polidipsia

Akibat meningkatnya difusi cairan dari intrasel kedalam vaskuler

menyebabkan penurunan volume intrasel sehingga efeknya adalah dehidrasi sel.

Akibat dari dehidrasi sel mulut menjadi kering dan sensor haus teraktivasi

menyebabkan seseorang haus terus dan ingin selalu minum (polidipsia) (Bare &

Suzanne, 2002).

c. Polifagia

Karena glukosa tidak dapat masuk ke sel akibat dari menurunnya kadar

insulin maka produksi energi menurun, penurunan energi akan menstimulasi rasa

lapar. Maka reaksi yang terjadi adalah seseorang akan lebih banyak makan. (Bare

& Suzanne, 2002).

d. Penurunan berat badan

Karena glukosa tidak dapat di transport kedalam sel maka sel kekurangan

cairan dan tidak mampu mengadakan metabolisme, akibat dari itu maka sel akan

menciut, sehingga seluruh jaringan terutama otot mengalami atrofidan penurunan

secara otomatis (Bare & Suzanne, 2002).

2.1.5 Komplikasi

Komplikasi-komplikasi pada diabetes melitus dapat dibagi menjadi dua,

yaitu:

1) Komplikasi yang bersifat akut

a) Koma hipoglikemi

Koma hipoglikemi terjadi karena pemakaian obat-obat diabetik yang

melebihi dosis yang dianjurkan sehingga terjadi penurunan glukosa dalam darah.

Glukosa yang ada sebagian besar difasilitasi untuk masuk ke dalam sel

b) Ketoasidosis diabetik

Minimnya glukosa di dalam sel akan mengakibatkan sel mencari sumber

alternatif untuk memperoleh energi sel, jika tidak ada glukosa maka benda-benda

8

keton yang digunakan oleh sel. Kondisi ini akan mengakibatkan penumpukan

residu pembongkaran benda-benda keton yang berlebihan yang dapat

mengakibatkan asidosis.

c) Hiperosmolar non ketotik

Koma ini terjadi karena penurunan komposisi cairan intrasel dan ekstrasel

karena banyak dieksresi melalui urin.

2) Komplikasi Kronis (Menahun)

a) Makroangiopati

Mengenai pembuluh darah besar, pembuluh darah jantung, pembuluh

darah tepi, pembuluh darah otak, perubahan pada pembuluh darah besar dapat

mengalami aterosklerosis sering terjadi pada NIDDM. Komplikasi

makroangiopati adalah penyakit vaskular otak, penyakit ateri coroner, dan

penyakit vaskuler perifer.

b) Mikroangiopati

Mengenai pembuluh darah kecil, retinopati diabetik dan nefropati diabetik.

Perubahan-perubahan mikrovaskuler yang ditandai dengan penebalan dan

kerusakan membrane diantara jaringan dan pembuluh darah sekitar. Terjadi pada

penderita IDDM yang terjadi neuropati, nefropati, dan retinopati.

c) Neuropati

Akumulasi sorbitol di dalam jaringan dan pembuluh metabolik

mengakibatkan fungsi sensorik dan motorik saraf menurun kehilangan sensori

mengakibatkan penurunan persepsi nyeri.

d) Rentan infeksi seperti tuberkulosis paru, gingivitis dan infeksi saluran

kemih.

e) Kaki diabetik

Perubahan mikroangiopati, makroangiopati dan neuropati menyebabkan

perubahan pada ekstremitas bawah. Komplikasinya dapat terjadi gangguan

sirkulasi, infeksi, gangren, penurunan sensasi, dan hilangnya fungsi saraf sensorik

dapat menunjang terjadinya trauma atau tidak terkontrolnya infeksi yang

mengakibatkan gangren (Purnyami et al., 2011).

9

2.2 Neuropati Diabetik

Neuropati diabetik adalah adanya gejala dan atau tanda dari disfungsi saraf

penderita diabetes tanpa ada penyebab lain selain diabetes melitus (Boulton,

2005). Studi epidemiologik menunjukkan bahwa dengan tidak terkontrolnya kadar

gula maka akan mempunyai resiko yang lebih besar untuk terjadinya neuropati,

seperti halnya ulkus kaki dan amputasi. Suatu kenaikan kadar HbA1c 2%

mempunyai resiko komplikasi neuropati sebesar 1,6 kali lipat dalam waktu 4

tahun. Polineuropati diabetik menggambarkan keterlibatan banyak saraf tepi dan

distribusinya umumnya bilateral simetris meliputi gangguan sensorik, motorik

maupun otonom (Sjahrir, 2006). Pada pasien diabetes melitus tipe 2, 59%

menunjukkan berbagai neuropati, 45% diantaranya menderita polineuropati

diabetik (Aswin, 2004). Gejala yang mudah dikenal adalah kelainan yang sifatnya

simetris (Sjahrir, 2006). Gangguan sensorik selalu lebih nyata dibanding kelainan

motorik dan sudah terlihat pada awal penyakit. Ditandai dengan hilangnya akson

dan serabut saraf terpanjang terkena terlebih dulu. Umumnya gejala nyeri,

parastesi dan hilang rasa muncul pada malam hari. Khas diawali dari jari kaki

berjalan ke proksimal tungkai. Seiring memberatnya penyakit jari tangan dan

lengan terkena sehingga memberi gambaran hand gloves stocking. Kelainan ini

dapat mengenai saraf sensoris, motor dan fungsi otonomik dengan bermacam-

macam derajat tingkat, dengan predominan terutama disfungsi sensoris (Sadeli,

2008). Kelemahan otot-otot tungkai dan penurunan reflek lutut dan tumit terjadi

lebih lambat. Adanya nyeri dan menurunnya rasa terhadap temperatur melibatkan

serabut sarabut saraf kecil (small fiber neuropathy) dan merupakan predisposisi

terjadinya ulkus kaki. Gangguan propioseptif, rasa getar dan gaya berjalan

(sensory ataxia gait) menunjukkan keterlibatan serabut saraf ukuran besar (large

fiber neuropathy). Disfungsi otonom yang timbul adalah adanya anhidrosis, atonia

kandung kencing dan pupil reaksi lambat. Awitan gejala perlahan sebagai gejala

negatif dan atau positif. Serabut saraf berukuran besar dan kecil terkena walaupun

manifestasi dini yang muncul mungkin dari serabut kecil (Bansal, 2006).

Banyak teori yang dikemukan oleh para ahli tentang patofisiologi

terjadinya neuropati diabetika, namun semuanya sampai sekarang belum diketahui

10

sepenuhnya. Faktor-faktor etiologi neuropati diabetika diduga adalah vaskular,

berkenaan dengan metabolisme, neurotrofik dan imunologik. Studi terbaru

menunjukkan adanya kecenderungan suatu multifaktorial patogenesis yang terjadi

pada neuropati diabetik (Ametov, 2003). Stres oksidatif terjadi dalam sebuah

sistem seluler saat produksi dari radikal bebas melampaui kapasitas antioksidan

dari sistem tersebut. Jika antioksidan seluler tidak memindahkan radikal bebas,

radikal bebas tersebut menyerang dan merusak protein, lipid dan asam nukleat.

Oksidasi produk radikal bebas menurunkan aktifitas biologi, membuat hilangnya

energi metabolisme, sinyal sel, transport, dan fungsi-fungsi utama lainnya. Hasil

produknya juga membuat degradasi proteosome, kemudian dapat menurunkan

fungsi seluler. Akumulasi dari beberapa kerusakan membuat sel mati melalui

nekrotisasi atau mekanisme apoptosis. Hiperglikemik kronis menyebabkan stres

oksidatif pada jaringan cenderung pada komplikasi pasien dengan diabetes.

Metabolisme glukosa yang berlebihan menghasilkan radikal bebas (Vincent et al.,

2004). Beberapa jenis radikal bebas di produksi secara normal di dalam tubuh

untuk menjalankan beberapa fungsi spesifik. Superoxide, hydrogen peroxide

(H2O2), dan nitric oxide (NO) adalah tiga diantara radikal bebas ROS yang

penting untuk fisiologi normal, tetapi juga dipercaya mempercepat proses penuaan

dan memediasi degenerasi selular pada keadaan sakit.

Ketidakseimbangan radikal bebas dan antioksidan akan menyebabkan

terjadinya stress oksidatif yang berakibat pada kerusakan jaringan atau endotel.

Stres oksidatif merupakan modulator penting pada perkembangan komplikasi

DM. Beberapa bukti penelitian ilmiah menunjukkan bahwa didapatkan

peningkatan kadar basal dari produksi radikal bebas dan penurunan anti-oksidan

yang memburuk seiring dengan peningkatan glukosa plasma sehingga terjadilah

suatu keadaan stres oksidatif (Vincent et al., 2004). Peningkatan glukosa intrasel

juga berperan dalam proses patologis. Glukosa dapat bereaksi dengan Reactive

Oxygen Species (ROS) dan akan membentuk karbonil. Karbonil bereaksi dengan

protein atau lemak akan menyebabkan pembentukan glikosidasi atau liposidasi.

Selain itu glukosa dapat juga membentuk karbonil secara langsung dengan protein

dan membentuk Advanced glycation end products (AGEs) yang berperan dalam

11

stress oksidatif dan dapat menyebabkan kerusakan sel. Peningkatan glukosa

intrasel juga akan meningkatkan glikolisis dan aktivasi Tricarboxylic acid (TCA)

sehingga menyababkan ketidakseimbangan transport elektron ke mitokondria dan

mempercepat produksi superoxide. Superoxide adalah radikal bebas yang sangat

reaktif dan dapat menimbulkan kerusakan jaringan. Superoxide juga berperan

dalam aktivasi protein kinase C (PKC) dengan cara merangsang sintesa

diacylglycerol (Dubby et al., 2004). Peningkatan produksi superoxide pada

mitokondria selama kondisi hiperglikemia menyebabkan peningkatan stress

oksidatif. Selama hiperglikemia rasio antara nicotiamide adenine dinucleotide

phosphal hyrolase (NADPH)/NAD+ menurun karena kelebihan penggunaan

NADPH untuk mengurangi pembentukan glukosa menjadi sorbitol. Sebagai

konsekuensinya NADPH tersedia untuk mempertahankan anti oksidan GSH pada

pengurangan dari katalisator oleh GSH reductase juga meningkatakan stress

oksidatif. Peningkatan AGEs dan pengikatan AGE pada reseptornya (RAGE) juga

meningkatkan stress oksidatif. Peningkatan formasi diacylglycerol (DAG) pada

jalur PKC menimbulkan stress oksidatif lewat aktivasi bebas PKC dari NADPH

oxidase (Srivastata, 2005).

Mekanisme yang menyebabkan stres oksidatif pada hiperglikemik kronik

dan perkembangan neuropati telah diperiksa pada model dengan binatang. Stres

oksidatif ini dihubungkan dengan perkembangan apoptosis pada neuron dan

menyokong sel glia sehingga dapat disatukan dengan mekanisme lainyang

berperan dalam kerusakan sistem saraf pada diabetes. Pada binatang percobaan

dampak terjadinya stres oksidatif pada sel glia akan menyebabkan proses

demielinisasi dimana hal ini diterangkan dengan adanya penurunan kecepatan

hantar saraf dan manifestasinya berupa timbulnya gejala nyeri sedangkan pada

neuron akan mengakibatkan aksonopati, penurunan kapasitas regenerasi dari

akson sehingga dapat menimbulkan gejala negatif pada neuropati diabetika perifer

(Dobretsov et al., 2007). Oleh karena itu dibutuhkan antioksidan dari luar tubuh

terutama antioksidan alami yang terdapat dalam berbagai jenis tanaman untuk

menghambat reaksi oksidasi sehingga jumlah radikal bebas menjadi berkurang

(Sriram et al., 2011).

12

2.3 Aloksan

Aloksan (ALS) (2,4,5,6-tetraoxypyrimidine; 2,4,5,6-pyrimidinetetrone)

adalah suatu substrat yang secara struktural merupakan derivat pirimidin

sederhana (Lenzen, 2008). Nama ALS diperoleh dari penggabungan kata allantoin

dan oksalurea atau asam oksalurik, allantoin adalah produk asam urat yang

diekskresikan oleh janin dalam alantois dan asam oksalurik diturunkan dari asam

oksalat dan urea yang ditemukan dalam air seni (Rohilla and Ali, 2012). Aloksan

merupakan bahan kimia yang digunakan untuk menginduksi binatang percobaan

untuk menghasilkan kondisi diabetik eksperimental (hiperglikemik) secara cepat.

Aloksan dapat diberikan secara intravena, intraperitoneal, atau subkutan pada

binatang percobaan. Tikus hiperglikemik dapat dihasilkan dengan menginjeksikan

120-150 mg/kgBB. Aloksan dapat menyebabkan diabetes melitus tergantung

insulin pada binatang tersebut (aloksan diabetes) dengan karakteristik mirip

dengan Diabetes Melitus tipe 1 pada manusia (Yuriska, 2009). Mekanisme kerja

aloksan diawali dengan ambilan aloksan ke dalam sel-sel pankreas dan

kecepatan ambilan ini akan menentukan sifat diabetogenik aloksan. Ambilan ini

juga dapat terjadi pada hati atau jaringan lain, tetapi jaringan tersebut relatif lebih

resisten dibanding pada sel-sel pankreas. Sifat inilah yang melindungi jaringan

terhadap toksisitas aloksan (Amma, 2009).

Gambar 2.3 Struktur Molekul ALS

Pemberian ALS dengan dosis 120 mg/kg bb pada tikus jantan strain Wistar

secara intra peritoneal selama 5 hari mampu meningkatkan kadar glukosa darah

puasa (Sharma et al., 2010; Chitra et al., 2010). Pemberian ALS pada mencit

jantan (Mus musculus) strain Swiss albino dengan dosis 150 mg/kgBB dalam

13

larutan 0,9% NaCl secara intra peritoneal mampu menyebabkan keadaan

hiperglikemia pada hewan coba selama 5 hari (Sharma and Garg, 2008) sampai

satu minggu setelah penyuntikan (Sharma et al., 2010). Studiawan dan Santosa

(2005) menyatakan, pemberian ALS dengan dosis 100 mg/kg bb mencit jantan

galur Wistar setiap 4 hari sekali selama 8 hari menunjukkan kenaikan kadar

glukosa darah hewan coba yang berarti. Pemberian aloksan pada tikus wistar

jantan dengan dosis tunggal 120 mg/kgBB dalam larutan NaCl 0,9% mampu

menaikkan kadar glukosa darah setelah 48 jam injeksi aloksan dan menimbulkan

komplikasi berupa neuropati diabetik yang ditunjukkan dengan perubahan

signifikan pada tingkah laku hewan coba (Morani and Bodhankar, 2007).

2.4 Kayu Manis (Cinnamomum burmannii)

Kayu manis adalah tanaman yang banyak digunakan sebagai rempah-

rempah dan obat herbal di seluruh dunia. Komponen aktif berupa polifenol

terdapat pada kulit kayu manis dapat berfungsi sebagai antioksidan dalam

melawan bahaya radikal bebas dalam membran sel. Senyawa polifenol memiliki

kemampuan sebagai scavenger radikal bebas dengan cara mendonasikan satu

elektron yang tidak berpasangan atau atom H+ dalam radikal bebas sehingga

reaksi oksidasi berantai pembentukan radikal bebas akan berhenti karena terjadi

hambatan produksi lipid peroxide (Mudgal et al., 2010). Menurut Rohmah (2010)

kayu manis mengandung cynamaldehide, eugenol, dan senyawa lain seperti

flavanoid, tanin, triter-penoid, dan saponin, cinnamaldehyde merupakan turunan

dari senyawa polifenol yang bersifat sebagai antioksidan dan ekstrak kulit kayu

manis mengandung komponen cinnamaldehyde sebesar 90,9 %. Struktur molekul

dari cynnamaldehyde ditampilkan pada Gambar 2.4.

Gambar 2.4 Struktur Molekul Cynnamaldehyde

14

Antioksidan mampu menurunkan stress oksidatif. Hal ini dapat

menimbulkan efek protektif terhadap sel beta pankreas dan meningkatkan

sensitivitas insulin. Antioksidan memiliki mekanisme dalam penghambatan

fosfodiesterase sehingga kadar cAMP dalam sel- pankreas meningkat

menyebabkan sekresi insulin oleh (Panjuantiningrum, 2009). Anderson et al.

(2004) menyatakan, pada ekstrak etanol Cinnamon terdapat komponen utama

yang disebut dengan procyanidins yang memiliki aktivitas biologi mirip insulin.

Ekstrak kayu manis mengaktivasi sintesis glikogen, peningkatan pengangkutan

glukosa dan mengaktivasi reseptor kinase insulin. Pemberian ekstrak kulit kayu

manis (Cinnamomum burmannii) mampu menghambat lipopolisakarida dan

memiliki peran sebagai antioksidan (El-Dhubiab, 2012). Pemberian ekstrak kayu

manis yang mengandung cinnamaldehyde dengan dosis 5-20 mg/kg/hari

menurunkan glukosa darah dan meningkatkan insulin pada tikus yang diinduksi

streptozotosin (Iyer et al., 2009. Soni and Bhatnagar (2009) menyatakan,

konsumsi 2 gram bubuk kayu manis (Cinnamomum cassia) pada pria dewasa

penderita DM tipe 2 selama 40 hari menurunkan kadar glukosa darah puasa

sebesar 18,87 %. Pemberian bubuk kayu manis pada tikus wistar dengan diabetes

melitus tipe 2 mampu menurunkan kadar LDL (Soemardini, 2011), pemberian

minuman serbuk kayu manis selama 7 hari mampu menurunkan kadar kolesterol

total darah pada tikus (Vanessa et al., 2013). Berdasarkan hasil studi Hardiyani

(2013) menunjukkan bahwa pemberian seduhan bubuk kayu manis dosis 0,73

mg/gBB selama 7 hari dapat menurunkan kadar glukosa darah mencit yang

diinduksi aloksan.

15

2.5 Kerangka Konseptual Penelitian

Aloksan merupakan substrat yang secara struktural merupakan derivat

pirimidin sederhana bersifat toksik selektif terhadap sel beta pankreas yang

memproduksi insulin sehingga produksi insulin menurun dan kadar glukosa tikus

meningkat sehingga terjadi diabetes melitus yang menyebabkan terjadinya stres

Kayu Manis

(Cinnamomum burmanii)

Polifenol

Cynamaldehide dan cinnamic

acid

Antioksidan eksogen

Radical scavenger

Aloksan

Sel Beta Pankreas rusak

Hiperglikemia

Stres oksidatif

Respon nyeri tikus

Komplikasi

(neuropati diabetik)

Menyumbangakan satu

elektron tidak berpasangan

16

oksidatif yang mengarah pada komplikasi berupa neuropati diabetik. Seduhan

bubuk kayu manis (Cinnamomum burmannii) diduga memiliki efek antioksidan

berupa senyawa polifenol yang terdiri dari cynamaldehide dan cinnamic acid yang

berperan sebagai radical scavenger dengan menyumbangkan satu elektron tidak

berpasangan dalam radikal bebas sehingga menghambat pembentukan radikal

bebas dalam tubuh. Akibatnya kadar glukosa darah tikus akan menurun dan

sekaligus memberikan efek terhadap komplikasi berupa neuropati diabetik yang

ditunjukkan melalui respon nyeri tikus meningkat.

2.6 Hipotesis Penelitian

Terdapat pengaruh pemberian seduhan bubuk kayu manis (Cinnamomum

burmannii) terhadap respon rasa nyeri tikus wistar yang diinduksi aloksan.

17

BAB 3. METODE PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian

Jenis penelitian ini adalah true experimental design dengan rancangan

penelitian Post Test Only Control Group Design.

3.2 Rancangan Penelitian

Rancangan penelitian yang digunakan adalah penelitian Post Test Only

Control Group Design. Penilaian hanya dilakukan pada saat post test, dengan

membandingkan hasil penelitian dari kelompok kontrol dengan kelompok

perlakuan. Secara sistematis rancangan penelitian dapat digambarkan sebagai

berikut:

K(-)

NaCl

D1

P1

D6, G6

K(+)

Aloksan

D2

P2

D7, G7

P

R

K1

Aloksan

D3

P3

D8, G8

K2

Aloksan

D4

P4

D9, G9

K3

Aloksan

D5

P5

D10, G10

Keterangan :

P : Populasi

R : Randomisasi

K(-) : Kelompok kontrol negatif

K(+) : Kelompok kontrol positif

K1 : Kelompok perlakuan 1

K2 : Kelompok perlakuan 2

18

K3 : Kelompok perlakuan 3

D1 : Data kadar glukosa darah kelompok kontrol negatif setelah pemberian

NaCl 0,9%

D2 : Data kadar glukosa darah kelompok kontrol positif setelah pemberian

aloksan 120 mg/kgBB

D3 : Data kadar glukosa darah kelompok perlakuan 1 setelah pemberian

aloksan 120 mg/kgBB

D4 : Data kadar glukosa darah kelompok perlakuan 2 setelah pemberian

aloksan 120 mg/kgBB

D5 : Data kadar glukosa darah kelompok perlakuan 3 setelah pemberian

aloksan 120 mg/kgBB

P1 : Perlakuan terhadap kelompok kontrol negatif (tanpa pemberian seduhan

bubuk kayu manis)

P2 : Perlakuan terhadap kelompok kontrol positif (tanpa pemberian seduhan

bubuk kayu manis)

P3 : Perlakuan terhadap kelompok perlakuan 1 (pemberian seduhan bubuk

kayu manis 0,5 mg/gBB)

P4 : Perlakuan terhadap kelompok perlakuan 2 (pemberian seduhan bubuk

kayu manis 0,75 mg/gBB)

P5 : Perlakuan terhadap kelompok perlakuan 3 (pemberian seduhan bubuk

kayu manis 1 mg/gBB)

D6 : Data kadar glukosa darah kelompok kontrol negatif setelah perlakuan

D7 : Data kadar glukosa darah kelompok kontrol positif setelah perlakuan

D8 : Data kadar glukosa darah kelompok perlakuan 1 setelah perlakuan

D9 : Data kadar glukosa darah kelompok perlakuan 2 setelah perlakuan

D10 : Data kadar glukosa darah kelompok perlakuan 3 setelah perlakuan

G6 : Respon geliatan tikus wistar kelompok kontrol negatif

G7 : Respon geliatan tikus wistar kelompok kontrol positif

G8 : Respon geliatan tikus wistar kelompok perlakuan 1

G9 : Respon geliatan tikus wistar kelompok perlakuan 2

G10 : Respon geliatan tikus wistar kelompok perlakuan 3

19

3.3 Populasi, Sampel, Besar Sampel, dan Teknik Pengambilan Sampel

Sampel yang digunakan pada penelitian ini diambil dengan teknik random

sederhana (simple random sampling) dari populasi tikus wistar jantan dengan

berat badan rata-rata 150-200 gram dan berumur 2-3 bulan. Jumlah sampel

ditentukan berdasarkan rumus Federer, yaitu:

(t-1) (r-1) 15

(t-1) (r-1) 15

(5-1) (r-1) 15

4 (r-1) 15

r 4,75 5

Pada rumus tersebut, t adalah jumlah perlakuan dan r adalah banyaknya

replikasi setiap kelompok perlakuan. Jadi sampel yang digunakan pada penelitian

ini adalah 5 ekor tikus untuk 5 kelompok sehingga jumlah sampel yang digunakan

adalah 25 ekor tikus.

3.4 Variabel Penelitian

3.3.1 Variabel Bebas

Variabel bebas penelitian ini adalah dosis pemberian seduhan bubuk kayu

manis (Cinnamomum burmannii) pada tikus wistar.

3.3.2 Variabel Terikat

Variabel terikat adalah respon rasa nyeri tikus.

3.3.3 Variabel Terkendali:

1. Usia tikus

20

2. Jenis kelamin (jantan)

3. Berat badan tikus

4. Dosis aloksan

5. Waktu dan lama perlakuan

6. Pemeliharaan tikus

3.5 Definisi Operasional

3.4.1 Kayu manis (Cinnamomum burmannii)

Kayu manis (Cinnamomum burmannii) yang digunakan adalah bubuk

kayu manis dalam kemasan yang kemudian diencerkan menggunakan 50 mL

aquades. Seduhan bubuk kayu manis ini diberikan kepada tikus peroral melalui

sonde lambung pada kelompok perlakuan pertama, kedua, dan ketiga dengan

dosis masing-masing 0,5 mg/gBB, 0,75 mg/gBB, dan 1 mg/gBB selama 7 hari.

3.4.2 Respon Nyeri Tikus

Neuropati diabetik merupakan kerusakan saraf sebagai komplikasi dari

diabetes melitus. Kerusakan saraf dapat diketahui dengan melakukan pengamatan

terhadap respon nyeri yang dinilai dengan melihat reaksi geliatan dari tikus yang

berupa menjilat telapak kaki atau melompat di dalam hot plate.

3.4.3 Usia Tikus

Ditentukan berkisar 2-3 bulan karena pada umur tersebut hewan coba telah

matur.

3.4.4 Jenis Kelamin Tikus

Hewan coba yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus wistar

jantan karena relatif lebih kuat dan tidak terganggu oleh kehamilan.

3.4.5 Aloksan

21

Aloksan yang digunakan dalam penelitian ini adalah 120 mg/kgBB. Tikus

yang memiliki KGD lebih dari 250 mg/dl diberikan perlakuan selanjutnya

(Morani and Bodhankar, 2007).

3.4.5 Waktu dan Lama Perlakuan

Perlakuan dilakukan pada saat hewan coba tenang atau telah diaklimatisasi

selama 1 minggu.

3.4.6 Pemeliharaan dan Perlakuan Hewan Coba

Pemeliharaan dan perawatan hewan coba di sebuah kandang berukuran 45

x 30 x 20 cm. Kandang beralaskan sekam kering. Pada kandang kontrol negatif

berisi 5 ekor hewan coba, kontrol positif berisi 5 ekor hewan coba, dan kandang

perlakuan 1, 2, dan 3 masing-masing berisi 5 ekor hewan coba dengan pemberian

makanan pellet dan minum berupa aquades pada semua kandang. Pemberian

aloksan dilakukan pada hari kedua setelah aklimatisasi dan dipuasakan selama 48

jam, tikus wistar diinduksi dengan dosis 120 mg/kgBB pada kandang kontrol

positif, perlakuan 1, 2, dan 3, sedangkan pada kandang kontrol negatif diberikan

NaCl. Setelah 48 jam pemberian aloksan kadar glukosa darah tikus diukur

menggunakan blood glucose test strip, kemudian pada kandang perlakuan 1, 2,

dan 3 diberikan seduhan bubuk kayu manis dengan dosis masing-masing 0,5

mg/gBB, 0,75 mg/gBB, 1 mg/gBB peroral melalui sonde lambung selama 7 hari.

Pengukuran respon nyeri tikus dinilai dengan memasukkan tikus ke dalam hot

plate test pada hari 1, 3, 5, dan 7 saat pemberian seduhan bubuk kayu manis.

3.6 Alat dan Bahan Penelitian

3.5.1 Alat Penelitian

1. Kandang hewan coba

2. Wadah makanan hewan coba

3. Botol minuman hewan coba

22

4. Kawat kasa untuk tutup kandang

5. Sekam untuk alas kandang

6. Alat sonde lambung

7. spuit 6 cc

8. Blood glucose test strip

9. Hot-cold plate

3.5.2 Bahan Penelitian

1. Tikus wistar

2. Aloksan

3. Seduhan bubuk kayu manis

3.7 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Farmako Terapi dan Fisiologi

Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember. Waktu pelaksanaan adalah bulan

September 2014.

3.8 Prosedur Penelitian

3.8.1 Adaptasi Hewan Coba

Sebelum penelitian dimulai, tikus wistar diadaptasikan terlebih dahulu

selama tujuh hari di Laboratorium Farmako Terapi dan Fisiologi Fakultas

Kedokteran Gigi Universitas Jember. Makanan dalam bentuk pellet dan minuman

diberikan secara oral.

3.8.2 Pembagian Kelompok Hewan Coba

Hewan coba yang sudah diaklimatisasi akan dikelompokan menjadi 5

kelompok dan masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus, diantaranya 2

kelompok kontrol yaitu kelompok kontrol positif dan kelompok kontrol negatif

serta 3 kelompok perlakuan, yaitu kelompok perlakuan 1, 2, dan 3.

23

3.8.3 Perlakuan Hewan Coba

a. Pemaparan Aloksan

Setelah aklimatisasi dan dipuasakan selama 48 jam, K(+), K1, K2, dan K3

diinduksi aloksan dengan dosis 120 mg/kgBB dengan pelarut 0,9% NaCl secara

intraperitoneal. Perhitungan dosis ALS dapat dilihat pada lampiran. Kelompok

kontrol negatif diberi NaCl secara intraperitoneal dengan volume pemberian 1 ml.

48 jam setelah induksi aloksan dilakukan pengukuran kadar glukosa darah hewan

coba. Hewan coba dengan kadar glukosa darah puasa lebih besar dari 250 mg/dl

digunakan untuk perlakuan selanjutnya.

b. Pemberian Seduhan

Kelompok perlakuan 1, 2, dan 3 diberi seduhan bubuk kayu manis secara

peroral melalui sonde selama 7 hari dengan volume pemberian 1 ml, sedangkan

kelompok kontrol diberi aquades. Pembuatan seduhan dilakukan dengan

mendidihkan 200 ml air, kemudian diamkan sampai suhu air mencapai 70oC.

Gambar bubuk kayu manis dan perhitungan dosis seduhan bubuk kayu manis

dapat dilihat pada lampiran.

3.8.2 Pemeriksaan Respon Rasa Nyeri Hewan Coba

Respon rasa nyeri pada tikus wistar dilakukan dengan cara pengukuran

hiperalgesia dengan rangsangan panas (thermal stimulus) dengan metode Hot

Plate Test yaitu dengan mengamati gerakan tikus terhadap panas yang diberikan

pada telapak kaki dengan suhu diatur konstan 51 1 oC dan waktu 10 detik

digunakan sebagai cut off time. Pengukuran dilakukan pada hari ke 1, 3, 5, dan 7

bersamaan dengan pemberian seduhan bubuk kayu manis.

3.9 Analisis Data

Data yang diperoleh diolah dan dilihat distribusi datanya normal atau tidak

dengan uji Shapiro-Wilk. Bila distribusi datanya normal dan varians datanya

24

sama, kemudian diuji beda dengan menggunakan statistik parametrik One Way

Anova, jika P < 0,05 dilanjutkan dengan uji Post Hoc. Bila distribusi datanya tidak

normal atau varians data tidak sama, maka ditansformasi. Jika setelah

ditransformasi tetap didapatkan distribusi data yang tidak normal atau tidak sama,

maka dilakukan uji beda menggunakan statistik non parametrik Kruskal-Wallis,

jika didapat P < 0,05 dilanjutkan dengan uji Post Hoc (Mann Whitney test).

a. Jika P < 0,05; maka ada perbedaan yang bermakna

b. Jika P > 0,05; maka tidak ada perbedaan yang bermakna

3.10 Etika Penelitian

Telah didapatkan Ethical Clearence dari Komisi Etik Penelitian Kesehatan

Fakultas Kedokteran Universitas Jember.

25

3.11 Alur Penelitian

H 1-7

H 10, 12,

P2

25 ekor tikus wistar

Aklimatisasi selama 7 hari

Randomisasi

H 8

Tikus wistar dimasukkan ke dalam hot plate

Diamati geliatan respon nyeri mencit

Analisis Data

Hasil

P3

Pemberian NaCl

0,1 ml

Pemberian Aloksan

120 mg/kgBB

Pemberian Aloksan

120 mg/kgBB

P1K(+)K(-)

glukosa darah

Pemberian seduhan

bubuk kayu manis

0,75 mg/gBB

Pemberian Aloksan

120 mg/kgBB

Cek kadar

Pemberian Aloksan

120 mg/kgBB

Cek kadar

glukosa darah

Cek kadar

glukosa darah

Cek kadar

glukosa darah

Cek kadar

glukosa darah

Tanpa pemberian

seduhan bubuk

kayu manis

Pemberian seduhan

bubuk kayu manis

0,5 mg/gBB

Pemberian seduhan

bubuk kayu manis

1 mg/gBB

H 10

H 10-16

14, 16

26

DAFTAR PUSTAKA

Al-Dhubiab, B.E. 2012. Pharmaceutical applications and phytochemical profile of

Cinnamomum burmannii. Pharmacogn Rev. Vol 6(12): 125131.

Ametov, A.S., Barinov, A., Dyck, P.J., et al. 2003. The sensory symptoms of

diabetic polyneuropathy are improved with alpha lipoic acid. Diabetes Care.

Vol 26: 770-776.

Anderson, R.A., Broadhurst, L., Polansky,M.M., Schmidt, W.F., Khan, A.,

Flanagan, V.P., Schoene, N. W. and Graves, D.J. 2004. Isolation and

Characterization of Polyphenol Type-A Polymers from Cinnamon with

Insulin-Like Biological Activity. J Agric Food Chem. Vol. 52 (1): 65-70.

Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. Riset Kesehatan Dasar

(RISKESDAS) 2007. Kementrian Kesehatan Republik Indonesia; 2007.

Bansal, V., Kalita, J., Misra, U.K. 2006. Diabetic Neuropathy. Postgrad Med J.

Vol 82: 95-100.

Bisht, S., Sisodia, S.S. 2011. Assessment of antidiabetic potential of

Cinnamomum tamala leaves extract in streptozotocin induced diabetic rats.

Indian Journal of Pharmacology. Vol.43(5): 582-585.

Boulton, A.J., Vinik, A.I., Arezo, J.C., et al. 2005. Diabetic neuropathies, a

statement by American diabetes association. Diabetes Care. Vol 28(4): 956-

962.

Bril, V., Perkins, B., Toth, C. 2013. Neuropathy. Can J Diabetes. Vol 37: S142-

S144

Cheng, D.M., Kuhn, P., Raskin, I. 2012. In vivo and in vitro antidiabetic effects of

aqueous cinnamon extract and cinnamon polyphenol-enhanced food matrix.

Food Chemistry. Vol 135(4): 2994-3002.

Dobretsov, M., Romanosky D., Stimer, J.R. 2007. Early Diabetic Neuropathy:

Trigger and Mechanisms. World J Gastroenterol. Vol 13:175-191.

Dubby, J.J., Campbell, R.K., Setter, S.M., White, J.R., Rasmussen, K.A. 2004.

Diabetic Neuropathy an Intensive Review. Am J Health-Sys Pharm. Vol

61:160-176.

27

El Baroty, G.S., El Baky, H.A., Saleh, M.A. 2010. Characterization of antioxidant

and antimicrobial compounds of cinnamon and ginger essential oils. African

Journal of Biochemistry Research. Vol4(6): 167-174.

Farmer, K.L., Li, C., Dobrowsky, R.T. 2012. Diabetic Peripheral Neuropathy:

Should a Chaperone Accompany Our Therapeutic Approach. Pharmacol Rev.

Vol 64: 880900.

Fowler, M.J. 2008. Microvascular and Macrovascular Complications of Diabetes.

Clinical Diabetes Journal. Vol 26(2): 77-82.

Ghorbani, A., Shafiee-Nick, R., Rakhshandeh, H., Borji, A. 2013.

Antihyperlipidemic Effect of a Polyherbal Mixture in Streptozotocin-Induced

Diabetic Rats. Journal of Lipids. Volume 2013 Article ID 675759: 6 pages.

Hardiyani, S. 2013. Pengaruh Seduhan Bubuk Kayu Manis (Cinnamomum

burmanii) Terhadap Kadar Glukosa Darah Mencit (Mus musculus L.) Strain

Balb-C Diabetik Setelah Pemaparan Aloksan. Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam. Universitas Jember.

Iyer, A., Panchal, S., Poudyal, H., Brown, L. 2009. Potential Health Benefit of

Indian Spices in the Symptoms of the Metabolic Syndromes. Indian Journal

of Biochemistry & Biophysics. Vol. 46: 467-481.

Juarez-Rojop, I.E., Diaz-Zagoya, J.C., Ble-Castillo, J.L. 2012. Hypoglycemic

effect of Carica papaya leaves in streptozotocin-induced diabetic rats. BMC

Complement Altern Med 2012; 12:236.

Kaleem, M., Asif, M., Ahmed, Q.U., Bano, B. 2006. Antidiabetic and antioxidant

activity of Annona squamosal extract in streptozotocin-induced diabetic rats.

Singapore Medical Journal. Vol 47: 670-675.

Lenzen, S. 2008. The Mechanism of Alloxan and Streptozotocin Induced

Diabetes. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18087688 [ 8 Agustus 2014].

Morani, A.S. and Bodhankar, S.L. 2007. Neuroprotective effect of early treatment

with pioglitazone and pyridoxine hydrochloride in alloxan induced diabetes in

rats. Pharmacologyonline, 2: 418-428.

Niu, C.S., Chen, L.J., Niu, H.S. 2014. Antihyperglycemic action of rhodiola-

aqeous extract in type1-like diabetic rats. BMC Complement Altern Med

2014; 14:20.

Purnyami, Utomo, M.,Astuti, R. 2011. Hubungan Antara Faktor Karakteristik,

Profil Lipid dan Hipertensi dengan Penyakit Jantung Koroner pada Penderita

Diabetes Mellitus di Rumah Sakit Tentara Semarang. Fakultas Kesehatan

Masyarakat. Universitas Muhammadiyah Semarang, Semarang.

28

Rohilla, A., Ali, S. 2012. Alloxan Induced Diabetes: Mechanisms and Effects.

International Journal of Research in Pharmaceutical and Biomedical

Sciences. Vol 3 (2): 819-823.

Rohmah, M. 2010. Aktifitas Antioksidan Pada Campuran Kopi Robusta (Coffea

cannephora) dengan Kayu Manis (Cinnamomun burmanii). Jurnal Teknologi

Pertanian. Vol. 6 (2): 50-54.

Sadeli, H.A. 2008. Nyeri Neuroapti Diabetika. Yogyakarta: Medigama Press

2008: 77-90.

Sharma, N. and Garg, V. 2008. Antidiabetic and Antioxidant Potential of

Ethanolic Extract of Butea monosperma Leaves in Alloxan-induced Diabetic

Mice. Indian Journal of Biochemistry and Biophysics. Vol. 46: 99-105.

Sharma, N., Garg, V. and Paul, A. 2010. Antihyperglycemic, Antihyperlipidemic

and Antioxidative Potential of Prosopis Cinerraria Bark. Indian Journal of

Clinical Biochemistry. Vol. 25 (2): 193-200

Sjahrir, H. 2006. Diabetic Neuropathy: The Pathoneubiology & Treatment

Update. Medan: USU Press.

Smeltzer, C. Suzanne, Bare G. Brenda., 2002. Buku Ajar Keperawatan Medikal Bedah. Alih Bahasa: dr. H. Y. Kuncara. Jakarta: EGC.

Soni, R. and Bhatnagar, V. 2009. Effect of Cinnamon (Cinnamomum cassia)

Intervention on Blood Glucose of Middle Aged Adult Male with Non Insulin

Dependent Diabetes Mellitus (NIDDM). Ethno-Med. Vol. 3 (2): 141-144.

Sriram, S.M., Kim, B.Y., Kwon, Y.T. 2011. The N-end rule pathway: emerging

functions and molecular principles of substrate recognition. Nat Rev Mol Cell

Biol. Vol 12(11): 735-47.

Srivastata, S.K., Raman, K.V., Bhatnagar, A. 2005. Role of Aldose Reductase and

Oxidative Damage in Diabetes and Consequent Potential for Therapeutic

Options. Endocer Rev. Vol 25: 612-628.

Studiawan, H. dan Santosa, M. H. 2005. Uji Aktivitas Penurun Kadar Glukosa

Darah Ekstrak Daun Eugenia polyantha pada Mencit yang Diinduksi

Aloksan. Media Kedokteran Hewan. Vol. 21 (2): 62-65.

Vincent, A.M., Russell, J.W., Low, P., Feldman, E.L. Oxidative Stress in the

Pathogenesis of Diabetic Neuropathy. Endocr Rev. Vol 25(4): 612-628.

29

Yuriska, A. 2009. Efek Aloksan Terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar.

http://eprints.undip.ac.id/7527/1/adhita_yuriska_f.pdf [12 Agustus 2014].