ppt elektroforesis.pptx
TRANSCRIPT
ELEKTROFORESIS
Muawanah
Sabaniah Indjar Gama
Elektroforesis adalah teknik pemisahan komponen atau molekul
bermuatan berdasarkan perbedaan tingkat migrasinya dalam
sebuah medan listrik Atau pergerakan partikel bermuatan
listrik atau molekul dalam medium konduktif di bawah
pengaruh medan listrik.
Prinsip elektroforesis
pemisahan didasarkan atas perbedaan migrasi komponen pada
fase pendukung, karena adanya perbedaan muatan dan masa
molekul. jika suatu fase zat bermuatan, diberi beda potensial,
fase tersebut akan berpindah sepanjang medium yang kontinu
ke arah katoda atau anoda sesuai dengan muatan partikel.
metode elektroforetik dapat diterapkan untuk pemisahan
dari suatu sampel dengan variety luas, termasuk protein,
asam nukleat, asam amino dan karbohidrat.
Efisiensi pemisahan elektroforesis diatur oleh dua faktor
utama:
1. mobilitas elektroforesis analit
2. aliran elektroosmosis (EOF) dari solusi.
TEKNIK ELEKTROFORESIS
Menurut Stenesh dalam Titrawani (1996) teknik
elektroforesis dapat dibedakan menjadi dua cara, yaitu :
1. Tanpa ada pengemban padat atau matriks (Elektroforesis
lapisan gerak / moving boundary).
2. Dengan pengemban padat atau matriks.
JENIS - JENIS DAN MANFAAT ELEKTROFORESIS
Manfaat Elektroforesis adalah Mendeteksi muatan suatu sistem dalam koloid,
Untuk memproduksi barang industri yang terbuat dari karet, Untuk mengurangi
zat pencemar udara yang dikeluarkan dari cerobong asap pabrik, akan tetapi
penggunaan elektroforesis selalu mengalami peningkatan sehingga tidak hanya
yang disebutkan diatas melainkan dapat digunakan untuk menganalisis DNA
dalam berbagai bidang kepolisian, dalam kegiatan molekuler dan
mengidentifikasi protein yang terdapat dalam DNA.
JENIS ELEKTROFORESIS
1. Elektroforesis Zone (Elektroforesis wilayah)
2. Elektroforesis Kertas
3. Elektroforesis kapiler
4. Elektroforesis gel
ELEKTROFORESIS WILAYAH
Tujuan dari teknik elektroforesis ini adalah untuk uji
kemurnian preparat, penentuan komponen dalam campuran,
penentuan bobot molekul, dan penentuan perubahan
mobilitas atau konformasi.
faktor-faktor yang mempengaruhi pergerakan ion-ion adalah
mobilitas ion, tipe resolusinnya, macam larutan buffernya,
pH yang digunakan, kuat ion zat terlarut, temperatur, ada
atau tidaknya fenomena elektroforesis atau elektroosmosis.
ELEKTROFORESIS KERTAS
Elektroforesis kertas adalah jenis elektroforesis yang terdiri
dari kertas sebagai fase diam dan partikel yang terlarut
sebagai fase gerak, terutama ion-ion kompleks. Pemisahan ini
terjadi akibat adanya gradasi konsentrasi sepanjang system
pemisahan. Pergerakan partikel dalam kertas tergantung pada
muatan atau valensi zat terlarut, luas penampang, tegangan
yang digunakan, konsentrasi elektrolit, kekuatan ion, pH,
viskositas, dan adsorbsivitas zat terlarut.
ELEKTROFORESIS GEL
Elektroforesi gel merupakan salah satu teknik utama dalam biologi
molekular. Prinsip dasar teknik ini adalah bahwa DNA, RNA, atau protein
dapat dipisahkan oleh medan listrik. Dalam hal ini, molekul-molekul
tersebut dipisahkan berdasarkan laju perpindahannya oleh gaya gerak
listrik di dalam matriks gel. Laju perpindahan tersebut bergantung pada
ukuran molekul bersangkutan. Elektroforesis gel biasanya dilakukan
untuk tujuan analisis, namun dapat pula digunakan sebagai teknik
preparatif untuk memurnikan molekul sebelum digunakan dalam metode-
metode lain seperti spektrometer massa, PCR, kloning, sekuensing DNA,
atau immuno-blotting
E L E K T R O F O R E S I S K A P I L E R
Elektroforesis kapiler adalah metode elektroforesis yang digunakan
untuk memisahkan asam amino, protein, lipid, karbohidrat, dan nukleotida
dengan resolusi tinggi yang dilakukan pada pipa kapiler berisi
buffer.Elektroforesis kapiler merupakan pengembangan konsep
elektroforesis konvensional. Konsep dasar elektroforesis kapiler adalah
tidak sedikit molekul berada dalam larutan sebagai partikel bermuatan
(ion), baik bermuatan positif (kation) maupun bermuatan negatif (anion).
Kalau medan listrik diberikan kepada larutan molekul bermuatan tersebut
maka masing-masing ion bergerak menuju elektroda yang berlawanan
muatannya. Kation menuju katoda sebaliknya anion menuju anoda.
SEKIAN DAN TERIMA KASIH
Fef = q . E