PENGARUH CARA PENGERINGAN TERHADAP KADAR FENOLAT TOTAL DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KULIT BUAH MANGGIS (Manggista

mangostana, L)

FELA OLVIANDA0704027

Pembimbing I : Drs. B.A Martinus, MsiPembimbing II : Afdhil Arel, S. Farm, Apt

I. PENDAHULUAN

Radikal Bebas

Radikal bebas merupakan suatu molekul yang sangat reaktif karena mempunyai

satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan

Radikal bebas dapat berperan dalam terjadinya berbagai penyakit karena

radikal bebas memiliki elektron bebas di kulit

terluar sehingga sangat reaktif dan mampu bereaksi

dengan protein, lipid, karbohidrat, atau DNA

I.I Latar Belakang

ANTIOKSIDAN

suatu senyawa yang dapat memperlambat atau mencegah

proses oksidasi

merupakan zat yang dapat menetralkan radikal bebas, atau

suatu bahan yang berfungsi mencegah tubuh dari efek yang

merugikan yang timbul dari proses ataupun reaksi yang menyebabkan oksidasi yang

berlebihan Banyak perhatian ditujukan pada

penyelidikan antioksidan, khususnya antioksidan alami

yang dapat menghambat peroksidasi lipid atau melindungi biomolekul dari kerusakan yang

disebabkan radikal bebas

Manggis (Garcinia

mangostana, L)

Tumbuhan yang sangat bermanfaat untuk

kesehatan tubuh karena diketahui mengandung

xanton sebagai antioksidan, antiproliperativ,

antiinflamasi dan antimikrobial

1.2 Perumusan Masalah

Berdasarkan senyawa kimia yang terkandung dalam manggis dan keterkaitan dengan sifat antioksidannya yang berasal dari senyawa fenol, maka dilakukan pengukuran kadar fenolat total dan aktivitas antioksidan pada kulit buah manggis dengan bermacam cara pengeringan sehingga dapat diketahui proses pengeringan yang bagaimana menunjukan hasil yang baik.1.3 Tujuan

Penelitian1. Menentukan kadar fenolat total yang terkandung dalam kulit buah manggis dengan beberapa cara pengeringan dengan metode Folin-Ciocalteu.2. Menentukan besar aktivitas antioksidan kulit buah manggis dengan beberapa cara pengeringan dengan menggunakan DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil).

1.4 HipotesaH0 : Cara pengeringan tidak berpengaruh terhadap kadar fenolat total dan aktivitas antioksidan pada kulit buah manggis.H1 : Cara pengeringan berpengaruh terhadap kadar fenolat total dan aktivitas antioksidan pada kulit buah manggis.1.5 Manfaat Penelitian1. Mengetahui tumbuhan yang mengandung fenol yang berhubungan dengan aktivitas antioksidannya.2. Meningkatkan penggunaan antioksidan yang berasal dari kulit buah manggis baik yang segar maupun yang kering dalam melawan radikal bebas.3.Meningkatkan pemanfaatan bahan alam potensial yang ada disekitar kita.

PROSEDUR PENELITIAN

Penelitian ini telah dilakukan selama 3 bulan di Laboratorium Penelitian KOPERTIS Wilayah X.

Waktu dan Tempat Penelitian

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah Rotary

evaporator (Heidolph), blender, Spektrofotometer UV-Vis, oven,

timbangan analitik, botol maserasi, labu ukur dengan berbagai ukuran, gelas ukur

dengan berbagai ukuran, beker glass, Erlenmeyer, cawan

penguap, krus porselen, kaca arloji, pipet mikro, pipet gondok, batang pengaduk, tabung reaksi, corong, plet tetes, spatel, gegep, kertas saring Whatman No. 1 dan

pipet tetes

Alat & Bahan

Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian

ini adalah kulit buah Garcinia mangostana, L, Metanol p.a (Merck), etanol p.a (Merck),

Natrium karbonat p.a (Merck), Asam galat (SIGMA),

reagen Folin-Ciocalteu (Merck), DPPH (SIGMA).

ALAT BAHAN

Perlakuan Pengeringan

Buah Mang

gis

Buang

kulit luarn

ya

Rajang

Tipis kemudia

n bagi menjadi 4 bagian

Bagian I Sampel

segar

( Maserasi deng

an etan

ol 96%)

Bagian II, samp

el dikeringangink

an

Bagian III,

dikeringka

n dibawah sinar matahari

Bagian IV,

dikeringka

n dalam

oven suhu 60°C

Pembuatan Reagen

Larutan natrium karbonat 1 M

Dilarutkan 5,3 g natrium karbonat dengan aquadest dalam labu ukur 50 mL sampai tanda batas

Larutan induk asam galat (5 mg / mL)

Timbang 0,125 g asam galat, masukkan dalam labu ukur 25 mL dan larutkan dengan 2,5 mL etanol p.a 96 % lalu tambahkan aquadest sampai tanda batas

Larutan DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) 35 µg/mL

Ditimbang sebanyak 10 mg DPPH dan dilarutkan dengan metanol di dalam labu sampai 100 mL sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 100 µg/mL. Pipet 17,5 ml, diencerkan dengan metanol dalam labu ukur 50 mL sampai tanda batas sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 35 µg/mL

Pembuatan Ekstrak SampelSampel

SegarSampel Kering

300 g kulit buah manggis

Ekstrak

Ekstrak kental

Dicuci dengan air suling, dirajang sekecil mungkin

•Maserasi dengan etanol 96 % selama 3hari•saring dengan kertas saring whatman no. 1•Lakukan tiga kali pengulangan

Kulit buah manggis

Dicuci dengan air suling, dirajang sekecil mungkin

•Dikeringkan (kering angin, kering di bawah matahari, kering oven 60oC), setelah kering sampel diblender.•Maserasi dengan etanol 70 % selama 3hari•Lalu disaring dengan kertas saring whatman no. 1, residu ditambah lagi etanol 70% selam 3 hari, residu ditambah etanol 96% selama 3 hari, kemudian disaring dengan kertas saring whatman no. 1.Rotary

Evaporator

Uji Susut Pengeringan

Uji Fitokimia

Skema kerja Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum Asam

Galat1 mL larutan asam galat

Larutan asam galat 100 µg/mL

Larutan asam galat 100 µg/mL

Ukur serapan pada panjang gelombang 400-800 nm dengan spektrofotometer UV-Vis

Tambahkan metanol : air suling (1:1) dalam labu ukur 50 mL)

•Tambah 5 mL Folin-Ciocelteu yang telah diencerkan (1:10 dengan aquadest) •Tambahkan 4 mL Natrium karbonat 1 M•Tampahkan 0,5 mL air suling•Diamkan selama 15 menit pada suhu kamar

Penentuan Kadar Fenolat Total Kulit Buah Manggis

50 mg ekstrak Tambah metanol 50

mL

0,5 mL larutan ekstrak Tambah Folin-Ciocelteu 5 mL

yang diencerkan (1:10) dengan aquadestTambah 4 mL Natrium Karbonat

Ukur serapan larutan dengan menggunakan

Spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang

maksimum 400-800.

Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH

Tambahkan 2 mL metanol : aquadest (1:1)

Diamkan selama 30 menit ditempat gelap.

4 ml Larutan DPPH

(35µg/mL)

Ukur serapan dengan

spektrofotometer UV-Visibel pada

panjang gelombang 400-800

2 ml Larutan ekstrak Kulit

Buah Manggis

Tambahkan 4 ml larutan DPPH 35 µg/mL.Diamkan selama 30 menit ditempat gelap

Ukur serapan dengan spektrofotometer UV-Visibel pada panjang gelombang 400-800

Penentuan Aktivitas Antioksidan Sampel dengan Metoda

Peredaman DPPH

HASILHasil yang diperoleh dari penelitian yang telah dilakukan sebagai berikut:1. Dari 300 gram sampel kulit buah manggis, didapatkan ekstrak kental masing-masing sampel kulit buah manggis yaitu:•Segar : 24,78 g (8,27 % b/b)•Kering angin : 13,17 g (4,39 % b/b)•Kering oven : 13,94 g (4,64 % b/b)•Kering matahari : 14,69 g (4,89 % b/b)

2. Hasil penentuan persentase susut pengeringan masing-masing sampel yaitu.•Segar : 6,61 %•Kering angin : 19,8 %•Kering oven : 14,6 %•Kering matahari : 23,6 %3. Dari hasil pemeriksaan pendahuluan kandungan kimia metabolit sekunder kulit buah manggis menunjukkan bahwa kulit buah manggis mengandung flavonoid, terpenoid, saponin dan fenolik .

4. Hasil penentuan panjang gelombang serapan maksimum larutan standar asam galat 5 mg/mL direaksikan dengan reagen Folin-Ciocelteu menunjukkan panjang maksimum 756 nm dengan serapan 0,264.

5. Hasil pengukuran kurva kalibrasi larutan standar asam galat direaksikan dengan reagen Folin-Ciocalteu dengan r = 0,997 dan persamaan regresi y = 0,0622 + 0,00547x.

6. Hasil penetapan kadar senyawa fenolat total yang didapat dari kulit buah manggis dengan beberapa cara pengeringan yaitu.•Segar : 7,3233 mg/g (0,7323 % b/b)•Kering angin : 4,5629 mg/g (0,4563 % b/b)•Kering oven : 6,6953 mg/g (0,6695 % b/b)•Kering matahari : 3,7151 mg/g (0,3715 % b/b)

7. Hasil penentuan panjang gelombang serapan larutan DPPH 35 µg/mL menunjukkan panjang gelombang maksimum 517 nm dan serapan sebesar 0,579.

8. Hasil perhitungan IC50 larutan asam galat sebagai pembanding pada penentuan aktivitas antioksidan sebesar 8,133 µg/mL.

9. Hasil perhitungan IC50 dari masing-masing sampel kulit buah manggis dengan beberapa cara pengeringan yaitu :•Segar : 22,04 µg/mL•Kering angin : 49,98 µg/mL•Kering oven : 16,58 µg/mL•Kering matahari : 33,53 µg/mL

10. Kesetaraan aktivitas antioksidan masing-masing sampel dengan pembanding asam galat yaitu:•1 mg asam galat setara dengan 2,71 mg sampel segar•1 mg asam galat setara dengan 6,14 mg sampel kering angin•1 mg asam galat setara dengan 2,03 mg sampel kering oven•1 mg asam galat setara dengan 4,12 mg sampel kering matahari

KESIMPULAN

Pengeringan kulit buah manggis menyebabkan penurunan yang nyata (p< 0,05) terhadap kadar fenolat total dan aktivitas antioksidan dibandingkan dengan kulit buah manggis yang segar. Cara pengeringan memberikan pengaruh yang berbeda nyata (p< 0,05) terhadap perolehan kadar senyawa fenolat dan aktivitas antioksidan. Diantara cara pengeringan yang dicobakan, yang terbaik adalah cara pengeringan dalam oven 600 C.

saran

Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk isolasi senyawa aktif dari kulit buah manggis dengan beberapa cara pengeringan

Gambar Buah Manggis

Gambar Kulit Buah Manggis

Gambar Spektrofotometer UV-Visible

TERIMA KASIH