POTENSI ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN KEMUNING (Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS (Garcinia mangostana L.) DENGAN METODE FTC DAN DPPH

SKRIPSI

Oleh:

RANI YUNI MAKARYATI K100100134

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2014

POTENSI ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN KEMUNING (Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS (Garcinia mangostana L.) DENGAN METODE FTC DAN DPPH

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta

Oleh: RANI YUNI MAKARYATI

K100100134

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2014

i

1

2

3

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Wr. Wb.

Alhamdulillah, segala puji syukur hanya kepada Allah SWT yang telah

melimpahkan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan

judul “DAYA PEREDUKSI EKSTRAK ETANOL DAUN KEMUNING

(Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS (Garcinia mangostana L.)

DENGAN METODE FTC DAN DPPH”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi

salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta. Penulis dengan segala kerendahan hati mengucapkan terima kasih sebesar-

besarnya kepada:

1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Surakarta.

2. Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt dan Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt selaku

dosen pembimbing skripsi yang telah memberikan bimbingan, ilmu dan

motivasi.

3. Ibu Ika Trisharyanti DK, M.Farm., Apt. selaku Penguji I dan ketua sidang

tertutup skripsi.

4. Bapak Andi Suhendi, M.Si, Apt. selaku Penguji II sidang tertutup skripsi.

5. Bapak Sutikno dan Ibu Sri, Mbak Indah, Mas Aris, Kembaranku (Rina), dan

Mas Muzzamil, atas doa yang tiada henti.

6. Sahabatku Ria, Anis dan semua pihak yang telah membantu dalam penulisan

skripsi ini.

Akhirukalam, semoga skripsi ini dapat bermanfaat khususnya dibidang

kefarmasian.

Wassalamu'alaikum wr. wb.

Surakarta, 25 September 2014

Penulis

iv

4

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ....................................................................................... i

HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... ii

HALAMAN DEKLARASI .............................................................................. iii

KATA PENGANTAR .................................................................................... iv

DAFTAR ISI ................................................................................................... v

DAFTAR TABEL ........................................................................................... viii

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... ix

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... x

DAFTAR SINGKATAN ................................................................................ xi

INTISARI ......................................................................................................... xii

BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1

A. Latar Belakang ............................................................................... 1

B. Rumusan Masalah ......................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ........................................................................... 3

D. Tinjauan Pustaka ........................................................................... 3

1. Radikal Bebas ........................................................................... 3

2. Antioksidan ............................................................................... 3

3. Kandungan Kimia .................................................................... 4

4. Senyawa Fenolat dan Flavonoid ............................................... 5

5. Uji Aktivitas Antioksidan ......................................................... 6

E. Landasan Teori ............................................................................... 8

F. Keterangan Empiris ........................................................................ 8

BAB II METODE PENELITIAN .................................................................... 9

A. Jenis Penelitian ............................................................................... 9

B. Variabel Penelitian ........................................................................ 9

1. Variabel Bebas .......................................................................... 9

v

5

2. Variabel Tergantung ................................................................ 9

3. Variabel terkendali .................................................................... 9

C. Alat dan Bahan .............................................................................. 9

1. Alat ...................................................................................... 9

2. Bahan ...................................................................................... 9

D. Jalannya Penelitian ........................................................................ 10

1. Pengumpulan bahan .................................................................. 10

2. Jalannya Penelitian .................................................................... 10

a. Ekstraksi ............................................................................ 10

b. Pembuatan reagen yang digunakan ................................... 10

1) Pembuatan larutan stok ................................................. 10

c. Penentuan OT penetapan kadar fenol ................................ 10

d. Penentuan OT penetapan kadar flavonoid .......................... 11

e. Penentuan λ maks penetapan kadar fenol ........................... 11

f. Penentuan λ maks penetapan kadar flavonoid .................... 11

g. Penetapan kadar fenol dan flavonoid total ......................... 11

1) Penetapan fenol total ................................................... 11

2) Penetapan flavonoid total ........................................... 12

h. Pengukuran aktivitas antioksidan ....................................... 12

1) Metode DPPH ............................................................... 12

2) Metode FTC .................................................................. 13

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Determinasi tanaman ........................................................................... 14

B. Ekstraksi ...................................................................................... 14

C. Penentuan Kadar Fenolat dan Flavonoid Total .................................... 15

D. Uji Aktivitas Antioksidan .................................................................... 16

1. Metode DPPH................................................................................. 16

2. Metode FTC ................................................................................... 19

vi

6

E. Korelasi Kandungan Fenolat dan Flavonoid Total dengan

Aktivitas Antioksidan ......................................................................... 21

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan ...................................................................................... 22

B. Saran .................................................................................................... 22

DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 23

LAMPIRAN .................................................................................................... 27

vii

7

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. OT Asam Galat .................................................................................. 11

Tabel 2. OT kuersetin ...................................................................................... 11

Tabel 3. Aktivitas antioksidan berdasarkan nilai IC50 ..................................... 18

Tabel 4. Hasil rerata % hambat peroksidasi lipid standar dan ekstrak

dengan metode FTC dan DPPH ......................................................... 21

viii

8

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Struktur umum senyawa flavanoid kandungan utama ekstrak daun kemuning ................................................................ 4

Gambar 2. Struktur umum senyawa flavanoid kandungan utama kulit

manggis ......................................................................................... 4 Gambar 3. Donasi proton dari antioksidan ke radikal DPPH ......................... 6

Gambar 4. Pembentukan kompleks senyawa ................................................. 7

Gambar 5. Mekanisme Asam Galat Vs Reagen Folin .................................... 15

Gambar 6. Profil kurva baku asam galat dan kuersetin. ................................. 16

Gambar 7. Grafik konsentrasi ekstrak kulit manggis dan vitamin E vs

% hambat menggunakan metode DPPH ...................................... 18

Gambar 8. Gafik konsentrasi ekstrak daun kemuning vs % hambat

radikal menggunakan metode DPPH ............................................ 19

Gambar 9. Profil absorbansi kontrol, sampel ekstrak dan standar

dengan metode FTC ...................................................................... 20

Gambar 10. Profil absorbansi kontrol, sampel ekstrak daun kemuning

dan standar dengan metode FTC .................................................. 21

ix

9

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Data Kurva Baku Asam Galat dan Quarsetin ............................. 27

Lampiran 2. Detail Hasil Untuk Ekstrak Etanol Kulit Manggis ..................... 28

Lampiran 3. Detail Hasil Untuk Ekstrak Etanol Daun Kemuning .................. 29

Lampiran 4. Perhitungan % Hambat Metode FTC Kulit Manggis dan

Daun Kemuning .......................................................................... 31

Lampiran 5. Perhitungan % Hambat Metode DPPH Kulit Manggis dan

Daun Kemuning .......................................................................... 33

x

10

DAFTAR SINGKATAN

µg : Mikrogram

µl : Mikroliter

µm : Mikromolar

DPPH : 1,1-Diphenyl-2-Picryl-Hydrazyl

FTC : Ferri (Iii) Thiocyanate

g : Gram

GAE : Gallic Acid Equivalent

IC50 : Inhibitory Concentration 50 %

Kg : Kilogram

M : Molar

mg : Miligram

mL : Mililiter

nm : Nanometer

P.a : Pro Analisis

QE : Quercetin Equivalent

UV : Ultaviolet

xi

11

INTISARI

Daun kemuning (Murraya paniculata L.) dan kulit manggis (Garcinia

mangostana L.) merupakan beberapa dari banyak tanaman yang mengandung zat pereduksi yang kuat di dalam tubuh. Rohman dan Riyanto, (2005) meneliti daya antioksidan ekstrak etanol daun kemuning dengan metode DPPH memberikan nilai IC50 sebesar 126,17 µg/mL dan antioksidan ekstrak kulit manggis dengan pelarut metanol menggunakan metode DPPH memberikan nilai IC50 sebesar 11,117 µg/mL. Tujuan penelitian ini untuk menentukan aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol daun kemuning (M. paniculata, L.) dan kulit manggis (G. mangostana, L.) dengan pembanding vitamin E menggunakan metode Ferri (III) Thiocyanate (FTC) dan 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH). Penentuan kandungan fenolat total pada ekstrak menggunakan reagen Folin- Ciocalteu dengan standar asam galat dan dihitung sebagai Gallic Acid Equivalent (GAE) sedangkan flavonoid menggunakan alumunium klorida dengan standar quersetin dan dihitung sebagai Quercetin Equivalent (QE).

Ekstrak yang diperoleh ditetapkan senyawa fenol dan flavonoid dengan spektrofotometri visibel didapatkan masing-masing kadarnya pada daun kemuning sebesar 113,23±2,05 (GAE) dan 205,66±6,79 (QE) pada kulit manggis didapatkan kadarnya sebesar 274,52±15,11 (GAE) dan 396,85±23,26 (QE). Ekstrak kulit manggis, daun kemuning, dan vitamin E berurutan memiliki aktivitas antioksidan, dengan nilai IC50 sebesar 21,24±1,68 µg/mL, 149,45±16 µg/mL, dan 12,990 µg/mL. Persen penghambatan peroksidasi lipid ekstrak kulit manggis, daun kemuning dan vitamin E berurutan sebesar 44,505%±5,23, 39,246%±2,69 dan 82,72%. Daun kemuning memiliki kadar fenol dan flavonoid dua kali lebih kecil dari kulit manggis namun nilai IC50 daun kemuning tujuh kali lebih besar dari kulit, sedangkan dengan metode FTC ekstrak daun kemuning dan kulit manggis tidak berkontribusi besar.

Kata Kunci: Fenol, flavonoid, DPPH, FTC, daun kemuning (Murraya

paniculata, L.), kulit manggis (Garcinia mangostana, L.)

xii