pemeriksaan mikroskopis tuberkulosis -...

PEMERIKSAAN MIKROSKOPISTUBERKULOSIS

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006

PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM

PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUMPEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS


Diterbitkan oleh:Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit & Penyehatan Lingkungan

supported by Global Fund

AcKNOwLEDGMENT“Buku Pedoman Pemeriksaan Mikroskopis Tuberkulosis”

disusun dengan referensi utama:Buku Pedoman ”Diagnosis Tuberkulosis secara Laboratorium dengan

Pemeriksaan Mikroskopis Dahak”

Pengarang:Richard Lumb, Ivan Bastian, Gunawan Yamin

Diterbitkan oleh:Institute of Medical & Veterinary Science

From RoadAdelaide, South Australia 5000

www.imvs.sa.gov.auTahun 2004

Ilustrasi oleh:Kerry Raid



Buku Panduan ini diterbitkan atas bantuan dan masukan serta dukungan:

• SeluruhDireksidanstafRSUPPersahabatan-Jakarta Terutama staf Instalasi Laboratorium Patologi Klinik dan Mikrobiologi RSUP

Persahabatan, Jakarta

• Prof.dr.AgusSjahrurrachman,Sp.MK.Ph.D GuruBesarFKUI-KetuaPOKJALabTB

• Dr.SriWidyastuti Dit.BinaPelayananPenunjangMedik-KetuaTimManajemenPOKJALabTB

• Dr.SriPrihatini,Sp.P KonsultanTBNasional-WHO

• Dr.HariniDjaniar,Sp.PK Ka. Balai Pengembangan Laboratorium Kesehatan Provinsi Jawa Barat

• Dr.dr.NiMadeMertaniasih,Sp.MK.MS KaInstalasiLaboratoriumMikrobiologiFKUNAIR/RS.Dr.Soetomo-Surabaya

• IvanBastian,RichardLumb,GunawanYaminselakupengarangdanKerryRaidselaku ilustrator dan artist pada Buku Pedoman “Diagnosis Tuberkulosis secara Laboratorium dengan Pemeriksaan Mikroskopis Dahak” IMVS, Adelaide, South

Terima Kasih



Tim PenyusunPOKJA LAB TBc

1. Dr. Lia Gardenia Partakusuma, Sp.PK Instalasi Laboratorium Patologi Klinik dan Mikrobiologi RS. Persahabatan Ketua Tim Teknis POKJA Lab TB

2. Dr.TjahyaniMirawatiSudiro,Ph.D,Sp.MK Departemen Mikrobiologi FK UI

3. Dr. Retno Kadarsih S., Sp. MK Departemen Mikrobiologi FK UI

4. Dr. Elly Trisnawati Dit.BinaPelayananPenunjangMedik,DitjenYanmedik,DepkesRI

5. w.D. Murwheni, S.Si Balai Laboratorium Kesehatan DKI Jakarta

6. Dr. Syahrial Harun Puslitbang P2M, Badan Penelitian dan Pengembangan, Depkes RI

7. Ir. Parulian Balai Besar Teknologi Kesehatan Lingkungan DKI Jakarta, Depkes RI

SUBDIT P2TBc, DEPKES RI

1. Dr. carmelia Basri, M.Epid2. Dr. Siti Nadia3. Sudarman S., SKM, MM4. Dr. Ratih Pahlesia5. Mikyal Faralina, SKM



Daftar IsiTerima Kasih ................................................................................................................................................................................ i

Tim Penyusun ............................................................................................................................................................................ ii

Daftar Isi .................................................................................................................................................................................iii

Kata Pengantar .........................................................................................................................................................................iv

Sambutan ..................................................................................................................................................................................v

Bab 1 Pendahuluan........................................................................................................................................................1

Bab 2 Pengumpulan Dahak ........................................................................................................................................2 waktu Pengumpulan Dahak ..........................................................................................................................2 Tempat Pengumpulan Dahak ........................................................................................................................2 Pengumpulan Dahak ........................................................................................................................................3 cara Pengumpulan Dahak ..............................................................................................................................4 Kualitas Spesimen ..............................................................................................................................................5 Registrasi Spesimen ..........................................................................................................................................6

Bab 3 Pembuatan Sediaan Apus ...............................................................................................................................8 Alat-alatyangdibutuhkan ..............................................................................................................................8 cara Membuat Sediaan Apus ........................................................................................................................9 Bagaimana Membuat Sediaan Apus yang Baik ................................................................................... 10

Bab 4 Alat dan Bahan Pewarnaan.......................................................................................................................... 12

Bab 5 PewarnaanMetodaZiehl-Neelsen ............................................................................................................ 13

Bab 6 Pembacaan Sediaan Apus ........................................................................................................................... 16

Bab 7 Pelaporan ........................................................................................................................................................... 21

Bab 8 Penyimpanan .................................................................................................................................................... 23

Bab 9 KeamananKerja ............................................................................................................................................... 24

Bab 10 Pemantapan Mutu .......................................................................................................................................... 26

Bab 11 Lampiran ............................................................................................................................................................ 27 Pot Dahak yang Ideal ..................................................................................................................................... 27 Formulir Permohonan Laboratorium TB (TB 05) .................................................................................. 28 Formulir Register Laboratorium TB (TB 04) ............................................................................................ 29 Daftar Tilik Pemantapan Mutu Internal ................................................................................................... 30 Mikroskop .......................................................................................................................................................... 31 cara Pengiriman Sediaan Apus .................................................................................................................. 40 Informasi Untuk Pasien ................................................................................................................................. 41

i


DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006ii

Sebagai negara yang sedang berkembang, penyakit infeksi masih merupakan salah satu penyebab kematian di Indonesia dan penyakit TB masih merupakan penyakit infeksi yang utama penyebab kematian tersebut.

Untuk menurunkan angka kesakitan TB tersebut, salah satu upaya yang perlu mendapat perhatian adalah penegakan diagnosis dengan pemeriksaan labora-torium secaramikros-kopisdahak yangberkualitas.Karena pemeriksaan mikroskopis BTA ini dilaksanakan padaberbagai jenisdan tingkat laboratoriummakaperlu adanya standarisasi dalam prosedur pemeriksaan mikroskopis dahak.

DirektoratP2MLbersama-samadenganDirektoratBinaPelayananPenunjangMedikmelaluiPokjaLaboratoriumTB telah selesai menyusun Buku Pedoman Pemeriksaan Mikros-kopisTuberkulosis(TB)Paru.Untukitukepadase-mua pihak yang telah berpartisipasi dalam penyusunan buku pedoman ini kami mengucapkan terima kasih.

Kami sangat mengharapkan agar semua tenaga labo-ratorium dalam melakukan pemeriksaan mikroskopis dahakTBmeng-acupadapedomaninisehinggadihara-pkan mutu pemeriksaan laboratorium dapat merata di semuajenisdantingkatlaboratorium,sertakemampuandapat terus ditingkatkan.

Kami menyadari buku ini belum sempurna, oleh karena itu usul perbaikan sangat kami harapkan untuk penyem-purnaan buku ini di masa yang akan datang.

Jakarta, Januari 2006 DIREKTUR BINA PELAYANAN PENUNJANG MEDIK

Kata Pengantar





iii

SambutanSaat ini Tuberkulosis merupakan masalah kesehatan masyarakat di Indonesia. Jum-lah Pasien TB di Indonesia menempati urutan ketiga terbanyak di dunia. Kerugian yang diakibatkannya sangat besar, baik dari aspek kesehatan maupun dari aspek sosial dan ekonomi.

WHOsejakawaltahun1990-antelahmemperkenalkanstrategipenanggulanganTB yang dikenal sebagai strategi DOTS (Directly Observed Treatment Shortcourse). Strategi tersebut dinilai sebagai strategi intervensi yang sangat cost-effective dan dianjurkanolehWHOdanBankDuniauntukditerapkansecaraterpadupadasetiapunit pelayanan kesehatan. Target utama pengendalian TB ini adalah menemukan pasien TB menular (BTA positif ) sedikitnya 70 % pada akhir tahun 2005 dan menyem-buhkan pasien TB yang diobati sedikitnya 85 %.

Dengan memprioritaskan pada penemuan pasien TB dengan BTA positif, maka labo-ratorium merupakan kunci utama dalam mendiagnosa pasien TB. Hal ini ditegaskan pada komponen kedua strategi DOTS, yaitu penegakan diagnosis menggunakan pemeriksaan mikroskopis.

WalaupunstrategiDOTStelahdiadopsisejaktahun1995,dilapangantetapmasihdijumpaikendala-kendalaterutamadalamhalkualitaspemeriksaanlaboratorium.Berdasarkan hal tersebut, maka dirasakan perlu adanya suatu standar pemeriksaan mikroskopis TB di seluruh laboratorium.

Kami menyambut gembira dengan diterbitkannya “Buku Pedoman Pemeriksaan Mikroskopis Tuberkulosis” ini, diharapkan buku ini dapat berguna bagi petugas di lapangan sehingga pemeriksaan dahak mikroskopis TB dapat sesuai dengan standar dan kualitas yang telah ditetapkan.

TaklupakamisampaikanterimakasihatasdukungandankerjasamaDirektoratBinaPelayananPenunjangMedik,Direktorat JenderalPelayananMedik, sertakepadasemua pihak yang tidak dapat kami sebutkan satu persatu, yang telah menyum-bangkan tenaga dan pikiran demi tersusunnya buku ini.

Jakarta, Februari 2006





Tujuandaripanduaniniadalahuntukpenggunaanpraktispetugasteknislaborato-rium dalam melakukan pemeriksaan mikroskopis dahak langsung untuk menemukan kuman Basil Tahan Asam (BTA) dalam upaya menegakkan diagnosis TB, serta sistem pencatatan dan pelaporan yang dibutuhkan.

Dalam program pengendalian TB, diagnosis ditegakkan melalui pemeriksaan dahak secaramikroskopis langsungyangdiambil3kaliberturut-turut : Sewaktu-Pagi-Sewaktu (SPS).

Pemeriksaan3 spesimen (SPS)dahaksecaramikroskopis langsungmenjadipili-han, karena nilainya setara dengan pemeriksaan dahak secara kultur atau biakan. Pemeriksaan kultur memerlukan waktu lebih lama (paling cepat sekitar 6 minggu) dan mahal.

Tujuanpemeriksaanmikroskopisdahakadalah: Menegakkan diagnosis TB Menentukan potensi penularan Memantau hasil pengobatan pasien

PENDAHULUAN1



2

wAKTU PENGUMPULAN SPESIMEN Dibutuhkan tiga spesimen dahak untuk menegakkan diagnosis TB secara mikrosko-pis.Spesimendahakpalingbaikdiambilpadapagihariselama3hariberturut-turut(pagi-pagi-pagi),tetapiuntukkenyamananpenderitapengumpulandahakdilakukan:Sewaktu–Pagi–Sewaktu(SPS)dalamjangkawaktu2hari. Sewaktuhari-1 (dahak sewaktu pertama = A) KumpulkandahakspesimenpertamapadasaatpasienberkunjungkeUPK(Unit

Pelayanan Kesehatan) Beri pot dahak pada saat pasien pulang untuk keperluan pengumpulan dahak

pada hari berikutnya.

Pagihari-2 (dahak pagi = B) Pasien mengeluarkan dahak spesimen kedua pada pagi hari kedua setelah ban-

gun tidur dan membawa spesimen ke laboratorium. Sewaktuhari-2 (dahak sewaktu kedua = c) Kumpulkan dahak spesimen ketiga di laboratorium pada saat pasien kembali ke

laboratorium pada hari kedua saat membawa dahak pagi (B).

TEMPAT PENGUMPULAN DAHAK Pengumpulan dahak dilakukan di ruang terbuka dan mendapat sinar matahari lang-sung atau di ruangan dengan ventilasi yang baik, untuk mengurangi kemungkinan penularan akibat percikan dahak yang infeksius.

Jangan mengambil dahak di ruangan tertutup dengan ventilasi yang buruk, mis-alnya: Kamar kecil / toilet Ruangkerja (ruangpendaftaran, ruang pengumpulansampel, laboratorium,dsb)

PENGUMPULAN DAHAK2



Ruang tunggu, ruang umum lainnya.

PENGUMPULAN DAHAK

Petunjuksebelumpengumpulandahak

PENGUMPULAN DAHAK2

• Periksa Formulir permo-honan Laboratorium TB 05

• Lengkapi isian formulir• Tandai (√) untuk Diagnosis

atauFollow-up

Beri labelyangjelaspadadindingpotdahaksesuai dengan nomor identitas sediaan dahak (TB 06)

Labelditempelkanpadadindingpot, janganpada tutupnya

Pot dahak sekali pakai (tidak harus steril), di-

Formulir Permohonan Laboratorium TB untuk pemeriksaan dahak (TB 05)



4

cARA PENGUMPULAN DAHAK

Beripetunjukpadapasienuntuk:1. Kumur dengan air sebelum mengeluarkan dahak2. Bila memakai gigi palsu, lepaskan sebelum berkumur3. Tarik nafas dalam 2 – 3 kali dan setiap kali hembuskan nafas dengan kuat4. Letakkan pot yang sudah dibuka dekat dengan mulut dan keluarkan dahak ke

dalam pot5. Batukkan dengan keras dari dalam dada6. Tutup pot dengan rapat dengan cara memutar tutupnya7. Setelah mengeluarkan dahak, bersihkan mulut dengan tissue, kemudian buang

tissue di tempat sampah yang bertutup, kemudian cuci tangan

Bila perlu hal di atas dapat diulang sampai mendapatkan dahak yang berkualitas baikdanvolumeyangcukup(3-5ml)

Bila dahak sulit dikeluarkan, dapat dilakukan hal sebagai berikut:1. Lakukan olah raga ringan kemudian menarik nafas dalam beberapa kali. Bila

terasa akan batuk, nafas ditahan selama mungkin lalu disuruh batuk.2. Malam hari sebelum tidur, banyak minum air atau menelan 1 tablet gliseril

guayakolat 200 mg.

Bilaspesimenjelek,pemeriksaantetapdilakukandengan:1. Mengambilbagianyangpalingmukopurulen/kentalkuningkehijauan2. Diberi catatan bahwa ”spesimen tidak memenuhi syarat / air liur”

Bila tidak ada spesimen dahak yang dapat dikeluarkan, pot dahak harus dibuang, tidak dapat digunakan untuk pasien lain.

Jangan berdiri di depan pasien saat pengumpulan

PENGUMPULAN DAHAK2



KUALITAS SPESIMEN

Pengumpulan spesimen diulang bila : Spesimenjelasairliur Data pada pot dahak tidak sesuai dengan data dalam formulir permo-

honan laboratorium TB (formulir TB 05)

Dahak mukoid Dahak purulen

Bukan dahak, tetapi air liur (encer dan seperti air, atau sebagian besar terdiri dari

gelembung-gelembung)Dahak tercampur darah

X

√√

√

PENGUMPULAN DAHAK2



6

Spesimen dikumpulkan bukan dalam pot dahak

REGISTRASI SPESIMEN

Identitas spesimen harus dicatat lebih dahulu pada formulir TB 04 sebelum

PENGUMPULAN DAHAK2

Register Laboratorium (TB 04)

Formulir Permohonan Laboratorium TB (TB

1

02/05/757 A

3

4

2

5



diproses.

Keterangan bagan :1. Periksa data pasien di pot dahak dan cocokkan dengan yang ada di formulir

permohonan laboratorium TB (Formulir TB 05)2. Pindahkan data pasien dari formulir permohon laboratorium TB (TB 05) ke register

laboratorium TB (Formulir TB 04)3. Tulis nomor register laboratorium pada formulir TB 04.4. Tulis nomor register laboratorium pada formulir permohonan laboratorium TB

(TB 05)5. Berilah tanda pada kolom yang sesuai di register laboratorium alasan pemeriksaan

dahak sesuai formulir permohonan laboratorium TB.

Untuk setiap pasien, gunakan nomor identitas sediaan yang sama dan beri huruf A,B,c untuk identifikasi spesimen :

Sewaktu (A) Pagi (B) Sewaktu (c)

PENGUMPULAN DAHAK2



8

Spesimen air liur harus dilaporkan pada formulir permohonan laboratorium TB (TB 05)

ALAT-ALAT YANG DIBUTUHKAN

APLIKATOR dari bambu/kayu yang bersih lebih baik, sebab: Dapat lebih cepat memisahkan bagian yang purulen dari air liur Dapat mengangkat dahak lebih banyak daripada ose Lebih mudah didapat dan lebih aman karena dapat langsung dibuang

4

Kacasediaanyangbaru,bersih,janganmemakai ulang kaca sediaan yang telah

Botol berisi pasir dan disinfektan (alkohol 70% / lisol) untuk membersihkan ose

Aplikator dari bambu/lidi lancip,bambu/lidiujungtidak rata atau ose.

Lampu spiritus/bunsen

wadah pem-buanganuntuk aplika-tor

wadah pem-buanganberisi disinfek-tan (misalnya lisol 5%)

PEMBUATAN SEDIAAN APUS3



Pemakaian lebih cepat

MEJA KERJA harus kokoh, kedap air, mudah dibersihkan dengan disinfektan.

cARA MEMBUAT SEDIAAN APUS

Satu kaca sediaan digunakan hanya untuk satu spesimen dahak

Spesimen dahak dengan bagian yang purulen (A) di dalam air liur (B)

Pilih dan ambil bagian dari dahak yang purulen meng-gunakan ose atau lidi yang

Pola 2 cm x 3 cm

A

B

3 cm

Tulis nomor identitas pasien pada bagianujungkaca.Bilamenggu-nakan kaca frosted tulis dengan meng-gunakan pensil 2B padabagian yang buram/frosted. Bila menggunakan kaca biasa, tulis dengan spidol permanen pada stiker yang dilekatkan di balik

Kode Kabupaten/ Kode UPK

Nomor sediaan

waktu pengumpulan

2 cm




10

Jangan terlalu tipis untuk menghindari apusanmenjadikeringsebelumdiratakan.Untukmeratakansediaanbuatspiral-spiralkecil sewaktu apusan setengah kering dengan menggunakan lidi lancip sehingga didapat sebaran lekosit lebih rata dan area baca lebih homogen.

Janganmembuat spiral-spiralkecilpadaapusan yang sudah kering, karena dapat terkelupas danmenjadi aerosol yangberbahaya.

BAGAIMANA MEMBUAT SEDIAAN APUS YANG BAIK

Ose yang telah digunakan dicelupkan dalam botol pasir disinfektan, kemudian bakar sampai ose membaraBila menggunakan lidi, langsung dibuang ke dalam botol berisi disinfektan.

cara membuat sediaan apus




Sediaan apus yang baik ialah :• Berasaldaridahakmukopurulen,bukanairliur.• Berbentukspiral-spiralkecilberulang(coil type), yang tersebar merata, ukuran 2 x 3 cm.• Tidakterlalutebalatautipis.• Setelahdikeringkansebelumdiwarnai,tulisanpadasuratkabar4-5cmdibawah

sediaan apus masih terbaca.

cara penanganan dahak yang bercampur darah1. Dahak dengan darah sedikit: Pilih bagian dahak yang tidak mengandung darah, dan buat sediaan seperti biasa2. Dahak dengan darah sedang Buatsediaan,kemudianfiksasi,genangidenganairbersih/aquadeslaludigoyang-

goyang sampai warna merah darah hilang. Lalu air dibuang dan bilas lagi dengan airkemudianwarnaidenganZiehl-Neelsen.

cara penanganan dahak yang encer

Keringkan di udara.

Setelah kering lakukan fiksasi dengan pemanasan. Pastikan apusan mengha-

dap ke atas Lewatkan 3 x melalui api

dari lampu spiritus.

Gunakanpinsetataupenjepitkayu untuk memegang kaca

Pemanasan yang berlebihan akan merusak hasil.cuci tangan setelah selesai membuat sediaan apus.

Sediaan yang baik dapat dinilai dengan cara membaca tulisan di bawahnya

Keringkan apusan di atas rak sediaan, hindari sinar matahari lang-sung.




12

5

UntukmewarnaisediaanapusdenganpewarnaanZiehl-Neelsendiperlukan:

ALAT DAN BAHAN PEwARNAAN 4

Rak sediaan untuk meletakkan sediaan. Rak diletakkan di atas bak cuci atau baskom.

Pinset atau Penjepitkayu

Air mengal i r atau botol sem-

Pengatur waktu

Methylene blue 0,3%

carbol fuchsin 0,3%

Asam alkohol(3% Hcl dalam etanol)

Rak untuk mengeringkan sedi-aan yang telah diwarnai.Lampu spiritus

Sulut api



Letakkan sediaan dengan bagian apusanmeng-hadapkeataspadarakyang ditempatkan di atas bak cuci atau baskom, antara satu sediaan dengan sediaanlainnyamasing-masingberjarakkuranglebih1jari.Jumlahmaksimum

Genangi seluruh permukaan sedi-aan dengan carbol fuchsin.Saring zat warna setiap kali akan melakukan pewarnaan sediaan

Panasi dari bawah dengan menggu-nakan sulut api setiap sediaan sampai keluar uap.

Diamkan selama minimal 5 menit.Waktuyanglebihlamajugaboleh,tetapipewarna di atas sediaan tidak boleh

Bilassediaandenganhati-hatidengan Jangan ada percikan ke sediaan lain

1 2

3 4

5

PEWARNAANMETODAZIEHL-NEELSEN



14

PEWARNAANMETODAZIEHL-NEELSEN

Miringkan sediaan menggunakan penjepitkayuataupinsetuntukmembuang air

Genangi dengan asam alkohol sam-pai tidak tampak warna merah carbol fuchsin

Genangi permukaan sediaan dengan methylene blue selama

Miringkan sediaan untuk mengalirkan

7

8 9

10 11

Bilas sediaan dengan air mengalirJangan ada percikan ke sediaan lain

Keringkan sediaan pada rak pengeringJangan keringkan dengan kertas tissue

6



Hasil pewarnaan apusan dengan teknik pembuatan yang kurang baik

Sediaan apus yang telah diwarnai dengan

Terlalu tebal Terlalu tipis

Kurang di tengah, terlalu tipis dan kurang dekolorisasi

Pewarnaan tidak merata, ukuran terlalu besar

PEWARNAANMETODAZIEHL-NEELSEN5



16

PEMBAcAAN SEDIAAN APUS

Sediaan apus harus diperiksa secara sistematis untuk memastikan bahwa hasil yang dilaporkan telah mewakili seluruh bagian sediaan. Jangan memeriksa sediaan sebelum kering.

Langkah-langkahpembacaansediaanapus:

Gunakan lensa objektif 10 x untukmenetap-kanfokusdanmenemukanlapang pandang. Periksa sediaan untuk menentu-kankualitas sediaan.Padasediaan dahak umumnya ditemukan lebih banyak sel lekosit atau sel radang

Teteskan satu tetes minyak emersi, aplikator minyak emersi tidak boleh menyentuh kaca objek.Tetesanharusjatuhbebaske permukaan sediaan apus agar aplikator minyak emersi tidak terkontaminasi dengan

Putarlahlensaobjektif100xdenganhati-hatikeatassediaanapus.Jangansekali-kalilensamenyentuhkaca sediaan.

1

Sesuaikanfokusdenganhati-hatisampaisel-selterlihatdengan

2

3 4



Sebelum melakukan pembacaan, lakukan penilaian sediaan apus yang telah di-

A. Kualitas dahak Kualitas dahak yang baik

dinilai dengan melihat di bawah mikroskop, yaitu terlihat lebih dari 25 leko-sit (sel radang) per lapang pandang pada pembe-saran 100 x (10 x pem-besaran lensaobjektif /10 xpem-besaran lensaokuler),jugadapatdilihatsel debu (dust cells) atau

B. Ukuran sediaan apus Ukuran sediaan apus yang baik

adalah 2 x 3 cm, karena dengan ukuran tersebut dapat dibaca minimal 100 lapang pandang sepanjanggaristengah.

c. Kerataan sediaan apus Dahak tersebar merata, tidak

ter-lihatdaerahyangkosongpadakacaobjek.

D. Ketebalan sediaan apus Diperiksa dengan cara me-

megangsediaanapus4-5cmdi atas surat kabar atau tulisan cetakan. Ketebalan sediaan apusdianggapbaikbilahuruf-huruf tulisannya masih dapat

A

}

PEMBAcAAN SEDIAAN APUS6

+ 150 lapang pan-



18

E. Pewarnaan sediaan apus BTAterlihatjelasberwarnamerahterangdenganlatarbelakangbirutanpaada

sisa-sisazatwarnafuchsin.

F. Kebersihan sediaan apus Sediaanapusharusbebasdarisisa-sisazatwarnafuchsin, kotoran serta kristal

yang dihasilkan dari pemanasan berlebih saat pewarnaan.

Dekolorisasi yang tidak baik




Beri pen-yangga pada kaki agar punggung menjadilurus

Kaki meng-gantung

Naikkan mikroskop untuk membantu meluruskan punggung dan letakkan kaki rata den-gan lantai

Mikroskop terlalu rendah dan kaki tidak rata dengan lantai

Untuk menghindari kelelahan pembacaan sediaan apus, lakukan pemeriksaan dengan sikap tubuh yang benar

Sikap yang benar Sikap yang salah

Sikap yang benar Sikap yang salah

PEMBAcAAN SEDIAAN APUS6



20

Sediaan apus dahak dengan pewarnaan Zielh-Neelsen(banyakselradang)

Sediaan apus air liur dengan pewarnaan Zielh-Neelsen(banyakselepitel)

Lakukan pembacaan sediaan apus secara sistematis untuk memastikan hasil yang dilaporkan mewakili seluruh bagian sediaan.Pembacaandimulaidariujungkiri keujungkanandandilakukanpadasediaanyangsel-selnyaterlihat,bilasediaantampakkosong,geserpadalapangpandang

A B

Setelah selesai pembacaan, bersihkan minyak dari sediaan apus dengan meng-gunakan pelarut organik.Setelahkering, tempatkansediaanapus tersebutdenganhati-hatidalamkotakpenyimpanangunapengontrolankualitasolehlaboratoriumrujukan/cross-check .IniharusdikerjakanberdasarkanpetunjukyangditetapkanolehProgramTBNa-

Sebelummengujisediaanapusselanjutnya,bersihkanlensadengan menggunakan tissue.




BTAyangditemukanmenegakkandiagnosisTBdanjumlahBTAyangditemukanmenunjukkanberatnyapenyakit.Olehkarenaitusangatpentinguntukmencatatdengan benar apa yang terlihat. Skema pelaporan ini mengacu pada skala Interna-tional Union Against Tuberculosis and Lung Diseases (IUATLD).

PELAPORAN7Apa yang terlihat

Tidak ditemukan BTA minimal dalam 100 lapang pandang

1 – 9 BTA dalam 100 lapang pandang

10 – 99 BTA dalam 100 lapang pandang

1 – 10 BTA dalam 1 lapang pandang, periksa minimal 50 lapang pandang

Lebih dari 10 BTA dalam 1 lapang pandang, periksa minimal 20 lapang

Apa yang dilaporkan

BTA negatif

TuliskanjumlahBTAyangditemukan/100lapang pandang

1+

2+

3+



22

1. Periksa Nomor Register Laboratorium, cocokkan dengan formulir Permohonan Laboratorium (TB 05)

2. catat hasil pemeriksaan pada Formulir Permohonan Laboratorium (TB 05)3. Beri tanggal dan tandatangani Formulir Permohonan Laboratorium (TB 05)4. catat hasil pemeriksaan pada Register Laboratorium (TB 04)5. Kembalikan Formulir Permohonan Laboratorium TB 05 kepada dokter atau UPK

yang mengirimkan

Pelaporandisampaikansecepatnyapadadokterpengirim,petugasharusmenjagakerahasiaan hasil laboratorium.Jangan menuliskan hasil pemeriksaan pada sediaan karena sediaan dibutuhkan untukcrosscheck/ujisilangpemantapanmutu.

PELAPORAN 7

1

4 2

35

Register Laboratorium (TB 04)

catat Hasil

Formulir Permohonan Laboratorium TB

Kembalikan ke dokter atau

Beri tanggal dan tandatan-



PENYIMPANAN8Hapus dengan hati-hati min-yak imersi pada sediaan dengan menggunakanujungkertastissueyang bersih.Untuk setiap sediaan digunakan satu kertas tissue.

Jangan menggunakan 1 kertas tis-

Simpan sediaan dalam kotak sediaan secara berurutan menurut nomor register laboratorium untuk keper-luanpemantapanmutu/ujisilang (cross check) minimal

Kertas tissue yang telah digunakan dibuang ke tempat pembuangan yang telah diberi disinfektan.



24

KEAMANAN KERJA9PenularanTBterjadikarenapercikandahakinfeksiusdiudaraterhiruporanglain.Pemeriksaan dahak yang dilakukan sesuai prosedur standar oleh petugas labora-toriummenjamintidakakanberisikopenularanTB.

KeamananKerjaLaboratorium:1. Selain petugas laboratorium tidak diperkenankan masuk ke dalam ruangan

pemeriksaan laboratorium. (Petugas kebersihan dan teknisi alat hanya diperk-enankanmasuksetelahmempelajarikeamanankerjalaboratoriumdanmenda-pat izin dari pimpinan unit laboratorium)

2. Setiappetugas laboratoriumhendaknyamenyadaribahwa sedangbekerjadenganbahan-bahanyangberbahaya,karenaituharusmengenakanjaslab.

3. Dilarang makan, minum atau merokok di dalam ruangan laboratorium.4. Dilarangmemakaiperhiasanpadatanganselamabekerjadandilarangmeny-

entuhwajahdengantanganatauperalatanlaboratorium.5. Dilarang menggunakan pipet dengan mulut.6. Setelahselesaibekerja,bersihkanmejakerja,peralatandanlantaidengandis-

infektan.7. Bersihkan tangan setelah melakukan setiap kegiatan. Setelah menyelesaikan

semuapekerjaan,cucilahtangandengansabunsampaibersih.8. Tanggalkanjaslabsebelummeninggalkanruanganlaboratoriumdancucitangan

kembali9. Pekerjaanadministratifsebaiknyadikerjakandiluarruanganlaboratorium.10. Ruangan harus mempunyai ventilasi yang baik. Bila ruang memakai Ac, exhaust

fanharusdipasangsetiap6jamselama30menit.11.Setiaporangyangbekerjadilaboratoriumdianjurkanmelakukanpemeriksaan

kesehatan secara berkala.12.Penggunaanmaskertidakmenjaminkeamanankerjadantidakdiharuskan.

Pengelolaan limbah :1. Buang aplikator bambu, lidi lancip bekas pakai, dan kaca sediaan yang sudah

tidak dipakai ke dalam ember yang telah dilapisi kantung plastik dan diisi disin-fektan

2. Buka tutup pot dahak bekas, isi dengan desinfektan sama banyak dengan sisa dahak, tutup kembali lalu masukkan ke dalam ember yang telah dilapisi kantung plastik yang telah diisi disinfektan untuk dibuang

3. Untuk limbah cair (bekas pewarnaan) ditampung dulu dalam wadah yang diberi disinfektan sebelum dibuang.

4. Semuabahanbekaspakaidirendamdalamdisinfektanselamaminimal12jam,



KEAMANAN KERJA9

Tuangkan disinfektan ke dalam wadah dahak yang te-lah selesai diperiksa sebelum

Buang wadah dahak yang telah diberi disinfektan ke dalam tempat pembuangan yang telah diberi

Seluruh limbah yang telah direndam dalam disinfektan dibakar atau dikubur dalam lubang sedalam minimal 1,5



26

Untukmenjaminketepatanhasilpemeriksaandahakmikroskopis,harusdilakukankegiatan pemantapan mutu yang meliputi:

1. Pendidikan dan pelatihan

2. Pelaksanaan pemantapan mutu internal:

persiapan penderita, pengumpulan dan penanganan spesimen, pemeliharaan alat/mikroskop, ujikualitasreagen/larutanpewarna, penyusunan prosedur tetap, dan pencatatan serta pelaporan.

3. Pelaksanaan pemantapan mutu eksternal :

• Melakukanujisilang/crosscheck. • Mengikutiujiprofisiensi/ujipanel. • Supervisi.

4. Melaksanakan praktek laboratorium yang benar.

5. Menindaklanjutipemantapanmutu internaldaneksternaldengankegiatanpeningkatan mutu.

PEMANTAPAN MUTU



LAMPIRANPOT DAHAK YANG IDEAL

SYARAT :

Sekali pakai. Bahan kuat, tidak bocor dan tidak

mudah pecah. Tutup berulir, dapat menutup

rapat. Plastikjernih/tembuspandang. Mulut lebar, diameter 6 cm. Dapat ditulisi dengan pena per-

Pot dahak yang tidak dian-jurkan:

Tidak tembus pandang Terlalu kecil Tutup tidak berulir

X

X

X

X

√



28

LAMPIRANFORMULIR PERMOHONAN LABORATORIUM TB (TB 05)



LAMPIRANFORMULIR REGISTER LABORATORIUM TB (TB 04)



30

LAMPIRANDAFTAR TILIK PEMANTAPAN MUTU INTERNAL

No. Kegiatan Ya* Tidak*

1. Mengikuti pelatihan pemeriksaan mikrosko-pis dahak dalam 3 tahun terakhir.

2. Memberi instruksi yang benar tentang cara mengeluarkan dahak pada pasien.

3. Menyediakan wadah dahak yang sesuai den-gan persyaratan.

4. Ada SOP mengenai cara pemeriksaan mikroskopis dahak:

• MembuatapusansesuaidenganSOP.

• Mewarnaisediaanapusmenggunakanpewarnaan Ziehl Neelsen sesuai dengan SOP.

• Melakukanpembacaansediaanapussesuai SOP.

• MelaporkanhasilpembacaansesuaiSOP.

5. Melakukanujikualitasreagenmenggunakankontrol positif (1+) dan negatif.

6. Melakukan pemeliharaan berkala mikroskop dan peralatan lain.

7. Tidak menggunakan reagensia kadaluarsa.

8. Pemeriksaan ulang oleh pengawas.

9. Menyimpanseluruhsediaansekurang-kurangnya selama 3 bulan (untuk cross check/ujisilang).

* Beri tanda ( ) pada kolom yang sesuai



BAGIAN-BAGIANMIKROSKOP

Bagianpentingdarimikroskopadalahlensaokuler,lensaobjektif,tabungmikroskop,makrometer/pengatur fokus kasar, mikrometer/pengatur fokus halus, revolver/lem-pengobjektif,lengan,mejasediaan,penjepitsediaan,skala,kondensor,pengaturiris/diafragma, penggeser sediaan dan pengatur lampu.

A. BAGIAN MEKANIK

1) Kaki,bentuknyabermacam-macamtergantungpabrikpembuatnya,adayang berbentuk V, bulat, segi empat.

2) Lengan menghubungkan kaki dan tabung mikroskop (untuk dipegang pada waktu mengangkat mikroskop).

3) Tabung mikroskop, menghubungkan antara lensa okuler dan lensa ob-jektif,merupakanjalancahaya.Padamikroskopberprismaantaratabungmikroskopdanlempengobjektifterdapatlensaprisma.

4) Makrometer (Pengatur fokus kasar). Untukmenggerakkanmejasediaankeatasdankebawahsecaramakro. 5) Mikrometer (Pengatur halus). Untukmenggerakkanmejasediaankeatasdankebawahsecaramikro

sehinggaobjekdapatterlihatdenganlebihjelas. 6) Pengatur kondensor, untuk menggerakkan kondensor ke atas dan ke

bawah. 7) Pengatur iris/diafragma, untuk mengatur kekuatan cahaya. 8) Mejasediaan,untukmeletakkankacasediaan. 9) Penjepitsediaanuntukmenjepitkacasediaan. 10) Penggeser sediaan, berfungsi menggeser kaca sediaan ke depan dan ke

belakang atau ke kiri dan ke kanan untuk mendapatkan lapangan pandang yang baik.

LAMPIRANMIKROSKOP



32

LAMPIRANMIKROSKOP

11) Skala,terletakpadamejasediaanbergunauntukmenandailetakobjekyang terlihat.

12) Lempengobjektifdengan3atau4lubangtempatlensaobjektifmelekat,dan dapat diputar.

B. BAGIAN OPTIK

1) Lensa okuler Lensayangberhadapandenganmata,terletakdiujungtabungmikroskop,

dapat diangkat dengan menariknya ke atas. Ukuran pembesaran 5 x dan 10 x. Untuk pemeriksaan dahak BTA, digunakan yang 10 x. Fungsi dari lensa okulermemberikanperbesarankeduakalinyapadabenda/objek.

2) Lensaobjektif Lensaobjektifberadatepatdibawahtabungmikroskop,melekatpada

lempengobjektif.Lensainiberfungsimemberipembesaranpertamapadabenda.Terdapatobjektifdenganperbesaran10x(pembesarankecil),40x/45 x (pembesaran sedang) dan 100 x (pembesaran besar). Ukuran lensa dapatdiaturdenganmemutar lempengobjektif,bilakedudukan lensasudah tepat akan terdengar bunyi “klik”. Untuk pembesaran 100 x sediaan harus ditetesi minyak emersi.

3) Kondensor Fungsikondensoradalahmemfokuskancahayaagarmenjadikuatsehingga

jatuhsebagaititikcahayadiatassediaan.Kondensordapatdinaikturunkandenganmemutar-mutarpengatur kondensor.Bila tidakmemerlukancahaya yang terlalu kuat maka kondensor diturunkan. Pada pemeriksaan dahak kondensor dinaikkan sampai maksimal. Pada kondensor terdapat jugatempatfilteryangbersifatmenyaringcahaya,tetapipadapemeriksaanmikroskopik dahak, filter ini tidak digunakan.

4) Iris/Diafragma Terletak pada kondensor, berfungsi mengatur banyak sedikitnya cahaya



LAMPIRANMIKROSKOP



34

yang masuk ke dalam mikroskop. Untuk pemeriksaan BTA diafragma harus dibuka maksimal.

5) Sumber cahaya Di bawah kondensor terdapat sumber cahaya yang dapat berupa cermin

ataulampu.Untukcahayayangjauh,digunakancermindatar,sedangkanuntukcahayadekat (misalnyamenggunakan lampumeja)digunakancermin cekung.

Untukdapatmelihatbendaatauobjekdenganmikroskopmakaperludiketahuiprinsipkerjamikroskopdancarapenggunaannya.

A. PRINSIP KERJA MIKROSKOP

cahaya yang berasal dari sumber cahaya (cermin atau sinar lampu) diteruskan ke diafragma,kondensordankacasediaanyangdiperiksa.Cahayadarilensaobjektifditeruskanmelaluitabungmikroskopkelensaokulerdanselanjutnyaditerimaolehmatasehinggaobjekterlihat.

B. cARA MENGGUNAKAN MIKROSKOP UNTUK PEMERIKSAAN DAHAK

1) Letakkanmikroskopdimejayangpermukaannyadatar, tidak licindandekat sumber cahaya.

2) Bila menggunakan sumber cahaya lampu : a) Atur tegangan lampu ke minimum. b) Nyalakan mikroskop memakai tombol ON. c) Sesuaikandenganpelan-pelan sampai intensitascahayayangdi-

inginkan tercapai. 3) Bila menggunakan cermin, arahkan cer-min ke sumber cahaya. 4) Letakkan sediaan yang telah diwarnai ke atasmejasediaan. 5) Putarlempengobjektifkeobjektif10x. 6) Atur dengan tombol pengatur fokus kasar

dan pengatur fokus halus sampai sediaan terlihatjelas.

Selalu gunakan tombol pengatur focusuntukmenurunkanmejasediaanmenjauhi

LAMPIRANMIKROSKOP



lensa

7) Sesuaikanjarakantarpupilsampaigambarkiridangambarkananmenyatudengancaramenggeser-geserkedua lensaokulerkarenasetiaporangmempunyaijarakantarpupilyangberbeda-beda).

8) Fokuskan gambar dengan mata kanan dengan cara melihat ke dalam okuler kanan dan sesuaikan dengan tombol pengatur focus halus.

9) Fokuskan gambar dengan mata kiri dengan cara melihat ke dalam okuler kiri dan putar. cincin penyesuai diopter sampai didapatkan gambar yang palingjelas,baikuntukmatakirimaupunmatakanan.

10) Buka iris/diafragma sampai 70 – 80%, hingga lapangan pandang terang dengan merata.

11) Teteskanminyakimersidiatassediaan(aplikatorjanganmenyentuhsedi-

aan)danputarlensaobjektif100xketempatnyasampaiberbunyi“klik”. 12) Fokuskandenganmenggunakantombolpengatur fokushalus (jangan

menggunakan tombol pengatur fokus kasar sebab dapat menyebabkan pecahnyalensaobjektifmaupunkacasediaan)sampaididapatkangambaryangpalingjelas.

13) Gunakan pengatur tegangan lampu untuk mendapatkan cahaya yang tepat.

LAMPIRANMIKROSKOP



36

14) Begitusediaanselesaidibaca,putarobjektif100xmenjauhikacasediaan,tempatkanobjektif10xdiatassediaan,lalusediaandiambil.

15) Bila telah selesai, atur kembali pengatur tegangan lampu ke minimum dan matikan mikroskop dengan menekan tombol OFF.

16) Setiapselesaimenggunakanmikroskop,bersihkandenganhati-hatiminyakemersidarilensaobjektif100xdenganmenggunakankertaslensa/kainhalus, masukkan dalam kotak mikroskop yang telah dikontrol kelembaban-nya dengan menempatkan lampu 5 watt yang menyala.

PERAwATAN MIKROSKOP

Jangansekali-kalimembongkarbagiandalammikroskop.

MEMBERSIHKAN LENSA

Untuk membersihkan lensa sebaiknya gunakan Ethyl ether atau pembersih lensayangsesuaianjuranpabrik.Beberapabahanpembersihdapatmerusakpermukaan lensa atau melarutkan perekat lensa setelah digunakan beberapa waktu.

Bahanpembersih Penggunaanjangkapanjang Pengunaansekali-sekali

Rekomendasi pabrik √ √ Ethyl ether/ethanol √ √ Alkohol X √ Bensin X √ Aseton/ keton X √ Xylol X X

Gunakan sesedikit mungkin cairan pembersih. Letakkan sedikit cairan pada kertas lensa untuk membersihkan.

Kertas lensa adalah yang terbaik untuk membersihkan lensa, dapat pula digunakan kain halus (flannel).

Kertas tissue dapat menggores permukaan lensa.

LAMPIRANMIKROSKOP



Jangan menyentuh bola lampu saat mema-sang, gunakan tissue

SUMBER cAHAYA

• Jangansekali-sekalimenyentuhpermukaanbolalampudengantangantelan-jang,karenalemakkulityangtertinggalakanmengurangiterangnyasinar.

• Gunakankertastissue/kertaslensa/pembungkuslampuuntukmemegangbolalampu saat memasangnya ke mikroskop.

• Sebaiknyaselalutersediacadanganlampudansekering.Pastikanvoltaseyangdigunakan sesuai, 110V atau 220V, dan bilamana perlu gunakan stabilisator voltase.

• Harusadaventilasiyangcukupagarpanasyangdihasilkanlampudapatdiatasi.Sebelum menyalakan lampu, putarlah regulator voltase ke minimum. Setelah

Penghembus udara

LAMPIRANMIKROSKOP



38

Okulerharustetappadatempatnya,jamurataudebudapatmasukmelaluilubangkosongtempatobjektifbilalensatidakterpasang.Bilalensaadayanghilang, tutup rapat dengan penutup yang tersedia.

Bila gambar terlihat buram atau ada bintik hitam, periksa adanya debu atau kotoranpada lensaobjektif,okuler, kondensor,dankacasumbercahaya.Bintik hitam bergerak bila okuler diputar, berarti debu pada okuler. Bintik hitam bila sediaan digerakkan, berarti debu pada kaca sediaan.

Debu pada lensa dapat dihilangkan dengan menggunakan sikat halus atau dengan meniupkan udara dengan penghembus udara di atas permukaan lensa.

PEMELIHARAAN BAGIAN-BAGIAN MEKANIK DARI MIKROSKOP

SULIT DIGERAKKAN

Haliniterjadikarenaakumulasidebuataukarenasaluranpenggeser/rakdan/rodagigitelahmenjadikasar.Atasidengancaramembersihkankotorandanmeminyak-inya dengan minyak gemuk/ silicone grease. Debu dibersihkan dengan penghembus udara atau kuas, dapat pula dibersihkan dengan pelarut, misalnya bensin.Gangguaninidapatpulaterjadiakibatadabagianyangmelengkung.

LONGGAR

Haliniseringterjadikarenaulirkondensortelahaus.Laporkanpadateknisialat.

PERTUMBUHAN JAMUR

• Jamuryangtumbuhdilensa,tabungokulerdanprismamenyebabkangambar

Jamur tumbuhdi bagian dalam kepala

Jamur tumbuhdi bagian dalam tabung

LAMPIRANMIKROSKOP



Kotak penghangat untuk menyimpan mikroskop

Penempatan bahan pengering

LAMPIRANMIKROSKOP

Untuk pertukaran udara



40

LAMPIRANcARA PENGIRIMAN SEDIAAN APUS

1. Bungkus sediaan apus dengan kertas tissue satu persatu.2. Ikat dengan karet agar gulungan tidak terlepas.

Masukkan gulungan kedalam kantong plastik yang tertutup rapat kemudian masu-kkankedalamamplopuntukdikirimkelaboratoriumrujukan

• Kirimkansediaanapusdidalamkotaksediaan.• Bilatidaktersediakotaksediaanlakukanpengirimandengancaraberikut:

1. Periksamasing-masingpotdahakdengan menuliskan:

- NamaPasien - Tanggal - .............2. Tutupmasing-masingpotdalam

Kantongbio-hazardsecarabersa-maan

3. Periksa ulang spesimen dengan formulir pemeriksaan

4. Letakkankantongbio-hazardyangsudah disegel ke dalam kotak pen-giriman

5. Letakkan formulir dan daftar asli ke dalam kantong segel

6. Aturlah pengiriman agar tidak bergerak

7. Kemudian masukkan kantong

1 2



LAMPIRANINFORMASI UNTUK PASIEN

1. Dokter/perawat mengirim anda ke laboratorium karena mereka menduga bahwa mungkinandamempunyaigejalaTB.

2. Untuk mendiagnosa TB dibutuhkan 3 spesimen dahak yang akan dikumpul-kan: - Pemeriksaanpertama - Esokpaginyasebelumsarapan - Ketikakembalikelaboratoriumkeesokanharinya

3. Contohkualitasdahakyangbaikadalahdariparu-paru,bukandariairliurataulendir hidung.

4. Berkumurdenganairjikaandabarusajamakan,ataujikaandamemakaigigipalsu (cabut terlebih dahulu).

5. Untuk menghasilkan contoh dahak yang baik: - Tariknafasdalam-dalam2sampai3kali,hembuskandengankuatsetiapkali

membuang nafas. - Batukkanyangdalammelaluidada. - Letakkanpotdalamkeadaanterbukadantutupkanpadamulutuntukme-

nampung spesimen dahak. - Tutupdenganrapatbilatelahselesai.

6. Anda mungkin diminta untuk mengulang pengumpulan dahak untuk mempe-

pemeriksaan mikroskopis tuberkulosis -...

Documents