pemeriksaan laboratorium pada infeksi virus

dr. Agustyas Tjiptaningrum, SpPK

TUJUAN PEMERIKSAAN LABORATORIUM

Pemeriksaan laboratorium pada infeksi bertujuan:

1. Menegakkan diagnosis penyakit

2. Dasar pengobatan penyakit

3. Pemantauan perjalanan penyakit

4. Pemantauan terapi

5. Penentuan prognosis

DEMAM DENGUE

DEFINISI DEMAM DENGUE DAN DBD

Merupakan penyakit infeksi yang disebabkan oleh virus dengue dengan manifestasi klinik demam, nyeri otot, atau nyeri sendi disertai leukopenia, ruam, limfadenopati, trombositopeni, dan diatesis hemoragik

Pada DBD terjadi perembesan plasma yang ditandai hemokonsentrasi (peningkatan hematokrit) atau penumpukan cairan di rongga tubuh

Sindroma renjatan dengue (Dengue Shock Syndrome) adalah demam berdarah yang ditandai renjatan atau syok

Suhendro, Nainggolan L, Chen K, Pohan HT. Demam berdarah dengue. In: Sudoyo AW, Setiyohadi B, Alwi I, K MS, Setiati S, editors. Buku ajar ilmu penyakit dalam. IV ed. Jakarta: Pusat Penerbitan Departemen Ilmu Penyakit Dalam; 2006. p. 1731-5.

INFEKSI DENGUE

EPIDEMIOLOGI

PEMERIKSAAN LABORATORIUM INFEKSI DENGUE

EPIDEMIOLOGI

PEMERIKSAAN LABORATORIUM INFEKSI DENGUE

EPIDEMIOLOGI

Asia Tenggara sejak th 2000 dengue epidemik menyebar ke beberapa daerah baru dan mengalami peningkatan angka kejadian

Negara dimana terdapat kasus dengue adalah Indonesia, Bangladesh, India, Maldives, Myanmar, Sri lanka, Thailand, dan Timor Leste, Bhutan (2004), dan Nepal (2006)

KLASIFIKASI DENGUE

KLASIFIKASI INFEKSI DENGUE MENURUT WHO 1997

KRITERIA DIAGNOSIS DEMAM DENGUE MENURUT WHO 1997

KLASIFIKASI DENGUE

KLASIFIKASI DENGUE FEVER MENURUT WHO 2009 (REVISI)

WHO. Dengue: Guidelines for Diagnosis, Treatment, Prevention and Control: World Health Organization; 2009.

PERJALANAN PENYAKIT DENGUE MENURUT WHO 2009 (REVISI)

Dibagi menjadi 3 fase: 1. Fase Febris 2. Fase kritis 3. Fase pemulihan (recovery phases)

PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS

Pemilihan metode diagnosis yang sesuai dengan efisiensi dan keakuratan tergantung :

Tujuan tes

Fasilitas tipe laboratorium

Tenaga ahli teknis yang tersedia

Waktu pengumpulan sampel

Jenis pemeriksaan laboratorium untuk diagnosis:

1. Deteksi virus kultur virus

2. Deteksi asam nukleat virus PCR atau NSBA (Nucleic Acid Sequence Based Amplification)

3. Deteksi antigen atau antibodi virus


DETEKSI ANTIGEN

Antigen yang dideteksi adalah non structural protein-1 (NS-1) atau antigen envelope/membrane (E/M)

Deteksi antigen yang sering digunakan adalah NS-1

NS-1 terdapat dalam jumlah besar dalam darah pasien infeksi primer maupun sekunder sampai hari ke 9 setelah onset sakit

DETEKSI ANTIBODI

Deteksi total IgM dengan ELISA

Bahan pemeriksaan bisa serum, darah pada kertas filter, atau saliva

Tidak semua serotipe dengue tercakup dalam satu kit pemeriksaan untuk deteksi IgM dengue

Reaksi silang dengan infeksi flavivirus lain seperti Japanese encephalitis dan yellow fever, bahkan ada dilaporkan false positif dengan infeksi malaria dan leptospirosis


DETEKSI ANTIBODI

Deteksi IgG dengan ELISA

Bahan pemeriksaan bisa serum, plasma, atau darah pada kertas filter

Digunakan untuk deteksi infeksi saat ini atau infeksi lalu (bila digunakan serum berpasangan)

Peningkatan kadar IgG 4x atau lebih pada serum berpasangan yaitu serum fase akut dan penyembuhan mengkonfirmasi adanya infeksi dengue

Deteksi ratio IgM/IgG

Untuk membedakan antara infeksi primer atau sekunder

Ratio > 1,2 dengan pengenceran serum 1/100 atau 1,4 dengan pengenceran serum 1/20 infeksi primer

Ratio < 1,2 dengan pengenceran serum 1/100 atau 1,4 dengan pengenceran serum 1/20 infeksi sekunder


DETEKSI ANTIBODI

Deteksi IgA

Bahan serum dan saliva

Metode ELISA

IgA dengue positif 1 hari setelah IgM positif

Puncak pada hari ke 8 demam dan menurun cepat sampai tidak terdeteksi pada hari ke-40

Tidak terdapat perbedaan titer antara infeksi primer dan sekunder


DETEKSI ANTIBODI

Hemaglutinaasi inhibisi (HI)

Dilakukan berdasarkan kemampuan antigen dengue untuk mengaglutinasi eritrosit

HI mengukur potensi antibodi anti dengue yang terdapat dalam serum pasien untuk menghambat aglutinasi tersebut

Dilakukan dengan serum berpasangan yaitu serum fase akut dan konvalescent atau jarak pengambilan serum 1 dan ke 2 adalah 7 hari atau lebih

Infeksi primer titer antibodi HI rendah pada fase akut dan meningkat lambat pada fase konvalescent

Infeksi sekunder titer antibodi HI meningkat cepat sampai titer 1:1280

HEMAGLUTINASI INHIBISI



UJI FIKSASI KOMPLEMEN

Kurang sensitif

Untuk konfirmasi infeksi dengue pada serum berpasangan yang diambil sesudah infeksi

Peningkatan 4x pada dari serum akut ke konvalescent menunjukkan infeksi sekunder

TES NEUTRALISASI

Jarang digunakan


WAKTU PEMERIKSAAN

Setelah onset sakit virus dapat dideteksi dalam serum/plasma/darah dan jaringan lain dalam 4-5 hari

STADIUM AWAL PENYAKIT untuk deteksi antigen berupa isolasi/kultur virus, deteksi asam nukleat atau antigen virus

AKHIR FASE AKUT serologi (pemeriksaan antibodi)

RESPONS IMUN UNTUK PEMBENTUKAN ANTIBODI

Pada infeksi primer, terbentuk IgM :

1. 50% pasien pada hari ke 4-5

2. 80% pasien hari ke-5

3. 99% pasien pada hari ke-10


PEMBENTUKAN ANTIBODI PADA INFEKSI PRIMER

Pada infeksi primer, terbentuk IgM :

1. 50% pasien pada hari ke 4-5

2. 80% pasien hari ke-5

3. 99% pasien pada hari ke-10

Kadar IgM mencapai puncak sekitar 2 minggu setelah gejala muncul dan menurun sampai tidak terdeteksi setelah 2-3 bulan

IgG anti dengue terdeteksi dg kadar rendah pada akhir minggu pertama sakit, kemudian meningkat perlahan dan bertahan beberapa bulan sampai seumur hidup


PEMBENTUKAN ANTIBODI PADA INFEKSI SEKUNDER

Imunoglobulin yang terdeteksi dg kadar tinggi bahkan pada fase akut adalah IgG (menetap selama 10 bulan)

Akhir stadium penyembuhan (konvalescent) IgM terdeteksi dgn kadar rendah pada infeksi sekunder dibandingkan pada infeksi primer

Untuk membedakan infeksi primer atau sekunder digunakan:

1. Rasio IgM/IgG lebih sering digunakan

2. Hemagglutinasi inhibisi (HI)

JENIS PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS DEMAM DENGUE DAN WAKTU PEMERIKSAANNYA

PERBANDINGAN HASIL PEMERIKSAAN ANTIBODI DENGUE PADA INFEKSI PRIMER DAN SEKUNDER DENGAN ELISA DAN TES HI

PEMILIHAN METODE DIAGNOSIS

INTERPRETASI HASIL PEMERIKSAAN DIAGNOSIS DENGUE

PENGAMBILAN SAMPEL

Volume darah yang diambil 2-5 mL

Bila pemeriksaan ditunda keesokan harinya, segera pisahkan serum dan serum disimpan dalam freezer

Darah lengkap tidak boleh disimpan dalam freezer supaya tidak hemolisis

PEMERIKSAAN HEMATOLOGI

PEMERIKSAAN HEMATOLOGI RUTIN

1. Pemeriksaan trombosit dan hematokrit digunakan untuk membantu diagnosis pada stadium akut infeksi

2. Trombosit dibawah 100.000/L DHF tetapi juga dapat ditemukan pada dengue fever

3. Trombositopenia ditemukan pada hari ke-3 hingga 8 onset sakit

4. Hemokonsentrasi ditandai dengan peningkatan hematokrit >20% atau lebih dibandingkan serum konvalescent menunjukkan adanya hipovolemia akibat peningkatan permeabilitas vaskuler dan terjadi kebocoran plasma

PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK MONITORING DAN PENATALAKSANAAN PASIEN

Hematologi lengkap harus dilakukan pada saat pasien datang

Nilai hematokrit yang didapat merupakan baseline nilai hematokrit pasien

Hasil pemeriksaan hematologi lengkap :

1. Eritrosit normal

2. Leukosit leukopeni, tetapi bisa dijumpai normal atau leukositosis. Pada fase akhir demam terjadi limfositosis relatif, terdapat limfosit plasma biru (4%) pada hari ke-3 s/d ke-7

3. Trombosti trombositopenia pada fase kritis, trombosit

PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK MONITORING DAN PENATALAKSANAAN PASIEN

Pemeriksaan laboratorium lain bila terdapat indikasi :

1. Fungsi hati ALT dan AST, PT, dan bilirubin

2. Pemeriksaan kadar protein total dan albumin bila terdapat tanda2 kebocoran masif seperti asites atau efusi pleura

3. Elektrolit dan analisis gas darah syok

4. Ureum dan kreatinin bila terdapat tanda2 gagal ginjal akut akibat syok hipovolemik

5. Pemeriksaan koagulasi (PT, aPTT, fibrinogen, dan D-dimer) untuk melihat kelainan koagulasi, koagulopati, ataupun adanya tanda DIC pada pasien

PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK INFEKSI VIRUS

INFEKSI EBV

Infeksi mononukleosis merupakan syndroma klinis akut akibat infeksi primer Epstein Barr Virus (EBV)

Pemeriksaan laboratorium penunjang diagnosis antara lain:

Pemeriksaan hematologi

Pemeriksaan mikrobiologi

Pemeriksaan serologi

Pemeriksaan Hematologi:

Leukositosis dan limfositosis (ditemukan limfosit atipik)

Jumlah limfosit meningkat hingga 50% dari jumlah leukosit dan limfosit atipik 10% dari jumlah limfosit

Neutropenia (jml neutrofil

PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK INFEKSI VIRUS EBV

Pemeriksaan Hematologi:

Bila terjadi neutrofilia maka gambaran neutrofil adalah granulasi toksik, shift to the left, dan dohle bodies

Limfosit atipik

Limfosit normal


INFEKSI VIRUS LAIN

Pemeriksaan yang dilakukan:

1. Pemeriksaan hematologi

2. Pemeriksaan serologi deteksi antigen-antibodi untuk menegakkan diagnosis

3. Pemeriksaan mikrobiologi kultur atau isolasi virus untuk diagnosis

4. Pemeriksaan kimia sesuai indikasi , untuk memantu perjalanan penyakit, komplikasi, dan penatalaksanaan


Biasanya limfositosis tetapi beberapa infeksi virus terdapat neutrofilia

Terdapat limfosit atipik

Hitung eosinofil menurun pada akut infeksi virus dan meningkat kembali pada fase pemulihan


INFEKSI VIRUS LAIN


Trombositopenia dapat terjadi pada beberapa infeksi virus akibat pemakaian trombosit selama infeksi virus aktif

Pada infeksi rubella pada fase penyembuhan (recovery phase) terjadi trombositopenia akibat interaksi kompleks imun dengan platelet

Hemolisis akut dapat terjadi pada infeksi measles (cacar)

Infeksi Parvovirus dapat menyebabkan

aplasia eritrosit akut dan transient dengan sedikit penurunan Hb dan tidak ditemukannya retikulosit

Neutropenia atau trombositopenia

Anemia berat tetapi transient


INFEKSI VIRUS LAIN


Infeksi Herpesvirus dapat menyebabkan

Syndroma hemofagositik pansitopenia

Infeksi virus kroni HTLV-1 limfositosis dengan limfosit atipik (+)

Neutrofilia didapat akibat infeksi virus

pemeriksaan laboratorium pada infeksi virus

Documents