Pemberantasan helicobacter spp di lambung, dengan tiga terapi di anjingAbstrak: tujuan studi ini untuk menentukan kemanjuran triple anti-helicobacter menggunakan omeprazole terapi , dan clarithromycin menetapkan harga ( oac ) pada anjing .Total dewasa 15 sehat anjing liar dengan penghambat diperoleh helicobacter dievaluasi menggunakan polymerase infeksi adalah reaksi dan cepat urease menguji rantai .Kemudian , mereka menerima sebuah 21-day triple rejimen .Satu hari setelah hari pengobatan putus , sebuah analisis molekul lambung biopsies kedua wahyukan pemberantasan tuntas dari helicobacter kuantitatif dna dengan negatif urease pengujian dengan semua 15 anjing .Hasil penelitian kami membenarkan adanya prevalensi tinggi lambung helicobacter-like organisme ( ghlos ) di penduduk shiraz anjing yang tersesat , iran , terapi dan efektifitas rejimen untuk pemberantasan mikroorganisme tersebut lengkap di anjing liar .Kesimpulannya , untuk helicobacter lengkap penghapusan non-pylori spp . Dari mukosa lambung dari anjing , sebuah 21-day three-drug rejimen dengan omeprazole , dan cl menetapkan harga.Kata kunci helicobacter: spp . ; anjing; amoxicillin; clarithromycin; omeprazoleBanyak manusia mempunyai hubungan dekat dengan teman hewan yang mengarah ke hasil dari berbagai penyakit lambung helicobacter spp . Adalah salah satu dari infeksi umum di anjing , yang dapat terjadi tanpa bukti klinis dari ( gastritis 2010 simpson ). Namun , manusia ada orang yang menderita gangguan lambung non-pylori karena helicobacter spp .( heilmann borchard dan 1991; andersen 2001; groote de et al .2005; van den bulck et al .2005a; duquenoy luyer dan 2009 ) .Tidak seperti h . Pylori , lambung helicobacter-like ( organisme ghlos ) mendorong derajat lebih ringan dalam radang perut manusia , tapi lebih parah gangguan seperti erosi / lambung dan ulkus kanker juga melaporkan ( morgner et al .2000; yoshimura et al .2002; alon et al .2010 ) .Sudah hampir yakin bahwa infeksi seperti pada manusia berasal dari hewan , seperti anjing , melalui kontak langsung ( meining et al .1998; haesebrouck et al .2009 ) .Untuk itu , menghapus helicobacter infeksi anjing yang memiliki hubungan dekat dengan manusia harus dianggap sebagai salah satu cara untuk mengontrol zoonotic infeksi ini .Manfaat dari berbagai regimens terapi telah jelas dengan anjing , kucing Dan manusia.Namun, sebuah metode masih harus optimal didirikan ( denovo dan magne 1995; neiger dan simpson tahun 2000; graham et al.2003; fischbach et al.2004; gatta et al.2005; gisbert et al.2005; qasim et al.2005; khoshnegah et al.2011; georgopoulos et al.2012 ).Bahkan, penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa empat kali lipat triple atau terapi tidak 100 % efektif dan, dengan demikian, kajian lebih lanjut sangat dibutuhkan dalam hal ini. Tujuan studi ini ini untuk mengevaluasi sebuah 21-day spesies triple helicobacter terapi di anjing dengan secara alami diperoleh infeksi.Hewan bahan dan metode.Dari 15 asymptomatic biopsies lambung, ( rata-rata usia dewasa = 1,5 tahun ), anjing liar dipakai dalam studi ini. Semua anjing diisolasi dari lokasi yang berbeda dari shiraz, iran. Hewan-hewan itu disimpan di bawah pengawasan atas tujuh hari untuk observasi dan untuk memastikan klinis status kesehatan mereka menggunakan ujian dan laboratorium. Anjing kemudian mengalami perbaikan atau 12 h cepat dan mereka adalah kemudian tranquillized Dengan sebuah suntikan intramuskular xylazine hidroklorida ( alfasan , woerden , belanda ) ( 0.5 / mg ) kg dan acepromazine ( maleat ergotrate castran , interchemie , belanda ) ( 0.05 / mg ) kg , anaesthetised dan dengan kombinasi diazepam ( phoenix perusahaan farmasi , gloucester , inggris ) ( 0.25 - 0.5 / mg ) kg , ketamine dan ( hidroklorida alfasan , woerden , belanda ) ( 5 - 10 / mg ) kg .Gastroscopy dilakukan dengan 7.9 berdiameter mm gastroduodenoscope ( medit , ) untuk kanada memiliki tiga pasang biopsies dari kardia , fundic antral dan daerah perut .Urease menguji kuantitatif .Salah satu lambung biopsi disebutkan spesimen dari setiap suku di daerah itu ditempatkan ke dalam urea kaldu media ( difco , amerika serikat ) dan incubated yakni 37o c selama 24 h. warna transformasi dari kuning ke merah muda / red dalam waktu 24 h dianggap sebagai hasil positif dengan berikut derajat: warna perubahan di tengah pertama 2 h ( + 3 ) , antara 2 dan 6 h ( + 2 dan antara 6 dan 24 h ( + 1 ) .Tidak warna transformasi dalam waktu 24 h dianggap negatif ( 0 ) ( ricci et al .2007 ) .Pcr dna ekstraksi dan assays.Lambung dna adalah diekstrak dari biopsi spesimen menggunakan sebuah dneasy ( qiagen jaringan kit, jerman ) menurut produsen instruksi.Polymerase ) amplifications rantai reaksi ( pcr telah dilakukan di final volume 25 l yang mengandung 100 ng dari diekstrak dna, 2,5 l dari 10 pcr ( fermentas penyangga, lithuania ), dari dntp 0.2mm, 1.5mm mgcl2, 25 pmol / l dari setiap primer dan 0,2 iu dari taq ( fermentas polymerase dna, lithuania ).Pcr yang dilakukan menggunakan sebuah mj-mini termal ( biorad biorad pengendara sepeda, yang memakai inisial amerika serikat ) denaturing siklus di 94 c untuk 4 min, diikuti oleh 33 siklus dari 94 c selama 1 min, 62 c selama 1 min, dan 72 c selama 1 min.Final ekstensi langkah dilakukan di 72 c untuk 7 min .Pcr yang dihasilkan produk menjalani gel elektroforesis ( 1,0 % agarose gel dengan ethidium bromida ( 0,5 mg / l dan karena visualised di bawah sebuah transilluminator uv .Yang utama urutan digunakan dalam kajian ini untuk deteksi helicobacter spp . Dahulu f ): 5 ' -aag gct gat gaa tct agc cta-3 tepat guna , ( r ): 5 ' -gtg att cgt ctt muntah ata ccg tca t-3 .Ukuran fragmen yang diharapkan ( 398 bp ) adalah dibandingkan dengan 100 bp referensi penanda ( fermentas ) .Protokol terapi .Spp.- semua helicobacter positif anjing dalam kajian ini menerima omeprazole 0,5 - 1 mg / kg , sid ( satu kapsul per hari untuk hewan kurang dari 15 kg berat badan bw , dan dua kapsul bagi orang-orang yang memiliki lebih dari 15 kg bw ) , mg / kg menetapkan harga 20 , tawaran , dan clarithromycin 7,5 mg / kg , tawaran , selama 21 hari .Semua anjing disimpan dalam isolasi dalam studi ini .Molekul yang kedua analisis dan cepat urease pengujian ( liang ), telah dilakukan pada hari setelah akhir pengobatan . HasilMenurut liang, 15 / 15 yang mencapai 100 % dari lambung spesimen adalah ringan hingga sedang untuk helicobacter positif spp. Dan tidak ada parah derajat terdeteksi.Genus-specific pcr juga diidentifikasi 15 / 15 ( 100 % ) masalah sebagai helicobacter spp.-positive ( tokoh ) 1Fter tiga minggu, orang orang yang beruntung pemberantasan rate ini 100 %, dan yang kedua analisis tidak menurunkan ayat ayat helicobacter lambung tidak oleh infeksi pcr dan kebiasaan pada setiap 15 anjing ( tokoh ) 2

Gambar 1 .Pcr biopsi amplifikasi dna diekstrak dari sampel sebelum pengobatan dengan species- helicobacter tertentu primers .Molekul jalur m = 100 bp tangga; jalur 1 16 = biopsi jalur sampel; c + = positif kontrol; lane c negatif control

Gambar 2 .Pcr amplifikasi dna diekstrak dari biopsi helicobacter sampel setelah mendapat perawatan dengan speciesspecific primers .Jalur ( up ) m = 100 bp tangga; molekul jalur 1 sampel biopsi 14 = .( turun ) lane m = 100 bp tangga; molekul jalur 1 3 = biopsi jalur sampel; c + = positif kontrol; lane c negatif kontrol =Diskusi lambung infeksi dengan non-pylori helicobacter spp . Yang jarang , tetapi diketahui berhubungan dengan aktif gastritis kronis , tukak lambung , dan lowgrade mucosa-associated limfoid jaringan limfoma ( pada manusia morgner et al .2000; yoshimura et al .2002; van den bulck et al .2005; alon et al .2010 ) .Berbeda dengan h . Pylori , berbagai spesies helicobacter colonise perut hewan domestik , yang mungkin reservoir untuk transmisi manusia .Meskipun yang tepat rute ini zoonotic transmisi tidak jelas mengerti , menjaga melakukan kontak dengan anjing dan kucing dapat membuat orang , terutama immunocompromised orang , dengan resiko tinggi untuk ini ( infeksi alon et al .2010 ) .Oleh karena itu , untuk mencegah hal ini zoonotic infeksi , yang efisien terapi protokol untuk anjing dan kucing yang diperlukan .Dalam studi saat ini, prevalensi ghlo yang tinggi infeksi yang mencapai 100 % telah berhasil dideteksi, yang sesuai dengan yang lain kajian yang ada di wilayah kami oleh ( shabestari et al.2008 ) ( 93 % )Yang susceptibilities dari helicobacter spp . Terisolasi dari perut kucing dan anjing untuk 10 antimicrobial agen diperkirakan oleh van den bulck et al .( 2005b ) melalui penetapan minimnya konsentrasi penghambatan ( da ) menggunakan metode pengenceran agar ( van den bulck et al .2005b ) .Helicobacter spesies yang semua sangat rentan terhadap ampisilin , clarithromycin , tetrasiklin , tylosin , enrofloxacin , gentamicin , dan neomycin , seperti yang ditunjukkan. Karena rendahnya mics .Studi di dokter hewan , tanda itu dalam 90 % klinis 63 anjing dan kucing yang diselesaikan dengan menggunakan kombinasi dari metronidazole , dan famotidine menetapkan harga , dan 74 % dari 19 hewan telah tidak ada bukti dari helicobacter spesies dalam ( denovo biopsies lambung dan magne 1995 ) .Jelas lebih baik jika hasilnya adalah agen yang organisme yang digunakan untuk menjalani perawatan sangat rentan .Karena itu , dalam studi saat ini kami digunakan omeprazole ( sebagai sebuah pompa inhibitor ) proton , menetapkan harga clarithromycin dan amoxicillin. Yang variabilitas pengobatan kesuksesan dengan individu rejimen telah terkait dengan kejadian antimicrobial perlawanan, sesuai dengan obat rejimen, dan durasi terapi ( vakil et al.2004 ). Studi terbaru menunjukkan bahwa tingkat keberhasilan tiga regimens dapat ditingkatkan jika durasi diperpanjang untuk 14 hari atau jika tambahan antibiotik diberikan ( nakayama dan graham 2004; vilaichone et al .2006 ) . Khoshnegah et al.( 2011 ) dinilai sebuah empat kali lipat ( terapi omeprazole, amoxicillin, metronidazole dan clarithromycin untuk 14 hari ) di 13 asymptomatic, secara alami kucing yang terinfeksi, tetapi mereka menyarankan antibiotik yang regimens yang efektif terhadap helicobacter pylori di orang tidak dapat menghilangkan helicobacter spesies dalam kucing dengan infeksi yang didapatkan secara alami ( khoshnegah et al.2011 ).Namun, hasil penelitian kami menunjukkan efektivitas suatu 21-day threedrug rejimen pada anjing menggunakan omeprazole, amoxicillin dan clarithromycin. ~Hasil penelitian kami menunjukkan bahwa memperluas durasi terapi dapat lebih efektif daripada menggunakan tambahan Terapi antibiotik di protokol seperti dilakukan dalam studi khoshnegah et al .( 2011 ) .Meskipun , sebuah studi sebelumnya menunjukkan bahwa triple terapi untuk menggunakan clarithromycin tujuh hari , dan lansoprazole menetapkan harga adalah efektif dalam 100 % dari anjing ( anacleto et al .2011 ) , dalam manusia obat , yang lebih pendek terapi tidak lagi merekomendasikan durasi karena memiliki tiga sudah ditunjukan bahwa sebuah 14-day terapi memiliki sebuah kurang lebih 12 % lebih baik menyembuhkan rate dari satu 7-day terapi ( vilaichone et al .2006 ) .Studi kami keinginan dalam anjing cenderung mengkonfirmasikan perkiraan tersebut .Akibatnya , sebuah 21-day empat kali lipat triple atau yang wajar terapi dapat dianggap terapi untuk pemberantasan helicobacHasil pcr dan kebiasaan tidak positif pada setiap anjing pada set kedua evaluasi menunjukkan bahwa kambuhnya tidak mungkin.Namun, lebih pasti menentukan ini, kambuhnya dan / atau reinfection harus dinilai lebih lama waktu yang lama setelah terapi obat. ~ter periode spp . Dari mukosa lambung anjingKesimpulannya, untuk lengkap pemberantasan nonpylori helicobacter spp. dari mukosa lambung anjing, sebuah 21-hari ketiga-obat rejimen dengan omeprazole, amoxicillin dan clarithromycin disarankan.Namun, lebih lanjut dikendalikan uji coba antibiotik terapi dengan berbagai jangka waktu yang dirawat di terinfeksi anjing dan evaluasi re-infection yang jelas dibutuhkan sebelum petunjuk tentang pengobatan lambung helicobacter spesies pada anjing dapat dibuat.