Nanin Dwi Rinawati

1506 100 042

DOSEN PEMBIMBING:

N.D. Kuswytasari,S.Si.,M.Si

Awik Puji Dyah Nurhayati, S.Si., M.Si

Latar Belakang

Kendala budidaya

ikan

Penyakit Bakteri Vibrio alginolyticus

Vibriosis pada udang dan ikan terutama ikan

kerapu

Pencegahan

Kandungan senyawa kimia pada Tumbuhan

Majapahit

Bahan alami

Kelemahan:

-Organisme patogen menjadi resisten

- residu dapat mencemari lingkungan

perairan

Antibiotik

RUMUSAN

PERMASALAHAN Pengaruh ekstrak daun, buah, kulit batang Majapahit (C. cujete L.) terhadap pertumbuhan bakteri V. alginolyticus???

BATASAN PERMASALAHAN • Daun, kulit batang dan buah

dalam bentuk ekstrak kering dan basah

• Maserasi dengan pelarut etanol 96%

• Nilai zona hambat, MIC (Minimum Inhibitory Concentration), dan MBC (Minimum bactericidal Concentration) pada V. alginolyticus

TUJUAN Mengetahui daya antibakteri ekstrak daun, kulit batang dan buah Majapahit(C. cujete L.) terhadap bakteri V. alginolyticus

MANFAAT memberikan informasi kepada masyarakat tentang manfaat tumbuhan Majapahit (C.cujete L.) sebagai bahan alternatif pengganti antibiotik untuk pencegahan penyakit ikan air payau dan air laut

METODOLOGI PENELITIAN

Waktu • Maret – Juli 2010

Tempat

• Lab. Botani jurusan Biologi FMIPA ITS Surabaya

• Tropical Disease Center (TDC)

• Lab. Mikrobiologi jurusan Biologi FMIPA ITS Surabaya.

Cara

Kerja

Ekstraksi Daun, Buah dan Kulit Batang Majapahit

(Crescentia cujete L.)

Kultur Bakteri

Vibrio alginolyticus

Pembuatan Larutan 0,5 Mc Farland & Suspensi Bakteri

Vibrio alginolyticus

Pengamatan Zona bening

Metode Penentuan MIC (Minimum Inhibitory

Concentration)

Metode Penentuan MBC (Minimum Bactericidal Concentration)

3 kali ulangan

12 perlakuan dengan konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% dan 100% serta kontrol positif (Eritromosin) dan kontrol negatif (Akuades)

Rancangan Penelitian Dan Analisis Data

Metode difusi (Zona bening)

• Diamati secara deskriptif kualitatif dan kuantitatif

• Dianalisis dengan Analysis of Varian (ANOVA) one way

• Apabila berbeda nyata akan dilanjutkan dengan uji Tukey (Gasperz, 1991)

Metode dilusi (MIC & MBC)

• Dianalisis secara deskriptif kualitatif dan dibandingkan dengan kontrol

Tipe Ekstrak Diameter zona bening

(mm)

Respon hambat

Kontrol negatif (akuades) 0a -

Buah kering 0a -

Buah segar 8,8b -

Kulit batang kering 9b -

Kulit batang segar 9,4b -

Daun kering 11,1bc +

Daun segar 19,8 d ++

Kontrol positif (Eritromisin) 26,1e +++

Tabel 4.1 Diameter zona bening yang menentukan respon hambat ekstrak Crescentia cujete L. terhadap pertumbuhan bakteri V. alginolyticus pada inkubasi 24 jam

Keterangan : Angka-angka pada kolom yang sama yang didampingi oleh huruf kecil yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf kepercayaan 95%.

Tanda (-) : Tidak ada respon hambatan, (+) : respon hambatan lemah, (++) respon hambatan sedang, (+++) : respon hambatan kuat.

0

5

10

15

20

25

30

Eritromisin Akuades Daun segar Daun kering Kulit batang

segar

Kulit batang

kering

Buah segar Buah kering

Dia

mete

r Z

on

a B

en

ing

(m

m)

Tipe Ekstrak

18 jam

24 jam

48 jam

Gambar 4.1 Grafik hubungan antara diameter zona bening dengan tipe ekstrak pada konsentrasi 100% terhadap bakteri

V. alginolyticus

• Perbedaan ukuran zona bening dipengaruhi

oleh: Kadar senyawa metabolit sekunder Tingkat kehalusan bahan Proses pengeringan

• Terbentuknya zona bening adanya senyawa

metabolit sekunder saponin, alkaloid, polifenol, flavonoid, dan tanin (Hutapea, 1993;

Ogbuagu, 2008 ).

Uji antibakteri dengan metode difusi

Ekstrak daun segar diameter zona bening terbesar & respon hambat tergolong sedang

Metode dilusi konsentrasi minimum yang dapat menghambat dan membunuh bakteri

Konsentrasi Ekstrak Penentuan Nilai MIC ∑ Koloni Bakteri

0% Keruh *

10% Keruh *

20% Keruh *

30% Keruh *

40% Keruh *

50% Keruh *

60% Jernih 0,00107 x 105

70% Jernih 0,00067 x 105

80% Jernih 0,00033 x 105

90% Jernih 0

100% Jernih 0

Tabel 4.2 Nilai MIC dan MBC ekstrak daun segar tumbuhan Majapahit (C. cujete L.) terhadap pertumbuhan V. alginolyticus

Keterangan : : Menunjukkan nilai MIC (Minimum Inhibitory Concentration) : Menunjukkan nilai MBC (Minimum bactericidal Concentration) * : Tidak dihitung

Mekanisme penghambatan

Alkaloid Gugus basa bereaksi dengan senyawa asam amino perubahan struktur dan susunan susunan rantai DNA berubah perubahan keseimbangan genetik pada rantai DNA kerusakan sel lisis kematian sel pada bakteri (Gunawan, 2009)

Saponin Membentuk senyawa kompleks dengan membran sel melalui ikatan hidrogen (Cannell, 1998) menghancurkan sifat permeabilitas dinding sel kematian sel (Noer, dkk., 2006)

Tanin

Merusak membran sel bakteri permeabilitas sel terganggu sel tidak dapat melakukan aktivitas hidup pertumbuhan terhambat kematian sel. (Ajizah, 2004).

Polifenol dan flavonoid

Fenol berikatan dengan protein struktur protein rusak Ketidakstabilan pada dinding sel dan membran sitoplasma fungsi metabolisme sel terganggu makromolekul dan ion lolos sel kehilangan bentuknya lisis (Susanti 2008).

• Ekstrak daun segar dan kering, kulit batang segar dan kering, serta buah segar majapahit (Crescentia cujete L.) daya antibakteri terhadap bakteri Vibrio alginolyticus, kecuali pada ekstrak buah kering.

• Zona bening terbesar adalah 19,8 mm, dihasilkan dari ekstrak daun segar majapahit (C. cujete L.), diikuti dengan daun kering sebesar 11,1 mm, kulit batang segar sebesar 9,4 mm, kulit batang kering sebesar 9 mm, dan buah segar sebesar 8,8 mm.

• Nilai MIC (Minimum Inhibitory Concentration) ekstrak daun segar majapahit terhadap pertumbuhan bakteri V. alginolyticus adalah 60% dan nilai MBC adalah 90%.

Kesimpulan

• Uji antibakteri ekstrak daun majapahit (C. cujete L.) terhadap ikan air payau atau laut yang terserang bakteri V. alginolyticus sehingga dapat diketahui efektifitas dari ekstrak tersebut.

• Pemisahan senyawa metabolit sekunder pada ekstrak daun majapahit (C. cujete L.), sehingga dapat diketahui senyawa yang berperan dalam menghambat pertumbuhan bakteri V. alginolyticus.

Saran