STERILISASI, PEMBUATAN MEDIUM, PENGHITUNGAN JUMLAH MIKROBA, DAN PEWARNAAN GRAM

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

Disusun Oleh :

Kelompok XE

Burhan Aminuddin23010113120050

Happy Ganis Rahmawati23010113120057

Afit Setiawan23010113120072

Ridha Dwi Jayanti23010113120093

Heraghani Ibnu K23010113140223

S. Mustaqim Ibrahim23010113140227

PROGRAM STUDI S-1 PETERNAKAN

FAKULTAS PETERNAKAN DAN PERTANIAN

UNIVERSITAS DIPONEGORO

SEMARANG

2014

LEMBAR PENGESAHAN

Judul: LAPORAN RESMI PRATIKUM MIKROBIOLOGI

Kelompok: XE (SEPULUH)E

Jurusan: PETERNAKAN

Fakultas: PETERNAKAN DAN PERTANIAN

Tanggal Pengesahan: Juni 2014

Menyetujui,

Asisten Pendamping

Tri Vidyanto

NIM. 23010111120056

RINGKASAN

KELOMPOK XE . 2014. Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi. (Asisten: TRI VIDYANTO).

Praktikum Mikrobiologi dengan materi Sterilisasi dan Pembuatan Medium dilaksanakan pada hari Rabu, tanggal 21 Mei 2014 pukul 07.00 - 10.00 WIB dan materi Metode Hitungan Cawan dan Pewarnaan Gram pada hari Kamis, tanggal 22 Mei 2014 pukul 09.00 - 11.00 WIB di Laboratorium Fisiologi dan Biokimia, Fakultas Peternakan dan Pertanian Universitas Diponegoro, Semarang. Tujuan praktikum adalah mengetahui cara sterilisasi kering dan basah, pembuatan medium PDA, metode hitungan cawan, pewarnaan gram positif dan gram negatif.

Materi yang digunakan dalam praktikum adalah timbangan, erlenmeyer, tabung reaksi, gelas ukur, waterbath, beker glass, gelas ukur, pisau, kain saring, oven, autoklaf, cawan petri, pipet hisap, penghisap, bunsen, kaca objek, loop, mikroskop. Bahan yang digunakan adalah kentang, asam tartarat, agar, aquades, kertas pembungkus, kapas, alkohol untuk mensterilisasi dan aluminium foil, medium berupa susu UHT, biakan bakteri dan larutan gram A (violet kristal), gram B (larutan lugol), gram C (aquades), gram D (safranin). Metode yang dilakukan pembuatan medium PDA, sterilisasi kering, dengan mengeringakan alat pada oven dengan suhu 160C dan sterilisasi basah dengan memasukan pada autoklaf dengan suhu 121C, perhitungan cawan yaitu menghitung bakteri yang tumbuh, dan pewarnaan gram.

Berdasarkan hasil praktikum sterilisasi bahwa sterilisasi berfungsi untuk membersihkan alat yang akan digunakan. Pembuatan medium digunakan sebagai tempat pertumbuhan bakteri dan menyediakan nutrisi bagi bakteri. Berdasarkan perhitungan cawan dan pewarnaan gram disimpulkan bakteri dihitung sesuai dengan Standart Plate Count (SPC) diketahui jumlah bakteri pada susu UHT adalah 3,3 x 1010 Cfu/ml. Pewarnaan bakteri dengan memberikan gram (violet kristal, larutan lugol, aquades, safranin) yang dibedakan menjadi gram positif berwarna ungu dan gram negatif berwarna merah muda. Hasil Praktikum Mikrobiologi Umum yaitu sterilisasi pada alat dan bahan yang digunakan, perhitungan jumlah bakteri dengan metode hitung cawan diperoleh hasil rata-rata 1,32 x 105 Cfu/ml , serta pewarnaan gram pada pengamatanE. coli berbentuk coccus berwarna merah muda berarti gram positif. Pewarnaan gram pada Lactobacilus asidiphilus berwarna ungu berbentuk bassil berarti gram negatif.

Kata kunci : Pembuatan Medium, Sterilisasi, Pengenceran, Perhitungan Cawan, Pewarnaan Gram.

KATA PENGANTAR

Puji syukur kami panjatkan atas kehadirat Allah SWT yang telah berkenan melimpahkan rahmatnya, sehingga penyusun dapat menyelesaikan Laporan Praktikum Mikrobiologi. Praktikum ini diadakan bertujuan agar para mahasiswa mengenal dan mengetahui lebih luas tentang berbagai metodedalam pembuatan medium untuk pertumbuhan bakteri dimana medium tersebut harus memiliki semua nutrien yang dapat digunakan bakteri untuk tumbuh dan berkembang. Praktikum ini juga bertujuan untuk mengetahui jumlah mikroba yang terkandung pada suatu bahan pangan, serta mahasiswa dapat melakukan pewarnaan gram terhadap bakteri guna mengetahui morfologi bakteri tersebut.

Penulis menyampaikan terimakasih kepada Dr. Dra. Turrini Yudiarti, M.Sc. selaku Koordinator Praktikum, Jenny Febrianti selaku Koordinator Umum Asisten Praktikum, Tri Vidyanto selaku Asisten Pembimbing yang telah membimbing dan membantu kami selama praktikum berlangsung sampai penyusunan laporan praktikum Mikrobiologi ini selesai. Harapan penulis semoga laporan praktikum ini dapat bermanfaat bagi pembaca.

Demikian kata pengantar dari penulis, penulis menyampaikan terimakasih atas perhatiaan dan koreksi dari berbagai pihak.

Semarang, Juni 2014

Penulis

DAFTAR ISI

Halaman

KATA PENGANTARiv

DAFTAR ISIv

DAFTAR TABELvi

DAFTAR ILUSTRASIvii

DAFTAR LAMPIRANviii

BAB I PENDAHULUAN1

BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2

2.1. Sterilisasi 2

2.2. Medium dan Pengencer4

2.3. Metode Hitungan Cawan7

2.4. Morfologi Bakteri9

2.5. Pewarnaan Gram10

BAB III MATERI DAN METODE12

3.1. Materi12

3.2. Metode13

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN16

4.1. Sterilisasi16

4.2. Pembuatan Medium17

4.3. Penghitungan Jumlah Mikroba18

4.4. Pewarnaan Gram20

BAB V SIMPULAN DAN SARAN24

DAFTAR PUSTAKA25

LAMPIRAN27

DAFTAR TABEL

Nomor

Halaman

1. Penghitungan Jumlah Mikroba18

DAFTAR ILUSTRASI

Nomor

Halaman

1.Gambar Pengamatan Bakteri Gram Positif Perbesaran 1000 kali202.Gambar Pengamatan Bakteri Gram Negatif Perbesaran 1000 kali22

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Halaman

1. Gambar dan Fungsi Alat27

2. Perhitungan SPC (Standard Plate Count)30

3. Foto Copy Laporan Hasil Praktikum31

viii