Laporan Praktikum

Imobilisasi Enzim dan Sel

Percobaan 1

Imobilisasi Enzim Secara Penyerapan Fisik

Nama : Annisa Setyaningrum

Stambuk : G 301 11 002

Kelompok : I (Satu)

Asisten : Kurniawati

LABORATORIUM KIMIA ORGANIK DAN BIOKIMIA

JURUSAN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS TADULAKO

PALU

2014

Percobaan I

Imobilisasi Enzim Secara Penyerapan Fisik

I. Tujuan

Mempelajari cara imobilisasi enzim amilase secara penyerapan fisik

menggunakan bahan pengamobil limbah abu sekam padi dan karbon aktif

II. Alat dan Bahan

II.1 Alat

1. Neraca analitik

2. Gelas ukur 100 ml

3. Gelas ukur 25 ml

4. Gelas kimia 600 ml

5. Batang pengaduk

6. Spektronik-20

7. Erlenmeyer 50 ml

8. Erlenmeyer 100 ml

9. Tabung reaksi

10.Rak tabung reaksi

11. Pipet tetes

12. Penjepit tabung

13. Hot plate

14. Penangas air

15. Corong Buchner

16. Corong kaca

17. Stopwatch

18. Botol semprot

19. Kertas saring

II.2 Bahan

1. Larutan pati 1 %

2. Larutan iodium 10 %

3. Enzim Alfa Amilase

4. Aquadest

5. Abu sekam padi

1

III. Prosedur Kerja

III.1 Imobilisasi Enzim Alfa Amilase dengan Abu Sekam Padi

1. Mengayak abu sekam padi yang diperoleh dari pabrik penggilingan

dengan ayakan 60 mesh, kemudian menimbang hasil ayakan sebanyak

10 g dan memasukkan abu sekam padi tersebut ke dalam corong

buchner.

2. Mengambil enzim alfa amilase dalam bentuk cair sebanyak 5 ml

kemudian mencampur dengan abu sekam padi yang berada dalam

corong buchner, mengaduk campuran tersebut hingga rata serta

menyaring hingga kering.

3. Menimbang enzim alfa amilase amobil yang dihasilkan dan

menentukan rendemennya dengan menggunakan persamaan berikut

kemudian menyimpan hasil tersebut untuk pengujian aktivitas.

Rendemen Enzim Amobil = x 100%

3.2 Penentuan Aktivitas Alfa Amilase Amobil Hasil Imobilisasi

1. Memasukkan larutan pati 1 % sebanyak 5 ml ke dalam masing-masing

tabung reaksi yang berkode A, B, dan D, kemudian menabahkan 0,05

ml larutan iodinum 10%.

2. Menambahkan 1 ml enzim alfa amilase pada tabung reaksi A,

menambahkan 2 g enzim alfa amilase amobil dengan bahan

pengamobil abu sekam padi pada tabung reaksi B, dan menambahkan

1 ml air destilata pada tabung reaksi C.

3. Mengocok ketiga tabung reaksi tersebut hingga homogen, kemudian

memasukkan kedalam air bersuhu 60 oC selama 30 menit, selanjutnya

memasukkan ke dalam air mendidih selama 10 menit.

4. Memindahkan produk reaksi ke dalam erlenmeyer 100 ml dan

menabahkan air destilata sebanyak 50 ml.

2

5. Kemudian menyaring hasil produk tersebut, setelah itu mengukur

serapan filtrat yang diperoleh dengan panjang gelombang 500 nm.

6. Menentukkan aktivitasnya dngan cara yaitu nilai seapan awal tanpa

enzim(tabung reaksi D) – nilai serapan setelah penabahan enzim

(tabung reaksi A, B, dan C)/menit/ml atau g.

Retensi Amobil= x 100%

3

IV. Hasil Pengamatan

No. Perlakuan Hasil Pengamatan1. 10 g abu sekam padi + 5 ml

enzim alfa amilaseEnzim alfa amilase amobil

2. 5 ml larutan pati 1 % + 0,05 ml larutan iodinum 10% + 1 ml enzim alfa amylase + panaskan pada 60oC selama 30 menit + panaskan pada air mendidih selama 10 menit + 50 ml aquadest + saring + mengukur absorbansi pada panjang gelombang 500 nm. (Tabung A)

Larutan berwarna kuning dengan nilai A sebesar 0,058

3. 5 ml larutan pati 1 % + 0,05 ml larutan iodinum 10% + 2 g enzim alfa amylase amobil+ panaskan pada 60oC selama 30 menit + panaskan pada air mendidih selama 10 menit + 50 ml aquadest + saring + mengukur absorbansi pada panjang gelombang 500 nm. (Tabung B)

Larutan berwarna kuning dengan nilai A sebesar 0,080

4. 5 ml larutan pati 1 % + 0,05 ml larutan iodinum 10% + 1 ml aquadest + panaskan pada 60oC selama 30 menit + panaskan pada air mendidih selama 10 menit + 50 ml aquadest + saring + mengukur absorbansi pada panjang gelombang 500 nm. (Tabung D)

Larutan berwarna biru dengan nilai A sebesar 0,141

4

V. Analisa Data

V.1Imobilisasi Enzim Alfa Amilase dengan Abu Sekam Padi

Berat enzim α amylase = 11,635 gram (10 ml)

Berat abu sekam padi = 10 gram

Berat enzim amobil = 21,523 gram

V.2Penentuan Aktivitas Alfa Amilase Amobil Hasil Imobilisasi

Penentuan serapan pada panjang gelombang 500 nm

No. Tabung

A B D

1. 0,058 0,080 1,141

Retensi Amobil= x 100%

= x 100% = 72,5 %

5