laporan glukosa darah mhd ali aman. biokim.docx

7/22/2019 LAPORAN GLUKOSA DARAH MHD ALI AMAN. BIOKIM.docx

1/8

Laporan Praktikum Hari/Tanggal : Selasa, 10 Desember 2013

Biokimia Waktu : 09:00-10:40 WIB

PJP : Syaefudin,M.si

Asisten : Lusianawati,S.si

Resti Siti Muthmainah,S.si

GLUKOSA DARAH

Kelompok 2

Mhd Ali Aman.Siregar J3L112002Indryani Rahayu Kuswardhani J3L112080

Emilia Anisa J3L112153

PROGRAM KEAHLIAN ANALISIS KIMIA

PROGRAM DIPLOMA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2013


2/8

Pendahuluan

Glukosa darah adalah gula yang terdapat dalam darah yang terbentuk dari

karbohidrat dalam makanan dan disimpan sebagai glikogen di hati dan otot

rangka. Dalam ilmu kedokteran,gula darah adalah istilah yang mengacu kepada

tingkatglukosa di dalamdarah.Jika dalam tubuh kita mengalami kekurangan atau

kelebhan glukosa darah maka akan dapat menimbulkan penyakit dalam tubuh kita.

Salah satu contoh penyakit yang disebabkan oleh kelainan kadar glukosa yaitu

diabetes mellitus. Diabetes mellitus atau yang lebih dikenal dengan kencing manis

merupakan penyakit yang timbul karena suatu gangguan dari pankreas, yaitu

organ tubuh yang biasa menghasilkan insulin dan sangat berperan dalam

metabolisme glukosa bagi sel tubuh. Seseorang yang terkena diabetes mellitus

selalu ditandai oleh naiknya kadar gula darah (hiperglikemia) dan tingginya kadar

gula dalam urine (Achjadi 2003). Pada orang yang menderita diabetes mellitus

atau kencing manis, jumlah glukosa darah lebih besar dari 130 mg per 100 ml

darah (Poedjiadi, 1994).

Terdapat dua jenis penyakit diabetes melitus yaitu diabetes melitus tipe 1

(insulin-dependent diabetes mellitus) yaitu kondisi defisiensi produksi insulin oleh

pankreas. Kondisi ini hanya bisa diobati dengan pemberian insulin. Diabetes

melitus tipe 2 (non-insulin-dependent diabetes mellitus) yang terjadi akibat

ketidakmampuan tubuh untuk berespons dengan wajar terhadap aktivitas insulin

yang dihasilkan pankreas (resistensi insulin), sehingga tidak tercapai kadar

glukosa yang normal dalam darah. Diabetes melitus tipe 2 ini lebih banyak

ditemukan dan diperkirakan meliputi 90% dari semua kasus diabetes di seluruh

dunia (Suryohudoyo 1996).

Tujuan Percobaan

Percobaan bertujuan menentukan kadar glukosa darah,dan hubungan kadar

glukosa darah dengan kondisi kesehatan.

Alat dan Bahan

Alat-alat yang digunakan ialah tabung reaksi, tabung erlenmeyer, pipet

tetes, pipet volumetrik 10 mL, pipet volumetric 1 mL, penangas air, kertas saring,
http://id.wikipedia.org/wiki/Kedokteranhttp://id.wikipedia.org/wiki/Glukosahttp://id.wikipedia.org/wiki/Darahhttp://id.wikipedia.org/wiki/Darahhttp://id.wikipedia.org/wiki/Glukosahttp://id.wikipedia.org/wiki/Kedokteran


3/8

corong, spekronik-20, dan gelas piala 250 mL.

Bahan- bahan yang digunakan ialah darah, H2SO4 0,67 N, akuades, Na-

Wolframat 10%, kupritartrat, larutan standar glukosa, dan larutan fosfolibdat.

Prosedur Percobaan

Penentuan kadar glukosa dalam darah dilakukan dengan beberapa tahapan.

Tahap awal dengan membuat filtrat penyaringan darah yang akan digunakan

dalam pengukuran kadar. Pembuatan filtrat dilakukan dengan mencampurkan 1

mL darah, 7 mL akuades, dan 1 mL Na-Wolframat 10% di dalam tabung

erlenmeyer kecil. Campuran tersebut pun dikocok dan ditetesi dengan 1 mL

H2SO4 0,67 N secara perlahan. Selanjutnya hasil campuran tersebut didiamkan

tanpa dikocok selama 10 menit yang kemudian disaring untuk mendapatkan

filtratnya.

Pengujian dilakukan dengan beberapa perlakuan, yaitu perlakuan blanko,

standar glukosa, dan tiga pengujian terhadap filtrat. Perlakuan blanko dimasukkan

1 mL akuades dengan 1 mL kupritartrat. Perlakuan standar glukosa didapatkan

dengan mencampurkan 1 mL larutan standar glukosa dengan 1 mL kupritartrat.

Sementara untuk filtrat didapatkan dengan mencampurkan 1 mL filtrat dengan 1

mL kupritartrat. Ketiga perlakuan tersebut dilakukan secara bersamaan (pada

waktu yang sama). Ketiga jenis perlakuan tersebut dipanaskan dalam air mendidih

selama 8 menit tepat. Perlakuan yang telah dipanaskan pun didinginkan dan

diencerkan dengan menambahkan 7 mL akuades pada setiap perlakuan.

Selanjutnya pada setiap tabung dimasukan 1 mL fosfomolibdat pada waktu yang

bersamaan untuk setiap perlakuan. Pengukuran pun dilakukan dengan

menggunakan spektronik-20. Penggunaan spektronik-20 dilakukan dengan men-tera alat terlebih dahulu. Tera dilakukan dengan memasukkan larutan blanko ke

dalam tabung kupet dan dimasukkan ke dalam spektronik, selanjutnya ditekan

tombol blank. Kemudian dilakukan hal yang sama pada setiap perlakuan tanpa

menekan tombol blank. Angka yang tertera pada spektronik-20 menunjukkan

tingkat absorban larutan. Tingkat absorban larutan pun dicatat yang kemudian

akan dihitung untuk menentukan kadar glukosa di dalam darah.darah yang

digunakan merupakan darah ayam.


4/8

Data dan Hasil Percobaan

Tabel 1. Penentuan kadar glukosa darah

Larutan Absorban Kadar glukosa darah mg/dL

Blanko 0,000

Standar glukosa 0,006

Filtrat 1 0,019 31.666

Filtrat 2 0,004 6.6666

Contoh perhitungan:

[kadar glukosa darah] = A sampel X C standar

A standar

= 0,019 X C standar

0,006=31,666

Pembahasan

Prinsip penentuan kadar glukosa darah dengan metode Folin-Wu adalah

reaksi reduksi ion kupri di dalam larutan kupritartrat oleh gula pereduksi menjadi

ion kupro. Senyawa Cu2O yang terbentuk selanjutnya bereaksi dengan asam

fosfomolibdat membentuk senyawa fosfomolibdenum oksida yang berwarna biru

tua. Intensitas warna biru yang terbentuk sebanding dengan kadar glukosa di

dalam darah sampel sehingga dapat diukur serapannya secara spektrofotometri

(Groff dan Gropper 2000). Namun metode ini memiliki kerugian, yaitu warna

berangsur-angsur memudar dibandingkan dengan larutan standar glukosa dengan

perlakuan yang sama, akan tetapi metode ini juga memiliki beberapa

keuntungan,yaitu hanya dibutuhkan dua pelarut, filtrat yang terbentuk lebih netral,

dan proses filtrasi lebih cepat (Haden 1923).

Penentuan glukosa darah dilakukan pertama- tama dengan cara membuat

filtrate. Pembuatan filtrat dilakukan dengan memipet 1 ml darah ke dalam

erlenmeyer kecil, serta ditambahkan 1 mL Na-wolframat 10%, dan 1 mL H2SO4

0,67 N tetes demi tetes. Fungsi penambahan akuades adalah mengencerkan darah

sehingga albumin dalam darah akan larut oleh akuades. Dan Penambahan Na-

wolframat bertujuan mengendapkan albumin yang terlarut dalam air. H2SO4


5/8

berfungsi sebagai katalisator untuk mempercepat reaksi pengendapan albumin

oleh Na-wolframat.

Larutan yang telah dibuat didiamkan selama 10 menit agar terjadi endapan

albumin secara sempurna, sehingga ketika endapan tersebut dipisahkan dengan

kertas saring akan memisah dengan sempurna. Selanjutnya tabung reaksi yang

telah berisi masing-masing bahan, berturut-turut filtrat, standar glukosa, dan

akuades ditambahkan 1 mL larutan kupritartrat. Penambahan larutan kupritartrat

berfungsi dalam pembentukan warna biru ketika ditambahkan pereaksi

fosfomolibdat. Hal tersebut dapat terjadi karena larutan kupritartrat mengandung

asam laktat dan ion Cu+. Menurut Girinda (1989), pada penambahan kupritartrat,

ion kupri akan direduksi oleh gula menjadi kupro dan mengendap sebagai Cu2O.

Penambahan pereaksi fosfomolibdat kuprooksida melarut lagi dan warna larutan

akan berubah menjadi biru tua disebabkan oleh adanya oksidasi Mo. Intensitaas

warna larutan adalah ukuran banyaknya gula yang ada di dalam filtrat. Hasil

percobaan ini sesuai dengan prinsip uji tauber yang memberikan hasil positif

(warna biru) pada larutan yang mengandung monosakarida (glukosa).

Selanjutnya ketiga tabung tersebut dipanaskan dengan air mendidih selama

8 menit tepat. Pemanasan berfungsi menambah laju reaksi oleh kupritartat. Ketiga

tabung tersebut didinginkan, lalu diencerkan dengan 7 ml akuades. Sebanyak 1

mL larutan fosfomolibdat ditambahkan pada setiap tabung. Penambahan H2SO4

0,67 N bertujuan untuk menciptakan suasana asam, karena reaksi dengan

fosfomolibdat terjadi pada suasana asam. Perubahan warna yang terjadi diamati

dan intensitas warnanya diamati dengan spektronik-20 pada panjang gelombang

660 nm.

Pengamatan dengan spektronik-20 menggunakan prinsip hukum LambertBeer. Suatu spektrofotometer tersusun dari sumber spektrum sinar tampak yang

sinambung dan monokromatis. Sel pengabsorbsi untuk mengukur perbedaan

absorbsi antara cuplikan dengan blanko ataupun pembanding. Adapun

penggunaan panjang gelombang sebesar 660 nm disebabkan karena panjang

gelombang maksimum untuk transmitansi larutan glukosa adalah 660nm

(Syabatini 2010).


6/8

Sampel darah yang digunakan untuk pengujian kadar glukosa dalam darah

berasal dari darah ayam. Kadar gula darah normal pada ternak ruminansia

bervariasi, yaitu antara 40 60 mg/100 ml dan 35 - 55 mg/100 ml (Poedjiadji

1994). Berdasarkan hasil percobaan yang telah dilakukan diperoleh kadar glukosa

darah pada ayam sampel 1 sebesar 31,666 mg/Dl dan sampel 2 6,6666 mg/dL.

Pada sampel 1 hal ini sesuai dengan teori namu pada sampel 2 berbeda dengan

teori hal ini kemungkinan di sebabkan terjadinya kesalahan pada saat percobaan

atau pada saat pengukuran absorban.berdasarkan reaksi

Cu2+ + C6H12O6 + Cu2O

Kadar glukosa darah pada manusia pada umumnya 100-120 mg/dL

sedangkan pada saat puasa 70-100 mg/dL. Akan tetapi kadar gula darah seseorang

berbeda-beda, hal ini dapat dipengaruhi tinggi dan berat badan,selain itu dapat di

pengaruhi seseorang habis makan atau tidak. Bila kadar gula dalam darah

melebihi atau kurang dari batas normal maka sistem metabolisme dalam tubuh

akan terganggu. Salah satu contoh penyakit yang disebabkan oleh kelainan kadar

glukosa yaitu diabetes melitus. Terdapat dua jenis penyakit diabetes melitus yaitu

diabetes melitus tipe 1 (insulin-dependent diabetes mellitus) yaitu kondisi

defisiensi produksi insulin oleh pankreas. Kondisi ini hanya bisa diobati dengan

pemberian insulin. Diabetes melitus tipe 2 (non-insulin-dependent diabetes

mellitus) yang terjadi akibat ketidakmampuan tubuh untuk berespons dengan

wajar terhadap aktivitas insulin yang dihasilkan pankreas (resistensi insulin),

sehingga tidak tercapai kadar glukosa yang normal dalam darah. Diabetes melitus

tipe 2 ini lebih banyak ditemukan dan diperkirakan meliputi 90% dari semua

kasus diabetes di seluruh dunia (Suryohudoyo 1996).

Kadar glukosa darah dapat diukur menggunakan beberapa metode, salahsatu di antaranya metode O-Toluidin. Prinsip metode Wedemeyer dan Yasutake

yaitu jaringan otot atau hati dipanaskan dalam KOH, ditambahkan Na2SO4 dan

etanol kemudian dipanaskan, selanjutnya didinginkan dan disentrifuse, supernatan

yang terbentuk dibuang. Glikogen dilarutkan dalam akuades kemudian kembali

diendapkan. Supernatan hasil pengendapan dibuang, glikogen diendapkan dalam

HCl. Hidrolisat didinginkan dan ditambahkan NaOH. Penambahan NaOH

bertujuan untuk menetralisasi. Kemudian diencerkan dengan akuades.


7/8

Penambahan reagent anthrone akan membantu perhitungan kadar glikogen

melalui penghitungan absorbansi (Groff dan Gropper 2000).

Simpulan

Berdasarkan percobaan dapat disimpulkan bahwa glukosa darah pada ayam

31,6666 mg/dL dan glukosa darah dapat menetukan kondisi kesehatan tubuh.

Daftar Pustaka

Achjadi K. 2003.Penyakit Gangguan Metabolisme. Bogor : IPB Press.

Girindra A. 1986.Biokimia I. Jakarta: Gramedia.

Groff JL dan Gropper. 2000.Advanced Nutrition and Human Metabolism 3 Ed.

USA: Wadsworth-Thomson Learning.Kusnawijaya. 1993. Biokimia.

Bandung: Exact Ganeca.

Poedjiadi Anna 1994.Dasar-dasar Biokimia.Jakarta: UI Press.

Subronto. 2001. Ilmu Penyakit Ternak II. Yogyakarta : Gadjah Mada University

Press.

Suryohudoyo P & Purnomo SU. 1996. Dasar Molekuler Diabetes Mellitus (DM),

Naskah Lengkap Surabaya Diabetes Update-I : 71-73.

Syabatini Annisa. 2010. Analisis Campuran Dua Komponen Tanpa Pemisahan

Dengan Spektrofotometer. Pontianak : UNLAM Press.


8/8

laporan glukosa darah mhd ali aman. biokim.docx

Documents