laporan akhir resmi fix dyah lgkp2

8/20/2019 Laporan Akhir Resmi Fix Dyah Lgkp2

1/36

LAPORAN AKHIR

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

DISUSUN OLEH :

NAMA NIM

Dyah Dwimuji Rahayuningsih 111!1!"

KELOMPOK "#

NAMA NIM

Aman$a Rahayuning Da%ma 111!1!&'

Au(iya )*+y Ri,-a 111!1!.1

D*/i(a Mi0a Naa2 111!11".


M3 I-%am )aisha( 111!1!!4

Ris-a D*a 5u%2anu% 111!1!&4

6URUSAN KESEHATAN MAS7ARAKAT

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI DAN GENETIKA MOLEKULER

)AKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNI8ERSITAS MULA9ARMAN

SAMARINDA

!1

1


2/36

LEMBAR PENGESAHAN

LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

Disusun O(*h:

NAMA NIM


KELOMPOK "#

NAMA NIM

Aman$a Rahayuning Da%ma 111!1!&'

Au(iya )*+y Ri,-a 111!1!.1

D*/i(a Mi0a Naa2 111!11".


M3 I-%am )aisha( 111!1!!4Ris-a D*a 5u%2anu% 111!1!&4

Laporan akhir praktikum Mikrobiologi Dasar ini telah di serahkan di Samarinda pada tanggal 31 bulan

Desember 2015 dan telah memenuhi syarat.

Menyetujui

Asisten

#* Hi-ma0 M3 73

!M. 130"02503"

Asisten

E%sa(iany N3 P3 5

!M. 130"02501#

Asisten

Nu% Mau(i$a Au(ia

!M. 130"025011

Asisten $

Ris-aP%iha0iningsih

!M. 130"0250#1

Asisten $

Tuni- Kh;i%iyah

!M. 130"02502"

Asisten $

7usnaini

!M. 130"025010

Mengetahui

%epala Laboraturium Mikrobiologi Dasar

D%3%*%3 n a03B;$hi Dha%ma3 M3Si3

!&. 1'"10"2( 200012 1 002

Dosen &engampu

I%3 Samsu%ian0;< M3Si

!&. 1'(2111# 1'#'03 1 001

2


3/36

KATA PENGANTAR

&uji Syukur kami panjatkan kehadirat )uhan yang Maha *sa+ berkat rahmat danhidayah,!ya sehingga kami dapat menyelesaikan seluruh rangkaian kegiatan praktikum dan

penulisan laporan resmi praktikum mikrobiologi dasar.

Dengan selesainya laporan resmi praktikum mikrobiologi dasar ini+ kami tidak lupa

mengu-apkan terima kasih kepada dosen+ asisten pembimbing dan semua pihak atas segala

bimbingan+ petunjuk dan saran,saran yang sangat baik dan berharga kepada kami sejak aal

pelaksanaan praktikum sampai dengan penulisan laporan resmi ini.

Semoga tuhan yang Maha pengasih membalas segala baik budi dan jasa bapak+ ibu+

serta para asisten pembimbing serta semua pihak yang telah membantu dalam penulisan

laporan resmi ini.

Aamiin...

Samarinda+ 23 Desember 2015

&enyusun

DA)TAR ISI

3


4/36

/ALAMA! LA&A! A%/............................................................................................ i

/ALAMA! L*MA &*!*SA/A!................................................................................ ii

%A)A &*!A!)A............................................................................................................... iii

DA4)A S............................................................................................................................ i

DA4)A )A*L.....................................................................................................................

&*!*!ALA! ALA)+ S)*LSAS+ DA! &*M6A)A! M*DA................................. 1

SLAS DA! D*!)4%AS DASA M%A........................................................... "

&*M6A)A! A%A! M6!...........................................................................................12

&*7A!AA! DA! 8AA,8AA &*7A!AA!.............................................................15

&*!AMA)A! 9AM6 M%S%&S............................................................................20

&*!!)LA! M%A!SM*...........................................................................23

A!ALSA M%A!SM* &ADA 9AM6 /*AL ALAM ALA! &A*M......2"

DA)TAR TABEL

)abel 1.1 &erkenalan Alat dan Sterilisasi 3

)abel 1.2 &embuatan Media 5

)abel 2.1 solasi Mikroba pada Air &erasan 9eruk yang Membusuk '

)abel 2.2 solasi Mikroba pada )empe 10

)abel 3.1 &embiakan Murni pada Bacillus sp. 13)abel :.1 &earnaan pada akteri 1"

:


5/36

)abel 5.1 &engamatan 9amur 21

)abel (.1 /asi &engamatan Desin;ektan 2:

)abel ".1 Analisis Mikroorganisme &ada 9amu alian &arem 2#

5


6/36

9urnal &raktikum Mikrobiologi Dasar

P*ng*na(an A(a0< S0*%i(isasi< $an P*m+ua0an M*$iaAmanda . Darma+ Auliya 4eby iur=anur.

%elompok :8+ &raktikum Mikrobiologi Dasar 4akultas %esehatan Masyarakat+ 6niersitas Mulaarman

A+s0%a-

&engenalan alat+ sterilisasi+ dan pembuatan media oleh Dyah Dimuji ahayuningsih 2015.

Dalam melakukan kegiatan penelitian di laboratorium+ sebelumnya harus melakukan sterilisasi pada alat

dan bahan agar terbebas dari segala ma-am jenis kehidupan+ terutama mikroba. &enelitian ini bertujuan

untuk mengenal dan mengetahui kegunaan alat dan bahan yang terdapat di laboratorium+ mengetahui

jenis,jenis sterilisasi dan mengetahui sterilisasi dan melakukan sterilisasi terhadap peralatan yang akan

digunakan dalam praktikum+ serta mengetahui jenis media dan melakukan pembuatan medium dasar untuk

mikroba. &ada saat perkenalan alat+ alat yang harus diketahui ;ungsinya+ antara lain adalah -aan petri+

labu erlenmeyer+ hockey stick + hot plate, gelas ukur+ jarum ose+ batang magnet stirrer+ magnet stirrer+

tabung reaksi+ autoclave. Metode sterilisasi yang dilakukan menggunakan uap air panas dengan autoclavesebagai alat sterilisasi. &embuatan media !A dan &DA adalah dengan -ara men-ampurkan semua bahan

yang telah ditimbang sebelumnya agar sesuai dengan takaran yang telah ditentukan+ lalu memasukkannya

ke dalam labu erlenmeyer yang ditutup dengan menggunakan kapas dan dibungkus menggunakan

alumunium ;oil. %emudian+ dipanaskan larutan di atas hot plate sampai larutan menjadi homogen+ setelahitu dimasukkan ke dalam autoclave dan ditunggu selama 20 menit.

Ka0a Kun=i: S0*%i(isasi> Nutrient Agar/ Potato Dextrose Agar/ AutoclaveTanggal Praktikum: 25 November 2015? Diserahkan pada 2# !oember 2015

P*n$ahu(uan

Mikrobiologi adalah ilmu yang

mempelajari tentang kehidupan mikroorganisme

yang terdiri dari mor;ologi+ ;isiologi+

reproduksi+ dan penyebaran mikroorganisme.

Sebelum melakukan praktikum mikrobiologi+

alat,alat dan bahan sudah harus dalam keadaanyang steril. Suatu benda yang steril dapat dilihat

dari sudut pandang mikrobiologi+ yang berarti

telah bebas dari mikroorganisme hidup @1.

Sterilisasi alat+ medium dan teknik penanganan

mikroorganisme dilakukan untuk menjamin

kondisi kebersihan medium+ alat+ dan kemurnianmikroorganisme yang dipelihara @2. Sterilisasi

adalah suatu usaha yang dilakukan untuk

membebaskan alat dan bahan dari segala jenis

kehidupan+ terutama pada mikroba.

Se-ara garis besar+ sterilisasi memiliki

tiga -ara yaitu sterilisasi panas Bpanas basah+ panas keringC+ sterilisasi kimia Bgas etilen

oksida+ *tC+ dan sterilisasi dingin B;iltrasi+

radiasiC @3. )indakan sterilisasi juga dapat

dilakukan sebagai pen-egah kerusakan bahan

makanan dan hasil industri @2. Suatu produk

dikatakan steril apabila produk tersebut telah

bebas dari mikroorganisme hidup. Steril

diperoleh melalui proses sterilisasi. &ada

umumnya terdapat tiga jenis sterilisasi mekanik+

yaitu sterilisasi pemanasan+ sterilisasi

penyaringan+ serta sterilisasi penyinaran.

Sterilisasi pemanasan dengan menggunakan uap

air panas yang bertekanan tinggi merupakan

-ara sterilisasi yang paling banyak digunakan

dengan bantuan alat autoclave yang memilikinilai temperatur uap sekitar 121 dengan tekanan

15 psi @:.Asis0*n *n$aming E 1. 8ep /ikmat Maulana

Fusup+ 2. *rsaliany !urul &ratii >odrie+ 3. !ur

Maulida Aulia+ :. iska &rihatiningsih+ 5. )unik %hoiriyah+ (. Fusnaini.

P*nanggung jawa+: %oordinator Mata %uliah

Mikrobiologi DasarE Dr.rer.nat. odhi Dharma+ S.Si+

M.Si dan %epala Laboratorium Mikrobiologi danenetika MolekulerE Dr.rer.nat. odhi Dharma+ S.Si+

M.Si.

Media diperlukan sebagai sarana untuk

menumbuhkan dan mengembangkan mikroba.)etapi+ sebelum menggunakannya+ media juga

harus dalam keadaan steril agar mikroba yang

tidak diinginkan tidak tumbuh di dalam media@:. Mikroorganisme meman;aatkan nutrisi media

berupa molekul,molekul ke-il yang dirakit

untuk menyusun komponen sel. Dalam

pemeliharaan mikroorganisme diaali dengan

6G Laboratorium Mikrobiologi dan enetika molekuler 4M&A 6!M6L


7/36


teknik menyiapkan media pembiakan Bmedia

hidupC. &ada media dasar+ bakteri akan lebih

-epat tumbuh dengan baik. Media dasar tersebut

terdiri dari ekstrak daging H peptin H !a-l H

aIuades. Sedangkan untuk membuat media

padat+ memerlukan 3J kandungan agar. &ada

media dasar+ terdapat beberapa bakteri yang

tidak dapat berkembang dengan baik+ makauntuk menumbuhkan jenis bakteri tersebut

diperlukan bahan tambahan alami lain seperti

ekstrak kentang @2. Agar di dalam mikroba dapat

tumbuh dan berkembang dengan baik

diperlukan beberapa persyaratan+ yaitu EDi dalam media harus mengandung

semua unsur hara yang dibutuhkan dalam

pertumbuhan dan perkembangan. Di dalam

media harus memiliki tekanan osmose karena

bakteri membutuhkan media yang isotonis

dalam pertumbuhannya. Di dalam media harus

memiliki tegangan permukaan dan keasamanBp/C yang sesuai dengan kebutuhan mikroba.+

Media harus berada dalam keadaan steril agar

sebelum media ditanam mikroba+ tidak akan

ditumbuhi oleh mikroba lain yang tidak

diinginkan.

&raktikum ini bertujuan untuk melakukan

sterilisasi dan pembuatan media dasar pada

bakteri dan jamur. Media untuk bakteri berasal

dari Nutrien Agar dan media untuk jamur

berasal dari Potato Dextrose Agar . &raktikum

ini dilaksanakan agar pratikan dapat mengetahui

-ara,-ara sterilisasi+ jenis,jenis alat,alat dan bahan,bahan yang akan digunakan dalam

praktikum mikrobiologi serta untuk mengetahui

penggolongan media atau ma-am,ma-am

media.

M*0;$* P%a-0i-um

&raktikum &engenalan Alat+ Sterilisasi+ dan

&embuatan Media dilaksanakan pada 25

!oember 2015 pukul 1:.30,1(.30 7)A+ di

Laboratorium Mikrobiologi dan enetikaMolekuler 4akultas Matematika dan lmu

&engetahuan Alam+ 6niersitas Mulaarman+Samarinda.

A(a0

Alat yang digunakan dalam praktikum

adalah -aan petri B petri dishC+ labu erlenmeyer

B Erlenmeyer lask C+ gelas ukur+ jarum ose+ pipet

tetes+ hockey stick, tabung reaksi+ batang

magnetic stirrer + magnetic stirrer + spatula+

adah+ hot plate, vortex+ shaker + incubator,

autoclave, kuet+ spektro;otometer+ kasa dan

kapas+ nera-a analitik+ sentrius+ dsb.

Bahan

ahan yang digunakan dalam praktikum

adalah *kstrak daging B250 mlC+ ekstrak kentang

B250 mlC+ pepton B1+25 grC+ deKtrose B2+5 grC+

agar,agar B3+"5C+ !a8l+ kertas label+ kapas dankasa+ dll.

#a%a K*%ja

8ara kerja dalam praktikum adalah sbbE

1 S0*%i(isasi #awan P*0%i

Diletakkan -aan petri di atas kertas

bekas dengan posisi bagian yang lebih besar

berada di baah+ dan diusahakan -aan petri

berada di tengah. Lalu ujung kertas disamakan

kemudian dilipat ke atas+ kun-i membentuk

kipas dan ujungnya dilipat sehingga membentuk

segitiga. Setelah itu+ -aan petri dimasukkan kedalam autoclave untuk disterilisasikan kemudian

autoclave dinyalakan dengan suhu 1218.

)unngu proses sterilisasi -aan petri selama 15

, 20 menit.

P*m+ua0an M*$ia

8ara pembuatan media Nutrient Agar

dilakukan dengan menimbang pepton sebanyak

1+25 gr dan agar 3+"5 gr menggunakan nera-a

analitik+ serta ditambahkan ekstrak kentang

sebanyak 250 ml+ kemudian dimasukkan ke

dalam labu erlenmeyer yang sudah diberi nama

pada kertas label dan homogenkan.Ditambahkan magnetic stirrer dan ditutup

dengan kapas dan dibalut kain kasa serta

bungkus tutupnya dengan aluminium ;oil.

%emudian+ dipanaskan larutan di atas hot plate

hingga larutan menjadi homogen+ setelah itu

dimasukkan ke dalam autoclave dan tunggu

selama 20 menit.

Sedangkan -ara pembuatan media

Potato Dextrose Agar dilakukan dengan

menimbang dextrose sebanyak 2+5 gr dan agar

sebanyak 3+"5 gr menggunakan nera-a analitik+

serta ditambahkan ekstrak daging sebanyak 250ml+ kemudian dimasukkan ke dalam labu

erlenmeyer yang sudah diberi nama pada kertas

berlabel dan homogenkan. Ditambahkan

magnetic stirrer dan tutup dengan kapas dan

dibalut kain kasa serta dibungkus tutupnyadengan aluminium ;oil. %emudian+ dipanaskan

larutan di atas hot plate sampai larutan menjadi



8/36


homogen+ setelah itu dimasukkan ke dalam

autoclave dan tunggu selama 20 menit.

Hasi( $an P*m+ahasan

erdasarkan praktikum yang telah

dilakukan maka diperoleh hasil sebagai berikutE

Ta+*( 131 P*%-*na(an A(a0 $an S0*%i(isasi

!o. !ama Alat 4ungsi

1. Labu erlenmeyer

er;ungsi sebagai

tempat pembuatan

media.

2. 8aan petri er;ungsi sebagaimedia tempat

pertumbuhan

mikroba.

3. !ot plate er;ungsi sebagai pemanas dan dapat

digunakan sebagai

alat sterilisasi.

:. elas 6kur er;ungsi sebagai pengukur banyaknyalarutan yang akan

digunakan

5. Spatula er;ungsi sebagaialat yang mengambil

bahan penelitian.

(. Autoclave er;ungsi untukmensterilkan alatdan bahan yang ada

di laboratorium.

". !era-a analitik er;ungsi untukmenimbang mediayang akan dibuat.

#. "ncubator er;ungsi untukmenyimpan mediayang telah

diinkubasi

'. #haker er;ungsi untukmenumbuhkan

bakteri dalam


9/36


11. %abung reaksi er;ungsi untuk pengen-eran.

12. &arum ose er;ungsi untukmengisolasi mikroba

13. $ikropipet er;ungsi untukmengambil larutan.

1:. 'ampu spiritus er;ungsi untukmemanaskan suatu

benda.

15. (ortex er;ungsi untuk

menghomogenkanlarutan.

1(. )adah er;ungsi untukmenampung serbukyang akan diolah.

1". Pipet tetes er;ungsi untukmengambil sampellarutan dari satu

adah

1#. #prayer yang diisi

alcohol

er;ungsi untuk

mensterilkan tangan

1'. !ockey stick er;ungsi untukmeratakan media

20. Pinset er;ungsi untukmengambil media

atau bahan.



10/36


21. *entriuge Alat yang ber;ungsiuntuk memisahkanendapan dan bahan

yang digunakan

22. +ello tips Digunakan denganmikro pipet untuk

memgambil

sejumlah ke-illarutan sampel+ pada

umumnya pada

skala 100m.

23. Spektro;otometer Alat untuk

mengukur jumlah bakteri yang

terdapat dalam kuet

2:. %apas dan kasa er;ungsi untukmenutup alat yang

akan disterilisasi

25. Blue tips Digunakan pada mikro

pipet untuk

mengambil larutandalam dalam ukuran

1000m

Ta+*( 13 P*m+ua0an M*$ia

N;

3

Nama M*$ia K;m;sisi

1. Potato Dextrose Agar

a *

k s

t

r a

k

k

en

ta

n

g

25

0

m

l b D

e

xt

r o

s

e

2+

5

gr

-. Agar 3+"5 gr

2. Natrium Agar a.



11/36


daging 250 ml

b. Peptone 1+25 gr -. Agar 3+"5 gr

&ada dasarnya+ pembuatan media juga

membutuhkan suatu usaha agar mikroba tidak

berkontaminasi dengan alat dan bahan yang

akan digunakan. 6ntuk men-egah agar media

yang dibuat tidak terkena mikroba adalah

dengan melakukan sterilisasi pada alat dan

bahan yang akan digunakan. &ada dasarnya

sterilisasi yang menggunakan uap panas bertekanan dapat dilakukan dengan alat

autoclave. Alat ini terdiri dari bejana yang tahanterhadap sesuatu yang bertekanan tinggi @:. Alat,

alat yang dapat disterilisasikan menggunakanautoclave antara lain adalah -aan petri+ labu

erlenmeyer+ serta alat dan bahan lain yang tahan

dengan pemanasan bertekanan tinggi.

Media adalah substrat yang diperlukan

untuk pertumbuhan dan perkembangan pada

mikroba @:. Agar mikroba dapat tumbuh dan

berkembang dengan baik+ maka dalam

pembuatan media harus memenuhi beberapa

persyaratan tertentu+ yaitu media harus

mengandung susunan makanan yang terdiri darikarbon+ nitrogen+ unsur,unsur logam+ itamin+

air dan energi @2+ media harus memiliki tekanan

osmosa+ tegangan permukaan+ keasaman Bp/C

yang sesuai dengan kebutuhan mikroba danharus dalam keadaan steril+ yang berarti mikroba

lain yang tidak diharapkan tidak tumbuh dalam

media tersebut @:.

4aktor kesalahan yang membuat alat dan bahan tidak steril adalah berkontaminasinya alat

dan bahan tersebut dengan udara sekitar dan

karena terkena tangan yang belum disterilkan.

&ada praktikum ini+ praktikan membuat media !A dan &DA. Media Potato Dextrose Agar

biasanya disebut sebagai &DA. Media &DA

berasal dari kentang+ dextrose+ agar dan air+ yang

biasa digunakan untuk menumbuhkan jamur dan

merupakan salah satu media padat. Sedangkan

Nutrient Agar biasanya disebut sebagai !A.

Media !A berasal dari agar+ pepton+ daging dan

air. Media ini digunakan sebagai pertumbuhan

bakteri.

K*simu(an

Dari praktikum yang telah dilakukan+

dapat disimpulkan baha setiap alat dan bahan

di laboratorium memiliki nama dankegunaannya masing,masing. eberapa ma-am

alat yang ada di laboratorium tersebut terdiri

dari alat,alat gelas seperti -aan petri

B petridish-+ tabung reaksi+ labu erlenmeyer+

gelas ukur+ jarum ose+ pipet olume+ hockey

stick + pipet tetes+ gelas beker+ magnetic stirrer

dan gelas ukur serta peralatan dari kayu ataulogam seperti autoclave, oen+ incubator + hot

plate+ shaker + spektro;otometer+. Ma-am,ma-am

metode sterilisasi yang dapat dilakukan yaitu

metode radiasi+ metode pemanasan dengan uap

air dan pengaruh tekanan Bautokla;C+ metode

pemanasan se-ara kering+ metode penyaringan

B;iltrationC+ dan metode se-ara kimia. Media !A

ber;ungsi sebagia penumbuhan bakteri atau

mikroba sedangkan media &DA ber;ungsi untuk

menumbuhakan jamur.

R*?*%*nsi@1 Adji+ D.+ Nuliyanti+ dan /erny+ L. 200".

Perbandingan Eektiitas #terilisasi Alkohol

./0, "nramerah, /tokla dan /1on

terhadap Pertumbuhan Bakteri Bactillus

#ubtilis. 9urnal Sain $ol.25 !o.1E 1#.

@2 Subandi+ M. 201:. $ikrobiologi. andung.

&). emaja osdakarya.

@3 Daris+ D. 200(. #terilisasi Produk

esehatan 3!ealth *are Products- dengan

4adiasi Berkas Elektron 9urnal &roseding

&ertemuan dan &resentasi lmiah )eknologi

Akselerator dan Aplikasinya+ halE "#.@: Sariiria+ 6. 2005. $ikrobiologi Dasar

9akarta.&apas Sinar Sinanti.



12/36

6u%na( P%a-0i-um Mi-%;+i;(;gi Dasa%

Is;(asi $an I$*n0i?i-asi Dasa% Mi-%;+aAmanda . Darma+ Auliya 4eby iur=anur.

%elompok :8+ &raktikum Mikrobiologi Dasar

4akultas %esehatan Masyarakat+ 6niersitas Mulaarman

A+s0%a-

solasi dan denti;ikasi Dasar Mikroba oleh Dyah Dimuji ahayuningsih 2015. Sebelum isolasi

dan identi;ikasi dasar mikroba praktikan+ alat+ tempat dan bahan sudah harus steril. )eknik isolasi yang benar dan tepat perlu dilakukan di lapangan dan di laboratorium. )eknik yang benar dan tepat akan

memudahkan praktikan dalam memprediksi dan mengidenti;ikasi mikroba. solasi mikroba dapatdilakukan dengan dua -ara yaitu penggoresan dan penaburan. Metode yang digunakan adalah metode

-aan gores yang berdasarkan pengen-eran dan penuangan untuk mengisolasi mikroba. /asil yang

diperoleh pada media !A Sp1 6ormE irregular, Elevation7 lat, $argin7 undulate, %otal7 8, *olor7 bone

hite, Sp2 6orm7 spindle, Elevation7 lat, $argin7 undulate, %otal7 9, *olor7 bone hite, Sp3 6orm7circular, Elevation7 late, $argin7 undulate, %otal7 :9;;, *olor7 bone hite dan hasil yang didapat pada

&DA Sp1 6orm7 circular, Elevation7 convex, $argin7 entire, %otal7 :9;;, *olor7 bone hite, Sp2 6orm7

rhi1oid, Elevation7 umbonate, $argin7 undulate, %otal7 :9;;, *olor7 bone hite, Sp3 6orm7 ilamentous,

Elevation7 umbonate, $argin7 undulate, %otal7 :9;;, *olor7 bone hite 3 10,:C. Sp1 6orm7 irregular,

Elevation7 lat, $argin7 undulate, %otal7 :9;;, *olor7 hite, Sp2 6orm7 circular, Elevation7 lat, $argin7

entire, %otal7 :9;;, *olor7 hite B10,5

C+ Sp1

6orm7 ilamentous, Elevation7 unbonate, $argin7 lobate,%otal7 :9;;, *olor7 hite, Sp2 6orm7 spindle, Elevation7 lat, $argin7 undulate, %otal7 :9;;, *olor7

hite, #p9 6orm7 circular, Elevation7 lat, $argin7 entire, %otal7 1+ *olor7 hite 3 10,(C . &raktikum ini

bertujuan untuk mengetahui teknik dasar isolasi mikroba seperti bakteri+ jamur dan -ara dasar untuk

mengideti;ikasi mikroba.

Ka0a -un=iE solasiO denti;ikasi O MikrobaTangga( P%a-0i-umE 2 Desember 2015E Diserahkan tanggal 5 Desember 2015

P*n$ahu(uan

akteri adalah salah satu mikroba yang

dapat hidup di seluruh tempat yang ada dalam

dunia ini. akteri ada yang menguntungkan+merugikan+ bahkan masih banyak yang belum

dapat diidentidikasi jenisnya sehingga belum

diketahui man;aatnya @:. Agar dapatmengetahui si;at+ mor;ologi dari suatu

mikroba+ kita harus memiliki isolat murni yang

tidak ter-ampur dengan mikroba lain. 6ntuk

mendapatkan bakteri yang murni harus

dilakukan isolasi. solasi adalah -ara untuk

memisahkan atau memindahkan mikroba

tertentu dari lingkungannya+ sehingga akan

memperoleh kultur jaringan yang murni

Bbiakan murniC. solasi juga dapat diartikansebagai kegiatan yang dilakukan untuk

memisahkan bakteri diinginkan dengan bakteri

yang tidak diinginkan dari kontaminasi media

lain.Asis0*n *n$aming E 1. 8ep /ikmat Maulana

Fusup+ 2. *rsaliany !urul &ratii >odrie+ 3. !ur

Maulida Aulia+ :. iska &rihatiningsih+ 5. )unik

%hoiriyah+ (. Fusnaini.P*nanggung jawa+: %oordinator Mata %uliah

Mikrobiologi DasarE Dr.rer.nat. odhi Dharma+

S.Si+ M.Si dan %epala Laboratorium Mikrobiologi

dan enetika MolekulerE Dr.rer.nat. odhi Dharma+S.Si+M.Si

)ahapan aal untuk isolasi adalahinokulasi. nokulasi adalah tahapan penanaman

bakteri yang akan dikembangkan ke dalam

media. &enanaman ini dapat menggunakan jarum

ose maupun mikropipet. Alat yang digunakan

juga harus steril+ sehingga isolat yang murni

benar,benar didapatkan. leh karena itu+

praktikum ini dilakukan untuk mengetahui dan

mengerti -ara mengisolasi pertumbuhan mikroba

dengan -ara yang benar+ aseptis serta dapat

mempelajari pertumbuhan dan perkembang

biakan mikroba.

&en-emaran BkontaminasiC dari luar

terutama berasal dari udara yang banyak

mengandung mikroorganisme @2. Di dalam alam+mikroba sebagai populasi -ampuran berbagai

jenis mikroba yang berbeda. Sehingga perlu

melakukan isolasi pada mikroba tersebut untuk

mengetahui pertumbuhan dalam suatu

lingkungan yang terbebas dari pen-emaran

mikroba lain @3.


13/36


8ara yang digunakan pada praktikum ini

adalah pengen-eran+ -aranya adalah dengan

mengen-erkan -ampuran berma-am,ma-amspesies yang dien-erkan dalam suatu tabung

tersendiri. %emudian -ara lain untuk

memperoleh biakan koloni murni dari populasi

-ampuran mikroorganisme adalah dengan

penuangan+ yaitu mengen-erkan eksperimendalam medium agar yang telah di-airkan dan

didinginkan untuk di-aankan.

)erdapat berbagai ma-am metode isolasi

yang dapat digunakan. Ma-am,ma-am metode

isolasi tersebut antara lain Satu+ solasi tunggal

merupakan metode isolasi dengan -ara

meneteskan bahan yang mengandung

mikroorganisme pada suatu ka-a penutup dengan

menggunakan mikropipet+ yang kemudian

diteliti dibaah obyekti; mikroskop. Dua+ isolasi

gores merupakan metode isolasi dengan -aramenggeser atau menggoreskan ujung jarum ose

yang telah mengandung mikroorganisme dengan

hati,hati di atas permukaan agar se-ara


14/36


-aan petri steril yang telah disiapkan.

)uangkan perlahan,lahan di samping lampu

bunsen. Setelah selesai+ dituangkan media !A pada -aan petri yang telah diberi label untuk

tanda. %emudian diinkubasi selama 2: jam.

Setelah diinkubasi+ amati dan -atat perbedaan

bentuk koloni+ permukaan koloni+ dan tepi

koloni.




Ta+*( 31 Is;(asi $an I$*n0i?i-asi Dasa% Mi-%;+aa$a ai% +uah j*%u- yang 0*(ah m*m+usu-

N;3 #awan K*0*%angan

13 8& 1. &DA10,: #p undulate

*olor7 bone hite

%otal7 :9;;

2. 8&2. &DA 10,5 #p


15/36


Ta+*( 3 Is;(asi Mi-%;+a a$a T*m*

N;3 O+j*- K*0*%angan

1. Potato Dextrose Agar

pada tempe

1. )otol 12. )otol 2

3. )otol 3

Dalam pembahasan isolasi dan identi;ikasi

mikroba+ dapat kita lihat baha karakteristik

koloni yang tumbuh terpisah dengan baik dapat

diealuasi dengan -iri,-irinya sebagai berikutEapabila dilihat dari 6orm BbentukCE koloni

mikroorganisme terdiri dariE Punctiorm,

circular ilamentous, irregular, rhi1ioid

Elevation7 lat + raised + -oneK+ umbonate.

$argin7 Entire, undulate, ilamentous, lobate,

erose Metode yang digunakan adalah metode

-aan gores yang berdasarkan pengen-eran dan

penuangan untuk mengisolasi mikroba.

&en-emaran BkontaminasiC dari luar terutama

berasal dari udara yang banyak mengandung

mikroorganisme @1. Di dalam alam+ mikroba

sebagai populasi -ampuran berbagai jenismikroba yang berbeda. Sehingga perlu

melakukan isolasi pada mikroba tersebut untuk mengetahui pertumbuhan dalam suatu

lingkungan yang terbebas dari pen-emaran

mikroba lain @2. Dalam suatu pembuatan media+

aIuades sangat diperlukan untuk melarutkan

bahan yang akan digunakan. AIuades juga

merupakan air yang akan digunakan oleh

mikroorganisme untuk dapat hidup. 4aktor

keselahan yang menyebabkan mikroba pada

media &DA tidak dapat tumbuh yaitu+ saat

menghomogenkan media membentuk angkadelapan suspensi tidak ber-ampur merata dengan

media. Selain itu media tidak -o-ok bagi

pertumbuhan bakteri karena mungkin ada

beberapa kesalahan seperti mediumnya yang

rusak. Susunan makanan+ tekanan osmosi+ p/+

temperatur dan sterilisasi yang tidak -o-ok

dengan pertumbuhan bakteri @5. &raktikum ini

bertujuan agar para praktikan dapat mengetahuiteknik dasar untuk mengisolasi mikroba Bbakteri

dan jamurC+ serta untuk mengetahui -ara

mengidenti;ikasi dasar pada mikroba

K*simu(an


dapat disimpulkan baha untuk mengetahui

teknik dasar isolasi pada mikroba Bbakteri dan

jamurC serta -ara mengident;ikasi dasar mikroba perlu melakukan isolasi dan mor;ologi

pada koloni mikroba. Metode yang digunakan

dalam proses isolasi dan identii;kasi mikroba

adalah metode -aan gores yang berdasarkan

pengen-eran dan penuangan untuk mengisolasi

mikroba. /asil yang diperoleh pada media !A

Sp1 6ormE irregular, Elevation7 lat, $argin7

undulate, %otal7 8, *olor7 bone hite, Sp2

6orm7 spindle, Elevation7 lat, $argin7

undulate, %otal7 9, *olor7 bone hite, Sp3

6orm7 circular, Elevation7 late, $argin7

undulate, %otal7 :9;;, *olor7 bone hite danhasil yang didapat pada &DA Sp1 6orm7circular, Elevation7 convex, $argin7 entire,

%otal7 :9;;, *olor7 bone hite, Sp2 6orm7

rhi1oid, Elevation7 umbonate, $argin7

undulate, %otal7 :9;;, *olor7 bone hite, Sp3

6orm7 ilamentous, Elevation7 umbonate,

$argin7 undulate, %otal7 :9;;, *olor7 bone

hite 3 10,:C. Sp1 6orm7 irregular, Elevation7

lat, $argin7 undulate, %otal7 :9;;, *olor7

hite, Sp2 6orm7 circular, Elevation7 lat,

$argin7 entire, %otal7 :9;;, *olor7 hite B10,

5C+ Sp1 6orm7 ilamentous, Elevation7unbonate, $argin7 lobate, %otal7 :9;;, *olor7

hite, Sp2 6orm7 spindle, Elevation7 lat,

$argin7 undulate, %otal7 :9;;, *olor7 hite,#p9 6orm7 circular, Elevation7 lat, $argin7

entire, %otal7 1+ *olor7 hite 3 10,(C . &raktikum

ini bertujuan untuk mengetahui teknik dasar

isolasi mikroba seperti bakteri+ jamur dan -ara

dasar untuk mengideti;ikasi mikroba. Dalam

praktikum ini terdapat beberapa ;aktor

kesalahan yang dapat mempengaruhi proses

praktikum. Salah satunya+ adalah saat medium

di homogenkan dengan -ara membentuk angkadelapan sebanyak dua puluh enam kali media

harus berada pada permukaan meja yang rata

sehingga suspensi ter-ampur rata dengan

medium. 4aktor kesalahan yang lain juga dapat

terjadi apabila medium yang akan digunakan

masih dalam keadaan panas. /al tersebut akan

mematikan bakteri sehingga proses isolasi akan

gagal. Dalam proses penuangan sampel ke

media -aan petri juga harus dilakukan se-ara

1

2

3


16/36


aseptis yaitu di dekat lampu bunsen untuk

men-egah masuknya mikroba lain yang tidak

diinginkan.Selain itu+ sampel media yang telahdiisolasi tidak boleh dibuka,buka lagi+ karena

jika dibuka akan ada mikroba lain yang bisa

masuk.

R*?*%*nsi

@1Didjoseputro+ D. 1''#. Dasar=Dasar $ikrobiologi. 9akarta. Djambatan.

@29ohn 7iley and Sons Ltd. 1'''. Bacterial

*ell *ulture. !e ForkE A.S all

@3/idayat+ !.+ Masdiana.+ dan Sri+ S. 200(.

$ikrobilogi "ndustri FogyaE Andi ;;set

@:%apahang+ /.+ Maria+ .+ Mansjur+ /.+

Sastroatmadja+ D.+ dan Dedy+ D. 200".

"solasi, arakterisasi, dan "dentiikasi,

Bekteri $etanogenik Asal 'imbah Air

elapa9urnal 4orum &as-asarjana $ol.30 !o.1.halE25

@5Misnadiarly+ dkk. 201:. $ikrobiologi untuk

linik dan 'aboratorium. 9akarta. ineka

8ipta

@(Sutedjo+ M.+ %artasapoetra+ A.+Sastuadmodjo.1''(. $ikrobiologi %anah

9akartaE ineka 8ipta

@"Soetarto+ *.S.+ Suharni+ ).).+ !astira+ S.F.+

dan Sembiring+ L. 200#. Petun?uk

Praktikum $ikrobilogi untuk $ahasisa

6akultas Bilogi, Laboratorium Mikroba

4akultas 6M. Fogyakarta


17/36

P*m+ua0an Bia-an Mu%niAmanda . Darma+ Auliya 4eby iur=anur.



A+s0%a-

&embuatan biakan murni oleh Dyah Dimuji ahayuningsih+ 2015. &embiakan murni sangat

diperlukan untuk mempelajari mikroorganisme di dalam laboratorium. iakan murni merupakan suatu

perkembang biakan yang hanya mengandung satu spesies organisme. &embiakan murni dapat diperoleh

dengan metode -aan sebar+ metode -aan tuang+ dan metode -aan gores. &raktikum ini bertujuan

untuk memahami+ teknik,teknik pembuatan biakan murni dari biakan kompleks mikroba yang telah

berhasil diisolasi dari lingkungan. Ada beberapa metode untuk memperoleh biakan murni dari suatu biakan -ampuran+ yaitu metode -aan sebar B spread plateC+ metode -aan tuang B pour plateC+ dan metode

-aan gores B streak plateC. Metode yang digunakan dalam praktikum kali ini ialah metode -aan gores

dan metode -aan sebar. &raktikum ini bertujuan untuk menumbuhkan mikroorganisme dan mengetahui

hubungan pertumbuhan dengan populasi mikroorganisme. Dalam proses biakan murni sampeldiinkubasikan selama kurang lebih :# jam. Sehingga hasil yang diperoleh dari pembuatan biakan murni

adalah bentuk koloni dari mikroba yang tumbuh+ yaitu adanya berbagai ma-am mikroba yang tumbuh

dalam sampel yang menandakan masih terjadi kontaminan. &rinsip metode -aan gores yaitu

mendapatkan koloni yang benar,benar terpisah dari koloni yang lain+ sehingga mempermudah proses

isolasi. Sementara metode totol terhadap &DA untuk pembiakkan jamur.

Ka0a -un=i: bacillus spO biakan murniTangga( P%a-0i-um: Desember 2+ 2015? Diserahkan tanggal De-ember 5 +2015


18/36

9urnal Mikrobiologi Dasar

P*n$ahu(uan

iakan murni adalah suatu biakan yang

hanya mengandung satu spesies

mikroorganisme. Sebelum melakukan

praktikum+ para praktikan harus mengetahui danmempelajari bentuk dan ukuran mikroorganisme

dari biakan yang akan di buat. iakan murnisangat diperlukan untuk mempelajari

mikroorganisme di dalam laboratrium. )eknik

yang digunakan untuk menumbuhkan

mikroorganisme mikrorganisme pada media agar

tumbuh adalah dengan mengisolasi medium.

ahan yang diinokulasikan pada medium disebut

inokulum+ dengan menginokulasi medium

Nutrient Agar dengan metode -aan gores atau

media -aan tuang+ sel,sel mikroorganisme akan

terpisah sendiri,sendiri. Di alam+ pepulasi

mikroba merupakan populasi -ampuran dari

berbagai mikroorganisme atau disebut juga biakan -ampuran. )eknik biakan murni

digunakan untuk memisahkan berbagai ma-am

bakteri tersebut. 6ntuk dapat memperoleh

biakan murni digunakan beberapa teknik biakanyaitu metode agar tuang dan metode

penggoresan lempengan agar @1. Dalam

pembuatan mikroba di dalam laboratorium+

harus memerlukan medium yang berisi odrie+ 3. !ur

Maulida Aulia+ :. iska &rihatiningsih+ 5. )unik

%hoiriyah+ (. Fusnaini.P*nanggung jawa+: %oordinator Mata %uliahMikrobiologi DasarE Dr.rer.nat. odhi Dharma+ S.Si+

M.Si dan %epala Laboratorium Mikrobiologi dan

enetika MolekulerE Dr.rer.nat. odhi Dharma+ S.Si+

M.Si.

Se-ara mor;ologis+ bakteri dapat ditandai

tanpa isolasi+ biakan murni selalu dilakukan

sebelum mengidenti;ikasi suatu organisme

Se-ara umum+ koloni dari suatu biakan murnidapat ditanam pada suatu medium padat yang

sama dengan yang lainnya untuk menentukan

asal mula kemurniaannya @:. akteri adalah

salah satu mikroba yang dapat hidup di seluruh

tempat yang ada dalam dunia ini. akteri ada

yang menguntungkan+ merugikan+ bahkan masih

banyak yang belum dapat diidentidikasi jenisnya

sehingga belum diketahui man;aatnya @2. Dalam

praktikum ini berujuan agar paham akan teknik

pembuatan biakan murni dari bahan biakan

mikroba yang kompleks yang telah berhasil

diisolasi dari lingkungan.

M*0;$* P%a-0i-um

&raktikum ini dilaksanakan pada 2Desember 2015 pukul 1:.30,1#.00 7)A+ di

Laboratorium Mikrobiologi dan enetikaMolekuler 4akultas Matematika dan lmu

&engetahuan Alam+ 6niersitas Mulaarman+

Samarinda.

A(a0


adalah jarum ose+ -aan petri+ tabung

erlenmayer+ lampu bunsen+ tusuk gigi+ dan kertas

label.

Bahan

ahan yang digunakan dalam praktikum

adalah !A B Nutrient Agar C+ bakteri Bacillus+ jamur pada tempe dan &DA B Potato Dextrose

Agar C.

#a%a K*%ja

8ara kerja dalam praktikum adalah sbbE

Disiapkan media !A+ &DA+ a-teri .8earrus

dan jamur pada tempe. Dituang masing,masing

media ke dalam -aan petri+ diamkan hingga

menjadi agar. Setelah menjadi agar+ ambil -aan

petri berisi media &DA. %emudian diambil

jamur pada tempe menggunakan batang lidi+ lalu

tanamkan pada media dengan bentuk totol,totolsebanyak 3K. 6ntuk penanaman pada media !A+

panaskan jarum ose hingga menimbulkan

pijaran+ lalu ambil bakteri bacillus menggunakan

jarum ose tersebut. %emudian ditanamkan pada

media !A dan &DA dengan metode streak

sebanyak 3K. pertama streak dengan jarak yangrapat+ ke dua jarak yang renggang dan yang

ketiga berjarak sangat renggang. Setelah itu+ ke

dua media !A+ dan &DA yang telah ditanami

bakteri dan jamur dimasukkan ke dalaminkubator selama 2:,:# jam untuk selanjutnya

diamati kembali.





19/36


Ta+*( &31 P*m+ia-an Mu%ni a$a Bacillus s3

!o 8aan %eterangan1. Metode streak 1. Streak 12. Streak 2

3. Streak 3

:. %oloni

2. Metode totol 1. )otol 12. )otol 23. )otol 3

akteri dapat ditandai tanpa isolasi+ biakanmurni selalu dilakukan sebelum mengidenti;ikasi

suatu organisme. Se-ara umum+ koloni dari suatu

biakan murni dapat ditanam pada suatu medium

padat yang sama dengan yang lainnya untuk menentukan asal mula kemurniaannya @3.

Metode yang digunakan untuk membuat biakan

murni pada media agar ada beberapa jenis yaitu+

metode -aan gores+ metode -aan tuang+ dan

metode -aan sebar. &ada per-obaan kali ini

digunakan metode -aan gores dan metode totol

untuk membuat biakan murni.

&ada metode -aan gores mempunyai

prinsip yaitu mendapatkan koloni yang benar,

benar terpisah dari koloni yang lain+ sehingga

dapat mempermudah proses isolasi. Dengan

terjadinya proses penggoresan ini diharapkan


20/36


R*?*%*nsi

@19ohn 7iley and Sons Ltd. 1'''. Bacterial

*ell *ulture. !e Fork. A.S all

@2%apahang+ /.+ Maria+ .+ Mansjur+ /.+

Sastroatmadja+ D.+ dan Dedy+ D. 200".

"solasi, arakterisasi, dan "dentiikasi,

Bekteri $etanogenik Asal 'imbah Air

elapa 9urnal 4orum &as-asarjana $et.$ol.30 !o.1.halE25

@3Sutedjo+ M.+ %artasapoetra+ A.+

Sastuadmodjo.1''(. $ikrobiologi %anah

9akarta. ineka 8ipta

@:7aluyo+ L. 2010. %eknik $etode Dasar

$ikrobiologi Malang. 6MM &ress


21/36


P*wa%naan $an #a%a@#a%a P*wa%naanAmanda . Darma+ Auliya 4eby iur=anur.



A+s0%a-

&earnaan dan -ara,-ara pearnaan oleh Dyah Dimuji ahayuningsih 2015. &roses pearnaan pada bakteri ini dilakukan untuk memudahkan saat melihat struktur sel mikroba yang lebih jelas dengan

menggunakan mikroskop. 8ara,-ara pearnaan yang dilakukan dalam praktikum ini antara lain adalah

pearnaan sederhana+ pearnaan negati;+ pearnaan gram dan pearnaan spora. &raktikum ini bertujuan

untuk mengetahui -ara pearnaan pada bateri Bacillus sp. /asil dalam praktikum ini adalah pada

pearnaan sederhana didapatkan bakteri dengan bentuk basil yang berarna ungu+ sedangkan dalam

pearnaan negati; diperoleh bentuk basil yang berarna bening atau tidak berarna Btransparent C dengan

latar belakang yang berarna merah dan terdapat spora yang berbentuk *occus. %emudian pada

pearnaan gram didapatkan bakteri gram positi; yang berarna ungu dengan bentuk #treptobacil + atau

batang yang bergerombol+ sedangkan pada pearnaan spora didapatkan adanya spora bakteri yang

memiliki arna hijau sedangkan sel agetasisnya berarna merah.

Ka0a -un=i: pearnaan sederhanaO pearnaan gramO pearnaan negati;O pearnaan sporaO Bacillus spTangga( P%a-0i-um: 1( Desember 2015? Diserahkan tanggal 1' De-ember 2015


22/36


P*n$ahu(uan

Mikroorganisme yang ada di alam ini

memiliki mor;ologi+ sruktur+ dan si;at yang

khas+ termasuk baktri. Mikrorganisme dapat

dilihat menggunakan mikroskop biasa tanpa

melakukan staining + yaitu dengan -ara khusus+

misalnya tetes bergantung yang menggunakankondensor medan gelap dll. )etapi+

pengamatan ini tidak dapat digunakan untuk

melihat bagian sel dengan jelas karena tidak menggunakan pearnaan @(. akteri memiliki

berbagai ma-am ariasi bentuk seperti coccus,

basil dan spiral+ serta dapat hidup se-ara soliter

ataupun berkoloni. /abitat bakteri sangat

beraneka ragam+ yaitu air+ tanah+ udara+ bahkan

di dalam tubuh hean tersebut @1. akteri

memiliki si;at yang tidak berarna atau

transparent bukan karena ukurannya yang

sangat ke-il+ tetapi arna selnya transparent sehingga jika berada pada medium yang berair

sangat sulit dilihat+ apalagi dalam kondisi

hidup. 6ntuk mengamati bakteri pada kondisi

aslinya yang ke-il dan sulit dapat melakukan

upaya pearnaan atau memasukkan odrie+ 3. !ur Maulida Aulia+ :. iska&rihatiningsih+ 5. )unik %hoiriyah+ (. Fusnaini.

P*nanggung jawa+: %oordinator Mata %uliah Mikrobiologi

DasarE Dr.rer.nat. odhi Dharma+ S.Si+ M.Si dan %epala

Laboratorium Mikrobiologi dan enetika MolekulerE Dr.rer.nat.odhi Dharma+ S.Si+ M.Si

Nat arna adalah pengenalan bentuk

Bmor;ologiC mikroba+ ke-uali kelompok

mikroalge harus dilakukan pearnaan terlebih

dahulu karena tanpa melalui pearnaan+ maka

bentuk tersebut tidak dapat diamati dengan

jelas@3. Nat arna yang digunakan adalah salah

satu senyaa,senyaa garam yang ionnya

berana @(. aram,garam tersebut terdiri dari

ion yang bermuatan positi; dan ion bermuatannegati;. Senyaa kimia ini dapat digunakan

untuk membedakan mikrobe karena saat

bereaksi dengan mi-robe+ hasilnya akan berbeda @(. Se-ara kimia


23/36


-aan petri telah berisi bakan bakteri Bacillus

sp kemudian disterilkan dengan bunsen.

Diletakkan bakteri diatas ka-a preparat dengan

diulas. Ditetesi dengan crystal violet sebanyak

satu tetes+ diratakan menggunakan ka-a preparat

hingga tipis dan dikering,keringkan lalu di-u-i

dengan auades. Dibersihkan dengan tisu+diamati menggunakan mikroskop -ahaya dan

sebelumnya diletakkan cover glass di atas ka-a

preparat.

P*wa%naan N*ga0i?

Disterilkan tempat kerja dan ka-a

preparat dengan menyemprotkan sprayer yang

berisi alkohol. Dinyalakan bunsen+ kemudian

jarum ose dipijarkan. Diambil bakteri

menggunakan jarum ose yang sebelumnya


sp kemudian disterilkan dengan bunsen.Diletakkan bakteri diatas ka-a preparat dengan

diulas. Ditetesi dengan nigrosin sebanyak satu

tetes< diratakan menggunakan ka-a preparat

hingga tipis dan dikering,keringkan lalu di-u-i

dengan auades. Dibersihkan dengan tisu+diamati menggunakan mikroskop -ahaya dan

sebelumnya diletakkan cover glass di atas ka-a

preparat.

P*wa%naan S;%a

Di, shaker biakan L B 'actose BrothC

selama 2: jam kemudia di, shaker lagi selama :# jam. Disterilkan tempat kerja dan ka-a preparat

dengan menyemprotkan sprayer yang berisi

alkohol. Dinyalakan bunsen+ kemudian jarum

ose dipijarkan. Diambil bakteri menggunakan

jarum ose yang sebelumnya -aan petri telah

berisi bakan bakteri Bacillus sp kemudian

disterilkan dengan bunsen. Diletakkan bakteri

diatas ka-a preparat dengan diulas. Ditetesi

dengan $alachite @reen sebanyak 2,3 tetes.

Diletakkan kertas saring diatas ka-a preparat.

Diuapkan di dalam eaporator selama 5 menit

lalu diangkat dan didinginkan selama 1 menit.Dilepas kertas saring kemudian di-u-i dengan

auades+ ditetesi Sa;ranin 2,3 tetes. Didiamkan

selama 30 detik. Di-u-i dan dikeringkan lagi+

kemudian diamati menggunakan mikroskop

-ahaya dan sebelumnya diletakkan cover glass di

atas ka-a preparat.

P*wa%naan G%am

Disterilkan tempat kerja dan ka-a

preparat dengan menyemprotkan sprayer yang

berisi alkohol. Dinyalakan bunsen+ kemudian

jarum ose dipijarkan. Diambil bakteri

menggunakan jarum ose yang sebelumnya


sp kemudian disterilkan dengan bunsen.Diletakkan bakteri diatas ka-a preparat dengan

diulas. Ditetesi dengan crystal violet, diulas satu

arah+ didiamkan selama 1 menit dan di-u-idengan auades sampai bersih lalu ditetesi

Lugol sebanyak satu tetes. Didiamkan selama 1

menit kemudian di-u-i sampai bersih. Ditetesi

alkohol '0J sebanyak satu tetes dan diamkan

selama 1 menit. Di-u-i sampai bersih lalu

ditetesi Sa;ranin sebanyak satu tetes lalu

didiamkan selama 2 menit. Di-u-i lalu

dikeringkan+ diamati menggunakan mikroskop

-ahaya dan sebelumnya diletakkan cover glass diatas ka-a preparat.Ta+*( "31 P*wa%naan a$a Ba-0*%i

!o. &earnaan /asil

1. &earnaan Sederhana

entuk bakteriE basil

7arnaE 6ngu

&erbesaranE :0K10

2. &earnaan !egati; entuk bakteriE basildan terdapat spora

berbentuk coccus

7arnaE bening

&erbesaranE :0K10

akteri basil

akteri


24/36


3. &earnaan Spora entuk bakteriEspora

7arnaE hujau

&erbesaranE 10K100

:. &earnaan ram

entuk bakteriE

#trepto bacill

Bbatang

bergerombolC

7arnaE ungu yang

merupakan bakteri

gram positi;

&erbesaranE :0K10

Dari tabel tersebut dapat dilihat baha

dalam pearnaan sederhana bakteri berbentuk

basil atau tongkat dan berarna ungu. /al ini

dikarenakan


25/36



dapat disimpulkan baha -ara,-ara pearnaan

terdiri dari pearnaan sederhana+ pearnaan

negati;+ pearnaan gram+ dan pearnaan spora.

Mor;ologi pada masing,masing pearnaan

antara lain+ yaitu pada pearnaan sederhana

memiliki bentuk basil yang berarna ungu+ bentuk pearnaan pada pearnaan negati; yaitu

basil yang berarna bening+ bentuk pearnaan

pada pearnaan di;rensial melalui pearnaangram yaitu #treptobacil yang berarna ungu+

dan pada pearnaan spora bakteri berarna

hijau dan sel egetati;nya berarna merah.

R*?*%*nsi

@1 /arley dan &ress-ot. 2002. 'aboratory

Exercise in $icobiology 6SA. M-ra, /ill

&ublisher

@2 Subandi.+ M. 201:. $ikrobiologi+ andung. &). emaja osdakarya.

@3 Suriiria 6. 2005. $ikrobiologi Dasar .

9akarta. &apas Sinar Sinanti

@: Sutedjo+ M. M.+ A.+

%artasapoetra.+D.S.+danSastroadmodjo.1''(. 9akartaE &). ineka 8ipta.

@5 )artora 9. erard.+ ordell . 4unke.+

8histine L. 8ase. 2013. $icrbiology an

"ntroduction Ameri-anE &earson *du-ation

@( 7aluyo+ L. 2010. %eknik dan

$etode Dasar dalam $ikrobiologi.

MalangE 6MM &ress

@" skamto+ . Pearnaan #ederhana,

Negative, apsul dan @ram2;


26/36


P*ngama0an 6amu% Mi-%;s-;is

Amanda . Darma+ Auliya 4eby iur=anur.



A+s0%a- &engamatan 9amur Mikroskopis oleh Dyah Dimuji ahayuningsih 2015. 4ungi mikroskopisdibedakan menjadi yeast OragiOkhamir yang terdiri dari satu sel BunsiselulerC+ -ontohnya #accharomyces

cerevisiae dan ;ilamentous ;ungi yang terdiri dari kapang Bmold C berupa benang,benag hi;aO miselium

-ontohnya Aspergillus+ Penicillum+ 4hi1oid . &raktikum ini bertujuan untuk mengidenti;ikasi struktur dan

jenis jamur mikroskopis dengan metode suare block . Metode suare block dilakukan untuk mengamati

koloni ;ungi ber;ilamen yang dilakukan dengan -ara memotongOmengambil bagian ke-il dari media &DA

yang berbentuk persegi Adapun hasil yang di peroleh dari praktikum ini ialah di temukannya jamur

4hi1opus sp. ini adalah jamur yang berasal dari tempe yang telah diisolasi sebelumnya. &ada perbesaran

mikroskop 10K10 terlihat jamur berarna hitam dan berbentuk coccusObulat. /asil praktikum ini adalah

mikroorganisme tersebut berjenis jamur 4hi1opus /ligosporus #aito+ habitat jamur terdapat pada tempe

yang telah membusuk. %arakteristik 4hi1opus oligosporus yaitu struktur tubuh 4hi1opus

oligosporus mempunyai tiga tipe hi;a+ yaitu stolon Bhi;a yang membentuk jaringan pada permukaansubstratC+ ri


27/36


4ungi adalah mikroorganisme tidak

berkloro;il+ berbentuk hi;a atau sel tunggal+

eukariotik+ berdinding sel dari kitin atau

selulosa+ berproduksi seksual atau aseksual.

Dalam dunia kehidupan ;ungi merupakan

kingdom tersendiri+ karena -ara mendapatkan

makanannya berbeda dengan organisme

eukariotik lainnya yaitu melalui absorpsi@:

.4ungi tingkat tinggi maupun tingkat

rendah mempunyai -iri yang khas+ yakni berupa

benang tunggal atau yang ber-abang,-abang

yang disebut dengan hi;a. 4ungi merupakan

organisme eukariotik yang mempunyai -iri,-iri?mempunyai spora+ memproduksi spora+ tidak

mempunyai kloro;il sehingga tidak

ber;otosintesis+ dapat berkembang biak se-ara

seksual dan aseksual+ tubuh ber;ilamen dan

dinding sel mengandung kitin+ glukan+ selulosadan manant @(.

4ungi dibedakan menjadi dua golonganyakniE kapang dan khamir. %apang merupakan

;ungi yang ber;ilamen atau mempunyai

miselium. Sedangkan khamir merupakan ;ungi

bersel tunggal dan tidak ber;ilamen. 4ungi

merupakan organisme menyerupai tanaman @(.

M*0;$* P%a-0i-um

&raktikum dilaksanakan pada 1(

Desember 2015 pukul 1:.30,1#.00 7)A+ di

Laboratorium Mikrobiologi dan enetika

Molekuler+ 4akultas Matematika dan lmu&engetahuan Alam+ 6niersitas Mulaarman+

Samarinda.

A(a0


adalahE ob?ek glass, cover glass, -aan petri+

jarum ose+ nampan+ lampu spirtusObunsen+ sprayer + pinset+ pisau silet+ mikroskop -ahaya+

alumunium oil + pipet tetes+ kertas saring+ beaker

glass, tabung reaksi+ tisu.

Bahanahan yang digunakan dalam praktikum

adalahE biakan ;ungi Btempe yang telah

membusukC+ alcohol + alumunium ;oil+ kertas

label+ media Potato Dextrose Agar + kultur ;ungi

B#accharomyces cerevisiaeC.

#a%a K*%ja

Disiapkan alumunium ;oil dengan

ukuran sedang kemudian dibentuk alumunium

;oil tersebut menjadi bentuk huru; 6.

Disterilisasikan -aan petri di atas lampu

spirtusObunsen+ kemudian diletakkan alumunium

;oil yang telah dibentuk huru; 6 tersebut

kedalam -aan petri. Selanjutnya diletakkan

ob?ect glass yang telah disterilisasikan denganalcohol diatas alumunium oil tersebut. Diambil

agar dengan ukuran kurang lebih 0+5 m K 0+5 m

menggunakan pisau silet lalu letakkan agar

tersebut diatas objek glass. Ambil biakan ;ungi

Btempe yang telah membusukC sebanyak 1 osekemudian diulas pada sisi samping agar. Ambil

cover glass yang telah di sterilkan dengan

menggunakan alcohol dan diletakkan di atas

agar yang telah diulas oleh biakan ;ungi tersebut.

Setelah itu -aan petri ditutup dan inkubasikan

-aan tersebut di atas nampan. %emudian diberi

tutup botol yang telah berisi air di sudut,sudutnampan untuk menjaga kelembaban dalam

proses pertumbuhan jamur. Diinkubasikan

selama :# jam dalam suhu ruang. Setelah di

inkubasikan selama :# jam+ kemudian diamati

pertumbuhan jamur tersebut dengan mikroskop.




Ta+*( 31 P*ngama0an 6amu% a$a T*m*

yang T*(ah M*m+usu-

!o. !ama %eterangan

1. 4hi1opus

/ligosporus #aito

!abitat &amur7

terdapat pada tempe Perbesaran7


28/36


sebagai pengamatan koloni ;ungi ber;ilamen

Bmold C. Struktur ;ungi ini terdiri dari benang,

benang hi;a atau miselium. Setiap bagian ;ungi

dapat berkembang menjadi indiidu yang baru @1.

Menurut perkembangannya+ setiap jenis

memiliki koloni tersendiri. &enggunaan metode

suare block ini adalah media Potato Dextrose

Agar dibuat dengan ketipisan sekitar 2 mm+kemudian dibentuk seperti dadu dengan ukuran

0+5 -m K 0+5 -m. keuntungan dari penggunaan

metode ini adalah kita dapat lebih mudah

mengamati dari ;ungi yang dihasilkan karena

penggunaan metode aIuare sampel yangdigunakan diletakkan dipinggairan blo-k.

%arena penggunaan BpeletakkanC sampel

di-etakkan dipinggir maka akan lebih mudah

mengamatinya.

Dari per-obaan yang telah dilakukan

menggunakan sampel suspensi+ jamur yang

terdapat pada tempe busuk yang telahdiinkubator dan diamati dengan menggunakan

mikroskop maka+ hasil yang diperoleh yaitu

terdapat jamur jenis 4hi1opus sp. 4hi1opus sp.

adalah genus jamur benang yang termasuk ;ilum

ygomcota ordo $ucurales 4hi1opus sp.

K*simu(an


dapat disimpulkan baha setiap jenis jamur

memiliki -iri koloni tersendiri dalam

perkembang biakannya serta dalam pengamatan

jamur mikroskopis ini bertujuan untuk

mengetahui jenis,jenis ;ungi mikroskopis serta

mengetahui perbedaan struktur mor;ologi pada

;ungi uniseluler dan ;ungi ber;ilamen. 8iri, -iri

jamur ;ungi adalah uniseluler tersusun atas hi;a+

eukariotik+ tidak mempunyai kloro;il+ dindingselnya terdiri atas tet keton+ -adangan makanan

tersimpan dalam bentuk glikogen dan protein.

9amur yang di temukan pada pengamatan

mikrosopis ini ialah 4hi1opus sp.

R*?*%*nsi

@18appu-ino.+ 9.. and !. Sherman. 1'''.

$icrobiology A 'aboratory $anual 6ourth

@2Daris+ 7elly.+ Andria+ .M.+ o-hmah+ S.

2010. Determinasi 9amur Ly-operdales Fang

)erdapat di Desa &ajar ulan %e-amatan

Semidang Alas %abupaten Seluma engkulu.$et. $ol. 0" !o. 01. 6niersitas engkulu

@3Didjoseputro+ D.1'':. Dasar Dasar

$ikrobiologi. 9akarta. Djambatan

@:andjar+ ndraati.1'''. Pengenalan apang

%ropik Fmum. 9akarta. 6 &ress

@5&el-


29/36


P*ng;n0%;(an Mi-%;;%ganism*Amanda . Darma+ Auliya 4eby iur=anur.



A+s0%a-

&engontrolan Mikroorganisme oleh Dyah Dimuji ahayuningsih+ 2015. Antibiotik adalah suatu

substansi antimikroba yang diperoleh+ dibentuk dan dihasilkan oleh mikroorganisme yang pada umumnyaadalah jamur maupun 3. !ur Maulida :. iska &rihatinigsih 5. )unik %hoiriyah (. Fusnaini

P*nanggung jawa+E %oordinator mata kuliah mikrobiologi dasar

yaitu r. Samsurianto M. Si dan kepala Laboratorium Mikrobiologi

dan enetika Molekuler yaitu Dr. rer. nat. odhi Dharma M.Si

4M&A 6!M6L

Daya kerja antimikrobial bahan kimiasering disetarakan dengan ;enol. %emampuan

bahan kimia dibandingkan dengan ;enol

dinamakan koe;isien ;enol. ahan kimia yang

digunakan dalam pengobatan menjadi pilihan bila mematikan dan bukan hanya menghambat

pertumbuhan mikroba. ahan kimia yang

mematikan bakteri dinamakan bakterisidal +

sedangkan bahan kimia yang menghambat

pertumbuhan bakteri disebut bakteriostatik @3.

ahan antimikrobial dapat bersi;at

bakteriostatik pada konsentrasi rendah+ namun

bersi;at bakterisidal pada konsentrasi tinggi.

ahan kemoterapeutik yang baik adalah

mempunyai daya mematikan mikroba namun

tidak menyebabkan kera-unan pada induk

semang yang menggunakan bahan tersebut.

ahan yang demikian memiliki toksisitasselekti; @5. Nat,


30/36

U1


bertujuan untuk mengetahui daya kerja bahan

anti mikoba yang menghambat pertumbuhan

mikroba serta untuk mengetahui perbedaan

antibiotik dan disin;ektan. Metode yang

digunakan pada praktikum ini adalah metode

irbyO Bauer .

M*0;$* P%a-0i-um&raktikum ini dilaksanakan pada 1(

Desember 2015 pukul 1:.30,1#.00 7)A+ di

Laboratorium Mikrobiologi dan enetika

Molekuler+ 4akultas Matematika dan lmu

&engetahuan Alam+ 6niersitas Mulaarman+Samarinda.

Bahan

ahan,bahan yang digunakan pada

praktikum ini Auades+ biakan murni B Bacillus

sp. - kertas saring+ kertas label+ cotton bud +

-loram;enikol+ sabun liebuoy, bayclin, rinso danmedia Nutrient Agar

A(a0

Alat,alat yang digunakan dalam

praktikum ini adalah -aan petri+ lampu bunsen+

jarum ose+ pinset+ tabung reaksi+ sprayer + pinset+

orteK+ dan in-ubator.

#a%a K*%ja

Metode irbyCBaver

Sterilkan -aan petri media !A pada

lampu unsen+ ambil biakan pada tabung reaksimenggunakan kapas lalu oleskan merata pada

agar. Masukkan tiga buah kertas saring pada

-aan petri yang berisikan desin;ektan+

kemudian tiriskan kertas saring di bagian

dinding -aan. Setelah itu masukkan kertas

saring ke dalam -aan petri media !A.Letakkan kertas saring pada bagian atas agar

dengan masing,masing dipisahkan menjadi tiga

kuadran.




Ta+*( '31 Hasi( P*ngama0an D*sin?*-0an

!o ambar %eterangan

1 Disin;ektan

*loramenikol

61

Daya hambat

keseluruhan

menggunakan

desin;ektan

cloramenikol

adalah sebesar #+(

mm

2 Disin;ektan 'iebuoy Daya hambatkeseluruhan

menggunakan

desin;ektan

liebuoy adalah

sebesar '+: mm

3. Disin;ektan Bayclin Daya hambatkeseluruhan

menggunakan

desin;ektan

bayclin adalah

sebesar 12+25 mm

:. Disin;ektan inso Daya hambatkeseluruhan

menggunakan

desin;ektan pada

rinso tidak dapat

dihitung


31/36


Diketahui 62 E

62D1Q 3+2 -m

62D2 Q 3+2 -m

62D3 Q 3+: -m

62D: Q 3+3 -m

Diketahui 63 E61D1Q 3+1 -m

61D2 Q 3+0 -m

61D3 Q 3+3 -m

61D: Q 3+2 -m

Disin?*-0an Lifebuoy

Diketahui 61 E

61D1Q 1+# -m

61D2 Q 1+( -m

61D3 Q 1+( -m

61D: Q 1+5 -m

Diketahui 62 E

62D1Q 1+5 -m

62D2 Q 1+2 -m

62D3 Q 1+: -m

62D: Q 1+: -m

Diketahui 63 E

)idak dapat dilakukan pengukuran

Disin?*-0an Bayclin

Diketahui 61 E

61D1Q 1+( -m61D2 Q 1+5 -m

61D3 Q 1+" -m

61D: Q 1+( -m

Diketahui 62 E


Diketahui 63 E


Disin?*-0an Rins;

Diketahui 61 E62D1Q 3+: -m

62D2 Q 2+( -m

62D3 Q 2+( -m

62D: Q 3 -m

Diketahui 62 E


Diketahui 63 E


6ntuk menguji kekuatan disin;ektan

dalam menghambat pertumbuhan mikroba

digunakan kertas saring yang dibasahi dengan

disin;ektan+ kemudian diletakkan pada lempengan

agar yang telah diinokulasi mikroba. Lempengan

agar kemudian diinkubasikan selama 2: jam. ila

disin;ektan menghambat pertumbuhan mikroba+maka akan terlihat


32/36


33/36


34/36


35/36


K*simu(an

Dari praktikum yang dilakukan+ dapat

disimpulkan baha dalam menganalisa

mikroorganisme yang terdapat dalam jamu dapat

dilakukan dngan dua -ara+ yaitu se-arakuantitati; dengan menghitung jumlah

mikroorganisme yang terdapat didalamnya. Dan

se-ara kualitati; dengan -ara mengisolasi+

memurnikan dan mengidenti;ikasi. Metode yang

digunakan adalah metode pengen-eran denganmedia !A dan sampel serbuk jamu jenis jamu

/erbal Alami alian &arem. /asil yang

didapatkan adalah per-obaan ini menghasilkan 3

spesies. Spesies pertama memiliki orm circular,

elavation lat, margin entire+ color hite dan

total 1 spesies. Spesies kedua memiliki orm

ilamentous, elavation lat, margin ilmentous,color hite dan total 1 spesies. Sedangkan

spesies ketiga memiliki orm irreguler, elevation

lat, margin undulate+ color hite dan total 2

R*?*%*nsi

@1Ardiansyah. 200:. Penuntun Praktikum

$ikrobiologi Pangan. ogor.6niersitas

Djuanda.

@24ardia


36/36

laporan akhir resmi fix dyah lgkp2

Documents