KROMATOGRAFI AFINITAS

KROMATOGRAFI AFINITAS

Definisi

pemurnian

prosedur

syarat

aplikasi

Definisi

DEFINISITeknik kromatografi cair yang membuat penggunaan "interaksi biologis" untuk pemisahan dan analisis analit tertentu dalam sampel

Cont :

protein yang mengikat logam

SYARAT KROMATOGRAFI AFINITAS

ligan

PEMURNIANPemurnian dengan teknik kromatografi afinitas disebut pemurnian satu tahap (one step purification) dan diperlukan interaksi spesifik antara protein rekombinan dengan suatu ligan

PROSEDUR

Di siapkan kolom afinitas dengan matriks dan ligan yang sesuai

Sampel Protein dimasukkan ke dalam kolom dan protein akan melalui saringan matriks afinitas manik-manik.

Protein berinteraksi dengan afinitas ligan dengan beberapa protein yang mengikat dengan erat, longgar dan tak berikatan

Protein yang tidak mengikat akan tercuci oleh buffer aplikasi.

Protein yang mengikat di cuci dengan buffer elusi.

Protein elusi yang mengikat erat ligan dan mengumpulkan

protein murni penting

PENGAPLIKASIAN

enzim dengan substrat dan antibodi dengan antigenenzim dengan substrat dan antibodi dengan antigen