kajian aktivitas antioksidan dan kadar …/kajian... · helmi, pramudita, mas erwin, irawan, windi,...
TRANSCRIPT
i
KAJIAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN KADAR
ANTIKOLESTEROL PADA ANGKAK DENGAN VARIASI JENIS
SUBSTRAT (BERAS, JAGUNG DAN GAPLEK)
Skripsi
Untuk memenuhi sebagian persyaratan
guna memperoleh derajat Sarjana Teknologi Pertanian
di Fakultas Pertanian
Universitas Sebelas Maret
Jurusan/Program Studi Teknologi Hasil Pertanian
Oleh
HADI WIYOTO
H0605051
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2010
ii
KAJIAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN KADAR
ANTIKOLESTEROL PADA ANGKAK DENGAN VARIASI JENIS
SUBSTRAT (BERAS, JAGUNG DAN GAPLEK)
yang dipersiapkan dan disusun oleh HADI WIYOTO
H0605051
telah dipertahankan di depan Dewan Penguji pada tanggal : 14 April 2010
dan dinyatakan telah memenuhi syarat
Susunan Tim Penguji
Ketua
Ir. MAM. Andriani, MS NIP. 195005251986092001
Anggota I
Ir. Nur Her Riyadi P., MSi
NIP. 195505201982111002
Anggota II
Ir. Choirul Anam, MT., MP. NIP. 196802122005011001
Surakarta, April 2010
Mengetahui Universitas Sebelas Maret
Fakultas Pertanian Dekan
Prof. Dr. Ir. H. Suntoro, MS NIP. 195512171982031003
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penyusun panjatkan kepada Allah SWT yang telah
melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan merangkumnya dalam skripsi berjudul “Kajian Aktivitas
Antioksidan dan Kadar Antikolesterol pada Angkak dengan Variasi Jenis
Substrat (Beras, Jagung dan Gaplek)”. Penelitian dan penyususnan skripsi ini
merupakan salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Teknologi Pertanian
dari Jurusan/Program Studi Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Pertanian,
Universitas Sebelas Maret Surakarta.
Dalam penelitian dan penyusunan skripsi ini tentunya penulis tidak lepas
dari bantuan berbagai pihak. Untuk itu penulis ingin mengucapkan terimakasih
yang sebesar-besarnya kepada :
1. Prof. Dr. Ir. H. Suntoro, MS selaku Dekan Fakultas Pertanian Universitas
Sebelas Maret Surakarta.
2. Ir. Kawiji, MS selaku Ketua Jurusan Teknologi Hasil Pertanian Fakultas
Pertanian Universitas Sebelas Maret Surakarta.
3. Ir. Bambang Sigit Amanto, Msi selaku pembimbing akademik yang telah
memberikan bimbingan dan arahan selama menempuh kuliah di Jurusan
Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret
Surakarta.
4. Ir. MAM. Andriani, MS dan Ir. Nur Her Riyadi P, MS selaku dosen
pembimbing utama dan pendamping yang telah memberikan bimbingan dan
nasehat selama penulisan dan penyusunan skripsi ini.
5. Ir. Choirul Anam, MT., MP. selaku dosen penguji yang telah memberikan
banyak masukan.
6. Bapak dan Ibu Dosen Jurusan Teknologi Hasil Pertanian pada khususnya serta
seluruh staf pengajar di Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret
Surakarta pada umumnya, terimakasih atas ilmu yang telah diberikan selama
penulis menempuh kuliah. Semoga kelak bermanfaat.
iv
7. Ibu Sri Liswardani, STP., Pak Slamet, Pak Giyo, Pak Joko, terima kasih
banyak atas segala bantuannya.
8. Ayah, Ibu, mas Luri beserta keluarga, mas Mun beserta keluarga, mbak Sur,
mbak Asih, mbak Nur, mbak Wid beserta keluarga yang senantiasa
memberikan doa, nasehat, semangat serta dukungan kepada penulis.
9. Rahadhilla Meita Fitriasari yang senantiasa memberikan doa, nasihat,
motivasi, bantuan, selalu ada di saat susah dan senang, senantiasa menjadi
pendengar yang baik dan selalu bersabar kepada penulis.
10. Teman seperjuangan Dita, Merlyta, Niken, Tina dan Fendi terima kasih atas
kerja sama, pengertian dan kebersamaannya.
11. Helmi, Pramudita, mas Erwin, Irawan, Windi, mbak Pipit, bang Andri, Ilham,
Jati, dan teman-teman mahasiswa Jurusan THP angkatan 2005 (H0605) yang
tidak dapat penulis sebutkan satu persatu. Terima kasih untuk semuanya.
12. Teman-teman kos Klampis Ireng yang selalu memberikan motivasi dan
dukungan kepada penulis.
13. Teman-teman mahasiswa Jurusan THP dan ITP angkatan 2004, 2006 – 2009.
14. Semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian penulisan skripsi ini.
Pada penulisan skripsi ini penulis menyadari bahwa ‘tidak ada yang
sempurna di dunia ini kecuali ciptaan-Nya’. Namun penulis tetap berharap skripsi
ini dapat memberikan manfaat bagi pembaca.
Surakarta, April 2010
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL..................................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN....................................................................... ii
KATA PENGANTAR .................................................................................. iii
DAFTAR ISI ................................................................................................. v
DAFTAR TABEL ......................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR .................................................................................... viii
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. ix
RINGKASAN ............................................................................................... x
SUMMARY .................................................................................................. xi
BAB I PENDAHULUAN ......................................................................... 1
A. Latar Belakang ......................................................................... 1
B. Perumusan Masalah ................................................................. 3
C. Tujuan Penelitian ..................................................................... 4
D. Manfaat Penelitian ................................................................... 4
BAB II LANDASAN TEORI ..................................................................... 5
A. Tinjauan Pustaka ...................................................................... 5
1. Beras................................................................................... 5
2. Jagung ................................................................................ 8
3. Gaplek Singkong ................................................................ 13
4. Angkak ............................................................................... 16
5. Antioksidan ........................................................................ 19
6. Antikolesterol (Lovastatin) ................................................ 22
B. Kerangka Berpikir .................................................................... 24
C. Hipotesis................................................................................... 25
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................... 26
A. Tempat dan Waktu Penelitian .................................................. 26
B. Bahan dan Alat ......................................................................... 26
1. Bahan ................................................................................. 26
vi
2. Alat ..................................................................................... 26
C. Tahapan Penelitian ................................................................... 26
1. Produksi Kapang Monascus purpureus ............................. 26
2. Pembuatan Suspensi Monascus purpureus ....................... 27
3. Pembuatan Angkak ............................................................ 27
4. Uji Antioksidan .................................................................. 28
5. Uji Antikolesterol (Lovastatin) .......................................... 29
D. Rancangan Penelitian ............................................................... 29
E. Analisis Data ............................................................................ 29
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ............................. 30
A. Aktivitas Antioksidan Angkak ................................................. 30
B. Kadar Antikolesterol Angkak .................................................. 32
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................... 35
A. Kesimpulan .............................................................................. 35
B. Saran......................................................................................... 35
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 36
LAMPIRAN .................................................................................................. 41
vii
DAFTAR TABEL
Nomor Judul Halaman
2.1 Nilai Nutrisi Beras (per 100 gram Porsi Makanan) ....................... 6
2.2 Komposisi Kimiawi dari Beras dan Beberapa Pangan Lainnya .... 7
2.3 Nilai Nutrisi Jagung Putih (per 100 gram Porsi Makanan) ............ 10
2.4 Kadar Kalori, Protein dan Karbohidrat pada Berbagai Makanan
Mentah (dalam 100 gram) .............................................................. 11
2.5 Kandungan Amilosa Biji Jagung dari Beberapa Varietas .............. 11
2.6 Nilai Nutrisi Singkong (per 100 gram Porsi Makanan) ................. 14
2.7 Persyaratan Mutu/ Kualitas Gaplek Singkong (dalam persen) ...... 16
4.1 Aktivitas Antioksidan Angkak Berbagai Jenis Substrat ................ 31
4.2 Kadar Antikolesterol Angkak Berbagai Jenis Substrat .................. 33
viii
DAFTAR GAMBAR
Nomor Judul Halaman
2.1 Reaksi Antara Radikal DPPH (C18H12N5O6) dengan Antioksidan 21
2.2 Rumus Bangun dari Lovastatin (C24H36O5) ................................... 24
2.3 Diagram Alir Kerangka Berpikir ................................................... 25
3.1 Diagram Alir Proses Penelitian ...................................................... 28
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Nomor Judul Halaman
1. Produksi Kapang dan Pembuatan Suspensi Kapang M. purpureus .. 41
2. Uji Aktivitas Antioksidan Angkak .................................................... 42
3. Uji Kadar Antikolesterol (Lovastatin) Angkak ................................ 43
4. Hasil Analisa ANOVA...................................................................... 45
5. Foto Penelitian .................................................................................. 47
x
KAJIAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN KADAR ANTIKOLESTEROL PADA ANGKAK DENGAN VARIASI JENIS
SUBSTRAT (BERAS, JAGUNG DAN GAPLEK)
HADI WIYOTO H0605051
RINGKASAN
Angkak merupakan salah satu produk fermentasi beras dengan
menggunakan kapang Monascus purpureus. Secara tradisional substrat yang digunakan untuk memproduksi angkak adalah beras. Pada umumnya, beras pera yang memiliki kadar amilosa tinggi lebih cocok digunakan untuk memproduksi angkak daripada beras dengan amilosa rendah. Substrat lain yang bisa digunakan untuk memproduksi angkak adalah jagung dan gaplek.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh variasi jenis substrat (beras, jagung dan gaplek) terhadap aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol pada angkak serta untuk mengetahui jenis substrat yang mampu menghasilkan aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol paling tinggi pada angkak. Rancangan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan satu faktor (jenis substrat : beras, jagung dan gaplek), dengan 3 kali ulangan. Data hasil penelitian dianalisa dengan menggunakan ANOVA pada tingkat α = 0,05 serta dilanjutkan dengan DMRT pada tingkat α yang sama.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa jenis substrat mempengaruhi aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol angkak. Substrat beras memiliki aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol yang lebih tinggi bila dibandingkan dengan substrat jagung dan gaplek. Aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol angkak dengan substrat beras berturut-turut sebesar 45,6100% dan 0,026600%. Aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol angkak dengan substrat jagung berturut-turut sebesar 44,0500% dan 0,022833%, sedangkan aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol angkak dengan substrat gaplek berturut-turut sebesar 42,8333% dan 0,013200%.
Kata kunci : beras, jagung, gaplek, Monascus purpureus, angkak, aktivitas antioksidan, antikolesterol
xi
STUDY OF ANTIOXYDANT ACTIVITY AND ANTICHOLESTEROL CONTENT ON RED YEAST RICE WITH SUBSTRATES VARIATION
(RICE, CORN AND DRIED CASSAVA)
HADI WIYOTO H0605051
SUMMARY
Red yeast rice is one of rice fermented product use Monascus purpureus.
Traditionaly the substrates to produce red yeast rice is rice. Usually the rice with high amylose content is proper to produce red yeast rice than low amylose. The other substrates that can be used to produce red yeast rice are corn and dried cassava.
The purposes of this research are to know the effect of substrates variation (rice, corn and dried cassava) on antioxidant activity and anticholesterol content in red yeast rice and also to know which substrates that produce the highest antioxidant activity and anticholesterol content. Design of this research is Completely Randomized Design that consist of one factor (the kind of substrates : rice, corn and dried cassava) with 3 replication. Then the data is analyzed with ANOVA at level of confident α = 0.05, and continued with DMRT at the same level.
This result shows that the kind of substrates effect to antioxidant activity and anticholesterol content on red yeast rice. Rice substrates have higher antioxidant activity and anticholesterol content than the corn substrates and dried cassava substrates. Antioxidant activity and anticholesterol content on red yeast rice by rice substrates successively 45,6100% and 0,026600%. Antioxidant activity and anticholesterol content on red yeast rice by corn substrates successively 44,0500% and 0,022833%, while antioxidant activity and anticholesterol content on red yeast rice by dried cassava substrates successively 42,8333% and 0,013200%.
Key word : rice, corn, dried cassava, Monascus purpureus, red yeast rice, antioxidant activity, anticholesterol.
I. PENDAHULUAN
A. Latar belakang
Angkak merupakan salah satu produk fermentasi beras dengan
menggunakan kapang Monascus sp (Ardiansyah, 2005). Melalui proses
xii
fermentasi fasa padat dengan menggunakan kapang dari Monascus, butir beras
yang tadinya berwarna putih akan diselimuti pigmen merah yang dihasilkan
selama fermentasi. Metabolit yang terbentuk selama proses fermentasi
umumnya berupa senyawa-senyawa poliketida seperti monascin, ankaflavin,
rubropuctatin dan monascorubrin yang merupakan pigmen warna. Selain itu,
proses fermentasi juga menghasilkan beberapa senyawa metabolit sekunder
bentuk poliketida lain seperti monakolin K yang identik dengan lovastatin atau
mevinolin serta senyawa monakolin lainnya yang berfungsi sebagai
antikolesterol (Tisnadjaja, 2006).
Senyawa antioksidan memiliki peran yang sangat penting dalam
kesehatan. Berbagai bukti ilmiah menunjukkan bahwa senyawa antioksidan
mengurangi resiko terhadap penyakit kronis seperti kanker dan penyakit
jantung koroner. Karakter utama senyawa antioksidan adalah kemampuannya
untuk menangkap radikal bebas. Radikal bebas merupakan molekul yang
sangat reaktif karena memiliki elektron yang tidak berpasangan dalam orbital
luarnya sehingga dapat bereaksi dengan molekul sel tubuh dengan cara
mengikat elektron molekul sel tersebut (Amrun dan Umiyah, 2005). Karena
secara kimia molekulnya tidak lengkap, radikal bebas cenderung mengambil
partikel sel dari molekul lain, yang kemudian menimbulkan senyawa tidak
normal dan memulai reaksi berantai yang dapat merusak sel-sel penting dalam
tubuh (Anonima, 2009).
Menurut Albert (1989) dalam Aryantha, dkk. (2004), lovastatin
digolongkan ke dalam kelompok obat statin. Lovastatin sebagai agen
hiperkolesterolemia mampu menurunkan kadar serum kolesterol, LDL,
trigliserol dan VLDL dalam darah. Amita (2006), menyatakan bahwa
dibanding penurun kolesterol lainnya (pengikat asam empedu, asam nikotinat,
asam fibrat, penghambat absorpsi kolesterol), statin memiliki efek penurunan
LDL-C terbesar. Sehingga statin dijadikan obat utama untuk mengatasi
hiperkolesterolemia
Menurut Jenie, dkk. (1994), angkak secara tradisional diproduksi
dengan meggunakan substrat beras. Pada umumnya, angkak yang beredar di
1
xiii
pasaran terdapat dalam bentuk beras utuh. Winarno dan Titi (1994)
menyatakan bahwa berbagai varietas beras dapat digunakan untuk
memproduksi angkak, namun beras pera yang memiliki kadar amilosa tinggi
lebih cocok digunakan untuk memproduksi angkak daripada beras dengan
amilosa rendah.
Berbagai varietas beras dapat digunakan sebagai medium pertumbuhan
kapang M. purpureus. Santoso (1985) dalam Kasim, dkk. (2006) melaporkan
bahwa beras pera dengan intensitas amilosa yang tinggi dan amilopektin yang
rendah merupakan substrat yang baik untuk pembuatan angkak dan kandungan
lovastatinnya. Beras yang lengket atau ketan mempunyai intensitas amilosa
yang sangat rendah (<9%), beras yang sangat pulen mempunyai kandungan
amilosa yang rendah (9-20%), beras yang pulen berintensitas amilosa tinggi
(20-25%), sedangkan beras pera memiliki intensitas amilosa yang lebih tinggi
yakni 25-30%. Kandungan protein pada beras umumnya berkisar antara 6-
10%.
Substrat beras biasa digunakaan dalam produksi pigmen angkak.
Substrat lainnya adalah jagung, singkong, tepung tapioka dan gaplek, ubi,
sagu, terigu, suweg dan kentang serta campuran onggok-ampas tahu (Yuan,
1980 dalam Kasim, dkk., 2006). Sedangkan Rahayu, dkk. (1993) menyatakan
bahwa bahan berkarbohidrat lain seperti jagung dan cantel dapat pula
digunakan sebagai media pertumbuhan dalam pembuatan angkak.
Jagung merupakan salah satu jenis bahan makanan yang mengandung
sumber hidrat arang yang dapat digunakan untuk menggantikan (mensubtitusi)
beras karena jagung memiliki kalori yang hampir sama dengan kalori yang
terkandung pada padi. Kandungan protein dan karbohidratnya pun hampir
mendekati protein dan karbohidrat pada padi (Anonim, 1993). Menurut Suarni
dan Widowati (2005), komponen utama jagung adalah pati, yaitu sekitar 70%
dari bobot biji. Komponen karbohidrat lain adalah gula sederhana, yaitu
glukosa, sukrosa dan fruktosa, 1-3% dari bobot biji. Pati terdiri atas dua jenis
polimer glukosa, yaitu amilosa dan amilopektin. Komposisi amilosa dan
amilopektin di dalam biji jagung terkendali secara genetik.
xiv
Gaplek merupakan salah satu cara pengolahan ubi kayu yang paling
sederhana. Gaplek terutama mengandung zat pati seperti halnya beras. Tetapi
berbeda dengan beras, jagung dan padi-padian lain, gaplek hanya memiliki
kadar protein yang sangat rendah (Hastuti dan Rahardjo, 1983). Dari gaplek
ubi kayu dapat dibuat tiwul, gatot dan dan macam-macam makanan lainnya
(Tjokroadikoesoemo, 1986).
Berdasarkan latar belakang di atas maka perlu dilakukan penelitian
mengenai pembuatan angkak dengan menggunakan substrat beras, jagung dan
gaplek. Penelitian ini dicobakan dengan menggunakan substrat berupa beras,
jagung dan gaplek yang merupakan komoditi lokal yang masih jarang
digunakan sebagai bahan baku dalam pembuataan angkak. Pemilihan jagung
dan gaplek sebagai substrat dalam pembuatan angkak dikarenakan jagung dan
gaplek memiliki kandungan karbohidrat yang hampir setara dengan beras
selain itu juga harganya lebih murah. Penelitian ini juga bertujuan untuk
menguji aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol (lovastatin) dalam
angkak yang dibuat dari beras, jagung dan gaplek yang diinokulasi dengan
Monascus purpureus.
B. Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang yang dikemukakan di atas, dapat dirumuskan
permasalahan sebagai berikut :
1. Bagaimanakah pengaruh jenis substrat (beras, jagung dan gaplek)
terhadap sifat aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol (lovastatin)
dalam angkak ?
2. Jenis substrat manakah yang mampu menghasilkan aktivitas antioksidan
dan kadar antikolesterol (lovastatin) paling tinggi pada angkak ?
C. Tujuan penelitian
Tujuan dari penelitian ini yaitu:
1. Mengetahui pengaruh variasi jenis substrat (beras, jagung dan gaplek)
terhadap aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol pada angkak.
xv
2. Mengetahui jenis substrat yang mampu menghasilkan aktivitas antioksidan
dan kadar antikolesterol paling tinggi pada angkak.
D. Manfaat Penelitian
Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi
ilmiah yang dapat bermanfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan dan
teknologi di bidang pertanian dan pangan pada khususnya, mengenai potensi
beras, jagung dan gaplek dalam pembuatan angkak. Selain itu, penelitian ini
dapat memberikan acuan untuk memilih bahan baku dalam pembuatan angkak
sehingga dapat menghasilkan angkak dengan aktivitas antioksidan dan kadar
antikolesterol yang tinggi.
II. LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Pustaka
1. Beras
Menurut Anonimb (2009), kata “beras” mengacu pada bagian bulir
padi (gabah) yang telah dipisah dari sekam. Sekam (Jawa merang) secara
anatomi disebut “palea” (bagian yang ditutupi) dan “lemma” (bagian yang
menutupi). Taksonomi tanaman padi sebagai berikut:
Division : Spermatophyta
Sub divisio : Angiospermae
Klas : Monocotyledoneae
Ordo : Poales
Familia : Poaceae
Genus : Oryza
Spesies : Oryza sativa
(Anonimb, 2009)
Beras merupakan sereal yang paling populer di Indonesia. Dalam
pengertian sehari-hari yang dimaksud beras adalah gabah yang bagian
kulitnya sudah dibuang dengan cara digiling dan disosoh menggunakan
alat pengupas dan penggiling (huller) serta penyosoh (polisher). Gabah
xvi
yang hanya terkupas bagian kulit luarnya (sekam) disebut beras pecah kulit
(brown rice). Beras pecah kulit tersusun atas perikarp 1-2%, aleuron dan
testa 4-6%, embrio 2-3% dan endosperm 89-94%. Sedangkan beras pecah
kulit yang seluruh atau sebagian dari kulit arinya telah dipisahkan dalam
proses penyosohan disebut beras giling (milled rice). Beras yang biasa
dikonsumsi atau dijual di pasar adalah dalam bentuk beras giling. Proses
penggilingan dan penyosohan yang baik akan menghasilkan butiran beras
utuh (beras kepala) yang maksimal dan beras patah yang minimal
(Muchtadi dan Sugiyono, 1992).
Kadar zat gizi yang terdapat dalam beras dari varietas-varietas
yang berlainan tidaklah sama. Terutama kadarnya akan zat putih telur
terdapat perbedaan yang agak tinggi antara suatu varietas dengan varietas
lainnya. Perbedaan akan kadar zat gizi putih telur ini disebabkan oleh
pembawaan atau sifat varietas (Siregar, 1981).
Nilai nutrisi beras dapat dilihat pada Tabel 2.1 di bawah ini.
Tabel 2.1 Nilai Nutrisi Beras (per 100 gram Porsi Makanan) Nutrisi Beras
Komponen Utama Mineral Air, 10.46 g Energi, 370 kcal Energi, 1548 kj Protein, 6.81 g Total Lemak, 0.55 g Karbohidrat, 81.68 g Serat, 2.8 g Ampas, 0.49 g
Kalsium, Ca, 11 mg Besi, Fe, 1.6 mg Magnesium, Mg, 23 mg Phospor, P, 71 mg Potassium, K, 77 mg Sodium, Na, 7 mg Seng, Zn, 1.2 mg Tembaga, Cu, 0.171 mg Mangan, Mn, 0.974 mg Selenium, Se, 15.1 mcg
Asam Amino Vitamin Tryptophan, 0.079 g Threonine, 0.244 g Isoleucine, 0.294 g Leucine, 0.563 g Lysine, 0.246 g Methionine, 0.16 g Cystine, 0.14 g Phenylalanine, 0.364 g Tyrosine, 0.228 g
Vitamin C, 0 mg Thiamin, 0.18 mg Riboflavin, 0.055 mg Niacin, 2.145 mg Asam Pantothenic, 0.824 mg Vitamin B-6, 0.107 mg Folate, 7 mcg Vitamin B-12, 0 mcg Vitamin A, 0 IU
5
xvii
Valine, 0.416 g Arginine, 0.568 g Histidine, 0.16 g Alanine, 0.395 g Asam Aspartic, 0.64 g Asam Glutamic, 1.328 g Glycine, 0.31 g Proline, 0.321 g Serine, 0.358 g
Vitamin A, RE, 0 mcg_RE
Sumber : Anonimc, 2009
Komposisi kimiawi dari beras dan beberapa pangan lainnya dapat
dilihat pada Tabel 2.2 di bawah ini.
Tabel 2.2 Komposisi Kimiawi dari Beras dan Beberapa Pangan Lainnya
Bahan makanan Kadar (%) Protein Lemak Hidrat arang Air
Beras pecah kulit 8 0,6 76 12 Jagung kuning 10 5 68 15 Ubi kayu 1 0,9 37 51 Ubi jalar - 0,5 27 64 Kentang 2 0,2 21 73
Sumber : Siregar, 1981
Sebagaimana bulir serealia lain, bagian terbesar beras didominasi
oleh pati (sekitar 80-85%). Beras juga mengandung protein, vitamin
(terutama pada bagian aleuron), mineral dan air. Pati beras dapat
digolongkan menjadi dua kelompok yaitu amilosa (pati dengan struktur
tidak bercabang) dan amilopektin (pati dengan struktur bercabang).
Komposisi kedua golongan pati ini sangat menentukan warna (transparan
atau tidak) dan tekstur nasi (lengket, lunak, keras, atau pera) (Anonim,
2006).
Astawan (2006) menyatakan bahwa komponen kimia beras
berbeda-beda tergantung pada varietas dan cara pengolahannya. Selain
sebagai sumber energi dan protein, beras juga mengandung berbagai unsur
mineral dan vitamin. Sebagian besar karbohidrat beras adalah pati (85-
90%), sebagian kecil pentosan, selulosa, hemiselulosa dan gula. Dengan
demikian sifat fisikokimia beras terutama ditentukan oleh sifat fisikokimia
xviii
patinya. Sebagian besar butir beras terdiri dari karbohidrat jenis pati.
Hampir 90% berat kering beras adalah pati yang terdapat dalam bentuk
granula. Pati beras terbentuk oleh dua jenis molekul polisakarida, yang
masing-masing merupakan polimer dari glukosa. Kedua molekul tersebut
adalah amilosa dan amilopektin.
Beras biasa mengandung amilosa tinggi yaitu lebih besar dari 2%.
Secara umum varietas beras biasa dapat digolongkan ke dalam 3 golongan
berdasarkan pada kandungan amilosanya yaitu : golongan amilosa rendah,
sedang dan tinggi. Beras dengan golongan amilosa rendah jika mempunyai
kandungan amilosa 10-20%, misalnya beras cisadane dengan kandungan
amilosa 20%. Apabila kandungan amilosa beras antara 20-25% maka
dapat digolongkan ke dalam amilosa sedang, contohnya adalah beras IR 64
dengan kandungan amilosa 24%, dan golongan amilosa tinggi dengan
kandungan amilosa 25-32%, contohnya adalah beras IR 36 dengan
kandungan amilosa 25% (Riwan, 2008).
Berbagai varietas beras dapat digunakan sebagai medium
pertumbuhan kapang M. purpureus. Santoso (1985) dalam Kasim, dkk.
(2006) melaporkan bahwa beras pera dengan intensitas amilosa yang
tinggi dan amilopektin yang rendah merupakan substrat yang baik untuk
pembuatan angkak dan kandungan lovastatinnya. Beras mempunyai
kandungan amilosa yang berkaitan erat dengan tingkat kepulenannya.
Beras dengan struktur lengket atau ketan mempunyai intensitas amilosa
yang sangat rendah (<9%), beras yang sangat pulen mempunyai
kandungan amilosa yang rendah (9-20%), beras yang pulen berintensitas
amilosa tinggi (20-25%), sedangkan beras pera memiliki intensitas amilosa
yang lebih tinggi yakni 25-30%. Kandungan protein pada beras umumnya
berkisar antara 6-10%. Winarno dan Titi (1994) menyatakan bahwa
semakin tinggi kadar amilosa beras semakin sesuai untuk produksi angkak.
Sedangkan ketan tidak cocok untuk produksi angkak karena kelekatannya.
2. Jagung
xix
Jagung (Zea mays L.) merupakan salah satu tanaman pangan dunia
yang terpenting, selain gandum dan padi. Sebagai sumber karbohidrat
utama di Amerika Tengah dan Selatan, jagung juga menjadi alternatif
sumber pangan di Amerika Serikat. Penduduk beberapa daerah di
Indonesia (misalnya di Madura dan Nusa Tenggara) juga menggunakan
jagung sebagai pangan pokok. Selain sebagai sumber karbohidrat, jagung
juga ditanam sebagai pakan ternak (hijauan maupun tongkolnya), diambil
minyaknya (dari biji), dibuat tepung (dari biji, dikenal dengan istilah
tepung jagung atau maizena) dan bahan baku industri (dari tepung biji dan
tepung tongkolnya). Tongkol jagung kaya akan pentosa, yang dipakai
sebagai bahan baku pembuatan furfural. Jagung yang telah direkayasa
genetika juga sekarang ditanam sebagai penghasil bahan farmasi
(Anonimd, 2009).
Sistematika taksonomi tanaman jagung adalah sebagai berikut
Kingdom : Plantae (tumbuh-tumbuhan)
Divisio : Spermatophyta (tumbuhan berbiji)
SubDivisio : Angiospermae (berbiji tertutup)
Classis : Monocotyledone (berkeping satu)
Ordo : Graminae (rumput-rumputan)
Familia : Graminaceae
Genus : Zea
Species : Zea mays L.
(Anonimd, 2009).
Jagung merupakan salah satu jenis bahan makanan yang
mengandung sumber hidrat arang yang dapat digunakan untuk
menggantikan (mensubstitusi) beras karena jagung memiliki kalori yang
hampir sama dengan kalori yang terkandung pada padi. Kandungan protein
dan karbohidratnya pun hampir mendekati protein dan karbohidrat pada
padi (Anonim, 1993).
Nilai nutrisi jagung putih dapat dilihat pada Tabel 2.3 di bawah ini.
xx
Tabel 2.3 Nilai Nutrisi Jagung Putih (per 100 gram Porsi Makanan)
Nutrisi Jagung Putih Komponen Utama Mineral
Air, 75.9 g Energi, 86 kcal Energi, 360 kj Protein, 3.22 g Total Lemak, 1.18 g Karbohidrat, 19.02 g Serat, 2.7 g Ampas, 0.62 g
Kalsium, Ca, 2 mg Besi, Fe, 0.52 mg Magnesium, Mg, 37 mg Phospor, P, 89 mg Potassium, K, 270 mg Sodium, Na, 15 mg Seng, Zn, 0.45 mg Tembaga, Cu, 0.054 mg Mangan, Mn, 0.161 mg Selenium, Se, 0.6 mcg
Asam Amino Vitamin Tryptophan, 0.023 g Threonine, 0.129 g Isoleucine, 0.129 g Leucine, 0.348 g Lysine, 0.137 g Methionine, 0.067 g Cystine, 0.026 g Phenylalanine, 0.150 g Tyrosine, 0.123 g Valine, 0.185 g Arginine, 0.131 g Histidine, 0.089 g Alanine, 0.295 g Asam Aspartic, 0.244 g Asam Glutamic, 0.636 g Glycine, 0.127 g Proline, 0.292 g Serine, 0.153 g
Vitamin C, 6.8 mg Thiamin, 0.2 mg Riboflavin, 0.06 mg Niacin, 1.7 mg Asam Pantothenic, 0.76 mg Vitamin B-6, 0.055 mg Folate, 45.8 mcg Vitamin B-12, 0 mcg Vitamin A, 0 IU Vitamin A, RE, 0 mcg_RE Vitamin E, 0.09 mg_ATE
Sumber : Anonime, 2009
xxi
Kadar kalori, protein dan karbohidrat pada berbagai makanan
mentah dapat dilihat pada Tabel 2.4 di bawah ini.
Tabel 2.4 Kadar Kalori, Protein dan Karbohidrat pada Berbagai Makanan Mentah (dalam 100 gram)
Bahan mentah
Kadar kalori (kal)
Kadar protein (gr)
Kadar KH (gr)
Beras/padi 350 8 73 Jagung 320 8 63 Ubi kayu basah 136 1,2 32 Gaplek tepung 352 1,5 85 Ketela rambat 125 1,8 28 Kentang 85 2 19 Sagu 341 - 85 Cantel 304 9 58
Sumber : Anonim, 1993
Komponen utama jagung adalah pati, yaitu sekitar 70% dari bobot
biji. Komponen karbohidrat lain adalah gula sederhana, yaitu glukosa,
sukrosa dan fruktosa, 1-3% dari bobot biji. Pati terdiri atas dua jenis
polimer glukosa, yaitu amilosa dan amilopektin. Komposisi amilosa dan
amilopektin di dalam biji jagung terkendali secara genetik. Secara umum,
baik jagung yang mempunyai tipe endosperma gigi kuda (dent) maupun
mutiara (flint), mengandung amilosa 25-30% dan amilopektin 70-75%.
Namun jagung pulut (waxy maize) dapat mengandung 100% amilopektin
(Suarni dan Widowati, 2005).
Kandungan amilosa biji jagung dari beberapa varietas dapat dilihat
pada Tabel 2.5 di bawah ini.
Tabel 2.5 Kandungan Amilosa Biji Jagung dari Beberapa Varietas
xxii
Varietas Amilosa (%) Amilopektin(%)
Srikandi Putih 31,05 68,95
Srikandi Kuning 30,14 69,86 Anoman 29,92 70,08 Lokal nonpulut 28,50 71,50 Lokal pulut 4,25 95,75 Sukmaraga 34,55 65,45
Sumber: Suarni (2005) dalam Suarni dan Widowati (2005)
Menurut Richana dan Suarni (2005), dibanding sumber pati lain,
jagung mempunyai beragam jenis pati, mulai dari amilopektin rendah
sampai tinggi. Jagung dapat digolongkan menjadi empat jenis berdasarkan
sifat patinya, yaitu jenis normal mengandung 74-76% amilopektin dan 24-
26% amilosa, jenis waxy mengandung 99% amilopektin, jenis amilomaize
mengandung 20% amilopektin atau 40-70% amilosa, dan jagung manis
mengandung sejumlah sukrosa di samping pati. Jagung normal
mengandung 15,3-25,1% amilosa, jagung jenis waxy hampir tidak
beramilosa, jagung amilomize mengandung 42,6-67,8% amilosa, jagung
manis mengandung 22,8% amilosa.
Biji jagung tersusun dalam tongkol dengan susunan teratur
memanjang dan ditutup oleh seludang (klobot). Terdapat juga susunan biji
yang teratur (mozaik). Diameter tongkol adalah 3-5 cm dan mengandung
biji 300-1000 biji. Warna butir jagung bermacam-macam : putih, kuning,
jingga kemerah-merahan bahkan ada yang kebiruan, ungu dan hitam.
Berdasarkan bentuk butir dapat dibedakan atas 5 jenis sebagai berikut :
a. Jagung keras (flint), butirnya keras dan rata bagian ujungnya.
b. Jagung lekuk (dent) butirnya keras tetapi bagian ujungnya mempunyai
permukaan yang berlekuk.
c. Jagung manis, butirnya lemah, berlekuk dan rasanya manis.
d. Jagung tepung, khusus untuk menghasilkan tepung.
e. Jagung berondong (popcorn), butirnya kecil-kecil tetapi akan pecah dan
mekar bila digoreng (Syarief dan Irawati, 1988).
Jagung mengandung karbohidrat sekitar 71-73% yang terutama
terdiri dari pati, sebagian kecil gula dan serat. Pati terutama terdapat di
xxiii
bagian endosperma, gula terutama di lembaga dan serat pada bagian kulit
(Syarief dan Irawati, 1988).
Berdasarkan warna biji, jagung dapat dibedakan menjadi dua yaitu
jagung kuning dan jagung putih. Jagung putih lebih disukai dalam industri
pangan, sedangkan jagung kuning banyak dipakai untuk pakan. Tipe biji
tergantung pada komposisi endosperma. Endosperma jagung terdiri dari
jagung keras (horny) dan bagian tepung lunak (floury) (Subandi, dkk.,
1988).
Menurut Rahayu, dkk. (1993), secara tradisional pembuatan
angkak dilakukan dengan menggunakan bahan dasar beras sebagai substrat
atau media tumbuh jamur Monascus purpureus. Namun demikian,
penelitian menunjukkan bahwa bahan berkarbohidrat lain seperti jagung
dan cantel dapat pula digunakan sebagai media pertumbuhan.
3. Gaplek Singkong
Ubi kayu (Manihot esculenta Crantz) telah di kenal di Indonesia
sejak awal abad ke-19 dan sering disebut singkong atau ketela pohon.
Sebagai bahan pangan utama di Indonesia, ubi kayu menduduki tempat
ketiga setelah padi dan jagung (Affandi, 1906 dalam Setyono, dkk., 1990).
Menurut Tjokroadikoesoemo (1986), karena sifat-sifatnya yang
mudah dan mampu berproduksi tinggi sekalipun ditanam di tanah kering,
ubi kayu dapat berperan sebagai sumber bahan pangan yang murah dan
mudah didapat, terurama oleh penduduk pedesaan dan daerah pegunungan
terpencil yang di tempat itu bahan makanan yang lebih mahal dan bergizi
harganya tidak terjangkau oleh penduduk.
Klasifikasi tanaman singkong adalah sebagai berikut:
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Sub Divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Euphorbiales
xxiv
Famili : Euphorbiaceae
Genus : Manihot
Spesies : Manihot utilissima Pohl.; Manihot esculenta Crantz sin
(Prihatman, 2000 dalam Wahyu 2008).
Ubi kayu (Manihot esculenta Crantz) dapat diklasifikasikan
berdasarkan beberapa hal, seperti warna daging, rasa daging, dan besar
kadar racun sianida dalam umbi. Berdasarkan warna daging umbi, ubi
kayu (Manihot esculenta Crantz) dibedakan menjadi dua macam, yaitu ubi
kayu kuning dan ubi kayu putih. Berdasarkan rasa umbinya, ubi kayu
dibedakan menjadi dua golongan, yaitu ubi kayu pahit dan ubi kayu manis.
Rasa pahit ubi disebabkan oleh kandungan asam sianida dalam umbi.
Semakin besar kandungan asam sianida, maka rasanya akan semakin pahit
(Winarno, 1981).
Nilai nutrisi singkong dapat dilihat pada Tabel 2.6 di bawah ini.
Tabel 2.6 Nilai Nutrisi Singkong (per 100 gram Porsi Makanan) Nutrisi Singkong
Komponen Utama Mineral Air, 59.68 g Energi, 160 kcal Energi, 669 kj Protein, 1.36 g Total lemak, 0.28 g Karbohirat, 38.05 g Serat, 1.8 g Ampas, 0.62 g
Kalsium, Ca, 16 mg Besi, Fe, 0.27 mg Magnesium, Mg, 21 mg Phospor, P, 27 mg Potassium, K, 271 mg Sodium, Na, 14 mg Seng, Zn, 0.34 mg Tembaga, Cu, 0.1 mg Mangan, Mn, 0.384 mg Selenium, Se, 0.7 mcg
Asam Amino Vitamin Tryptophan, 0.019 g Threonine, 0.028 g Isoleucine, 0.027 g Leucine, 0.039 g Lysine, 0.044 g Methionine, 0.011 g Cystine, 0.028 g Phenylalanine, 0.026 g Tyrosine, 0.017 g Valine, 0.035 g Arginine, 0.137 g Histidine, 0.02 g
Vitamin C, 20.6 mg Thiamin, 0.087 mg Riboflavin, 0.048 mg Niacin, 0.854 mg Asam Pantothenic, 0.107 mg Vitamin B-6, 0.088 mg Folate, 27 mcg Vitamin B-12, 0 mcg Vitamin A, 25 IU Vitamin A, RE, 2 mcg_RE Vitamin E, 0.19 mg_ATE
xxv
Alanine, 0.038 g Asam Aspartic, 0.079 g Asam Glutamic, 0.206 g Glycine, 0.028 g Proline, 0.033 g Serine, 0.033 g
Sumber: Anonimf, 2009
Pati singkong mengandung 83% amilopektin (Chan, 1983 dalam
Wahyu, 2008). Menurut Kearsley and Dziedzic (1995) dalam Hidayat
(2008), dibandingkan pati lainnya, pati ubi kayu mengandung amilopektin
yang tinggi (87%). Sedangkan menurut Ceballos (2007), singkong
tradisional memiliki kandungan amilosa antara 17-25%.
Gaplek adalah salah satu produk usaha pengawetan untuk
memperpanjang masa simpan ubi kayu. Ubi kayu segar biasanya hanya
memiliki masa simpan selama 2-3 hari saja. Gaplek pada pengertian umum
adalah hasil pengeringan dari ubi kayu segar yang telah dikupas kulitnya
dan dicuci. Biasanya pengeringan tersebut dilakukan dengan cara
penjemuran di bawah sinar matahari. Gaplek yang dihasilkan biasanya
berwarna putih sampai putih kekuning-kuningan, berbau agak asam dan
mempunyai kadar air 10-12% (Yulineri, dkk., 1997).
Ubi kayu dalam keadaan segar tidak tahan lama. Untuk pemasaran
yang memerlukan waktu lama, ubi kayu harus diolah dulu menjadi bentuk
lain yang lebih awet, seperti gaplek, tapioka, tapai, peuyeum, keripik
singkong dan lain-lain (Anonim, 2000). Gaplek merupakan ubi kayu yang
telah dikupas kulitnya, kemudian dibelah menurut sumbunya menjadi dua
atau empat, kemudian dijemur. Penjemuran dapat dilakukan dengan cara
bahan ditempatkan di atas atap, dijemur di atas tanah dengan alas ataupun
tidak dan digantung. Dari gaplek ubi kayu dapat dibuat tiwul, gatot dan
dan macam-macam panganan lainnya (Tjokroadikoesoemo, 1986).
Menurut Hastuti dan Rahardjo (1983), gaplek ialah ubi kayu tak
berkulit yang dikeringkan. Sesuai dengan bentukya, gaplek ini ada yang
berasal dari ubi kayu yang utuh, yang dibelah, ada yang berasal dari irisan
ubi maupun serutan ubi. Gaplek umumnya berwarna putih kotor dibagian
xxvi
luarnya dan putih kekuningan serta bersih di bagian dalamnya. Gaplek
terutama mengandung zat pati seperti halnya beras. Tetapi berbeda dengan
beras, jagung dan padi-padian lain, gaplek hanya memiliki kadar protein
yang sangat rendah. Damarjati dan Widowati (1993), menyatakan bahwa
gaplek yang dibuat secara tradisional mempunyai mutu yang rendah
(berwarna coklat kehitaman), cepat diserang serangga dan hanya
mempunyai masa simpan selama 1-2 bulan.
Persyaratan mutu gaplek dapat dilihat pada Tabel 2.7 di bawah ini.
Tabel 2.7 Persyaratan Mutu/ Kualitas Gaplek Singkong (dalam persen) Jenis mutu Kadar air
Maks (%) Kadar pati maks (%)
Kadar serat Maks (%)
Kadar kotoran maks (%)
Mutu I 14 70 4 4 Mutu II 14 68 5 5,5 Mutu III 15 65 6 7
Sumber : Hastuti, 1983
Ampas tapioka dalam medium limbah cair tapioka dapat digunakan
sebagai sumber karbon pengganti tepung beras untuk produksi angkak
oleh M. purpureus, dalam sistem fermentasi cair. Bahkan mampu
meningkatkan intensitas pignen merah yang dihasilkan (Jenie, dkk., 1994).
4. Angkak
Angkak adalah produk fermentasi beras menggunakan kapang
Monascus sp. Angkak berasal dari China. Pembuatan pertama dilakukan
oleh dinasti Ming yang berkuasa pada abad ke-14 sampai abad ke-17.
Dalam teks tradisional The Anchient Chinese Pharmacopoenia disebutkan
bahwa angkak digunakan sebagai obat untuk melancarkan pencernaan dan
sirkulasi darah. Di beberapa negara Asia seperti Taiwan, Jepang, Korea
dan Hongkong, angkak diproduksi untuk keperluan sebagai pewarna alami
makanan (Ardiansyah, 2005).
Menurut Rahayu, dkk. (1993), angkak merupakan hasil fermentasi
beras menggunakan jamur Monascus purpureus yang menghasilkan
pigmen merah dan kuning. Pigmen yang dihasilkan mempunyai kestabilan
xxvii
yang tinggi, mudah dicerna dan tidak beracun. Produk ini mula-mula
berasl dari cina, kemudian disebarluaskan oleh para pembuat “rice wine”
ke taiwan. Angkak banyak dikenal dengan nama anka, red rice, chinnese
red rice, ankak, angquac, beni koji dan aga koji.
Mikroorganisme yang berperan dalam fermentasi angkak adalah
Monascus purpureus (Steinkraus, 1996). Menurut Hesseltine (1965) dalam
Rahayu, dkk. (1993), jamur Monascus purpureus diklasifikasikan sebagai
berikut :
Divisio : Amastigomycotina
Sub Divisio : Ascomycotina
Classis : Ascomycetes
Sub Classis : Plectomycetidae
Ordo : Eurotiales
Familia : Monascaceae
Genus : Monascus
Melalui proses fermentasi fasa padat dengan menggunakan kapang
dari Monascus, yang terkadang disebut kapang merah, beras yang semula
putih bersih akan berubah menjadi merah. Bulir-bulir beras yang tadinya
berwarna putih akan diselimuti pigmen merah yang dihasilkan selama
fermentasi. Metabolit yang terbentuk selama proses fermentasi umumnya
berupa senyawa-senyawa poliketida seperti monascin, ankaflavin,
rubropuctatin dan monascorubrin yang merupakan pigmen warna. Selain
itu, proses fermentasi juga menghasilkan beberapa senyawa metabolit
sekunder bentuk poliketida lain seperti monakolin K yang identik dengan
lovastatin atau mevinolin serta senyawa monakolin lainnya (Tisnadjaja,
2006).
Salah satu fenomena unik dari jamur M. purpureus adalah
kemampuan untuk menghasilkan cairan granular melalui ujung hifa. Pada
saat jamur masih muda, cairan yang dikeluarkan tidak berwarna tetapi
cairan tersebut secara perlahan-lahan berubah menjadi merah kekuningan
xxviii
atau merah oranye. Produksi pigmen angkak tersebut tidak hanya terdapat
pada cairan yang dikeluarkan tetapi juga pada bagian dalam hifa. Warna
merah tersebut mampu mendifusi ke dalam substrat. Warna merah tersebut
terdiri dari dua macam pigmen, yang merah yaitu monascorubrin
(C22H24O5) dan kuning yaitu monascoflavin (C17H22O4) (Steinkraus, 1983
dalam Rahayu, dkk., 1993).
Menurut Suwanto (1985) dalam Kasim, dkk. (2005), terdapat enam
komponen utama dari pigmen yang dihasilkan oleh M. purpureus. Keenam
pigmen tersebut adalah rubropunktatin (merah), monaskorubrin (merah),
monaskin (kuning), ankaflavin (kuning), rubropunktamin (ungu) dan
monaskorubramin (ungu).
Angkak dibuat dari beras sebagai substrat dengan fermentasi padat.
Beras yang digunakan adalah beras pera karena memiliki kadar amilosa
tinggi tetapi rendah amilopektin. Dengan memasukkan sekitar 25 gram
nasi ke dalam cawan petri, yang kemudian disterilisasi menggunakan
otoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit, sterilisasi ini dilakukan. Usai
tahap ini, didinginkan hingga 36oC, kemudian diinokulasi dengan 2 gram
inokulum Monascus purpureus. Setelah itu, campurkan diaduk hingga rata
dan diinkubasikan pada suhu 27-32oC selama 14 hari. Selama masa
inkubasi, kapang Monascus purpureus akan tumbuh dan berkembang biak
dengan cepat, menutupi permukaan beras dengan pigmen merah (Astawan,
2006).
Menurut Hesseltine (1965) dalam Steinkraus (1996), pembuatan
angkak dalam skala laboratorium dapat dilakukan dengan memasukkan 50
gram beras dan air sebanyak 30 ml ke dalam gelas beker yang tertutup
guna mencegah terjadinya kontaminasi yang dapat terjadi karena udara.
Atau dapat dilakukan dengan mencuci beras tersebut, kemudian dilakukan
perendaman selama 24 jam dan ditiriskan. Selanjutnya gelas beker yang
berisi beras disterilkan dengan autoklaf hingga diperoleh beras yang steril
dan didinginkan pada suhu kamar. Kemudian dilakukan inokulasi dengan
menambahkan 5 ml inokulum berupa suspensi askospora dari kultur M.
xxix
purpureus berumur 25 hari yang ditumbuhkan pada media Sabaround’s
agar, media yang sangat baik bagi pertumbuhan dan produksi pigmen.
Inkubasi dilakukan pada suhu 25-30oC. Selama inkubasi, beras menjadi
memerah dan menghasilkan panas. Pada saat itu, sebaiknya dilakukan
pengadukan sehingga uap air yang ada tidak mengendap dan pada akhir
fermentasi bisa diperoleh biji angkak yang tidak melekat satu sama lain.
Selanjutnya dilakukan pengeringan angkak pada suhu 40oC (Sooksan and
Gongsakdi, 1982 dalam Steinkraus, 1996).
5. Antioksidan
Antioksidan merupakan zat yang berfungsi melindungi tubuh dari
serangan radikal bebas. Yang termasuk ke dalam golongan zat ini antara
lain vitamin, polipenol, karotin dan mineral (Anonim, 2008). Antioksidan
merupakan senyawa yang dapat menghambat spesies oksigen
reaktif/spesies nitrogen reaktif (ROS/RNS) dan juga radikal bebas
sehingga antioksidan dapat mencegah penyakit-penyakit yang
dihubungkan dengan radikal bebas seperti arsinogenesis, kardiovaskuler
dan penuaan (Halliwell and Gutteridge, 2000 dalam Rohman dan Riyanto,
2005).
Antioksidan alam telah lama diketahui menguntungkan untuk
dipergunakan dalam bahan pangan karena umumnya derajat toksisitasnya
rendah, sedangkan antioksidan sintetik banyak digunakan pada bahan non
pangan (Cahyadi, 2006). Menurut Santoso (2006), antioksidan dalam
kaitan ini adalah substansi atau senyawa yang ditambahkan dalam lemak
atau pangan berlemak untuk mencegah oksidasi sehingga memperpanjang
daya simpannya. Idealnya, antioksidan yang digunakan dalam pangan
harus memenuhi syarat-syarat sebagai berikut : (1) tidak memberikan efek
yang secara fisiologi berbahaya; (2) tidak memberikan flavor, bau atau
warna yang tidak dikehendaki pada pangan yang diawetkan; (3) efektif
pada konsentrasi rendah; (4) larut dalam lemak atau minyak; (5) bertahan
xxx
sehingga memberikan perlindungan pada pangan; (6) mudah tersedia dan
cukup murah.
Radikal bebas adalah molekul yang sangat reaktif karena memiliki
elektron yang tidak berpasangan dalam orbital luarnya sehingga dapat
bereaksi dengan molekul sel tubuh dengan cara mengikat elektron molekul
sel tersebut (Amrun dan Umiyah, 2005). Karena secara kimia molekulnya
tidak lengkap, radikal bebas cenderung mengambil partikel sel dari
molekul lain, yang kemudian menimbulkan senyawa tidak normal dan
memulai reaksi berantai yang dapat merusak sel-sel penting dalam tubuh
(Anonima, 2009).
Menurut Sianturi (2006), polusi udara, asap rokok, alkohol, emisi
kendaraan bermotor, dan sinar ultraviolet yang berlebihan adalah faktor-
faktor eksternal yang memacu pertumbuhan radikal bebas di dalam tubuh
manusia. Anonima (2009) menambahkan jika di suatu tempat terjadi reaksi
oksidasi dimana reaksi tersebut menghasilkan hasil samping berupa radikal
bebas (·OH) maka tanpa adanya kehadiran antioksidan, radikal bebas ini
akan menyerang molekul-molekul lain disekitarnya. Hasil reaksi ini akan
dapat menghasilkan radikal bebas lain yang siap menyerang molekul
lainnya lagi. Akhirnya akan terbentuk reaksi berantai yang sangat
membahayakan. Berbeda halnya bila terdapat antioksidan. Radikal bebas
akan segera bereaksi dengan antioksidan membentuk molekul yang stabil
dan tidak berbahaya.
Penambahan antioksidan (AH) primer dengan konsentrasi rendah
pada lipida dapat menghambat atau mencegah reaksi autooksidasi lemak
dan minyak. Penambahan tersebut dapat menghalangi reaksi oksidasi pada
tahap inisiasi maupun propagasi (reaksi 1). Radikal-radikal antioksidan
(A*) yang terbentuk pada reaksi tersebut relatif stabil dan tidak
mempunyai cukup energi untuk dapat bereaksi dengan molekul lipida lain
dan membentuk radikal lipida baru (Gordon, 1990 dalam Ardiansyah,
2008).
Inisiasi : R* + AH ----------> RH + A*
xxxi
Radikallipida
Propagasi : ROO* + AH -------> ROOH + A*
Reaksi 1. Penghambatan antioksidan primer terhadap radikal lipida
(Gordon, 1990 dalam Ardiansyah, 2008).
Besarnya konsentrasi antioksidan yang ditambahkan dapat
berpengaruh pada laju oksidasi. Pada konsentrasi tinggi, aktivitas
antioksidan grup fenolik sering lenyap bahkan antioksidan tersebut
menjadi prooksidan (Reaksi 2). Pengaruh jumlah konsentrasi pada laju
oksidasi tergantung pada struktur antioksidan, kondisi dan sampel yang
akan diuji.
AH + O2 -----------> A* + HOO*
AH + ROOH ---------> RO* + H2O + A*
Reaksi 2. Antioksidan bertindak sebagai prooksidan pada konsentrasi
tinggi (Gordon, 1990 dalam Ardiansyah, 2008).
Uji DPPH adalah suatu metode kolorimetri yang efektif dan cepat
untuk memperkirakan aktivitas antiradikal. Uji kimia ini secara luas
digunakan dalam penelitian produk alami untuk isolasi antioksidan
fitokimia dan untuk menguji seberapa besar kapasitas ekstrak dan senyawa
murni dalam menyerap radikal bebas. Radikal DPPH adalah suatu
senyawa organik yang mengandung nitrogen tidak stabil dengan
absorbansi kuat pada λ max 517 nm dan berwarna ungu gelap. Setelah
bereaksi dengan senyawa antioksidan, DPPH tersebut akan tereduksi dan
warnanya akan berubah menjadi kuning. Perubahan tersebut dapat diukur
dengan spektrofotometer dan diplotkan terhadap konsentrasi (Reynertson,
2007 dalam Sa’ad, 2009).
xxxii
Gambar 2.1 Reaksi Antara Radikal DPPH (C18H12N5O6) dengan Antioksidan
Mekanisme reaksi penangkapan radikal DPPH oleh antioksidan
adalah DPPH• + AH ® DPPH-H + A•. Reaksi yang cepat dari radikal
DPPH terjadi dengan beberapa fenol, misalnya α-tokoferol tetapi reaksi
sekunder lambat menyebabkan penurunan absorbansi yang progresif
sehingga keadaan steady state tidak akan dicapai untuk beberapa jam.
Kebanyakan penelitian yang menggunakan metode DPPH melaporkan
aktivitas scavengingnya setelah reaksi 15 atau 30 menit (Pokorny et al.,
2001).
Dalam uji DPPH, kemampuan scavenging terhadap DPPH
dilakukan dengan mengamati penurunan absorbansi pada 515-517 nm.
Penurunan absorbansi terjadi karena penambahan elektron dari senyawa
antioksidan pada elektron yang tidak berpasangan pada gugus nitrogen
dalam struktur senyawa DPPH. Larutan DPPH berwarna ungu. Intensitas
warna ungu akan menurun ketika radikal DPPH tersebut berikatan dengan
hidrogen. Semakin kuat aktivitas antioksidan sampel maka akan semakin
besar penurunan intensitas warna ungunya (Osawa dan Namiki, 1981).
6. Antikolesterol (Lovastatin)
Kolesterol adalah molekul biologis yang berperan sangat penting
dalam sintesis membran sel, prekusor sintesis hormon steroid, hormon
korteks adrenal dan sintesis asam-asam empedu dan vitamin D. Kolesterol
terdiri atas high density cholesterol (HDL), low density cholesterol (LDL)
xxxiii
dan trigliserida. HDL bertugas untuk membawa kolesterol dari aliran darah
ke hati. LDL bertugas membawa kolesterol kembali ke aliran darah.
Kolesterol dapat berasal dari dua sumber yaitu eksogen (makanan) atau
endogen (disintesis dalam tubuh). Hiperkolesterolemia disebabkan kadar
kolesterol melebihi 239 mg/mL dalam darah (Aryantha, dkk., 2004).
Lovastatin adalah suatu pro-drug, yang di dalam tubuh akan segera
terhidrolisis menghasilkan suatu senyawa yang dapat menghambat kerja
dari HMG-CoA reduktase, yaitu sebuah enzim yang mengkatalisis
perubahan HMG-CoA menjadi mevalonat, yang merupakan sebuah tahap
penting dalam biosintesis kolesterol. Hambatan enzim ini meningkatkan
densitas reseptor LDL dalam sel hati sehingga terjadi penurunan LDL
kolesterol. Aktivitas lovastatin ini memiliki arti penting secara medis
sebagai obat anti hiperkolesterolemia (Hardmann et al., 1996 dalam Nauli
dan Udin, 2006).
Formula empiris dari lovastatin adalah C24H36O5 dengan berat
molekul 404.55 g/mol. Lovastatin hadir dalam bentuk lakton non aktif dan
asam hidroksi terbuka aktif semi polar dan larut baik dalam etanol
(Albert,1989 dalam Aryantha, dkk., 2004). Bentuk aktif dari lovastatin
adalah dalam bentuk asam hidroksi terbuka karena dapat berperan sebagai
inhibitor kompetitif HMG-CoA. Lovastatin tidak larut dalam air, larut
sebagian dalam etanol, metanol, asetonitril, etil asetat dan larut sempurna
dalam kloroform. Lovastatin mempunyai titik leleh 174,5 oC, rotasi optik
pada konsentrasi 0,5 gram dalam 100 ml asetonitril sebesar 325o.
Lovastatin mempunyai serapan maksimum sinar ultraviolet pada λ
235,238, dan 247 nm (Saimee, 2003 dalam Aryantha, dkk., 2004).
Monascus juga menghasilkan beberapa zat antihiperkolesterolemia
berupa senyawa statin, yang diberi nama monakolin J, K dan L. Senyawa
yang paling potensial adalah monakolin K atau mevinolin atau lovastatin,
yaitu senyawa hipolipidemik yang menginhibisi kerja HMG-CoA
reduktase. Enzim ini berperan dalam metabolisme HMG-CoA menjadi
asam mevalonat (Blanc et al., 1998; Z. Hai, 1998; Keane, 1999 dalam
xxxiv
Wibowo, dkk., 2006). Endo et al. (1976) dalam Aryantha, dkk. (2004),
menemukan bahwa secara alami kapang Monascus menghasilkan senyawa
yang menghambat biosintesis kolesterol dan disebut lovastatin (mevanolin,
monakolin K).
Prinsip kerja lovastatin terhadap HMG-CoA reduktase sama
dengan prinsip kerja inhibitor kompetitif enzim. HMG-CoA reduktase
dilambangkan sebagai enzim utama. Lovastatin sebagai inhibitor
kompetitif dan HMG-CoA sebagai substrat. HMG-CoA reduktase adalah
enzim utama yang mendukung sintesis kolesterol di organ hati dengan cara
berikatan dengan mengubah HMG-CoA menjadi mevalonat. Ketika
lovastatin hadir dalam bentuk asam hidroksi terbuka dengan konsentrasi
lebih dari konsentrasi substrat (HMG-CoA) maka HMG-CoA reduktase
akan lebih cenderung berikatan dengan lovastatin sehingga jumlah dan
frekuensi sintesis kolesterol tereduksi (Omura, 1992 dalam Aryantha, dkk.,
2004).
Gambar 2.2 Rumus Bangun dari Lovastatin (C24H36O5)
Dibanding penurun kolesterol lainnya (pengikat asam empedu,
asam nikotinat, asam fibrat, penghambat absorpsi kolesterol), statin
memiliki efek penurunan LDL-C terbesar. Sehingga statin dijadikan obat
utama untuk mengatasi hiperkolesterolemia. Saat ini, tersedia beberapa
statin di pasaran, yaitu simvastatin, lovastatin, pravastatin, fluvastatin,
atorvastatin, dan rosuvastatin (Amita, 2006).
B. Kerangka Berfikir
xxxv
Beras, jagung dan gaplek merupakan sumber karbohidrat dengan
kandungan amilosa tinggi. Sebagai sumber amilosa maka beras, jagung dan
gaplek dapat digunakan sebagai substrat dalam pembuatan angkak. Agar
terbentuk angkak maka substrat beras, jagung dan gaplek diinokulasi dengan
kapang Monascus purpureus. Angkak yang dihasilkan selanjutnya akan
dianalisa aktivitas antioksidannya dan kadar antikolesterolnya.
Gambar 2.3 Diagram Alir Kerangka Berpikir
C. Hipotesis
Diduga angkak yang dibuat dari jagung mempunyai aktivitas
antioksidan dan kadar antikolesterol yang lebih tinggi dibandingkan dengan
angkak yang dibuat dari beras dan gaplek.
III. METODE PENELITIAN
A. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Rekayasa Proses
Pengolahan dan Hasil Pertanian, Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas
Pertanian, Universitas Sebelas Maret Surakarta dan Laboratorium Kimia
Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta. Penelitian
ini dilaksanakan dari bulan November 2009 sampai April 2010.
B. Bahan dan Alat Penelitian
Angkak
Monascus purpureus
Beras, Jagung, Gaplek (sumber amilosa)
Antioksidan Antikolesterol
xxxvi
1. Bahan
Bahan yang digunakan untuk membuat angkak dalam penelitian ini
adalah beras putih (varietas IR 64), jagung putih (varietas Srikandi Putih),
gaplek (singkong varietas Malang-1), aquadest, biakan Monascus
purpureus dalam PDA miring. Sedangkan bahan yang digunakan untuk
analisa aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol adalah methanol,
larutan DPPH 0,1 mM, asetonitril, aquabidest dan asam fosfat 0,1%.
2. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah pisau,
penumbuk, mortar, ayakan, autoklaf, alat pengering, labu takar, pipet ukur,
mikro pipet, pro pipet, hot plate, bunsen, ose, erlenmeyer, pengaduk, gelas
ukur, tabung reaksi, vortex, timbangan analitik, spektrofotometer UV-Vis,
HPLC dan lain-lain.
C. Tahapan Penelitian
1. Produksi Kapang Monascus purpureus
Biakan murni Monascus purpureus, diperbanyak dengan
memindahkan kultur kapang tersebut ke dalam beberapa tabung reaksi
yang berisi media PDA miring dan diinkubasi selama 5-7 hari. Kegiatan
ini dilakukan dengan cara mengambil 1 ose kultur bakteri secara aseptis
kemudian diinokulasikan dalam tabung reaksi.
2. Pembuatan Suspensi Monascus purpureus
Pembuatan suspensi Monascus purpureus dilakukan dengan cara
menuangkan 2 ml aquades steril ke dalam tabung reaksi berisi media
miring biakan murni Monascus purpureus, kemudian digojog
menggunakan ose untuk melepaskan spora-spora Monascus purpureus dan
menuangkannya ke dalam erlenmeyer yang berisi substrat padat beras
putih, jagung maupun gaplek.
3. Pembuatan Angkak
26
xxxvii
Pembuatan angkak dilakukan dengan cara memasukkan 100 gram
bahan (beras, jagung maupun gaplek) rendaman 40 jam ke dalam
erlenmeyer, kemudian disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu
121°C selama 15 menit. Selanjutnya, bahan tersebut didinginkan hingga
mencapai suhu sekitar 36°C. Bahan hasil perendaman kemudian
diinokulasi dengan 2 ml suspensi Monascus purpureus. Setelah itu,
campuran tersebut diaduk hingga rata dan diinkubasi pada suhu 27-32°C
selama kurang lebih 30 hari, hingga terbentuknya pigmen merah yang
menyelubungi beras yang disebut angkak. Angkak ini kemudian
dikeringkan dengan alat pengering pada suhu 40°C selama 15 jam.
Pengeringan ini bertujuan untuk mengeringkan angkak. Angkak yang
sudah kering kemudian dibuat serbuk. Serbuk angkak diekstrak dengan
menggunakan metanol untuk diuji aktivitas antioksidan dan diekstrak
dengan menggunakan asetonitril untuk diuji kadar antikolesterol.
Didinginkan sampai suhu 36oC
2 ml kultur M. purpureus
Rendam selama 40 jam dan ditiriskan
Beras, jagung dan gaplek @100 gr
Disterilisasi 121oC selama 15 menit
Diinkubasi pada suhu 27-32°C selama 30 hari
xxxviii
Gambar 3.1 Diagram Alir Proses Penelitian
4. Uji Aktivitas Antioksidan
Analisa terhadap aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode
DPPH (Osawa dan Namiki, 1981). 0,05 gram sampel diekstrak dalam 10
ml methanol, kemudian divortek selam 1 jam atau didiamkan semalam.
Dari larutan tersebut diambil 100 µl kemudian diencerkan menjadi 5 ml.
Kemudian ditambahkan 0,1 mM DPPH sebanyak 1 ml dan divortek.
Simpan dalam ruang gelap selama 30 menit, kemudian ditera
absorbansinya pada panjang gelombang 516 nm.
5. Uji Kadar Antikolesterol (Lovastatin)
Lovastatin dapat diukur dari serbuk angkak,1 gram serbuk angkak
diekstrak dengan 2 mL asetonitril dan 0,1 mL asam fosfat 0,1%, dibiarkan
selama 30 menit, kemudian larutan disentrifuse dengan kecepatan 3000
rpm selama 10 menit. Selanjutnya disaring dengan kertas whatman dan
supernatannya diinjeksikan pada kolom HPLC maka kadar antikolesterol
dapat diukur (Kasim, dkk., 2005). Penentuan kadar antikolesterol
xxxix
dilakukan dengan menggunakan HPLC, pada kolom C18, fase gerak
metanol : asetonitril : asam formiat : air (35 : 40 : 15 : 10), panjang
gelombang (λ) 254 nm, dan flow/pressure 1/88 kg cm m-1, terhadap
ekstrak hasil pemisahan dengan asetonitril. Kadar antikolesterol diperoleh
dengan membandingkan luas area lovastatin sampel dengan luas area
lovastatin standar. Sebagai standar digunakan tablet lipovas 200 mg yang
mengandung 20 mg lovastatin (Nauli dan Udin, 2006).
D. Rancangan Penelitian
Rancangan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah
Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan satu faktor yaitu jenis substrat,
dengan 3 kali ulangan. Adapun substrat yang digunakan terdiri dari beras,
jagung dan gaplek.
Perlakuan Ulangan 1 2 3
Substrat Beras (B) B1 B2 B3 Substrat Jagung (J) J1 J2 J3
Substrat Gaplek (G) G1 G2 G3
E. Analisis Data
Data yang diperoleh dari hasil penelitian selanjutnya dianalisis dengan
metode ANOVA dan apabila ada perbedaan maka dilanjutkan dengan uji beda
nyata menggunakan DMRT (Duncan Multiple Range Test) dengan tingkat
signifikansi α = 0,05.
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Aktivitas Antioksidan Angkak
Kapang M. purpureus menghasilkan metabolit, antara lain zat warna,
zat antihiperkolesterolemia, asam-asam organik dan enzim. Zat warna
Monascus terdiri dari ankaflavine dan monascine (berwarna kuning),
rubropunctatine dan monascorubrine (jingga) serta rubropunctamine dan
monascorubramine (ungu) (Pastrana et al., 1995; K. Lakrod et al., 2000 dalam
Wibowo dkk., 2006). Beras yang diinokulasi dengan Monascus memiliki
xl
kemampuan yang lebih besar dalam mereduksi, scavenging dan kemampuan
mengkelat serta memiliki kandungan total fenol yang lebih tinggi
dibandingkan dengan beras yang tidak diinokulasi (Yang et al., 2006 dalam
Kim et al., 2007).
Menurut Chairote et al. (2009), antioksidan dalam angkak terdiri dari
beberapa senyawa seperti flavonoid, polifenol, karotenoid, alkaloid dan
vitamin. Beberapa metabolit sekunder yang diproduksi oleh jamur Monascus
merupakan komponen yang disusun dari poliketida. Komponen tersebut
adalah pigmen dan komponen fenolik yang memiliki aktivitas antioksidan.
Produksi pigmen yang semakin pekat diiringi dengan kenaikan jumlah
antioksidan yang dihasilkan. Sedangkan Aniya et al. (2000) dalam Chairote et
al. (2009) melaporkan bahwa satu dari metabolit sekunder dari Monascus
merupakan senyawa antioksidan dalam bentuk dimerumic acid yang akan
menghambat NADPH dan besi penyebab peroksidasi lemak. Serta Wong and
Bau (1977) dalam Timotius (2004) menyatakan bahwa Monascus mampu
menghasilkan antioksidan dan asam dimerumat (dimerumic acid).
Aktivitas antioksidan beberapa jenis angkak dari hasil penelitian dapat
dilihat pada Tabel 4.1 di bawah ini.
Tabel 4.1 Aktivitas Antioksidan Angkak dari Berbagai Jenis Substrat
Sampel Aktivitas Antioksidan (%) Angkak dari gaplek Angkak dari jagung Angkak dari beras
42,8333a 44,0500b 45,6100c
Keterangan : angka dengan notasi yang sama berarti tidak beda nyata pada tingkat kepercayaan 95%
Berdasarkan Tabel 4.1 dapat diketahui bahwa aktivitas antioksidan
angkak yang dibuat dari bebagai substrat berkisar antara 42,8333% -
45,6100%. Angkak dari beras memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi
bila dibandingkan dengan aktivitas antioksidan angkak dari jagung dan
gaplek. Hal ini dikarenakan angkak dari beras mempunyai pigmen warna
30
xli
yang lebih pekat bila dibandingkan dengan angkak dari jagung dan gaplek.
Menurut Chairote et al. (2009), produksi pigmen yang semakin pekat diiringi
dengan kenaikan jumlah antioksidan yang dihasilkan. Menurut Widjayanti
(2000), pembentukan pigmen kuning, merah dan oranye dengan substrat
cassava sangat rendah dibandingkan dengan substrat beras. Perbedaan
komposisi nutrisi dari masing-masing substrat juga dapat mempengaruhi
produksi pigmen. Vitamin B (Lin, 1973 dalam Widjayanti, 2000), asam
amino (McHan and Johnson, 1970 dalam Widjayanti, 2000) dan garam zinc
(Lin dan Demain, 1991 dalam Widjayanti, 2000) dapat mempengaruhi
produksi pigmen. Kandungan protein beras umumnya berkisar antara 6-10%.
Beras juga mengandung vitamin B, fosfat, kalium, asam amino dan garam
zinc. Kandungan senyawa-senyawa ini dapat mempengaruhi produksi pigmen
(Lin, 1973 dalam Kasim, dkk., 2005).
Produksi pigmen berlawanan dengan tingkat pulen (stickiness)
substrat (Widjayanti, 2000). Pembentukan angkak kurang baik pada gaplek.
Hal ini dikarenakan gaplek lebih pulen dari beras dan jagung. Tingkat
kepulenan berkaitan erat dengan kandungan amilosa. Semakin tinggi
kandungan amilosa maka semakin rendah tingkat kepulenan (semakin pera)
suatu bahan. Singkong memiliki kandungan amilosa antara 17-25%
(Ceballos, 2007), beras IR 64 memiliki kandungan amilosa 24% (Riwan,
2008) dan jagung putih mengandung amilosa 31,05% (Suarni, 2005 dalam
Suarni dan Widowati, 2005). Apabila ditinjau dari kandungan amilosa maka
jagung memiliki kandungan amilosa paling tinggi. Akan tetapi, aktivitas
antioksidan angkak yang dihasilkan dari jagung ternyata lebih rendah dari
beras. Hal ini dikarenakan jagung putih tergolong jagung mutiara (Zea mays
var. indurata) yang mempunyai bentuk agak bulat dengan bagian luar keras
dan licin. Penyebab biji yang keras karena bagian luar endosperma
seluruhnya terdiri dari pati keras yang menguntungkan sebagai daya tahan
terhadap serangan hama dan jamur (Noble dan Andrizal, 2003). Oleh karena
itu, miselia dari Monascus sulit untuk menembus lapisan endosperma biji
xlii
jagung sehingga aktivitas antioksidan yang dihasilkan menjadi kurang
optimal.
B. Kadar Antikolesterol (Lovastatin) Angkak
Lovastatin adalah suatu pro-drug yang di dalam tubuh akan segera
terhidrolisis menghasilkan suatu senyawa yang dapat menghambat kerja dari
HMG-CoA reduktase, yaitu sebuah enzim yang mengkatalisis perubahan
HMG-CoA menjadi mevalonat yang merupakan sebuah tahap penting dalam
biosintesis kolesterol. Hambatan enzim ini meningkatkan densitas reseptor
LDL dalam sel hati sehingga terjadi penurunan LDL kolesterol. Aktivitas
lovastatin ini memiliki arti penting secara medis sebagai obat anti
hiperkolesterolemia (Hardmann et al., 1996 dalam Nauli dan Udin, 2006) dan
diindikasikan dapat menurunkan resiko arteriosklerosis (Cottingham, 1998
dalam Nauli dan Udin, 2006).
Lovastatin merupakan produk metabolit sekunder yang dihasilkan
oleh Monascus setelah fase stasioner pada pertumbuhan Monascus.
Pembentukan produk metabolit sekunder ini dihasilkan oleh mikroorganisme
sebagai upaya untuk mempertahankan hidup dalam kondisi terbatasnya
nutrien. Ciri dari metabolit sekunder ini adalah metabolit tersebut umumnya
tidak diproduksi selama fase pertumbuhan cepat (trofofase) tetapi dibentuk
selama tahap produksi subsekuen (idiofase) (Kasim, dkk., 2006).
Kadar Antikolesterol beberapa jenis angkak dari hasil penelitian dapat
dilihat pada Tabel 4.2 di bawah ini.
Tabel 4.2 Kadar Antikolesterol Angkak dari Berbagai Jenis Substrat Sampel Kadar Antikolesterol (%)
Angkak dari gaplek Angkak dari jagung Angkak dari beras
0,013200a
0,022833b
0,026600c
Keterangan : angka dengan notasi yang sama berarti tidak beda nyata pada tingkat kepercayaan 95%
Berdasarkan Tabel 4.2 dapat diketahui bahwa kadar antikolesterol
angkak yang dibuat dari bebagai substrat berkisar antara 0.013200% -
0,026600%. Angkak dari beras memiliki kadar antikolesterol paling tinggi bila
dibandingkan dengan kadar antikolesterol angkak dari jagung dan gaplek.
xliii
Menurut Chang et al. (2002) dan Samie et al. (2003) dalam Lopez et al.
(2004) mengemukakan bahwa produksi lovastatin atau mevacor pada medium
beras lebih tinggi kandungannya dari substrat yang lain. Hal ini dikarenakan
beras mengandung asam amino methionin yang merupakan asam amino
esensial bagi biosintesis lovastatin karena merupakan precursor langsung
(Stocking dan Williams, 2003 dalam Kasim, dkk., 2005). Asam amino
methionin pada beras lebih tinggi daripada jagung dan gaplek. Menurut
Anonimc (2009), asam amino methionin pada beras sebesar 0,16%.
Sedangkan asam amino methionin pada jagung putih dan singkong berturut-
turut sebesar 0,067% (Anonime, 2009) dan 0,011% (Anonimf, 2009).
Pigmen juga dapat mengindikasikan banyaknya lovastatin yang
diproduksi (Kasim, dkk., 2006). Semakin pekat warna pigmen yang
dihasilkan maka semakin banyak lovastatin yang diproduksi. Hal ini terbukti
dengan angkak dari beras mempunyai pigmen warna yang lebih pekat bila
dibandingkan dengan angkak dari jagung dan gaplek.
Selain memproduksi pigmen, Monascus juga menghasilkan enzim α
dan β-amilase, glukoamilase, protease, dan lipase (Lin, 1973; Steinkraus,
1983 dalam Permana, dkk., 2006). Kapang M.purpureus menghasilkan enzim
amilase yang berfungsi menghidrolisis amilosa menjadi glukosa dan maltosa
melalui pemutusan ikatan (1,4)-glukosida. Glukosa mudah digunakan untuk
metabolisme mikroba (Kasim, dkk., 2006). Oleh karena itu, semakin tinggi
kandungan amilosanya maka semakin banyak amilosa yang terhidrolisis
sehingga semakin banyak lovastatin yang diproduksi. Singkong memiliki
kandungan amilosa antara 17-25% (Ceballos, 2007), beras IR 64 memiliki
kandungan amilosa 24% (Riwan, 2008) dan jagung putih mengandung
amilosa 31,05% (Suarni, 2005 dalam Suarni dan Widowati, 2005). Apabila
ditinjau dari kandungan amilosa maka jagung memiliki kandungan amilosa
paling tinggi. Akan tetapi, kadar antikolesterol angkak yang dihasilkan dari
jagung ternyata lebih rendah dari beras. Hal ini dikarenakan jagung putih
tergolong jagung mutiara (Zea mays var. indurata) yang mempunyai bentuk
agak bulat dengan bagian luar keras dan licin. Penyebab biji yang keras
xliv
karena bagian luar endosperma seluruhnya terdiri dari pati keras yang
menguntungkan sebagai daya tahan terhadap serangan hama dan jamur
(Noble dan Andrizal, 2003). Oleh karena itu, miselia dari Monascus sulit
untuk menembus lapisan endosperma biji jagung sehingga kadar
antikolesterol yang dihasilkan menjadi kurang optimal.
V. KESIMPULAN DAN SARAN
A. KESIMPULAN
Kesimpulan yang dapat diambil antara lain adalah sebagai berikut :
1. Jenis substrat mempunyai pengaruh terhadap aktivitas antioksidan dan kadar
antikolesterol dari angkak yang dihasilkan.
2. Angkak dari beras memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi (45,6100%)
bila dibandingkan dengan aktivitas antioksidan angkak dari jagung
(44,0500%) dan gaplek (42,8333%).
3. Angkak dari beras memiliki kadar antikolesterol paling tinggi (0,026600%)
bila dibandingkan dengan kadar antikolesterol angkak dari jagung
(0,022833%) dan gaplek (0,013200%).
4. Hipotesa awal penelitian ini adalah angkak dari jagung memiliki aktivitas
antioksidan dan kadar antikolesterol paling tinggi. Akan tetapi, berdasarkan
penelitian angkak dari beras yang memiliki aktivitas antioksidan dan kadar
antikolesterol paling tinggi sehingga hipotesa dari penelitian ini ditolak.
B. SARAN
Dari hasil penelitian dapat diberikan saran antara lain yaitu:
1. Sebaiknya digunakan substrat beras dalam pembuatan angkak karena dapat
menghasilkan aktivitas antioksidan dan kadar antikolesterol yang lebih
tinggi dibandingkan dengan substrat jagung dan gaplek.
2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai potensi beras, jagung dan
gaplek ditinjau dari segi kandungan amilosa dan senyawa penyusunnya
xlv
yang mempengaruhi pembuatan angkak untuk mengetahui aktivitas
antioksidan dan kadar antikolesterol yang dihasilkan.
DAFTAR PUSTAKA
Amita. 2006. Optimalisasi Manfaat Statin. http://www.majalah-farmacia.com (diakses tanggal 18 Juli 2009).
Amrun, Moch. H dan Umiyah. 2005. Pengujian Antiradikal Bebas Difenilpikril Hidrazil (DPPH) Ekstrak Buah Kenitu (Chrysophyllum cainito L.) Dari Daerah Sekitar Jember. Jurnal Ilmu Dasar Vol. 6, No. 2, hal : 110-114.
Anonim. 1993. Teknik Bercocok Tanam Jagung. Kanisius. Yogyakarta.
Anonim. 2000. Gaplek. http://bebas.vlsm.org/v12/artikel/pangan/DIPTI/ GAPLEK.PDF (diakses tanggal 14 Juli 2009).
Anonim. 2006. Teknologi Pengolahan Beras. htpp://www.eBookPangan.com (diakses tanggal 24 Juli 2009).
Anonim. 2008. Antioksidan. http://www.dokter.net/Blog/Antioksidan.htm (diakses tanggal 14 Juli 2009).
Anonima. 2009. Radikal Bebas. http://www.konsepsehat.com/radikal-bebas (diakses tanggal 18 Juli 2009).
Anonimb. 2009. Beras. http:// www.ipteknet.com (diakses tanggal 24 Juli 2009).
Anonimc. 2009. Beras Putih. http://www.asiamaya.com/nutrients/berasputih.htm (diakses tanggal 06 Maret 2010).
Anonimd. 2009. Jagung. http://www.scribd.com (diakses tanggal 14 Juli 2009).
Anonime. 2009. Jagung Putih. http://www.asiamaya.com/nutrients/jagung putih.htm (diakses tanggal 06 Maret 2010).
Anonimf. 2009. Singkong. http://www.asiamaya.com/nutrients/singkong.htm (diakses tanggal 06 Maret 2010)
Ardiansyah. 2005. Minum Angkak Menyehatkan. http://www.journal.agric.food. chem.com (diakses tanggal 18 Juli 2009).
xlvi
Ardiansyah. 2008. Antioksidan dan Peranannya Bagi Tubuh. htpp://www. ardiansyah.multiply.com/jurnal/item/14/ (diakses tanggal 24 Juli 2009).
Aryantha, Nyoman P., Siska Widayanti dan Yuanita. 2004. Eksplorasi Fungi Deuteromycetes (Aspergillus sp. dan Penicillium sp.) Penghasil Senyawa Anti Kolesterol Lovastatin. Laporan Akhir Penelitian Dasar, Fakultas MIPA, ITB. Bandung.
Astawan, Made. 2006. Beras Pera yang Difermentasikan. http://cybermed.cbn.net.id/detail.aspx.htm (diakses tanggal 14 Juli 2009).
Cahyadi, Wisnu. 2006. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan. Bumi Aksara. Jakarta.
Ceballos, Hernan. 2007. Penemuan: Singkong Lebih Bernutrisi. http://www.indobic.or.id/berita.php (diakses tanggal 31 Januari 2010).
Chairote, Em-on., Chairote, Griangsak and Lumyong, Saisamorn. 2009. Red Yeast Rice Prepared from Thai Glutinous Rice and the Antioxidant Activities. Chiang Mai J. Sci. 2009; 36(1) : 42-49.
Damarjati, Djoko S. dan Widowati. 1993. Prospek Pengembangan Kasava dan Potensi Tepung Kasava dalam Pengembangan Agroindustri di Pedesaan. Upgrading Sub Laboratoriun Biologi, UNS, Surakarta : 4-6 Agustus 1993.
Hastuti, Pudji dan Pamudji Rahardjo. 1983. Pengolahan Hasil Tanaman Serealia dan Palawija. Depdiknas. Jakarta.
Hidayat, Beni. 2008. Pengembangan Formulasi Produk Mie Berbahan Baku Pati Ubi Kayu. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II 2008 Universitas Lampung, 17-18 November 2008 ISBN : 978-979-1165-74-7 VII-311.
Jenie, B.S.L., Ridawati dan Winiati Pudji Rahayu. 1994. Produksi Angkak oleh Monascus purpureus dalam Medium Limbah Cair Tapioka, Ampas Tapioka dan Ampas Tahu. Buletin Teknologi dan Industri Pangan, volume V, No.3, hal: 60-64.
Kasim, Ernawati., Nandang Suharna dan Novik Nurhidayat. 2006. Kandungan Pigmen dan Lovastatin pada Angkak Beras Merah Kultivar Bah Butong dan BP 1804 IF 9 yang Difermentasi dengan Monascus purpureus Jmba. Jurnal Biodiversitas volume 7, no 1, hal: 7-9.
36
xlvii
Kasim, Ernawati., Sri Astuti dan Novik Nurhidayat. 2005. Karakterisasi Pigmen dan Kadar Lovastatin Beberapa Isolat Monascus purpureus. Jurnal Biodiversitas volume 6, no 4, hal: 247-250.
Kim, Seong Yeong., Yoon Sook Kim, Young Soon Kim, Jin Man Kim, and Hyung Joo Suh. 2007. The Application of Monascal Rice in Rice Beverage Preparation. http://www.net-lanna.info/food/Articles/11023679.pdf (diakses tanggal 05 Februari 2010).
Lopez, JL Casas., JA Sanchez Perez, JM Fernandez Sevilla, FG Acien Fernandez, E Molina Grima and Y Chisti. 2004. Fermentation Optimization for the Production of Lovastatin by Aspergillus Terreus: Use of Response Surface Methodology. J Chem Technol Biotechnol 79:1119-1126.
Muchtadi, Tien R. dan Sugiyono. 1992. Petunjuk Laboratorium Ilmu Pengetahuan Bahan Pangan. PAU Pangan dan Gizi IPB. Bogor.
Nauli, Tigor dan Linar Z. Udin. 2006. Model Fermentasi Lovastatin. Akta Kimindo Vol. 1 No. 2 April 2006: 99-104.
Noble, Pither dan Andrizal. 2003. Pedoman Penanganan Pasca Panen Jagung. Direktorat Pengolahan dan Pemasaran Hasil Tanaman Pangan. Departemen Pertanian. Jakarta.
Osawa, T. dan Namiki, M. A. 1981. A Novel Type of Antioxidant Isolated From Leaf Wax of Eucalyptus Leaves. Agric. Biol. Chem. 45 :735-739.
Permana, Djumhawan R., Sunnati Marzuki dan D. Tisnadjaja. 2006. Analisis Kualitas Produk Fermentasi Beras (Red Fermented Rice) dengan Monascus purpureus 3090. Jurnal Biodiversitas, Volume 5, Nomor 1 Halaman: 7-12.
Pokorny, Jan, Nedyalka Yanishlieva and Michael Gordon. 2001. Antioxidant in Food. CRC Press Cambridge. England.
Rahayu, Endang S., R. Indrati, T. Utami, E. Harmayani, dan M.N. Cahyanto. 1993. Bahan Pangan Hasil Fermentasi. PAU Pangan dan Gizi UGM. Yogyakarta.
Richana, Nur dan Suarni. 2005. Teknologi Pengolahan Jagung. http://balitsereal.litbang.deptan.go.id/bjagung/duatiga.pdf. (diakses tanggal 14 Juli 2009).
xlviii
Riwan. 2008. Hubungan antara Varietas dengan Komposisi Beras. http://tekhnologi-hasil-pertanian.blogspot.com. (diakses tanggal 18 Juli 2009).
Rohman, Abdul dan Sugeng Riyanto. 2005. Daya Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Kemuning (Murraya paniculata (L) Jack) Secara In Vitro. Jurnal Majalah Farmasi Indonesia Vol 16 (3), 136 – 140.
Sa’ad, Muhammad. 2009. Uji Aktivitas Penangkapan Radikal Isolat A dan B Fraksi IV Ekstrak Etanol Daun Dewandaru (Eugenia uniflora L.) dengan metode DPPH. Skripsi. Fakultas Farmasi UMS. Surakarta.
Santoso, Umar. 2006. Antioksidan. Sekolah Pascasarjana UGM. Yogyakarta.
Setyono, A., Suismono dan A. M. Fagi. 1990. Pengembangan Teknologi Pengolahan Ubi Kayu dalam Menjunjung Agroekologi di Pedesaan. Prosiding Seminar Nasional UPT-EGP. Lampung.
Sianturi, G. 2006. Antioksidan Memerangi Radikal Bebas. http://www.gizi.net/cgi-bin/berita/antioksidan/index.shtml (diakses tanggal 18 Juli 2009).
Siregar, Hadrian. 1981. Budidaya Tanaman Padi di Indonesia. Sastra Hudaya. Jakarta.
Steinkraus, Keith H. 1996. Hand Book of Indigenous Fermented Food: Second Edition. Marcel Dekker Inc. New York.
Suarni dan S. Widowati. 2005. Struktur, Komposisi, dan Nutrisi Jagung. http://balitsereal.litbang.deptan.go.id/bjagung/tiganol.pdf (diakses tanggal 14 Juli 2009).
Subandi, Mahyudin Syam dan Adi Widjono. 1988. Jagung. Pusat Penelitian dan Pengembangan Tanaman Pangan. Bogor.
Syarief, Rizal dan Anies Irawati. 1988. Pengetahuan Bahan Unit Industri Pertanian. PT. Mediyatama Sarana Perkasa. Jakarta.
Timotius, K. H. 2004. Produksi Pigmen Angkak oleh Monascus. Jurnal. Teknol. dan Industri Pangan, Vol. XV, No. 1 Th. 2004.
Tisnadjaja, Djadjat. 2006. Bebas Kolesterol dan Demam Berdarah dengan Angkak. Penebar Swadaya. Jakarta.
Tjokroadikoesoemo, Soebiyanto. 1986. HFS dan Industri Ubi Kayu Lainnya. Gramedia. Jakarta.
xlix
Wahyu, Maulana Karnawidjaja. 2008. Pemanfaatan Pati Singkong Sebagai Bahan Baku Edible Film. Beswan Djarum, Rso Bandung, Universitas Padjadjaran, Fakultas Teknologi, Industri Pertanian, Jurusan Teknologi Industri Pangan.
Wang, Jyh-Jye and Pan, Tzu-Ming. 2003. Effect of Red Mold Rice Supplements on Serum and Egg Yolk Cholesterol Levels of Laying Hens. J. Agric. Food Chem. 2003, 51, 4824-4829.
Wibowo, Marlia Singgih, Tiana Milanda dan Elin Julianti. 2006. Transformasi Gen Resistensi Higromisin (hph) ke Kapang Monascus purpureus Mutan Albino Melalui Mediasi Agrobacterium tumefaciens. Laporan Penelitian Fundamental. ITB. Bandung.
Widjayanti, Retno Dumilah Esti. 2000. Membandingkan Beras dan Cassava Sebagai Substrat untuk Produksi Pigmen Monascus dengan Fermentasi Padat. Jurnal Sains dan Teknologi Indonesia Vol. 2 No. 2 (Mei 2000) hal : 23-26.
Winarno, F. G. 1981. Kimia Pangan dan Gizi. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.
Winarno, F. G. dan Titi, S. R. 1994. Bahan Tambahan Untuk Makanan dan Kontaminan. Pustaka Sinar Harapan. Jakarta.
Yulineri, Titin., Riani Hardiningsih dan Suciatmih. 1997. Keberadaan Kapang pada Gaplek : Pengaruh Terhadap Kualitas dan Daya Simpan. Berita Biologi Jurnal Biologi Ilmiah vol. 4 (1). Pusat Penelitian dan Pengembangan Biologi-LIPI.