Jan Ingenhousz (1730-1799) merupakan orang yang pertama kali melakukan penelitian tentang fotosintesis. Ingenhousz memasukkan tumbuhan air Hydrilla verticillata ke dalam bejana yang diisi air. Bejana gelas itu ditutup denagn corong terbalik dan diatasnya di beri tabung reaksi yang diisi air hingga penuh. Bejana itu diletakkan di terik matahari. Tak lama kemudian muncul gelembung udara dari tumbuhan air tersebut. Gelembung udara tersebut menandakan adanya gas. Setelah diuji ternyata adalah oksigen. Ingenhousz menyimpulkan fotosintesis menghasilkan oksigen.

Pada tahun 1822, Engelmann melakukan percobaan dengan menggunakan alga Spirogyra. Alga Spirogyra memiliki kloroplas seperti spiral. Hanya kloroplas yang terkena cahaya yang mengeluarkan oksigen. Kloroplas yang tidak terkena cahaya tidak mengeluarkan oksigen. Hal tersebut dibuktikan dengan banyaknya bakteri suka oksigen yang berkerumun di bagioan kloroplas yang terkena cahaya. Kesimpulan percobaan Engelmann adalah :- fotosintesis dilakukan oleh kloroplas.- kloroplas hanya berfotosintesis jika terkena cahaya.

Pada tahun 1860 Julius von Sachs membuktikan bahwa proses fotosintesis menghasilkan amilum. Caranya daun yang sebagian dibungkus kertas timah dibiarkan terkena cahaya matahari sejak pagi dan dipetik sore hari. Daun tersebut direbus untuk mematikan sel-selnya. Selanjutnya daun itu dimasukkan ke dalam alkohol agar klorofilnya larut sehingga daun itu menjadi pucat. Saat daun ditetesi dengan iodin bagian yang sebelumnya tertutup oleh kertas timah tetap pucat, sedangkan yang tidak tertutup warnanya menjadi biru kehitaman. Warna biru kehitaman menandakan bahwa di daun tersebut terdapat amilum.