isolasi-dan-karakterisasi-senyawa-bioaktif-pada-daun-kelor-moringa-oleifera-lamk-yang-berpotensi-sebagai-antibakteri-terhadap-staphylococcus-aureus.rtf...

8/17/2019 isolasi-dan-karakterisasi-senyawa-bioaktif-pada-daun-kelor-moringa-oleifera-lamk-yang-berpotensi-sebagai-antiba…

http:///reader/full/isolasi-dan-karakterisasi-senyawa-bioaktif-pada-daun-kelor-moringa-oleifera-lamk-yang-berpote… 1/10

ISOLASI DAN KARAKTERISASI SENYAWA BIOAKTIF PADA DAUN

KELOR ( Moringa oleifera Lamk.) YANG BERPOTENSI SEBAGAI

ANTIBAKTERI TERHADAP Staphylococcus aureus

Rini Sulis!a"ai# B$a Ria %a&ika E&ia D$lima# Eni Ka&ika Sa&iAkademi Analis Farmasi Makanan dan Minuman Al Islam Yogyakarta

ABSTRAK

Akhir-akhir ini banyak penyakit yang disebabkan oleh bakteri. Selama ini

penanganan penyakit yang disebabkan oleh bakteri lebih banyak menggunakan

obat-obat sintetik yang membutuhkan biaya yang tidak sedikit dan tentunya banyak menimbulkan efek samping. Untuk itu perlu adanya alternatif untuk mengatasi

masalah tersebut, salah satunya dengan memanfaatkan tanaman obat yang

mengandung senyawa bioaktif yang berkhasiat sebagai antibakteri. Salah satu

tumbuhan obat yang berpotensi sebagai senyawa obat adalah kelor atau Moringa

oleifera lamk. Sehingga perlu dilakukan penelitian isolasi dan karakterisasi

senyawa bioktif pada daun kelor yang berpotensi sebagai antibakteri. Fraksi etil

asetat merupakan fraksi teraktif sebagai antibakteri pada kadar !" b#$. Isolat yang

diperoleh se%ara kromatografi lapis tipis preparatif dinyatakan murni se%ara &'(.

&arakterisasi isolat dengan menggunakan )*'+ menunukkan kromatogram yang

mirip dengan kuersetin sebagai senyawa standar.

Kaa kun'i isolasi, Moringa oleifera lamk., kuersetin, antibakteri

PENDAHULUAN

anyak penyakit disebabkan

oleh bakteri ditemukan di Indonesia

terutama disebabkan oleh kurangnya

kebersihan. *enanganan penyakit

yang disebabkan oleh bakteri selama

ini lebih banyak menggunakan obat /

obat sintetik dengan berbagai efek

samping yang ditimbulkan. 0leh

sebab itu perlu adanya alternatif salah

satunya dengan memanfaatkan

bahan-bahan alamiah di sekitar kita.

*emanfaatan tanaman obat

merupakan warisan nenek moyang

seak dulu kala. 1ksplorasi dan

budidaya tanaman obat terus

dikembangkan dengan tuuan angka

panang mengurangi impor bahan

baku obat sintetik demi menghemat

de$isa negara. Salah satu tanaman

yang berkhasiat obat adalah kelor.



&andungan kimia pada daun kelor

adalah fenol, hidrokuinin, fla$onoid

steroid, triterpenoid, tanin alkaloid

dan saponin 2&iswandono, !!34.

erbagai penelitian telah

membuktikan bahwa kandungan

bioaktif dalam daun kelor berpotensi

sebagai senyawa obat diantaranya

sebagai antiinflamasi 2Sashidara, et

al , !!54, antifungi 2+huang, et al,

!!64, antikanker 27ayaardhanan,

!!84, hepatoprotektif 2)am9a, !!5,

Uma et al, !!54 serta antioksidan

2enabdeselam, !!5: +humark,

!!54. *enelitian ini dilakukan untuk

mengui akti$itas antibakteri ekstrak

etanol daun kelor dengan metode

dilusi %air dengan perhitungan &adar

)ambat Minimal 2&)M4 dan &adar

unuh Minimal 2&M4 27awet9,

;



Maserat yang didapat dipekatkan

sampai pekat dengan vacuum rotary

evaporator pada suhu 6! + dan hasilo

yang didapat adalah ekstrak kental

etanol daun kelor.

F&aksinasi Eks&ak Ean+l Daun

K$l+&

Sebelum difraksinasi ekstrak etanol

dideteksi senyawa fenolik dan fla

$onoid dengan metode &romatografi

'apis (ipis 2&'(4. Analisis kualitatif

senyawa fenolik dengan &'(

menggunakan fase diam silika gel

F@8 dengan fase gerak etil

asetatmetanolair 2;!!;,@;! #4

dengan pereaksi semprot Fe+l dan

sebagai baku pembanding digunakan

asam galat. Analisis kualitatif

senyawa fla$onoid dengan &'(

menggunakan fase diam silika gel

F@8 dengan fase gerak AB 2 8@;4

dan metanolair dengan pereaksi

sitroborat dan uap amonia. Sebagai

baku pembanding digunakan fla

$onoid rutin. (ahapan selanutnya

adalah fraksinasi ekstrak etanol daun

kelor. 1kstrak etanol ditambahkan

a=uadest dan n-heksan kemudian

disentrifuge dan akan membentuk

lapisan yaitu fraksi larut air dan fraksi

larut n-heksan. *ada fraksi larut air

selanutnya ditambahkan etilasetat

di%ampur dan disentrifuge

membentuk lapisan yaitu fraksi

etilasetat dan fraksi tidak larut

etilasetat.

U,i Ani-ak$&i

P$n$nuan Kaa& Ham-a

%inimum (KH%)

>iambil sebanyak !,@ ml suspensi

bakteri Staphylococcus aureus

;!6+FU#ml dan dimasukkan ke dalam

tabung ui yang berisi !,@ ml ekstrak

etanol pada konsentrasi 6,@": 6!":

@5,@": @@": @,@" dan @! "

&onsentrasi ekstrak etanol

ditentukan berdasarkan ui

pendahuluan. &onsentrasi akhir

setelah di%ampur menadi ;,@":

!": 3,5@": 5,@": 6,@" dan

@". Selanutnya tabung diinkubasi

pada suhu 5 + selama ;3-8 am.0

>iamati ada tidaknya kekeruhan

larutan dan dibandingkan dengan

larutan kontrol untuk menentukan

pada mulai konsentrasi berapa ekstrak

etanol mampu menghambat

pertumbuhan bakteri. 'arutan kontrol

yang digunakan adalah kontrol

pelarut yaitu a=uadest dalam media

)I >S, kontrol media yaitu kontrol

)I >S, kontrol ekstrak yaitu kontrol



ekstrak etanol daun kelor dalam

media )I >S dan kontrol suspensi

bakteri ;! +FU#ml.6

P$n$nuan Kaa& Bunu

%inimum (KB%)

*enentuan &M dilakukan dengan

%ara larutan ekstrak etanol hasil ui

dilusi %air pada &)M digoreskan

pada media agar darah untuk

Staphylococcus aureus. >ilihat ada

tidak adanya pertumbuhan bakteri

dan dibandingkan dengan kontrol

untuk menentukan konsentrasi

terendah ekstrak etanol daun kelor

yang mampu menghambat

pertumbuhan bakteri 2&M4. agan

penentuan &)M dan &M sebagai

berikut

Cambar ;. Skema ui &)M dan &M

*enentuan ui &)M dan &M

dilakukan untuk semua larutan ui

meliputi ekstrak etanol daun kelor,

hasil dari fraksinasi ekstrak etanol

daun kelor 2fraksi n-heksan, fraksi

a=uadest, fraksi etil asetat4, dan isolat

fraksi teraktif.

Cambar . Skema kera penelitian

HASIL DAN PE%BAHASAN

Sebelum dilakukan ui

akti$itas antibakteri terlebih dahulu

dilakukan skrining fitokimia untuk

mengetahui kandungan kimia yang

berhubungan dengan akti$itas

biologinya. Sehingga dengan skrining

fitokimia diharapkan akan didapatkan

gambaran kandungan



kimia yang berpotensi sebagai

antibakteri. )asil ui skrining

fitokimia disaikan dalam tabel

berikut

(abel ;. )asil ui skrining fitokimia ekstrak etanol daun kelor

)asil ui skrining fitokimia

menunukkan kandungan senyawa

golongan polifenol dan fla$onoid

sehingga selanutnya dilakukan

identifikasi polifenol dan fla$onoid

se%ara kromatografi lapis tipis 2&'(4.

I$niikasi s$n!a"a *+li$n+l

)asil kromatogram yang didapat

setelah &'( disemprot dengan Fe+l

didapat ber%ak berwarna hitam pada

sampel. )al ini menunukkan adanya

polifenol dalam sampel.

Cambar . *rofil kromatografi identifikasi polifenol

&eterangan Fase diam silika gel F @8Fasegerak etilasetatmetanolair 2;!!;,@;!4

Urutan sampel dari kiri ke kanan pembanding asam

galat:fraksi heksan: fraksi etilasetat: ekstrak etanol daun

kelor

;. *enampak ber%ak UD @8. *enampak ber%ak UD 66.*ereaksi semprot Fe+l pada sinar tampak

(abel . ?ilai Ef identifikasi polifenol



*ada gambar kromatogram

terlihat bahwa rutin tidak terelusi

sempurna sehingga dilakukan

perubahan fase gerak dengan AB

2butanolasamasetatair4 dan

penotolan hanya diulangi untuk

pembanding rutin dan fraksi etilasetat

dikarenakan pada ui awal diketahui

hanya fraksi etilasetat yang

memberikan warna yang sama

dengan pembanding rutin.

Cambar @. *rofil identifikasi fla$onoid dengan fase gerak AB

&eterangan Fase diam silika gel F@8

Fase gerak AB 28;@4Urutan sampel dari kiri ke kanan pembanding rutin:fraksi

etilasetat

;. Sinar tampak pereaksi uap ammonia

. *enampak ber%ak UD @8.*enampak ber%ak UD 66

U,i Aki/ias Ani-ak$&i

Ui akti$itas antibakteri

dilakukan terhadap ekstrak etanol

daun kelor, fraksi n-heksan dan fraksi

etilasetat pada konsentrasi !"

berdasarkan hasil ui pendahuluan.

Untuk mengetahui akti$itas

antibakteri ekstrak etanol daun kelor,

fraksi n-heksan dan fraksi etilasetat

maka larutan sampel yang telah

diuikan dengan S. aureus digoreskan

pada media M). *ada gambar 6 dan 5

terlihat fraksi etilasetat pada

konsentrasi !" telah dapat

membunuh bakteri S. aureus yang

mana pada kadar tersebut sudah tidak

ada koloni bakteri sehingga dapat

dikatakan bahwa fraksi etilasetatlah

yang paling poten terhadap bakteri S.

aureus.



Cambar 6. )asil goresan pada media agar M) untuk kelompok kontrol

&eterangan

&M &ontrol Media&* &ontrol *elarut

&F1 &ontrol Fraksi etilasetat

&F) &ontrol Fraksi n-heksan

&1 &ontrol 1kstrak etanol

&S &ontrol Suspensi akteri

Cambar 5. )asil goresan pada media agar M) untuk kelompok sampel

&eterangan

1 1kstrak etanol daun kelor

F) Fraksi n-heksan

F1 Fraksi etilasetat

Is+lasi an Ka&ak$&isasi s$n!a"a

Bi+aki

Isolasi dilakukan terhadap fraksi

etilasetat dengan metode

&romatografi 'apis (ipis *reparatif

2&'(*4. Isolat yang didapat

dilakukan ui &'(. &arakterisasi

isolat dilakukan dengan )*'+

dengan pembanding kuersetin.



Cambar 3. &romatogram standar kuersetin

Cambar ari penelitian dapat diambil

beberapa kesimpulan

;. Fraksi teraktif dari ekstrak etanol

daun kelor adalah fraksi etilasetat


http:///reader/full/isolasi-dan-karakterisasi-senyawa-bioaktif-pada-daun-kelor-moringa-oleifera-lamk-yang-berpot… 10/10

yang pada konsentrasi !"

mampu membunuh bakteri S.

aureus ditandai dengan tidak

adanya pertumbuhan koloni

. )asil isolasi dengan &romatografi

'apis (ipis *reparatif 2&'(*4

menunukkan isolat telah murni

se%ara &'( ditandai dengan

adanya satu ber%ak pada plat &'(

. &arakterisasi isolat dengan )*'+

dengan baku pembanding

kuersetin memberikan waktu

retensi yang mirip menunukkan

bahwa isolat merupakan kuersetin.

DAFTAR PUSTAKA

enabdesselam FM. Et.al., !!5,

Antioidant a%ti$ities of alkaloid

etra%ts of two Algerian spe%ies

of Fumaria Fumaria

capreolata and Fumaria

bastardii, A+C *ubli%ation ec.

!at. "rod ., ;- 2!!54 3-@

+huang *) et al., !!6, Anti-fungal

a%ti$ity of %rude etra%ts and

essential oil of Moringa oleifera

'am., #ournal of Bioresource$echnology %& '())*+ ((-(

+humark * et al. !!5. (he in vitro

and e/ vivo antioidant properties,

hypolipidaemi% and

antiatheros%leroti% a%ti$ities of

water etra%t of Moringa oleifera

'am. 'ea$es. #ournal of

Ethnopharmacology ;;62!!34

8

isolasi-dan-karakterisasi-senyawa-bioaktif-pada-daun-kelor-moringa-oleifera-lamk-yang-berpotensi-sebagai-antibakteri-terhadap-staphylococcus-aureus.rtf...

Documents