induksi embrio somatik beberapa varietas apel...
TRANSCRIPT
INDUKSI EMBRIO SOMATIK BEBERAPA VARIETAS APEL
PADA MEDIA DENGAN KOMPOSISI ASAM AMINO YANG
BERBEDA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan
Mencapai Derajat Sarjana S1
Jurusan Agronomi
Diajukan Oleh :
DINAR NOVELLIA AISYAH
Nim. 201310200311017
JURUSAN AGRONOMI
PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI
FAKULTAS PERTANIAN PETERNAKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
MALANG
2017
i
ii
iii
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan pada tanggal 13 Juni 1995, sebagai
putra pertama dari tiga bersaudara. Ayahanda bernama Liliek,
S.T dan Ibunda Siswanti Pujihastuti. Penulis menyelesaikan
pendidikan Sekolah Dasar di SDN Petungasri 1 Pandaan pada
tahun 2007, kemudian melanjutkan ke jenjang Sekolah
Menengah Pertama di MTs Muallimaat Muhammadiyah Yogyakarta lulus tahun
2010, dan masuk Sekolah Menengah Atas MA Muallimaat Muhammadiyah
Yogyakarta lulus tahun 2013.
Penulis melanjutkan pendidikan di Program Studi Agroteknologi, Jurusan
Agronomi, Fakultas Pertanian Peternakan, Universitas Muhammadiyah Malang
pada tahun 2013. Semasa perkuliahan penulis aktif pada beberapa kegiatan
kampus, diantaranya adalah sebagai asisten Laboratorium Agronomi pada tahun
2015, sekretaris umum Himpunan Mahasiswa Jurusan Agronomi (HIMAGRO)
pada periode 2014 - 2015, dan anggota bidang keilmuan dan penalaran Badan
Eksekutif Mahasiswa Fakultas Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah
Malang (BEM FPP UMM) pada periode 2015 – 2016.
iv
PERSEMBAHAN
Skripsi ini saya persembahkan :
Sebagai bentuk rasa syukur kepada Allah SWT atas berkat rahmatNya
akhirnya penulis dapat menyelesaikan Skripsi dengan judul “Induksi
Embrio Somatik Beberapa Varietas Apel pada Media dengan Komposisi
Asam Amino yang Berbeda”
Sebagai rasa hormat dan ucapan terima kasih kepada Ibu Fatimah
Nursandi dan Bapak Syarif Husen, dan segenap dosen-dosen Agronomi
yang telah membimbing serta memberikan ilmu pengetahuan yang
bermanfaat dengan keikhlasan dan kesabaran.
Sebagai tanda bakti, hormat dan rasa terimakasih yang tiada tara
dipersembahkan kepada Ayahanda, Ibunda, dan adik adik tercinta yang
telah memberikan doa, kasih sayang, segala dukungan baik moril maupun
materil, dan cinta kasih yang tiada terhingga.
Teruntuk tim skripsi serta sahabat-sahabat yang tidak dapat disebutkan
satu persatu, terimakasih atas bantuan ilmu, nasihat, semangat, dukungan
dan kebersamaannya selama ini.
v
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Warahmatullohi Wabarakatuh
Syukur Alhamdulillah penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas
limpahan rahmat dan hidayahNya, sehingga penulis mampu menyelesaikan
laporan penelitian dengan judul “Induksi Embrio Somatik Beberapa Varietas
Apel pada Media dengan Komposisi Asam Amino yang Berbeda”.
Laporan penelitian ini merupakan salah satu persyaratan untuk
menyelesaikan pendidikan tingkat Sarjana pada Jurusan Agronomi, Fakultas
Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih atas
segala bantuan baik berupa tenaga dan pikiran, kepada yang terhormat :
1. Dr. Ir. Fatimah Nursandi, MSi. dan Dr. Ir. Syarif Husen, MP. sebagai
pembimbing saya yang telah bersedia membimbing dengan sabar dan
mengarahkan selama penyusunan skripsi ini hingga selesai.
2. Ir. Hartawati, MP. dan Erfan Dani Septa SP. MP. sebagai penguji yang
telah banyak membantu penulis dan dengan sabar membimbing dan
mendampingi pada proses penyempurnaan skripsi ini hingga selesai.
3. Dr. Ir. Untung Santoso, MSi. yang telah memberikan bimbingan selama
pelaksanaan penelitian hingga selesai.
4. Ir. Sufianto, MM. yang telah memberikan bimbingan analisis data skripsi
penelitian.
5. Teman-teman Agronomi angkatan 2013 yang selama ini membantu
dalam pelaksanaan penelitian ini hingga selesai.
Akhir kata, penulis menyadari bahwa laporan penelitian ini masih jauh
dari kesempurnaan. Penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang
bersifat membangun demi sempurnanya penulisan skripsi ini. Semoga
bermanfaat.
Wassalamu’alaikum Warahmatullohi Wabarakatuh
Malang, 20 Juli 2017
Penulis
vi
DAFTAR ISI Teks Hal
HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................... i
SURAT PERNYATAAN................................................................................. ii
HAK KEKAYAAN INTELEKTUAL DAN HAK PUBLIKASI .................... ii
RIWAYAT HIDUP ........................................................................................ iii
PERSEMBAHAN .......................................................................................... iv
KATA PENGANTAR ................................................................................... v
DAFTAR ISI .................................................................................................. vi
DAFTAR TABEL ....................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR .................................................................................. ix
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................... x
RINGKASAN ............................................................................................. xi
ABSTRACT ................................................................................................ xii
I. PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
1.1.Latar Belakang ......................................................................................... 1
1.2.Rumusan Masalah .................................................................................... 3
1.3.Tujuan Penelitian ..................................................................................... 3
1.4.Hipotesis .................................................................................................. 3
II. TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 4
2.1.Tanaman Apel ..................................................................................... 4
2.2.Kultur Jaringan .................................................................................... 4
2.3. Induksi Embrio Somatik .................................................................. 6
2.4. Media ............................................................................................ 10
2.5 Asam Amino ................................................................................... 12
III. BAHAN DAN METODE .................................................................. 18
3.1. Tempat dan Waktu Pelaksanaan ..................................................... 18
3.2. Alat dan Bahan ............................................................................... 18
3.2.1. Alat ............................................................................................ 18
3.2.2. Bahan ........................................................................................ 18
3.3. Rancangan Penelitian ...................................................................... 19
3.4. Pelaksanaan Penelitian .................................................................... 20
3.4.1. Sterilisasi Alat ............................................................................ 20
vii
3.4.2. Pembuatan Larutan Stok ......................................................... 21
3.4.3. Pembuatan Media Murashige & Skoog (MS) ......................... 21
3.4.4. Subkultur Eksplan ................................................................... 22
3.4.5. Pengamatan Menggunakan Mikroskop SEM ......................... 23
3.4.6. Pengamatan Histologi ............................................................. 23
3.5 Variabel Pengamatan ................................................................... 24
3.6 Analisis dan Penyajian Data ........................................................ 26
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN........................................................ 28
4.1. Hasil ............................................................................................. 28
4.1.1. Bobot Segar Kalus ................................................................. 28
4.1.2. Panjang Kalus ........................................................................ 31
4.1.3. Lebar Kalus ........................................................................... 33
4.1.4. Tekstur Kalus ......................................................................... 33
4.1.5 Warna Kalus ........................................................................... 36
4.1.6. Kalus Embriogenik ................................................................. 37
4.1.7. Hasil Pengamatan Mikroskopis .............................................. 39
4.2 Pembahasan .................................................................................. 43
V. KESIMPULAN ................................................................................. 52
5.1 Kesimpulan ................................................................................... 52
5.2 Saran ............................................................................................. 52
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 53
LAMPIRAN ................................................................................................... 58
viii
DAFTAR TABEL
No Teks Hal
1. Skoring warna Munsell ............................................................................ 22
2. Rerata bobot segar kalus apel (Malus sylvestris Mill), pertambahan
bobot kalus segar, dan persentase pertambahan bobot segar kalus
dengan kombinasi perlakuan varietas apel menggunakan asam amino ... 24
3. Rerata panjang kalus kalus apel (Malus sylvestris Mill) umur 0 MST
sampai dengan 8 MST pada perlakuan varietas apel dan komposisi
asam amino ............................................................................................... 28
4. Rerata lebar kalus kalus apel (Malus sylvestris Mill) umur 0 MST
sampai dengan 8 MST pada perlakuan varietas apel dan komposisi
asam amino ............................................................................................... 30
5. Rerata tekstur kalus apel (Malus sylvestris Mill) umur 4 MST dan 8
MST pada perlakuan varietas apel dan komposisi asam amino ............... 31
6. Rerata persentase warna kalus apel (Malus sylvestris Mill) umur 4
MST dan 8 MST pada perlakuan varietas apel dan komposisi asam
amino ........................................................................................................ 32
7. Rerata persentase kalus apel embriogenik pada perlakuan kombinasi
varietas apel dan komposisi asam amino ................................................. 33
ix
DAFTAR GAMBAR
No Teks Hal
1. Fase pertumbuhan embrio ....................................................................... 9
2. Struktur kimia kasein hidrolisat .............................................................. 12
3. Struktur kimia prolin ............................................................................... 13
4. Kalus embriogenik kedelai dengan perlakuan media MS + BAP 1
ppm + kinetin 2 ppm + kasein hidrolisat 200 ppm + prolin 100 ppm .... 15
5. Denah percobaan ..................................................................................... 18
6. Tekstur kalus apel ................................................................................... 31
7. Warna kalus apel ..................................................................................... 33
8. Kalus apel embriogenik .......................................................................... 34
9. Kalus remah pada pengamatan menggunakan kamera DSLR,
mikroskop digital, dan mikroskop SEM ................................................. 35
10. Kalus kompak pada pengamatan menggunakan kamera DSLR,
mikroskop digital, dan mikroskop SEM ................................................. 35
11. Penampang melintang kalus umur 4 MST .............................................. 37
12. Penampang melintang kalus umur 8 MST .............................................. 37
13. Penampang melintang kalus umur 4 MST dan 8 MST ........................... 41
14. Kalus embriogenik dan penampang melintangnya umur 8 MST ........... 43
x
DAFTAR LAMPIRAN
No Teks Hal
1. Analisis ragam bobot segar kalus umur 0 MST ...................................... 54
2. Analisis ragam bobot segar kalus umur 8 MST ...................................... 54
3. Analisis ragam pertambahan bobot segar kalus ...................................... 55
4. Analisis ragam persentase pertambahan bobot segar kalus ................... 55
5. Analisis ragam panjang kalus umur 0 MST sampai 8 MST ................... 56
6. Analisis ragam lebar kalus umur 0 MST sampai 8 MST ........................ 56
7. Analisis ragam tekstur kalus umur 8 MST .............................................. 57
8. Cara pengamatan menggunakan mikroskop SEM (Scanning Elektron
Microscope) ............................................................................................ 58
9. Cara pengamatan histologi ...................................................................... 59
10. Komposisi media MS .............................................................................. 60
11. Dokumentasi ........................................................................................... 61
53
DAFTAR PUSTAKA
Al-Khayri, J. 2011. Influence Of Yeast Extract and Casein Hydrolysate On Callus
Multiplication and Somatic Embryogenesis of Date Palm (Phoenix
dactylifera L.). Elsevier, Scientica Horticulture 130 (2011) 531-535.
Alfian, F. 2015. Mikropropagasi Tanaman Tebu (Saccharum officinarum L.)
Varietas NXI 1-3 Melalui Embriogenesis Somatik. Program Studi
Agroteknologi. Fakultas Pertanian. Universitas Jember. Jember.
Ageel, S., and K. Elmeer. 2011.Effects of Casein Hydrolysates and Glutamine on
Callus and Somatic Embryogenesis of Date Palm (Phoenix dactylifera L.).
New York Science Journal 4(7):121-125.
Almatseir, S. 2004. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. PT. Gramedia Pustaka Umum.
Jakarta.
Bambang, S. 1997. Budidaya Apel. Kanisius. Yogyakarta.
Bano, S. M. Jabeen, F. Rahim, dan I. Ilahi. 2005. Callus Induction and
Regeneration in Seed Explants of Rice (Oryza sativa CV. SWAT-II).
Pakistan Journal Botani., 37 (3) : 829-836
Baskaran N, S. Manoharan, S. Balakrishnan, P. Pugalendhi,. 2010.
Chemopreventive Potential of Ferulic Acid in 7,12 –Dimethylbenz [a]
anthracene - Induced Mammary Carcinogenesis in Sprague – Dawley rats.
Eropean Journal of Pharmacology. 637:22−9.
Bates, L.S., R.P. Walden, dan I.D. Teare. 1975. Rapid Determination of Free
Proline For Water stress Studies. Plant and Soil 39:205-207.
Bhojwani, M.K, Razdan. 1989. Plant Tissue Culture. Theory and Practice, a
Revised. Edition. Elsvier. Amsterdam.
BPS (Badan Pusat Statistik). 2012. Statistik Produksi Buah Apel Lokal pada Tahun
2004 – 2012. Diakses dari http://www.bps.go.id pada tanggal 20 September
2016.
Cempaka, A., Sunarto S., dan Laksmi K. 2015. Pengaruh Metode Pengolahan
(Juicing dan Blending) Terhadap Kandungan Quercetin Berbagai Varietas
Apel Lokal dan Impor. Indonesian Journal of Human Nutrion. Universitas
Brawijaya. Malang.
Chawla, H. S. 2000. Introduction to Plant Biotechnology. Science Publisher Inc.
USA.
Dantas, A C M., J. I Boneti, R. O Nodari., dan M. P Guerra. 2006. Embryo Rescue
From Interspecific Crosses in Apple Rootstock. Pesq. Agropec. Bras.,
Brasilia, v.41, n.6, p.969-973.
Deb, N., B. Alam; S.D. Gupta, and B.C. Ghosh. 1996. Cell Membrance Stability of
Leaf Tissue and Its Relationship With Drought ToLerance in Arachis.
Indian J. Exp. Biol. 34:1044.
Dewanti, P., L. I Widuri, C. Ainiyati, P. Okviandari, Maisaro, dan B. Sugiharto.
2016. Elimination of SCMV (Sugarcane Mozaik Virus) abd Rapid
Propagation of Virus-free Sugarcane (Saccharum officinarum L.) Using
Somatic Embryogenesis. Elsevier. Procedia Chemistry 18 : 96-102.
Dinas Pertanian .2008. Kondisi Apel di Kota Batu. Diakses dari
http://www.pertanian.go.id pada tanggal 20 September 2016.
54
Dzuraibak, R. F,. 2014. Inisiasi Dan Proliferasi Kalus Serta Induksi Kalus
Embriogenik Pada Kultur Antera Kedelai (Glycine max L. Merrill).
Disertasi – Institut Pertanian Bogor. Bogor. Hal 8-12
Elham, Z., dan N. S Taher. 2016. Optimizing of Synthetic Seed of Malling Apple
(Malus domestica) Rootstock CV. M26 and CV. MM106. Journal of Plant
Science 4 (3) : 46-51.
Fatmawati, A. 2008. Kajian Konsentrasi BAP dan 2,4-D Terhadap Induksi Kalus
Tanaman Artemisia annua. L. Secara In Vitro. Skripsi. Universitas Negeri
Semarang. Surakarta.
Frey, L., Y. Saranga, dan J. Janick. 1992. Somatic Embryogenesis in Carnation.
Hortscience 27 (1) : 63-65.
George E. F,. Hall M. A,. dan Klerk G. J. 2008. Plant Propagation by Tissue
Culture: The Background. Vol: 1.3rd. Edition Spriger. Netherlands. Hal :
65-113.
Gunawan, L. W. 1992. Teknik Kultur Jaringan. Laboratorium Kultur Jaringan
Tanaman Pusat Antar Universitas Bioteknologi Institut Pertanian Bogor.
Bogor.
Hendaryono, D. P. S, dan A. Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan Pengenalan
dan Petunjuk Perbanyakan Tanaman Secara Vegetatif Moderen. Kanisius.
Yogyakarta.
Hever. 1999. Osmoregulatory Role of Proline in Plant Exposed to Environtmental
Stress, in Perssarakli (Ed.). Handbook of Plant and Crop Stress. Second
Edition, Revised and Expanded 675-695.
Husin, N., M. Jalil, R. Y. Othman, N. Khalid. 2014. Enhancement of Regeneration
Efficiency In Banana (Musa acuminata cv. Berangan) By Using Proline and
Glutamine. Elsevier. Science Horticulture 168 : 33-37.
Ibrahim M. S. D. 2015. Pengembangan Metode Embriogenesis Somatik,
Peningkatan Keragaman Genetik Kopi Arabika dan Deteksi Dini
Keragaman Somaklonal Menggunakan SSR. Disertasi - Institut Pertanian
Bogor. Bogor.
Indra. 2008. Mikrobiologi dan ParasitologiI. PT. Citra AdityaBakti. Bandung.
Irawan, D. 2007. Potensi Pengembangan Tanaman Apel (Malus sylvestris Mill)
Berdasar Aspek Agroklimat Di Jawa Timur. Disertasi - Institut Pertanian
Bogor. Bogor.
Jahangir, G. Z., dan I. A Nasir. 2010. Various Hormonal Supplementations Active
Sugarcane Regeneration In- Vitro. Journal of Agriculture Science 2 (4) :
231-237.
Khumaida, N., dan T. Handayani. 2010. Induksi dan Proliferasi Kalus Embriogenik
pada Beberapa Genotip Kedelai. Journal Agro Indonesia 38 (1) : 19 – 24.
Kosmiatin, M., A. Purwito, G. A. Wattimean, dan I. Mariska. 2014. Induksi
Embriogenesis Somatik Dari Jaringan Endosperma Jeruk Siam (Citrus
noblis Lour.) cv Simadu. Journal Agronomi Indonesia 42 (1) : 44-51
Ladyman, A.R. dan B. Girard. 1992. Nonhormonal Factor That Improve The
Multiplication and Development of Somatic Embryos of Cucumber
(Cucumis sativus L.). Acta Horticulturae 300.
Leyser, O. 2002. Molecular Genetics of Auxin Signaling. Annu rev Plant Biol 53 :
377 – 398.
55
Lizawati. 2012. Induksi Kalus Embriogenik Dari Eksplan Tunas Apikal Tanaman
Jarak Pagar (Jathropha curcas L.) Dengan Penggunaan 2,4-D dan TDZ.
Jurnal Fakultas Pertanian Universitas Jambi Vol. 1 No. 2 : 75-87.
Loganathan M, Maruthasalam S. Shiu L. Y, Lien WC, Hsu W. H, Lee P. F, Yu C.
W, Lin C. H,. 2010. Regenaration of Soybean (Glycine max L. Merril)
Through Direct Somatic Embryogenesis from the Immature Embryonic Shoot
Tip. In Vitro Cell Dev Biol Plant. 46 : 265-273.
Mattjik, N. A. 2005. Peran kultur Jaringan dalam Perbaikan Tanaman. FP. Institut
Pertanian Bogor. Bogor.
Mapegau. 2006. Pengaruh Cekaman Air Terhadap Pertumbuhan dan Hasil
Tanaman Kedelai (Glycine max L. Merr). Program Studi Agronomi, Jurusan
Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian Universitas Jambi, Jambi.
Molina, D.M., M.E. Aponte, H. Cortina dan G. Moreno. 2002. The Effect of
Genotype and Explant Age on Somatic Embryogenesis of Coffee. Plant Cell
Tissue and Organ Culture 71: 117 – 125.
Nanda, R. M., dan G. R Rout. 2003. In Vitro Somatic Embryogenesis and Plant
RegenerationIn Acacia Arabica. Plant Cell Tiss. Org. Cult. 73 : 131-135.
Naz, S., A. Ali, dan A. Siddique. 2008. Somatic Embryogenesis dan Planlet
Formation System for Purifying Sugarcane Clones. African Journal of
Biotechnology 11 (42) : 9961 – 9969.
Pardal, S., T. I. R. Utami, dan M. Herman. 2001. Organogenesis dan
Embriogenesis Somatik Kedelai Secara In Vitro. Prosiding Seminar hasil
Rintisan dan Bioteknologi Tanaman. 28-36.
Paul, H., M. Belaizi, dan B. S Sangwan-Norreel. 1994. Somatic Embryogenesis in
Apple. J. Plant Physicl. Vol. 143 : 78-86.
Peterson, G. R., Smith. 1991. Effect of Abscicic Acid and Callus Size on
Regeneration of American And International Rice Variets. Plant Cell Rep
10: 35-38.
Pierik L. L. M. 1987. In vitro Cultures of Hinger Plant. Martinus-Nijhoff Publ.
Dordrecht. Netherlands. Hal : 344.
Purnamaningsih, R. 2002. Regenerasi Tanaman Melalui Embriogenesis Somatik
dan Beberapa Gen yang Mengendalikannya. Buletin Agrobio 5 (2) : 51-58.
Purnamaningsih, R., I. Mariska. 2005. Seleksi In Vitro Tanaman Padi untuk Sifat
Ketahanan Terhadap Aluminium. Jurnal Bioteknologi Pertanian, Vol. 10,
No. 2 : 66-69.
Purnamaningsih, R. 2012. Regenerasi Tanaman Melalui Embriogenesis Somatik
dan Beberapa Gen yang Mengendalikannya. Buletin AgroBio. 5 (2) : 51-58.
Razdan, M. K.. 2003. Introduction to Plant Tissue Culture. Departement of Botany.
Ramjas Collage. Delhi
Rahardja, P. C., dan Wahyu, W. 2003. Aneka Cara Memperbanyak Tanaman.
Agromedia Pustaka. Jakarta.
Richard, R. A., C. W. Denett, C. O. Qualset, E. Edstein, J. D. Norlyn, and M. D.
Winslow. 1987. Variation in Yield of Grain and Biomass in Wheat, Barley
and Tricale in a Salt-Affected fuclid. Field Crops Res. 15:277.
Ryugo, K. 1988. Fruit Culture It’s Science and Art. John Wilwy and Sons Inc.
USA.
Sari, R. M., 2012. Pengaruh Berbagai Bagian Benih Sebagai Sumber Eksplan
dengan Umur Kecambah Enam Hari Terhadap Induksi Embrio Somatik
56
Dua Varietas Kacang Tanah (Arachis hypogea L.). Skripsi. Universitas
Negeri Lampung. Lampung
Siregar, L., C. Lai-Keng dan B. Peng-Lim. 2010.Pengaruh Kasein Hidrolisat dan
Intensitas Cahaya terhadap Produksi Biomassa dan Alkaloid Canthinone di
Dalam Kultur Suspensi Sel Pasak Bumi (Eurycomalongifolia Jack). Makara
Sains14(1): 12-21.
Shiddiqi. U. A., Murniati, I. S. Sukemi. 2013. Pengaruh Pemberian Zat Pengatur
Tumbuh Terhadap Pertumbuhan Bibit Stum Mata Tidur Tanaman. Fakultas
Pertanian Universitas Riau. Pekanbaru.
Sudarmadji. 2003. Penggunaan Benzil Amino Purine pada Pertumbuhan Kalus
Kapas Secara In Vitro. Buletin Teknik Pertanian 8 (1) : 8-10.
Sujatno, A., R. Salam, Bandriyana, A. Dimyati. 2015. Studi Scanning Electron
Microscopy (SEM) untuk Karakterisasi Proses Oxidasi Paduan Zirkonium.
Jurnal Forum Nuklir (JFN). Vol. 9. No. 2 :44-50
Sunandar, A. 2015. Induksi Embriogenesis Somatik Sengon (Falcataria moluccana)
dengan Perlakuan Thidiazuron, Prolin, Dan Cahaya. Tesis. Institut
Pertanian Bogor. Bogor.
Surachman, D. 2011. Teknk Pemanfaatan Air Kelapa untuk Perbanyakan Nilam
Secara In Vitro. Buletin Teknik Pertanian. Vol. 16, No. 1 :31-33.
Thadavong, S., P. Sripichitt, W. Wongyai, P. Jompuk. 2004. Callus Induction and
Plant Regeneration from Mature Embryos of Glutinos Rice (Oryza sativa
L.) Cultivar TDKI. Kasetart Journal (Nat, Sci) 36 : 334 – 344.
Toki, S. 1997. Rapid and efficient Agrobacterium- Mediated Transformation in
Rice. Plant Mol. Biol. Rep. 15(1):16-21.
Trigiano, R.N. and D.J. Gray. 2010. Plant Tissue Culture, Development, and
Biotechnology. CRC Press. Florida.
Turhan, H. 2004. Callus Induction And Growth In Transgenic Potato Genotype.
Africa Journal of Biotechnology. Vol. 3 (8). 375-378.
Wardani, D. P., Solichatun, A. D Setyawan. 2004. Pertumbuhan dan Produksi
Saponin Kultur Kalus Talinum paniculatum Gaertn. Pada Variasi
Penambahan Asam 2,4-Diklorofenoksi Asetat (2,4-D) dan Kinetin. Jurnal
Biofarmasi. Vol. 2 No. 1 :35-43.
Wardiyati, T. 1998. Kultur Jaringan Tanaman Hortikultura. FP UB. Malang.
Warintek (Warung Informasi dan Teknologi) Ristek. 2011. Pisang. Diakses dari
http://www.warintek.ristek.go.id/pertanian/pisang.pdf. Pada tanggal 20
September 2016.
Wetherell, D. F. 1982. Pengantar Propagasi Tanaman Secara In Vitro. United
States of America: AveryPublishing Group, Inc.
Widiarti, W., M. C. Ichsan, dan D. Setiawan. 2007. Respon Kalus Bambu
(Bambusa vulgaris Sp) Terhadap Beberapa Konsentrasi ZPT pada Media
Pengkalusan. Fakultas Pertanian. Universitas Negeri Jember. Jember.
Widuri, L. I., P. Dewanti, dan S. Soepardjono. 2015. Induksi Somatik
Embriogenesis Tanaman Tebu Transgenik Bebas Virus (Saccharum
officinarum. L) SUT Event 02 Menggunakan 2,4-D Dan BAP. Berkala
Ilmiah Pertanian. Vol. 10. No. 10 :1-5.
Widyasmoro, L. E. 2007. Profil Pertumbuhan dan Kandungan Glikosida Jantung
Kalus Daun Kamboja Jepang (Adenium obseum (Forssk.) Roe m. & Schult.)
Dalam Woody Plant Medium Dengan Variasi Konsentrasi Asam 2,4-
57
Diklorofenoksiasetat dan 6-Furfurylaminopurine. Skripsi. Universitas
Sanatha Dharma. Yogyakarta
Widyastuti, N. 2002. Inovasi Memperbanyak Bibit Tanaman. Diakses dari
www.sinarharapan.co.id/berita/0202/13/ipt02.html. Tanggal 20 September
2016.
Widyastuti, N., dan T. Donowati. 2001. Peranan Beberapa Zat Pengatur Tumbuh
(ZPT) Tanaman pada Kultur In Vitro. Jurnal Sains dan Teknologi Indonesia
3 (5) : 55-63.
Widyawati, G. 2010. Pengaruh Variasi Konsentrasi NAA dan BAP Terhadap
Induksi Dan Pertumbuhan Kalus Jarak Pagar (Jatropha curcas L.). Tesis.
Universitas Negeri Surakarta. Surakarta.
Yelnititis, dan T. E. Komar. 2008. Upaya Induksi Kalus Embriogenik Dari
Potongan Daun Ramin.ITTO Cites Project dan Pusat Penelitian Dan
Pengembangan Hutan Dan konveresi Alam. Kementrian Kehutanan. Bogor.
Yelnititis. 2013. Induksi Embrio Somatik Shorea pinaga Scheff. Pada Kondisi Fisik
Media Berbeda. Jurnal Pemuliaan Tanaman Hutan. Vol. 7, No. 2 :73-84.
Yuan, F., Q. Wang, Q. Pan, G. Wang, J. Zhao, Y. Tian, dan K. Tang. 2011. An
Efficient Somatic Embryogenesis Based Plant Regeneration From The
Hypocotyl of Catharanthus roseus. African Journal of Biotechnology. Vol.
10 (66) : 14786-14795.
Yusnita. 2003. Kultur Jaringan : Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efisien.
Agro Media Pustaka. Jalarta. Hal : 105
Yuwono. 2003. Biologi Molekular. Erlangga. Jakarta. Hal 24