Identifikasi Salmonella sp. pada Sampel Minuman (Susu Kedelai)

I. Tujuana. Mahasiswa mengetahui teknik pemeriksaan Salmonella sp. pada sampel minuman (susu kedelai)b. Mahasiswa mengetahui hasil pemeriksaan Salmonella sp. pada sampel minuman (susu kedelai)

II. MetodeMetode yang digunakan adalah metode analisis kualitatif.

III. PrinsipPengenceran sampel dimasukkan ke media pemupuk SCBdiinkubasi pada incubator pada suhu 370C 24 jamdiinokulasikan pada media SSA dan MCAdiinkubasi pada suhu 370C 24 jam diamati hasil.

IV. Dasar Teoria. Tinjauan tentang PanganPangan adalah bahan-bahan yang dimakan setiap hari untuk memenuhi kebutuhan bagi pemeliharaan, pertumbuhan, kerja dan penggantian sel tubuh yang rusak. Oleh karena itu pangan atau makanan sangat dibutuhkan oleh manusia sebagai sumber zat gizi dan juga sumber energi. Namun pangan juga dapat sebagai sarana penggangu kesehatan bagi manusia karena pangan dapat terkontaminasi oleh cemaran fisik, kimia maupun mikrobia.Hampir semua bahan pangan tercemar oleh berbagai mikroorganisme dari lingkungan sekitarnya. Beberapa jenis mikroba yang terdapat pada bahan pangan adalah Salmonella sp, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, kapang, khamir serta mikroba patogen lainnya. Pencemaran mikroba pada bahan pangan merupakan hasil kontaminasi langsung atau tidak langsung dengan sumbersumber pencemaran mikroba, seperti tanah, udara, air, debu, saluran pencernaan dan pernafasan manusia maupun hewan. Hanya sebagian saja dari berbagai sumber pencemar yang berperan sebagai sumber mikroba awal yang selanjutnya akan berkembang biak pada bahan pangan sampai jumlah tertentu.

Bahan pangan dapat bertindak sebagai perantara atau substrat untuk tumbuhnya mikroorganisme yang bersifat patogenik terhadap manusia.Penyakit menular yang cukup berbahaya seperti tipes, kolera, disentri, tbc, poliomilitis dengan mudah disebarkan melalui bahan pangan yang disebabkan oleh mikroorganisme patogenik

Minuman adalah segala sesuatu yang dapat dikonsumsi dan dapat menghilangkan rasa haus. Minuman umumnya berbentuk cair, namun ada pula yang berbentuk padat seperti es krim atau es lilin. Minuman kesehatan adalah segala sesuatu yang dikonsumsi yang dapat menghilangkan rasa haus dan dahaga juga mempunyai efek menguntungkan terhadap kesehatan. Minuman merupakan bahan yang sangat dibutuhkan oleh makhluk hidup, yang berguna bagi kelangsungan hidup. Oleh karena itu, kualitas minuman harus terjamin agar konsumen sebagai pemakaian produk minuman yang mengandung bahan tambahan makanan, seperti bahan pengawet makanan.

b. Tinjauan tentang Susu KedelaiSusu kedelai adalah salah satu hasil pengolahan yang merupakan hasil ekstraksi dari kedelai. Protein susu kedelai memiliki susunan asam amino yang hampir sama dengan susu sapi sehingga susu kedelai seringkali digunakan sebagai pengganti susu sapi bagi mereka yang alergi terhadap protein hewani.Susu kedelai merupakan minuman yang bergizi tinggi, terutama karena kandungan proteinnya. Selain itu susu kedelai juga mengandung lemak, karbohidrat, kalsium, phosphor, zat besi, provitamin A, Vitamin B kompleks (kecuali B12), dan air. Namun perhatian masyarakat kita terhadap jenis minuman ini pada umumnya masih kurang.

c. Tinjauan tentang SalmonellaSalmonellamerupakan suatu genus bakteri enterobakteria gram-negatif berbentuk tongkat yang menyebabkan tifus, paratifus, dan penyakit foodborne. Spesies-spesiesSalmonelladapat bergerak bebas dan menghasilkan hydrogen sulfida.Salmonelladinamai dari Daniel Edward Salmon, ahli patologi Amerika, walaupun sebenarnya, rekannya Theobald Smith (yang terkenal akan hasilnya pada anafilaksis) yang pertama kali menemukan bacterium tahun 1885 pada tubuh babi.Berikut adalah klasifikasi dari BakteriSalmonella:Kerajaan:BakteriKelas:Gamma ProteobacteriaOrder:EnterobacterialesKeluarga:EnterobacteriaceaeGenus:SalmonellaSpecies:S. enterica(Anonimb, 2009).Salmonella adalah penyebab utama daripenyakityang disebarkan melalui makanan (foodborne diseases). Pada umumnya,serotipeSalmonella menyebabkan penyakit pada organ pencernaan. Penyakit yang disebabkan oleh Salmonella disebutsalmonellosis. Ciri-ciri orang yang mengalamisalmonellosisadalahdiare, keram perut, dan demam dalam waktu 8-72 jam setelah memakan makanan yang terkontaminasi oleh Salmonella.Gejala lainnya adalahdemam,sakit kepala,mualdanmuntah-muntah.Tiga serotipe utama dari jenisS. entericaadalahS. typhi,S. typhimurium, danS. enteritidis. S. typhi menyebabkan penyakit demam tifus (Typhoid fever), karenainvasibakteri ke dalam pembuluh darah dan gastroenteritis,yang disebabkan oleh keracunan makanan/intoksikasi.Gejala demam tifus meliputi demam, mual-mual, muntah dan kematian.S. typhimemiliki keunikan hanya menyerang manusia, dan tidak ada inang lain.InfeksiSalmonella dapat berakibat fatal kepada bayi, balita, ibu hamil dan kandungannya serta orang lanjut usia. Hal ini disebabkan karena kekebalan tubuh mereka yang menurun. Kontaminasi Salmonella dapat dicegah dengan mencuci tangan dan menjaga kebersihan makanan yang dikonsumsi.Tujuan dari pengidentifikasian dalam uji suatu bakteri (Salmonella) pada metode ini adalah untuk mengetahui mutu ataupun kualitas dari suatu produk berdasarkan kemasan atau sifat mikrobiologinya. Pengujian mikrobiologi pada sampel makanan akan selalu mengacu kepada persyaratan makanan yang sudah ditetapkan. Sebagai contoh sampel pada makanan yakni Parameter uji mikrobiologi padamayonnaiseyang dipersyaratkan sesuai Standar Nasional Indonesia dalam pengujianSalmonella.Prinsip pengujian deteksiSalmonellamenurut Metode Analisis Mikrobiologi (MA PPOM 74/MIK/06) yaitu ada empat tahap untuk mendeteksi adanyaSalmonella:1.Pra. Pengkayaan dalam media cair non selektif yang diinkubasi pada 371 C selama 18+2jam.2.Pengkayaan dalam media cair selektif yang diinkubasi pada 41,5 + 1 C selama 24 3 jam dalam RVS cair dan 371 C selama 243 jam MKTTn cair.3.Inokulasi & identifikasi dalam 2 media padat selektif, media selektif pertama diinkubasi pada 371 C selama 243 jam dan dengan media yang digunakan.4.Konfirmasi terhadap identitasSalmonelladengan uji biokimia dan serologi.

V. Alat dan Bahana. Alat Neraca analitik- Api bunsen Gelas beaker- Autoclave Gelas ukur- Bola hisap Pengaduk kaca- Rak tabung reaksi Botol semprot- Botol steril Erlenmeyer- Benang pulung Kompor listrik- Ose bulat Pipet ukur- Jarum Tabung reaksi- Plate Tabung durham- Mikroskop dan objek glassb. Bahan Sampel (susu kedelai) Aluminium foil Kapas berlemak Label Minyak imersi Tissuec. Media/reagen Media Mac Conkey Agar (MCA) Media Salmonella Shigella Agar (SSA) Media Selenite Cystine Broth (SCB) Aquadest Alkohol 70%

VI. Cara Kerjaa. Pengkayaan1. APD digunakan dengan baik, benar dan lengkap.2. Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.3. Sampel susu kedelai dipipet sebanyak 10ml dan dimasukkan kedalam media SCB dengan teknik aseptis.4. Diinkubasi pada suhu 370C selama 24-48 jam.

b. Penanaman biakan ke media selektif (MCA dan SSA)1. Disiapkan media MCA dan SSA yang telah diberi label.2. Dari tabung media SCB, diinokulasikan/digoreskan dengan ose steril ke media MCA dan SSA dengan metode gores kuadran (4 kuadran).3. Media yang telah digoreskan tersebut diinkubasi pada suhu 370C selama 12-24 jam.

c. Pengamatan pada media MCA dan SSADiamati koloni yang tumbuh pada media MCA dan SSA secara makroskopis, dibandingkan dengan cirri-ciri koloni untuk bakteri Salmonella sp. pada media MCA dan SSA.