hbsag kelompok 4b

7/22/2019 hbsag kelompok 4B

1/10

PEMERIKSAAN HBSAG (HEPATITIS B

SURFACE ANTIGEN) STRIP TEST

Oleh:

Kelompok IVB

Ni Putu Riski Maya Dewi (P07134011032)

I Kadek Dwi Suantarajaya (P07134011034)

Serafina Claudisinta Danal (P07134011036)

I Nyoman Yoga Arimbawa (P07134011038)

Pande Agus Jordy Sutanaya (P07134011040)

KEMENTERIAN KESEHATAN RI

POLITEKNIK KESEHATAN DENPASAR

JURUSAN ANALIS KESEHATAN

2013

1


2/10

Pemeriksaan HBSAg (Hepatitis B Surface Antigen) Strip Test

Hari/Tanggal Praktikum : Rabu, 19 Juni 2013

Tempat : Laboratorium Patologi Klinik, Poltekkes

Denpasar

I. TUJUAN

Untuk dapat mendeteksi secara kualitatif (ada atau tidaknya) HBsAg

(Hepatitis B Surface Antigen) pada serum atau plasma pasien

II. METODE

Metode yang digunakan dalam pemeriksaan HBSAg (Hepatitis B Surface

Antigen) Strip Test adalah metode Immunochromatografi Rapid Test.

III. PRINSIP

Sampel (serum atau plasma) yang mengandung HBSAg (Hepatitis B Surface

Antigen) akan bereaksi dengan partikel yang dilapisi antibody anti-HBsAg

dan akan membentuk kompleks antigen antibodi. Kompleks ini akan bergerak

ke atas pada membran secara kromatografi oleh gaya kapilaritas, menuju

daerah test dan kemudian akan berikatan dengan antibodi anti-HBsAg

sehingga menimbulkan garis warna sebagai kompleks antibodi-antigen-

antibodi

IV. DASAR TEORI

Hepatitis adalah suatu proses peradangan pada jaringan hati yang

memberikan gejala lemah badan, kencing seperti air teh disusul dengan matadan badan menjadi kuning. Tidak semua penyakit hepatitis mempunyai

bentuk yang klasik seperti ini. Ada hepatitis yang tidak nyata (inapparent

hepatitis), ada yang tanpa ikterik, ada yang bentuk jinak (benigna) dan adan

yang ganas (fulminan). Salah satu penyebab hepatitis adalah virus. Antigen

permukaan virus hepatitis B (hepatitis B surface antigen, HBsAg merupakan

material permukaan dari virus hepatitis B. Pada awalnya antigen ini

dinamakan antigen Australia karena pertama kalinya diisolasi oleh seorang

dokter peneliti Amerika, Baruch S. Blumberg dari serum orang Australia

(Anonim, 2010).

2


3/10

a. Virus hepatitis A(VHA)

Hepatitis A merupakan penyakit hepatitis akut yang sering dijumpai pada

beberapa usia muda. Penularan penyakit ini terjadi secara oral melalui

makanan dan minuman yang tercemar (oral - faecal). Penyakit ini umumnyamemberi gejala klinis yang akut, dan jelas namun hampir semuanya akan

sembuh tanpa bekas.

Struktur antigen Virus Hepatitis A

Virus hepatitis A merupakan virus RNA yang tergolong dalam virus picorna.

Virus hepatitis A merupakan partikel dengan diameter 27 nm, berbentuk

okosahedral dan tidak berbungkus. RNA dari virus ini diliputi oleh kapsid

yang terdiri dari polipeptida virus : VPI sampai dengan VP4.

b. Virus Hepatitis B

Hepatitis virus B merupakan radang hati yang disebabkan oleh infeksi dengan

virus Hepatitis B(VHB atau HBV) , yaitu suatu virus hepadna. Marka

serologic pertama ditemukan pada penduduk asli Australia oleh Blumberg

dan kawan-kawan pada tahun 1965 dan disebut sebagai Australian antigen

(Au Ag).

Pada tahun 1968, prince kemudian melaporkan adanya hepatitis B surface

antigen (HBsAg) pada penderita serum hepatitis yang akhirnya dikenal

sebagai virus hepatitis B yang identik dengan Australian antigen. Ada

beberapa macam subtype HBsAg yaitu: adw ,ayw, adr dan ayz yang amat

penting untuk epidemologi penyakit. Hepatitis B masih merupakan masalah

kesehatan masyarakat di Indonesia.

Perubahan serologi pada VHB di mulai dengan timbulnya HBsAg / H beAg /

HBV-DNA dalam darah/serum yang sering mendahului peningkatan aktvitas

transaminase, kemudian berturut-turut disusul dengan timbulnya lgM anti

HBc dan anti HBs. Perubahan biokimiawi maupun serologic adanya infeksi

VHB, umumnya akan kembali normal dalam 6 bulan. Dikatakan kronis bilaperubahan biokimiawi dan serologic menetap >6 bulan.

Struktur Antigen Virus Hepatitis B

Virus Hepatitis B (VHB) yang dikenal sebagai partikel Dane (diameter

42nm), termasuk dalam family Hepadana. Virus ini hanya dapat

menimbulkan infeksi pada manusia dan Champanse saja. Dalam darah

individu yang terinfeksi dengan VHB terhadap partikel Dane dan dua buah

partikel berbentuk lain, yang satu berbentuk tubular dan yang lain berbentuk

bulat dengan diameter 22nm. Partikel Dane terdiri beberapa bagian yang

3


4/10

amsing-masing memiliki antigenitas tersendiri. Bagian paling luar yang

merupakan selubung dikenal sebagai Hepatitis B surface antigen (HBaAg).

Bagian sebelah dalamnya yang merupakan inti atau core dari virus

mengandung hepatitis core antigen (HBcAg), dan Hepatitis Be antigen

(HBeAg), partially double stranded DNA, DNApolimerase (DNA-p) dan

suatu aktifitas polymerase.

Imunopatogenesis

Penularan VHB dapat terjadi melalui 2 pola,yaitu pola vertical dan pola

horizontal. Pada pola vertival infeksi terjadi dari ibi hamil dengan HBsAg

positif pada anak yang dilahirkannya pada saat persalinan (penularan

perinatal).

Masuknya VHB kedalam tubuh anak biasanya terjadi melalui abrasi kulitbayi akibat trauma kehamilan atau dapat juga melalui air ketuban yang masuk

dalam mulut anak.

Pada pola horizontal infeksi VHB dapat melalui luka dikulit atau selaput

lender, misalnya melalui suntikan, trnsfusi darah, alat operasi ,tusuk jarum,

pembuatan tattoo,tindik,luka pada selaput lender mulut, hidung, saluran

pencernaan makanan bagian bawah ,mata atau genitalia (hubungan intim).

VHB dapat ditemukan pada beberapa cairan tubuh seperti saliva, ASI, cairan

amnion, keringat,secret vagina dan air mata.

Setelah VHB masuk ke dalam tubuh penderita yang tidak memiliki kekebalan

terhadap VHB, poly-human serum albumin receptor (PAR) yang terdapat

pada permukaan HBsAg akan mengikat poly-human serum albumin (poly

HSA) yang disebut oleh hepatosit. Dalam tahap selanjutnya poly-HAS yang

sudah diikat oleh PAR dari VHB dari suatu kutubnya akan diikat oleh PAR

yang terdapat dipermukaan hepatosit pada kutubnya yang lain. Setelah itu

VHB masuk ke dalam sitosol dari hepatosit.

Didalam sitosol dari hepatositt ,protein VHB yang diproduksi oleh selhepatosit yang terinfeksi akan dipecah menjadi peptide yang akan diambil

oleh reticulum endoplasma, yaitu tempat molekul MHC kelas 1 dibuat, dan

mengikat serta mengangkut fragmen peptide tersebut ke permukaan hepatosit.

Bila ada limposit T CD8 yang lewat maka kompleks antigen-MHC kelas 1

akan dianggap oleh reseptor yang ada dipermukaan limposit CD8 dan

menimbulkan signal pada sel limposit tersebut sehingga sel tersebut menjadi

aktif, dan melepaskan sitokin yang dapat menghancurkan seluruh sel yang

terinfeksi beserta isinya. Beberapa sel hepatosit yang rusak tersebut akan

4


5/10

melepaskan enzimnya sehingga kadar SGOT,SGPT, bilirubin dan gamma-GT

dalam serum meningkat.

Waktu inkubasi VHB terentang antara 6 minggu sampai 6 bulan. Bila

seseorang individu mengalami infeksi VHB maka ada tiga kemungkinanutama yang dapat terjadi, yaitu:

Hepatitis akut (20% dengan gejala hepataitis akut yang nyata dan 80%

berjalan subklinis)

Hepatitis menahun

Pengidap VHB sehat

HBsAg biasanya positif selama beberapa gejala klinis dari penyakit masih

ada, dan baru menghilang beberapa minggu (1-12 minggu) kemudian HBsAg

yang menetap lebih dari 6 bulan merupakan petunjuk dari infeksi HBV yang

menahun atau penderita akan menjadi VHB (carrier) yang sehat.

Pada orang dewasa sekitar 10% akan menjadi pengidap menahun,sebaiknya

pada golongan anak,85-95% akan menjadi pengidap menahun. Dari pengidap

VHB yang menahun, 67% akan berrkembang menjadi serosis hati,dan

sebagian besar menjadi kanker hati.

c. Virus Hepatitis C(VHC)

Hepatitis C adalah hepatitis viral yang disebabkan oleh virus Hepatitis C

(vhc=hcv), dan tergolong dalam kelompok hepatitis non-A ,non-B(NANB).

Hepatitis viral inoi sering terjadi setelah transfuse darah atau pemberian

komponen darah sehingga pada masa yang lalu hepatitis C ini disebut sebagai

post transfusion NANB hepatitis.

Dibeberapa daerah didapatkan hepatitis non-A non-B yang tidak mempunyai

riwayat transfuse, dan disebut sebagai hepatitis sporadic atauu acquired

community. Dari penelitian selanjutnya ternyata 40-50% dari penderita

hepatitis ini menunjukkan antibody anti-HCV yang positif.

Pada umunya hepatitis C memberi gejala klinis yang relative ringan bahkan

sering tanpa gejala namun mempunyai kecenderungan untuk menjadi

menahun atau serosis hati yang lebih besar bila dibandingkan dengan

hepatitis viral yang lain.

Stuktur Antigen Virus Hepatitis C

Virus hepatitis C merupakan virus RNA dengan genom berantai tunggal,

dengan polaritas positif, diameter 30-60nm, dan panjang sekitar 10kb. VCH

5


6/10

merupakan virus yang peka terhadap pelarut organic seeperti kloroform,

terbungkus oleh envelop lipid dan termasuk dalam family antara flavivirus

dan pestivirus. Genom VHC terdiri dari sekitar 9413 nukleotida dan

mengkode sekitar 3010 asam amino.

Genom VHC terdiri dari 3 bagian utama sebagai berikut :

1. Region non-coding ,terdiri dari 340 nukleotida dan belum banyak

diketahui funggsinya,

2. Region structural, terdiri dari region nukleokapsid atau core (c), dan region

envelope(surface=s),dan

3. Region non structural (NS), terdiri dari NS 1-NS5 dan sebagian fungsi NS

2-NS5 tiddak diketahui.

PEMERIKSAAN LABORATORIUM

Pada pemeriksaan hepatitis secara imunologi diketahui terdapat beberapa

pemeriksaan yakni :

a. Pemeriksaan HBsAg

HBsAg merupakan suatu tahap secara kualitatif yang menggunakan serum

atau plasma dimana bertujuan untuk mendeteksi adanya HBsAg dalam serum

atau plasma membrane yang dilapisi dengan anti HBsAg antibody pada

daerah garis test selama proses pemeriksaan, sampel serum atau plasma

bereksi dengan partikel yang ditutupi dengan anti HBsAg antibodi, campuran

tersebut akan meresap sepanjang membrane kromatografi dengan anti

HBsAg, anti pada membrane dan menghasilkan suatu hasil posotif pada

daerah test, jika tidak menghasilkan garis yang berwarna pada daerah test

menunjukan hasil yang negatif. HBsAg berguna untuk diagnosa infeksi virus

hepatitis B, baik untuk keperluan klinis maupun epidemiologik, skrining

darah di unit-unit transfusi darah, serta digunakan pada evaluasi terapihepatitis B kronis. Pemeriksaan ini juga bermanfaat untuk menetapkan bahwa

hepatitis akut yang diderita disebabkan oleh virus B atau superinfeksi dengan

virus lain. HBsAg positif dengan IgM anti HBc dan HBeAg positif

menunjukkan infeksi virus hepatitis B akut. HBsAg positif dengan IgG anti

HBc dan HBeAg positif menunjukkan infeksi virus hepatitis B kronis dengan

replikasi aktif. HBsAg positif dengan IgG anti HBc dan anti-HBe positif

menunjukkan infeksi virus hepatitis B kronis dengan replikasi rendah (Ihwan,

2013).

b. Pemeriksaan Anti HCV

6


7/10

Tes human anti HCV lgG antibody dikembangkan untuk mendeteksi

sirkulasi anti HCV lgG antibody dinyatakan sebagai petunjuk infeksi hepatitis

C virus, tes ini berdasarkan prinsip yang menggunakan rekombinan HCV

protein sebagai viral antigen. Pada langkah pertama anti HCV IgG dalam

specimen bila ada akan terikat pada protein rekombin;an HCV yang dilabel

pada permukaan sumur microtitir. Setelah inkubasi bagian specimen yang

tidak terikat akan dipisahkan melalui pencucian, pada pencucian ke dua anti

human IgG konjugat ditambahkan akan mengikat antibody spesifik manusia

anti HCV IgG pada permukaan sumur akan membentuk sandwich complex.

c. Pemeriksaan Anti HBs

viral hepatitis adalah penyakit infeksi yang umumnya seing disebabkan

oleh virus hepatitis B (HBV) yang menjangkit hampir 5% dari populasi dunia

dengan beberapa variasi setempat, penyakit ini dapat timbul tanpa gejala,

akut(dengan kasus berat dan kematian) atau hepatitis kronik yang akan

memburuk ke erisis dan atau hepatocalullar carcinoma dan kematian.

Penyakit ini biasanya ditularkan melalui pertikaran cairan tubuh antara

seseorang yang sehat dengan orang yang sakit.

d. Pemeriksaan Anti HAV

Kelebihan dari pemeriksaan HBsAg ini adalah:

- Mudah dan cepat

- Sensitivitas dan spesifisitas tinggi.

- Karena menggunakan strip test, sehingga dapat dilakukan sendiri.

Sedangkan kelemahan dari pemeriksaan HBsAg ini adalah :

- Hanya menunjukkan adanya antigen HBsAg dalam specimen, dan tidak

boleh digunakan sebagai satu-satunya kriteria untuk diagnosis hepatitis B

- Seperti halnya dengan semua tes diagnotik, semua hasil harus

dipertimbangkan dengan informasi klinis lain yang tersedia untuk dokter.

- HBsAg strip test tidak dapat mendeteksi kurang dari 1 mg/ml HBsAg

dalam specimen. Jika hasilnya negative dan gejala klinis terus berlangsung

maka pengujian menggunakan metode klinis lainnya perlu dilakukan.

Hasil yang negative tidak menghalangi kemungkinan terjadi infeksi

hepatitis B.

Hal-hal yang harus diperhatikan dalam pemeriksaan HBsAg :

7


8/10

- Sampel yang digunakan merupakan sampel yang tidak limfemik, tidak

hemolisis (pemisahan serum atau plasma harus dilakukan segera

mungkin), dimana sampel yang digunakan merupakan sampel serum atau

plasma. Specimen yang ikterik (hiperbilirubin sampai dengan 500mol/l),

hemolisis (sampai dengan 30mg/l) dapat mempengaruhi hasil pembacaan.

- Specimen yang tidak langsung digunakan dapat disimpan pada kulkas

dengan suhu 2-8oC (bertahan sampai 3 hari), atau apabila disimpan pada

waktu yang sangat lama, sampel dapat disimpan pada suhu -20oC

(bertahan sampai 2 bulan).

- Semua komponen pemeriksaan harus dikondidikan pada suhu ruangan

sebelum dilakukan pemeriksaan.

- Kit pemeriksaan harus disimpan pada temperatur ruangan atau kulkas padasuhu 2-30oC. strip test tidak boleh dibekukan dan dianjurkan untuk tidak

menggunakan strip yang telah kadaluarsa.

V. ALAT DAN BAHAN.

A. Alat

1. Stopwatch

B. Bahan

1. Strip test

2. Sampel serum atau plasma

VI. CARA KERJA

1. Alat dan bahan yang diperlukan disiapkan terlebih dahulu.

2. Sebelum digunakan, semua komponen dikondisikan pada suhu

kamar terlebih dahulu.

3. Strip test dikeluarkan dari kemasan dan diletakkan di atas meja

yang datar dan diharapkan sesegera mungkin untuk digunakan

4. Strip test dicelupkan ke dalam serum atau plasma dengan arah

panah menunjuk ke arah sampel (serum atau plasma) selama 10-15

detik. Jangan sampai melewati garis maksimum strip ketika

mencelupkannya

8


9/10

5. Strip test diangkat kemudian diletakkan pada permukaan yang

datar dan kering. Hasil test diinterpretasikan dalam selang waktu

15 menit.

VII. INTERPRETASI HASIL

a. Positive : jika muncul 2 garis merah. Satu garis di wilayah

kontrol dan satu garisnya lagi di wilaya test.

Catatan : intensitas warna dari garis merah pada daerah test (T)

bervariasi tergantung pada konsentrasi HbSAg dalam sampel.

Munculnya garis berwarna pada daeh test selalu dianggap

positive

b. Negative : satu garis merah di daerah kontrol. Tidak ada garis

merah atau pink yang muncul di wilayah test (T)

c. Invalid : tidak ada garis yang muncul di kontrol (C) atau hanya

muncul garis berwarna pada daerah test (T)

Volume spesimen yang tidak memadai atau prosedur yang

tidak tepat dapat memungkinkan tidak terbentuknya garis

berwarna pada daerah kontrol (C). Ulangi prosedur dan

gunakan strip test yang baru . Jika masalah terus berlanjut,

hentikan menggunakan tes kit dan segera hubungi distributor

dari tes kit tersebut.

DAFTAR PUSTAKA

9


10/10

Anonim. 2012. Pemeriksaan HBsAG.

http://sesuri.blogspot.com/2012/11/pemeriksaan-hbsag.html. (Diakses

tanggal 15 Juni 2013).

Anonim. 2010. Pemeriksaan Hepatitis B Surface.

http://www.sodiycxacun.web.id/2010/10/pemeriksaa-hepatitis-b-surface-

antigen.html. (Diakses tanggal 15 Juni 2013).

Ihwan, Ahmad. 2013. Immunologi. http://ahmadihwan.blogspot.com/ ( diakses

tanggal 16 juni 2013)

Dina. 2011. Hepatitis. http://dinamd.tumblr.com/post/5016458190/mengenal-

lebih-jauh-tentang-hepatitis ( diakses tanggal 16 juni 2013)

10
http://sesuri.blogspot.com/2012/11/pemeriksaan-hbsag.htmlhttp://www.sodiycxacun.web.id/2010/10/pemeriksaa-hepatitis-b-surface-antigen.htmlhttp://www.sodiycxacun.web.id/2010/10/pemeriksaa-hepatitis-b-surface-antigen.htmlhttp://ahmadihwan.blogspot.com/http://dinamd.tumblr.com/post/5016458190/mengenal-lebih-jauh-tentang-hepatitishttp://dinamd.tumblr.com/post/5016458190/mengenal-lebih-jauh-tentang-hepatitishttp://www.sodiycxacun.web.id/2010/10/pemeriksaa-hepatitis-b-surface-antigen.htmlhttp://www.sodiycxacun.web.id/2010/10/pemeriksaa-hepatitis-b-surface-antigen.htmlhttp://ahmadihwan.blogspot.com/http://dinamd.tumblr.com/post/5016458190/mengenal-lebih-jauh-tentang-hepatitishttp://dinamd.tumblr.com/post/5016458190/mengenal-lebih-jauh-tentang-hepatitishttp://sesuri.blogspot.com/2012/11/pemeriksaan-hbsag.html

hbsag kelompok 4b

Documents