DETEKSI AKTIVITAS PROTEASE BAKTERI PROTEOLITIK Lactobacillus Firmus YANG

BERASAL DARI ISOLASI

IKAN TERI (Stolephorus spp)

Tahap I. Isolasi Bakteri Penghasil Protease

Sebelum disolasi. Sampel diinkubasi terlebih dahulu pada suhu 80oC 15 menit

Sampel dimasukkan dalam media Lacto Broth Agar

Diinkubasi 2 hari, suhu 37oC

1 ml sampel kultur diencerkan (10-1- 10-4)

Dari suspensi diambil 1 ml untuk diinokulasi pada media Lacto Broth Agar dengan metode streak

Diinkubasi 1 hari, suhu 37oC

Bakteri proteolitik ditandai terbentuknya zona bening disekitar koloni bakteri

Isolat bakteri proteolitik

Tahap II. Produksi enzim

Tahap III. Pengujian Aktivitas Protease

Pengujian aktivitas protease menggunakan metode Walter (1984) dalam Kurniati (2006),

Isolat bakteri proteolitik

Diambil 1 ose

Diinokulasi ke dalam media Lacto Broth Agar

Diinkubasi selama 10 jam, 37oC (kultur ini sebagai starter)

Sebanyak 2,5 ml starter diinokulasikan ke dalam media Lacto Broth Agar

Diinkubasi 1 hari, suhu 37oC

Disentrifugasi 15.000 rpm, suhu 4oC

Cairan supernatant enzim

Disimpan dalam medium penyimpanan suhu 4oC

Menentukan nilai Absorbansi dengan Spektrofotometer

Menentukan unit aktivitas per menit per ml enzim

Penentuan pH optimum enzim protease

Penentuan suhu optimum enzim protease

Disimpan dalam medium penyimpanan suhu 4oC