formulasi, pengaruh silikon terhadap penetrasi secara in

1

Formulasi, Pengaruh Silikon Terhadap Penetrasi Secara In Vitro Menggunakan Sel

Difusi Franz dan Uji Stabilitas Fisik Sediaan Emulgel Niasinamida

Diar S. H. Sukandi

Fakultas Farmasi, Universitas Indonesia, Depok, 16424

E-mail: [email protected]

Abstrak

Niasinamida merupakan vitamin yang larut di dalam air dikenal sebagai vitamin B3 dan telah digunakan untuk mengobati beberapa jenis permasalahan pada kulit. Penelitian ini bertujuan untuk membuat formulasi emulgel yang menggunakan silikon untuk membandingkan daya penetrasi secara in vitro antara emulgel dengan silikon dan tanpa penambahan silikon serta uji stabilitas fisik sediaan. Semua formulasi di uji daya penetrasinya secara in vitro dengan sel difusi Franz menggunakan membran abdomen tikus betina galur Sprague dawley. Jumlah kumulatif niasinamida yang terpenetrasi dari emulgel yang tidak mengandung silikon (F1) adalah 2028,8 ± 64,3 µg/cm2 sedangkan emulgel yang mengandung silikon secara berturut turut (F2-dimetikon dan F3-siklometikon) adalah 4662,4 ± 11,4 µg/cm2 dan 2679,45 ± 9,3 µg/cm2. Nilai fluks berturut-turut F1, F2, dan F3 adalah 253,6 ± 8,0 µg/cm2jam, 582,7 ± 1,4 µg/cm2jam, dan 334,93 ± 1,2 µg/cm2jam. Serta nilai % kumulatif terpenetrasi berturut-turut sebesar 8,89 ± 0,28 %, 17,95 ± 0,04 %, dan 11,83 ± 0,04 %. Berdasarkan hasil tersebut, dapat disimpulkan bahwa adanya silikon terbukti dapat meningkatkan penetrasi emulgel niasinamida dan ketiga formulasi menunjukan kestabilitan fisik yang baik.

Abstract

Osteoarthritis is a degenerative disease characterized by chronic inflammation in the joints. Based on previous research, pearl grass has anti-inflammatory effects in the practice of herbal medicine, but doesn’t have a lot of data to support. This study aimed to analyze the preventive and curative effects of the 70% ethanolic extract of pearl grass on the immune system characterized by decreasing number of leukocytes, lymphocytes and granulocytes. This study is divided into two stages, there are making rat model of osteoarthritis, and analyze the effect preventive and curative extract of pearl grass on the immune system. This study used 30 male white Sprague Dawley rats were divided into 6 groups. The normal group was given 0,5% CMC, the negative group was given 0,025 mL of monosodium iodoacetate in 0,9% saline, positive group was given suspension of glucosamine chondroitin 520 mg/200 g BW for preventive and 780 mg/200 g BW for curative. The dose variation was given 70% ethanolic extract of pearl grass with 3 dose variation 5,62 mg/ 200 g BW; 11,25 mg/ 200 g BW; and 22,5 mg/ 200 g BW. All groups were induced by 0,025 mL of monosodium iodoacetate except normal group. The test material is given orally once daily on days 1 to 50 in preventive , and given on days 29 to 50 are curative. Measurement of the number of leukocytes, lymphocytes and granulocytes counted on day 14, 28 and 49. The best results showed that the effect preventive (dose 2 = 11,25 mg / 200 g BW) and curative (dose 1 = 5,62 mg / 200 g BW) extract of pearl grass were able to decrease the number of leukocytes and lymphocytes significantly.

Formulasi, pengaruh..., Diar Siti Hazar Sukandi, FFAR UI, 2015

2

Pendahuluan

Niasinamida adalah vitamin yang larut dalam air, juga dikenal sebagai vitamin B3.

Niasinamida telah terbukti efektif dalam pengobatan pada hiperpigmentasi kulit. Dalam uji

klinis, pelembab yang mengandung 5% niasinamida dapat mengahmbat 35-68% transfer

melanosom dari melanosit ke keratinosit, hal ini membuktikan bahwa niasinamida dapat

menjadi agen pencerah kulit yang efektif (Hakozaki T, et.al, 2002). Selain itu, niasinamida

juga dapat berfungsi sebagai antijerawat dengan efek antiinflamasi yang kuat. Dalam salah

satu penelitian, 4% gel niasinamida topikal mampu untuk pengobatan jerawat vulgaris ringan

dan sedang. Mengurangi peradangan merupakan mekanisme utama pengobatan antijerawat.

Kajian yang lebih mutakhir telah mencatat bahwa niasinamida secara topikal sangat baik

ditoleransi oleh kulit wajah serta memberikan beberapa efek yang bermanfaat seperti

mengurangi produksi sebum (Önder, 2008). Koefisien partisi dari niasinamida adalah 1,82

dengan begitu penetrasi niasinamida tidak terlalu baik (Del & Levin, 2010). Jalur penetrasi

yang digunakan oleh zat aktif hidrofilik yaitu transappeandageal dan transepidermal

transeluler, untuk meningkatkan penetrasi niasinamida diperlukan suatu penmabah zat

tambahan lipofilik seperti silikon sehingga niasinamida dapat berpenetrasi melewati jalur

transepidermal interseluler.

Silikon seperti siklometikon dan dimetikon merupakan satu-satunya polimer organik /

anorganik yang telah dikomersialkan secara luas. Secara historis, silikon merupakan sebuah

cairan pembawa yang bersifat lipofilik. Pada sebuah penelitian menunjukkan bahwa silikon

sangat substantif pada kulit dan dapat meningkatkan penetrasi dari zat aktif. Formulasi

topikal dengan penambahan silikon dalam emulsi terbukti mampu mempertahankan zat aktif

kontak dengan kulit dan mencegah hilangnya zat aktif karena proses abrasi (Séné et al.,

2002).

Dipilihlah bentuk sediaan yang agak lipofilik dengan emulsi yang menggunakan zat

tambahan silikon yaitu emulgel, dimana basis gel dapat menghidrasi kulit dan emulsi yang

bersifat lipofilik untuk meningkatkan penetrasi. Maka dari itu, perlu dilakukan penelitian

tentang silikon seperti siklometikon dan dimetikon dengan menggunakan zat aktif

niasinamida yang sifatnya hidrofilik dalam bentuk sediaan emulgel. Penelitian ini akan

menguji daya penetrasi dari sediaan emulgel niasinamida menggunakan sel difusi Franz

dikarenakan silikon dapat berfungsi sebagai peningkat penetrasi sehingga dapat

meningkatkan efek terapetik yang diharapkan dari niasinamida yang bermanfaat untuk

berbagai permasalahan pada kulit.


3

Tinjauan Pustaka

a. Niasinamida (Vitamin B3)

Niasinamida berupa serbuk kristal putih dan tidak berbau. Larut dalam 1 : 1,5 air, 1 :

10 air mendidih, 1 : 5,5 dalam alkohol dehidrasi, dan larut dalam gliserol. Vitamin ini sangat

stabil terhadap panas, cahaya, dan udara (Draelos, 2010). Niasinamida adalah bentuk asam

amida piridin-3-karboksilat dari niasin, komponen dari vitamin B kompleks (Önder, 2008).

Niasinamida telah terbukti efektif dalam pengobatan pada hiperpigmentasi kulit. Dalam uji

klinis, pelembab yang mengandung 5% niasinamida dapat mengahmbat 35-68% transfer

melanosom dari melanosit ke keratinosit, hal ini membukti bahwa niasinamida dapat menjadi

agen pencerah kulit yang efektif (Hakozaki T, et.al, 2002).

Niasinamida baru membuktikan dapat berfungsi sebagai antijerawat dengan efek

antiinflamasi yang kuat. Dalam salah satu penelitian, 4% gel niasinamida topikal untuk

pengobatan jerawat vulgaris ringan dan sedang terbukti mampu mengobati jerawat.

Mengurangi peradangan merupakan mekanisme utama pengobatan antijerawat. Kajian yang

lebih mutakhir telah mencatat bahwa niasinamida secara topikal sangat baik ditoleransi oleh

kulit wajah serta memberikan beberapa efek yang bermanfaat seperti mengurangi produksi

sebum (Önder, 2008).

[Sumber: Departemen Kesehatan, 1995]

Rumus struktur niasinamida

b. Emulgel

Kombinasi antara gel dan emulsi merupakan bentuk sediaan yang disebut sebagai

emulgel. Emulgel adalah emulsi, baik dalam fase oil-in-water maupun water-in-oil, yang

dicampur dengan agen pembentuk gel. Bahkan, adanya agen pembentuk gel dalam fase air

dapat mengkonversi emulsi biasa menjadi emulgel (Rieger, 1986; Mohamed, 2004). Dibuat

sediaan emulgel dikarenakan sifat dari zat aktif yang digunakan hidrofilik dan memiliki


4

penetrasi yang kurang baik sehingga dibuat sediaan agak lipofilik seperti emulgel dengan

penggunaan emulsi oil-in water menggunakan zat tambahan silikon.

c. Silikon

Silikon seperti siklometikon dan dimetikon merupakan satu-satunya polimer organik /

anorganik yang telah dikomersialkan secara luas. Secara historis, silikon merupakan sebuah

cairan pembawa yang bersifat lipofilik (Somasundaran, 2006). Pada sebuah penelitian

menunjukkan bahwa silikon sangat substantif pada kulit dan dapat meningkatkan penetrasi

dari zat aktif. Formulasi topikal dengan penambahan silikon dalam emulsi terbukti mampu

mempertahankan zat aktif kontak dengan kulit dan mencegah hilangnya zat aktif karena

proses abrasi (Séné et al., 2002).

Penyesuaian pengobatan dan bioavailabilitas merupakan hal yang sangat penting di

industri farmasi. Penyesuaian pengobatan yang biasanya dikarenakan karena estetika dari

formulasi topikal sehingga mengurangi kenyamanan pada pasien. Bioavailabilitas merupakan

hal yang sangat penting dalam sebuah industri. Silikon, memiliki sifat fisikokimia yang unik,

yaitu dapat membantu mencapai bioavailabilitas yang lebih tinggi dan dengan demikian

menjadikan pembawa yang efisien dalam sistem penetrasi obat dalam formulasi topikal (Séné

et al., 2002). Kelebihan dari silikon lainnya yaitu fleksibel, menurunkan resistensi

penghalang sawar kulit, biokompatibel (non-sensitif dan non-iritatif), memiliki daya adhesi

yang optimum, mudah diolah (Séné et al., 2002).

Metode Penelitian

a. Tempat dan Waktu

Penelitian ini akan dilakukan pada bulan Februari sampai dengan Mei 2015.

Dilaksanakan di Laboratorium Farmasetika. Uji evaluasi fisik dan penetrasi sediaan emulgel

secara in vitro menggunakan sel difusi Franz dilakukan di laboratorium Farmasi Fisika

Fakultas Farmasi, Universitas Indonesia. Uji penetapan kadar dengan menggunakan

Spektrofotometer UV-Vis di Laboratorium Farmasetika Fakultas Farmasi Universitas

Indonesia.

b. Bahan

1. Bahan Uji dan Bahan Kimia

Bahan-bahan yang digunakan dalam penilitian ini adalah niasinamida (Western Drugs

LTD), dimetikon (Momentive Performance Materials), siklometikon (Momentive


5

Performance Materials), karbomer, TEA, isopropil miristat, tween 20, span 20, propilen

glikol, metil paraben, aquadest, buffer pH 7, buffer pH 4, kalium dihidrogenfosfat 0,2 M,

NaOH 0,2 N, aquadest bebas CO2, kulit tikus betina agalur Sprague Dawley yang berumur

2-3 bulan dengan berat 180-200 gram (Institut Pertanian Bogor, Indonesia).

c. Alat

Sel difusi Franz dengan luas area difusi 1,55 cm2 dan 1,77 cm2 serta volume

kompartemen 16 ml (Bengkel Gelas ITB, Indonesia), timbangan analitik, pengaduk magnetic,

mikroskop optik, termometer, penangas air, tabung sentrifugasi, viscometer Brookfield tipe

HAT dan spindle tipe HA (Brookfield Engineering Laboratories Inc., Amerika),

spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu UV-1601, Jepang), homogenizer Multimix CKL

(Omni-Multimix Inc., Malaysia), pH meter Eutech 510 (Eutech Instrument, Singapura), dan

peralatan gelas lainnya.

d. Prosedur Kerja

1. Pembuatan Sediaan Emulgel Penelitian ini menggunakan tiga variasi emulgel, yaitu variasi jenis silikon berupa

siklometikon dan dimetikon serta satu formula tanpa silikon sebagai blanko.

Formula Emulgel

Bahan Konsentrasi b/b (%)

F1 F2 F3 Basis Gel

Karbomer 0,5 0,5 0,5 TEA 0,1 0,1 0,1 Aquadest 79,87 74,66 74,66

Emulsi Niasinamida 4 4 4 Dimetikon - 5 - Siklometikon - - 5 Isopropil Miristat 1 1 1 Span 20 1 1 1 Tween 20 0,5 0,5 0,5 Propilen Glikol 5 5 5 Metil Paraben 0,03 0,03 0,03 Aquadest 8 8 8

2. Evaluasi Emulgel


6

Pengamatan Organoleptis Formulasi emulgel diperiksa secara visual yaitu pemeriksaan warna, penampilan dan

konsistensi (Khullar, 2011).

Uji Homogenitas Sediaan diletakkan di antara dua kaca objek lalu diperhatikan adanya partikel-partikel

kasar atau ketidakhomogenan selama 8 minggu. Pemeriksaan dilakukan setiap 2 minggu pada

semua bentuk sediaan (Khullar, 2011).

Pengukuran pH Formulasi yang sudah dibuat diukur pH nya dengan menggunakan pH meter. Pertama

dikalibrasi terlebih dahulu dengan menggunakan larutan buffer pH 7 dan pH 4. Kemudian

Elektroda dicelupkan ke dalam 1 % b/v larutan sediaan dalam air dan dicatat nilai pH yang

tertera pada layar. Pengukuran dilakukan pada suhu ruang (Lindberg, 2010).

Pengukuran Diameter Globul Rata-Rata Sediaan diletakkan di atas kaca objek dan ditutup dengan gelas penutup, kemudian

diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 100 kali yang dilengkapi lensa okuler

mikrometer yang telah dikalibrasi. Diameter partikel ratarata dihitung dan dikalikan dengan

faktor kalibrasi. Kenaikan viskositas akan meningkatkan stabilitas sediaan. Semakin tinggi

viskositas, semakin kecil ukuran globul dan semakin besar volume ratio (Djajadisastra,

2003). Pengukuran dilakukan pada minggu ke-0 dan ke-8 hanya pada sediaan emulgel.

Ukuran Globul (µm) Penampilan

> 0,005 Translusen (transparan) 0,005-0,1 Semi transparan, abu-abu

0,1-1 Emulsi putih-kebiruan > 1 Emulsi putih susu

[Sumber : Djajadisastra, 2003]

Uji Viskositas Formulasi yang sudah dibuat diuji viskositasnya dengan menggunakan viskometer

cone dan plate dengan spindel 5 pada alat Brookfield. Spindel bergerak di dalam emulgel

untuk mencatat data viskositas pada formulasi tersebut (Bonacucina et al., 2009).

Pengukuran dilakukan dengan viskometer Brookfield dengan kecepatan diatur mulai

dari 0,5; 2; 5; 10; dan 20 rpm, lalu dibalik dari 20; 10; 5; 2; 0,5 rpm. Dari masing masing

pengukuran dengan perbedaan rpm dibaca skalanya ketika jarum merah yang bergerak telah

stabil. Nilai viskositasnya lalu dihitung berdasarkan angka dial reading dikalikan dengan


7

faktor yang tertera pada brosur alat tersebut. Kenaikan viskositas akan meningkatkan

stabilitas sediaan. Semakin tinggi viskositas, semakin kecil ukuran globul dan semakin besar

volume ratio (Djajadisastra, 2004). Pengukuran dilakukan pada minggu ke-0 dan ke-8 pada

semua bentuk sediaan dengan penyimpanan suhu kamar.

Uji Stabilitas Fisik Sediaan a. Uji stabilitas pada suhu tinggi

Stabilitas sediaan meliputi bau, warna, dan pH dievaluasi pada suhu 40o ± 2oC selama

8 minggu dengan pengamatan setiap 2 minggu sekali.

b. Uji stabilitas pada suhu kamar

Stabilitas sediaan meliputi bau, warna, dan pH dievaluasi pada suhu 28o ± 2oC selama


c. Uji stabilitas pada suhu rendah

Stabilitas sediaan meliputi bau, warna, dan pH dievaluasi pada suhu 4o ± 2 oC selama


d. Metode Cycling Test

Sampel emulgel disimpan pada suhu 4oC selama 24 jam, lalu dipindahkan ke dalam

oven yang bersuhu 40oC selama 24 jam. Perlakuan ini adalah satu siklus. Pecobaan dilakukan

sebanyak 6 siklus kemudian diamati adanya pemisahan fase serta pertumbuhan kristal

e. Uji Mekanik (Sentrifugasi)

Sampel disentrifugasi dengan kecepatan putaran 3800 rpm selama 5 jam karena

hasilnya ekivalem dengan efek grafitasi selama 1 tahun. Setelah disentrifugasi, diamati

apakah terjadi pemisahan atau tidak antara fase air dengan fase minyak. Pengujian dilakukan

pada minggu ke-0.

Uji Konsistensi Sediaan yang akan diperiksa dimasukkan ke dalam wadah khusus dan diletakkan pada

meja penetrometer. Peralatan diatur hingga ujung kerucut menyentuh bagian permukaan

emulgel. Batang pendorong dilepas dengan mendorong tombol start. Angka penetrasi dibaca

lima detik setelah kerucut menembus sediaan. Pemeriksaan konsistensi dilakukan pada

minggu ke-0 dan minggu ke-8 pada semua bentuk sediaan dengan penyimpanan suhu kamar.

Dari pengukuran konsistensi dengan penetrometer akan diperoleh yield value (Djajadisastra,

2003).


8

Uji Penetrasi Emulgel Niasinamida dengan Sel Difusi Franz

Pembuatan Larutan Dapar Fosfat pH 7,4 Timbang kalium dihidrogenfosfat 2,72 gram dilarutkan 100,0 mL pada labu ukur.

Diambil 50 mL larutan KH2PO4 masukan ke labu ukur 200 mL. Timbang 0,8 gram NaOH

dilarutkan kedalam labu ukur 100,0 mL. Ambil 42,8 mL NaOH lalu campurkan dengan

KH2PO4 pada labu ukur 200 mL. Encerkan dengan aquadest bebas CO2 secukupnya hingga

200,0 mL. (Departemen Kesehatan, 1979)

Pembuatan Kurva Kalibrasi Niasinamida ditimbang seksama sebanyak kurang lebih 100,0 mg, kemudian

dilarutkan dengan dapar fosfat pH 7,4 dalam labu ukur ad 100,0 ml. Didapatkan larutan

dengan konsentrasi 1000 ppm. Dari larutan tersebut dipipet 10,0 ml, kemudian dilarutkan

dengan dapar fosfat pH 7,4 dalam labu ukur dan cukupkan volume hingga 100,0 ml.

Didapatkan larutan induk dengan konsentrasi 100 ppm. Dari larutan induk, dipipet dan

diencerkan dengan dapar fosfat pH 7,4 hingga didapat konsentrasi 11, 15, 20, 30, 40, 50 ppm.

Serapan diukur pada panjang gelombang maksimum dengan spektrofotometer UV-Vis.

Panjang gelombang maksimum niasinamida dalam dapar fosfat pH 7,4 ditentukan dengan

melakukan scanning pada panjang gelombang antara 200-400 nm. Setelah panjang

gelombang niasinamida didapatkan dibuat kurva kalibrasi dan persamaan regresi pada

panjang gelombang tersebut (Harmita, 2006).

Uji Penetapan Kadar Niasinamida dalam Sediaan a. Pembuatan kurva kalibrasi menggunakan aqua demineralisata

Niasinamida ditimbang seksama sebanyak kurang lebih 50,0 mg, kemudian dilarutkan

dengan aqua demineralisata dalam labu ukur ad 50,0 mL. Didapatkan larutan dengan

konsentrasi 1000 ppm. Dari larutan tersebut dipipet 5,0 ml, kemudian dilarutkan dengan aqua

demineralisata dalam labu uku ad 50,0 ml. Didapatkan larutan induk dengan konsentrasi 100

ppm. Dari larutan induk, dipipet dan diencerkan dengan aqua demineralisata hingga didapat

konsentrasi 12, 15, 20, 30, 40, 50 ppm. Serapan diukur pada panjang gelombang maksimum

dengan spektrofotometer UV-Vis. Panjang gelombang maksimum niasinamida dalam aqua

demineralisata ditentukan dengan melakukan scanning pada panjang gelombang antara 200-

400 nm. Setelah panjang gelombang niasinamida didapatkan dibuat kurva kalibrasi dan

persamaan regresi pada panjang gelombang tersebut (Harmita, 2006).

b. Pembuatan larutan sampel dari sediaan emulgel

Sediaan emulgel niasinamida ditimbang secara seksama sebanyak ± 1,0 g, kemudian


9

dilarutkan dengan aqua demineralisata dalam labu tentukur 25,0 ml. Lalu disaring dengan

menggunakan kertas saring. Larutan tersebut kemudian dipipet 0,3 ml dan dimasukkan ke

labu ukur 10,0 ml dan dicukupkan volumenya menggunakan aqua demineralisata. Setelah itu

larutan uji tersebut dianalisis dengan spektrofotometer UV-Vis.

Uji Penetrasi Niasinamida Membran yang digunakan adalah kulit tikus betina galur Sprague Dawley yang berumur 2-3

bulan. Pertama-tama tikus dibius dengan eter hingga mati. Kemudian, bulu tikus dicukur

dengan hati-hati. Setelah itu kulit tikus disayat pada bagian perut dengan ketebalan 0,6 + 0,1

mm. Lalu, kulit direndam dalam dapar fosfat pH 7,4 selama 30 menit setelah itu dan

disimpan dalam suhu 5oC. Kulit yang dapat digunakan dalam rentang waktu 24 jam. Uji

penetrasi dilakukan menggunakan sel difusi Franz dengan luas area difusi 1,55 dan 1,77 cm2

dan volume kompartemen 16 mL. Kompartemen reseptor diisi dengan dapar fosfat pH 7,4

dan dijaga suhunya 37 + 0,5OC, serta diaduk dengan stirrer berkecepatan 300 rpm.

Kemudian, kulit abdomen diletakkan di antara kompartemen donor dan kompartemen

reseptor dengan posisi stratum korneum menghadap ke atas. Sampel 1 g diaplikasikan pada

permukaan kulit. Kemudian, pada menit ke-10, 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 420, dan

480 sampel diambil sebanyak 0,5 mL dari kompartemen reseptor menggunakan syringe dan

segera digantikan dengan dapar fosfat pH 7,4 sejumlah volume yang sama. Setelah itu,

sampel dimasukkan ke dalam labu ukur 10,0 ml. Lalu, ditambahkan dengan dapar fosfat.

Sampel diukur serapannya pada panjang gelombang maksimum dengan spektrofotometer

UV-Vis.

3. Hasil Penelitian dan Pembahasan

Pembuatan Sediaan Emulgel Niasinamida Penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa penambahan silikon dalam sebuah

sediaan dapat meningkatkan daya penetrasi dari zat aktif yang berada di dalamnya. Berbagai

macam jenis silikon yang terdapat di pasaran, pada umumnya adalah dimetikon dan

siklometikon. Silikon seperti dimetikon maupun siklometikon merupakan sebuah cairan

pembawa yang bersifat lipofilik yang dapat bekerja sebagai peningkat penetrasi dengan cara

memodifikasi domain lipid interseluler guna menurunkan resistensi penghalang akibat

interaksi cairan lipofilik dengan lipid bilayer dari stratum korneum (Leopold et al., 2006).

Dengan adanya penelitian lebih lanjut tentang penggunaan silikon seperti dimetikon


10

dan siklometikon sebagai pembawa lipofilik dianggap perlu terhadap zat aktif yang sifatnya

hidrofilik seperti niasinamida. Penelitian ini menguji daya peningkat penetrasi silikon seperti

dimetikon dan siklometikon.

Dibuat tiga formulasi pada penelitian kali ini yaitu emulgel tanpa silikon (F1),

emulgel dengan dimetikon (F2), dan emulgel dengan siklometikon (F3). Masing-masing

sediaan emulgel mengandung zat aktif niasinamida 4% dengan tujuan mampu mengurangi

inflamasi pada jerawat dan membantu mencerahkan kulit. Tahap pada pembuat ketiga

formula ini adalah pembuatan, evaluasi, uji stabilitas fisik, dan uji penetrasi sediaan.

Evaluasi dan Uji Stabilitas Fisik Sediaan Emulgel Niasinamida Setiap sediaan di evaluasi dan dilakukan uji stabilitas fisik selama 8 minggu. Uji

tersebut meliputi organoleptis, homogenitas, dan pH. Uji stabilitas fisik ini dilakukan setiap 2

minggu pada penyimpanan tiga suhu yang berbeda, yaitu suhu kamar, suhu rendah, dan suhu

tinggi. Selain itu, dilakukan juga uji viskositas sediaan pada minggu ke-0 dan minggu ke-8

pada penyimpanan suhu kamar serta uji mekanik dan uji enam siklus (cycling test) pada

minggu ke-0.

Pengamatan Organoleptis Dilakukan pengamatan organoleptis untuk mengetahui adanya perubahan warna dan

bau pada sediaan emulgel selama 8 minggu pada penyimpanan suhu berbeda. Pada minggu

ke-0 atau awal pembuatan sediaan berwarna putih dan tidak berbau. Pada minggu ke-2

hingga ke-8 tidak terjadi perubahan organoleptis yang berarti. Dengan demikian, sediaan

emulgel niasinamida secara organoleptis stabil pada penyimpanan suhu rendah, suhu ruang

dan suhu tinggi.

Pemeriksaan Homogenitas Uji homogenitas dilakukan untuk mengetahui adanya partikel kasar dari sediaan

emulgel niasinamida selama 8 minggu pada penyimpanan suhu yang berbeda. Sediaan

emulgel niasinamida dioleskan di atas gelas objek lalu diamati apakah ada partikel kasar atau

tidak. Pada minggu ke-0 sediaan bersifat homogen dan tidak terdapat partikel-partikel kasar.

Setelah 8 minggu pengamatan sediaan emulgel niasinamida tidak mengalami perubahan

signifikan atau terbentuk partikel kasar baik penyimpanan di suhu rendah, suhu ruang atau

suhu tinggi. Dengan demikian sediaan emulgel niasinamida stabil secara homogenitas.

Pengukuran pH Pengukuran pH dilakukan selama 8 minggu dengan menggunakan pH meter pada

suhu 25OC. Sebelum digunakan untuk mengukur pH sediaan, pH meter terlebih dahulu


11

dikalibrasi menggunakan larutan pH 4 dan larutan pH 7. Untuk dapat menembus barier

stratum korneum tanpa menimbulkan iritasi, sediaan harus memiliki pH sesuai dengan pH

fisiologis kulit, yaitu 4,5 - 6,5. Semakin jauh beda antara pH sediaan dengan pH fisiologis

kulit, maka akan semakin kuat sediaan tersebut menimbulkan reaksi negatif pada kulit

(Tranggono & Latifah, 2007). Selama 8 minggu, pemeriksaan pH ketiga sediaan tidak

menunjukkan pH yang tetap. Ketiga formula memiliki pH yang tidak stabil namun masih

memasuki range pH kulit yaitu 4,5-6,5 sehingga dapat dinyatakan sediaan ini tidak akan

mengiritasi. Standar deviasi dari pH setiap 2 minggu kurang dari 0,15 sehingga perubahan

dapat diabaikan.

Pengukuran Diameter Globul Rata-rata Hasil pengukuran diameter globul rata-rata masing masing sediaan mengalami

perubahan pada minggu ke-0 hingga minggu ke-8. Diameter globul rata-rata paada minggu

ke-0 sediaan F1 adalah 0,579 µm, sediaan F2 adalah 1,098 µm, dan sediaan F3 adalah 0,865

µm. Selama 8 minggu sediaan disimpan pada kondisi suhu yang berbeda (suhu rendah, suhu

ruang, dan suhu tinggi). Untuk seluruh sediaan, ukuran globul rata-rata terbesar berada di

sedian yang disimpan pada suhu tinggi dan yang terkecil berada di sediaan yang disimpan di

suhu rendah. Dengan ukuran globul 0,1 µm – 1 µm sediaan emulgel niasinamida tergolong

kedalam dispersi koloid dan termasuk emulsi halus. Ukuran globul dari F2 dan F3 lebih besar

dibandingkan dengan F1, hal ini disebabkan karena penggunaan silikon pada fase minyak

emulsi sediaan. Perubahan yang terjadi pada ukuran globul sediaan dari minggu ke-0 hingga

minggu ke-8 disebabkan karena suhu penyimpanan. Semakin rendah suhu penyimpanan

maka fase minyak dari emulsi sediaan cenderung lebih kental sehingga ukuran globul emulsi

lebih kecil. Naiknya ukuran globul terjadi pada suhu tinggi dikarenakan kekentalan fase

minyak dari emulsi menurun dan cenderung terjadi koalesensi sehingga ukuran globul

menjadi lebih besar.

Penentuan Viskositas dan Sifat Alir (Rheologi) Pemeriksaan viskositas sediaan emulgel niasinamida dilakukan pada minggu ke-0 dan

minggu ke-8 pada penyimpanan suhu kamar dengan menggunakan alat viskometer

Brookfield dengan kecepatan 0,5; 2; 5; 10 dan 20 rpm. Spindel yang digunakan adalah

spindel 5. Dari nilai viskositas dapat diketahui sifat aliran sediaan tersebut. Grafik perubahan

viskositas anara keduanya pada kecepatan 0,5 rpm dapat dilihat pada grafik dibawah ini.


12

Viskositas suatu sediaan dipengaruhi beberapa faktor diantaranya, yaitu faktor

pencampuran atau pengadukan saat proses pembuatan sediaan, pemilihan zat pengental,

proporsi fase terdispersi, dan ukuran partikel (Ansel, 1989). Setelah penyimpanan selama 8

minggu pada kondisi penyimpanan suhu kamar terlihat bahwa viskositas kedua formula

mengalami perubahan. Ketiga formula mengalami peningkatan viskositas, hal ini dapat

disebabkan karena adanya tekanan geser dari pengaduk yang digunakan saat pembuatan

sediaan. Berdasarkan data yang diperoleh sediaan F3 yang menggunakan siklometikon pada

emulsinya memiliki nilai viskositas paling tinggi dibandingkan sediaan F1 dan F2.

Berdasarkan hukum stokes, ukuran diameter partikel (globul) berbanding terbalik dengan

viskositas mediumnya. Semakin kecil ukuran partikel, maka semakin tinggi viskositasnya.

Semakin tinggi viskositasnya maka semakin rendah laju sedimentasinya.

4.2.6 Uji Mekanik (Sentrifugasi) Uji mekanik dilakukan dengan proses sentrifugasi dengan kecepatan 3800 rpm selama

5 jam dilakukan untuk mengetahui kestabilan dari suatu sediaan terkait dengan pemisahan

fase. Menurut Bechner, uji ini setara dengan efek gravitasi untuk kira-kira satu tahun (Rieger,

2008).

Ketiga formulasi yang di lakukan uji mekanik semuanya memiliki sifat yang stabil.

Ketiga formulasi emulgel niasinamida tidak mengalami pemisahan fase. Hal ini terjadi karena

0

100000

200000

300000

400000

500000

600000

0 2 4 6 8

Viskosita

s

Minggu

F1

F2

F3


13

konsentrasi basis gel cukup baik untuk menahan pelarutnya dan emulsi agar tidak keluar dari

matriks gel.

Uji Cycling Test Uji cycling test pada sediaan emulgel niasinamida dilakukan selama 6 siklus. Sediaan

pertama disimpan pada suhu rendah (4o±2oC) selama 24 jam, lalu disimpan pada suhu tinggi

(40o±2oC) selama 24 jam berikutnya. Perlakuan ini adalah satu siklus. Semua sediaan

menunjukkan sifat yang stabil secara organoleptis dan homogenitas.

Uji Konsistensi Uji konsistensi ini diukur menggunakan alat penetrometer untuk mengetahui apakah

sediaan yang diuji memiliki daya sebar yang baik atau tidak berdasarkan nilai yield value

yang diperoleh. Sediaan yang baik memiliki yield value antara 100 - 1000 dyne/cm2 (Zatz &

Kushia, 1996). Semakin rendah nilai yield value, maka akan semakin mudah sediaan tersebut

disebar ke kulit, sebaliknya semakin tinggi sediaan yield value maka semakin sulit sediaan

tersebut disebar ke kulit. Dapat diketahui bahwa terdapat penurunan kedalaman penetrasi

kerucut, atau terjadi peningkatan konsistensi dari masing-masing sedian. Hal ini berbanding

lurus dengan hasil pengukuran viskositas sediaan yang semakin kental. Semakin kental

sediaan makan semakin sukar kerucut untuk menembus sediaan sehingga jarak tempuh

semakin kecil. Sediaan F3 memiliki nilai yield value tertinggi dibandingkan dengan sediaan

F1 dan F2. Hasil dari uji konsistensi sesuai dengan teori yang menyatakan nilai yield value

berbanding lurus dengan viskositas namun hasil penetrasi yang di dapatkan dengan

menggunakan penetrometer dan sel difusi Franz memiliki hasil yang berbeda. Pada uji

konsistensi nilai tertinggi kedalaman penetrasi dimiliki oleh F1 sedangan pada uji penetrasi

secara in vitro menggunakan sel difusi Franz nilai tertinggi penetrasi dimiliki oleh F2. Hal ini

disebabkan karena metode yang digunakan berbeda dan untuk uji penetrasi menggunakan

penetrometer lebih mengarah pada nilai daya sebar dan kekerasan suatu sediaan bukan

penetrasi perkutan.


14

Uji Penetrasi secara In Vitro dengan Sel Difusi Franz

a. Pembuatan Kurva Kalibrasi Pengukuran konsentrasi zat aktif yang terpenetrasi dalam reseptor dan uji penetapan

kadar zat aktif pada sediaan dianalisis secara spektrofotometri menggunakan alat

spektrofotometer UV-Vis. Pengukuran serapan dilakukan pada panjang gelombang

maksimum yang dapat dilihat pada gambar, yaitu 268,8 nm.

b. Pembuatan Kurva Kalibrasi Niasinamida Dengan Pelarut Aqua Demineralisata Sebelum dilakukan pengukuran sampel untuk uji penetapan kadar, terlebih dahulu

dibuat kurva kalibrasinya. Persamaan kurva kalibrasi yang diperoleh adalah y = 0,0141x +

0,0662 dan nilai r = 0,9986. Grafik kurva kalibrasi dapat dilihat pada gambar dibawah ini

0

100

200

300

400

500

0 8

Keda

laman

pen

etrasi kerucut

(1/10 mm)

Waktu (minggu)

F1

F2

F3


15

c. Pembuatan Kurva Kalibrasi Niasinamida dengan Pelarut Buffer Fosfat pH 7,4 Sebelum dilakukan pengukuran sampel untuk uji penetrasi secara In Vitro

menggunakan Sel Difusi Franz, terlebih dahulu dibuat kurva kalibrasinya. Persamaan kurva

kalibrasi yang diperoleh adalah y = 0,0139x + 0,0632 dan nilai r = 0,998. Grafik kurva

kalibrasi dapat dilihat pada gambar dibawah ini

d. Uji Penetapan Kadar Niasinamida Seluruh sediaan emulgel niasinamida yang telah dibuat, diuji kembali presentase

kadarnya untuk mengetahui apakah sediaan tersebut memenuhi batas spesifkasi kadar dalam

sediaan atau tidak. Penetapan kadar niasinamida dilakukan dengan mengambil sampel dari

masing-masing formulasi lalu diukur serapannya dengan spektrofotometer UV-Vis.

Berdasarkan data yang terlampir pada Lampiran 19 didapatkan hasil rata-rata

penetapan kadar sediaan dari formula 1, formula 2, dan formula 3 secara berturut-turut adalah

100,74%, 98,86%, 100,83%. Dengan hasil seperti itu semua sediaan memenuhi batas

spesifikasi kadar dalam sediaan yaitu 98,5-101,5 (United States Pharmacopeia 32, 2008).

e. Uji Penetrasi Niasinamida Sediaan yang dilakukan untuk uji penetrasi sediaan yang stabil, uji penetrasi ini

dilakukan selama 8 jam. Sampel diambil pada 11 titik, yaitu pada menit ke-10, menit ke-30,

menit ke-60, menit ke-90, menit ke-120, menit ke-180, menit ke 240, menit ke-300, menit ke-

360, menit ke-420, dan menit ke-480. Sampel yang diambil sebanyak 0,5 ml ini kemudian

y = 0.0141x + 0.0662 R = 0.9986

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

0 10 20 30 40 50 60

Serapa

n Konsentrasi (ppm)

y = 0.014x + 0.0632 R² = 0.998

0

0.2

0.4

0.6

0.8

0 10 20 30 40 50 60

Serapa

n

Konsentrasi (ppm)


16

diencerkan dalam labu 10,0 ml dengan dapar fosfat pH 7,4. Setelah itu, diukur serapannya

secara spektrofotometri pada panjang gelombang 268,80 nm. Serapan yang di dapat dicatat

dan dihitung kadar niasinamida yang terpenetrasi.

Uji penetrasi perkutan secara in vitro, memiliki dua parameter utama, yaitu jumlah

kumulatif zat aktif yang terpenetrasi, baik dalam bentuk massa/luas area atau persentase dosis

terpenetrasi dan laju penetrasi atau fluks (Lehman, Rzaszutak, & Raney, 2008). Berdasarkan

hasil yang diperoleh, dapat dihitung persentase niasinamida yang terpenetrasi. Perhitungan

jumlah kumulatif dan persentase niasinamida yang terpenetrasi dapat dilihat pada Lampiran

20. Perbandingan jumlah kumulatif niasinamida yang terpenetrasi dapat diamati pada gambar

dibawah.

Fluks dihitung dengan menarik garis linear dari kurva jumlah kumulatif zat aktif yang

terpenetrasi terhadap waktu sehingga didapat persamaan y = a + bx, b atau kemiringan garis

menyatakan nilai fluks yang dapat diamati pada Lampiran 23. Nilai ini secara normal

menyatakan unit tunggal pada permukaan kulit (Utley, 2001). Cara lain untuk menghitung

fluks adalah menggunakan persamaan hukum Fick pertama, yaitu jumlah kumulatif zat aktif

yang terpenetrasi melalui satuan luas dalam satuan waktu.

Hasil yang diperoleh dari uji penetrasi menunjukan jumlah niasinamida yang

terpenetrasi selama 8 jam secara berurutan dari yang terbanyak adalah F2 > F3 > F1.

Penetrasi niasinamida melalu membran kulit abdomen tikus selama 8 jam dari F1 yang

dilakukan tiga kali berturut-turut adalah sebesar 2028,8 ± 64,3 µg/cm2 dan fluks sebesar

253,6 ± 8,0 µg/cm2 jam. Sedangkan pada F2 memiliki nilai jumlah kumulatif niasinamida

terpenetrasi sebesar 4662,0 ± 11,4 µg/cm2 dan fluks sebesar 582,7 ± 1,4 µg/cm2 jam. Sediaan

terakhir yaitu F3 memiliki nilai jumlah kumulatif niasinamida terpenetrasi sebesar 2679,45 ±

9,3 µg/cm2 dan nilai fluks 334,93 ± 1,2 µg/cm2 jam. Setelah didapatkan nilai jumlah

niasinamida yang terpenetrasi dapat dihitung presentse jumlah niasinamida yang terpenetrasi

0 800 1600 2400 3200 4000 4800 5600

0 2 4 6 8 10 Jumlah Niasina

mida (ug

cm-‐2)

Waktu (jam)

F1

F2

F3


17

dari dosis yang diaplikasikan. Presentase jumlah niasinamida yang terpenetrasi dari urutan

terbesar dimulai dengan F2, F3, dan F1 yaitu 17,95 ± 0,04 %; 11,83 ± 0,04 % dan 8,98 ± 0,28

%.

Selain jumlah kumulatif F2 dan F3 yang lebih tinggi dibandingkan F1 (blanko), fluks

dari sediaan F2 dan F3 memiliki nilai yang lebih baik walaupun perbedaan antara F3 dan F1

tidak terlalu jauh berbeda. Fluks diperoleh dari keadaan steady state yang digambarkan oleh

suatu garis lurus pada kurva fluks yang diplotkan terhadap satuaan waktu. Grafik fluks

niasinamida tiap waktu pengambilan dari ketiga sediaan dapat dilihat pada gambar dibawah

ini.

Dari Gambar diatas dapat terlihat bahwa fluks niasinamida dari ketiga sediaan yang

awalnya masih belum memberikan nilai fluks atau sama dengan nol. Hal ini disebabkan pada

menit-menit awal serapan yang dihasilkan belum masuk ke dalam rentang kurva kalibrasi.

Keadaan tersebut merupakan keadaan lag time. Setelah mencapai menit ke-180 grafik fluks

mulai naik dan memiliki kemiringan yang tetap yang menggambarkan bahwa keadaan sudah

mencapai steady-state karena konsentrasi yang terpenetrasi melewati tebal membarn per

satuan waktu sudah konstan (Martin, Swarbricks, dan Cammarata, 1983).

F1, 253.6

F2, 582.7

F3, 334.93

0

100

200

300

400

500

600

700

8

Fluks N

iasina

mida (µg/cm

2 jam)

0

200

400

600

0 2 4 6 8

Fluks N

iasina

mida (ug cm

-‐2

jam-‐1)

Waktu (jam)

F1

F2

F3


18

Silikon seperti dimetikon maupun siklometikon adalah cairan pembawa yang sifatnya

lipofilik dan dapat bekerja sebagai peningkat penetrasi dengan cara memodifikasi domain

lipid interseluler guna menurunkan resistensi penghalang akibat interaksi cairan lipofilik

dengan lipid bilayer dari stratum korneum (Leopold et al., 2006). Pada sebuah penelitian

menunjukkan bahwa silikon sangat substantif pada kulit dan dapat secara signifikan

meningkatkan penetrasi dari zat aktif. Formulasi topikal dengan penambahan silikon dalam

emulsi terbukti mampu mempertahankan zat aktif kontak dengan kulit dan mencegah

hilangnya zat aktif karena proses abrasi (Séné et al., 2002).

Hasil yang di dapatkan dari penelitian ini menunjukan bahwa penambahan silikon

pada fase minyak emulsi yang digunakan untuk pembuatan emulgel terbukti dapat

meningkatkan penetrasi dari suatu zat aktif walaupun pada sediaan F3 peningkatan penetrasi

dibandingkan dengan sediaan F1 (blanko) tidak terlalu signifikan. Hal ini menyebabkan

hipotesis yang telah diungkapkan tepat. Dari hasil yang diperoleh, silikon jenis dimetikon

memiliki kemampuan yang lebih tinggi untuk meningkatkan penetrasi dibandingkan dengan

siklometikon. Menurut hasil penelitian sebelumnya, siklometikon dapat mengikat zat aktif

yang lebih lipofilik dari niasinamida sedangkan pada penelitian ini zat aktif hidrofilik seperti

niasinamida lebih terikat dengan silikon jenis dimetikon. Hal ini terjadi karena struktur

dimetikon yang memiliki rantai panjang mengikat zat aktif hidrofilik lebih baik dan struktur

kimia dari siklometikon yang siklik lebih baik mengikat zat aktif yang lipofilik.

Kesimpulan

Hasil dari uji penetrasi secara in vitro dengan menggunakan sel difusi Franz selama 8

jam dapat disimpulkan bahwa sediaan emulgel niasinamida yang menggunakan silikon pada

fase minyak emulsinya memberikan hasil penetrasi yang lebih tinggi dibandingkan emulsi

tanpa silikon. Jenis silikon yang dapat mengikat zat aktif niasinamida lebih baik adalah jenis

dimetikon. Kemudian setelah dilakukan uji stabilitas fisik diperpendek dapat disimpulkan

bahwa sediaan emulgel niasinamida stabil secara fisik.

Saran

Beberapa saran untuk hasil penelitian ini adalah perlu dilakukan uji stabilitas fisik

diperpanjang untuk mengetahui kestabilan suatu sediaan. Untuk uji penetrasi secara in vitro

membran yang diusulkan adalah membran kadaver manusia agar hasil yang diperoleh lebih

mendekati uji in vivo.


19

Daftar Acuan Ansel, H. C. (1989). Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi (Ed. Ke-4) (Farida Ibrahim, Penerjemah). Jakarta: UI

Press, 314, 492. Barret, C. (1969). Skin penetration. Journal Society Cosmetic Chemists , 20, 487-499. Benson, H. A. (2005). Transdermal Drug Delivery: Penetration Enhancement Techniques. Current Drug

Delivery , 2, 23-33. Bissett, D. L., Miyamoto K, Sun P, et al. Topical nicotinamide reduces yellowing, wrinkling, red blotchiness,

and hyperpigmented spots in aging facial skin. Int J Cosmet Sci. 2004;26:231–238. Bonacucina, G., Cespi, M., Palmieri, G.F., 2009. Characterization and stability of emulsion gels based on

acrylamide/sodium acryloyldimethyl taurate copolymer. AAPS PharmSciTech. 2, 10. Bosman, I., Lawant, A., Avegaart, S., Ensing, K., & Zeeuw, R. d. (1996). A Novel Diffusion Cell for in vitro

Transdermal Permeation, Compatible with Automated Dynamic Sampling., 1015-1023. Del, J. Q., Levin, J., Rosso, J. Q. Del, & Momin, S. B. (2010). How Much Do We Really Know About Our

Favorite Cosmeceutical Ingredients, 3(2), 22–41. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (1979). Farmakope Indonesia Edisi

III. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (1995). Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Djajadisastra, J. (2003). Cosmetic Stability. Departemen Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Forster, M., Bolzinger, M. A., Fessi, H., & Briancon, S. (2009). Topical delivery

of cosmetics and drugs topical delivery of cosmetics and drugs and delivery. Eur J Dermatol , 309-323.

Lehman, P., Rzaszutak, M, & Raney, S. (2008). Top 10 Frequently Asked Questions about Pre-Clinical Dermatology Research at The PRACS Institute. Retrieved June 19, 2011, from PRACS Institute, Ltd: http://www.pracs.com/preclinical/faq.html

Linberger, D. R dan Brennan, M. J. (2010). Topical Nonsteroidal Anti-Inflammatory Drugs for The Treatment of Pain Due to Soft Tissue Injury: Diclofenac Epolamine Topical Patch. Journal of Pain Reaserch, (3), 223-233

Long, C. C. (2002). Common Skin Disorder and Their Topical Treatment. Naga Sravan Kumar Varma, V., Maheshwari, P. V., Navya, M., Reddy, S. C., Shivakumar, H. G., & Gowda, D.

V. (2014). Calcipotriol delivery into the skin as emulgel for effective permeation. Saudi Pharmaceutical Journal, 22(6), 591–599. doi:10.1016/j.jsps.2014.02.007

Neun, D., & Ulman, K. (n.d.). Silicones as Excipients for Topical Pharmaceutical Applications Dow Corning. Önder, M. (2008). An Investigation of Efficacy of Topical Niacinamide for the Treatment of Mild and Moderate

Acne Vulgaris, 4–7. Rowe, R. C., Sheskey, P. J., & Owen, S. C. (2009). Handbook of Pharmaceutical Excipients (6th ed.). London:

The Pharmaceutical Press and American Pharmacists Association. Séné, C., D. Neun, L. Tan-Sien-Hee, K. Ulman, (2002). Silicones as Excipients for Topical Pharmaceutical

Applications.. Dow Corning (Life Sciences). Syamsuni, Haji. (2006). Farmasetika Dasar dan Hitungan Farmasi. Jakarta. EGC. Hal: 3 Somasundaran, P., Mehta, S. C., & Purohit, P. (2006). Silicone emulsions. Advances in Colloid and Interface

Science, 128-130(2006), 103–9. doi:10.1016/j.cis.2006.11.023 Touitou, E., & Barry, B. W. (2007). Chemical permeation enhancement. Enhancement in Drug Delivery. Tranggono, R.I., dan F. Latifah. (2007). Buku pegangan ilmu kosmetik. Jakarta: PT Gramedi pustaka utama Utley, L. J. (2001). Design, Testing, and Validation of an LC/MS Compatible Cell for Measuring Transdermal

Diffusion. Florida: University of Florida Wahyuningrum, C. (2013). Uji Aktivitas Antioksidan, Stabilitas Fisik, dan Pengaruh Konsentrasi Dimetikon

dan Siklometikon terhadap Daya Penetrasi Ekstrak Etanol Kulit Manggis (Garcinia mangostana L.) pada Krim Antikerut. Skripsi Program Sarjana Fakultas Farmasi Universitas Indonesia.

Walters, K. A. (2002). The Structure and Function of Skin, New York: Marcell Dekker Inc. Walters, K. A., dan Jonathan, H. (1993). Pharmaceutical Skin Penetration Enhancement. New York: Marcell

Dekker Inc., 335-361. Wester, R.C. & H.I. Maibach. (1990). Topical Drug Delivery Formulations: In Vitro Testing of Topical

Pharmaceutical Formulations (pp. 215). New York: Marcel Dekker Inc. Watson, D. G. (2005). Analis Farmasi. Edisi 2. Penerjemah Winny R.S. Jakarta : Penerbit ECG. Zatz, J. L., & Kushia, G. P. (1996). Gels. In H. A. Lieberman, Pharmaceutical Dosage Form: Disperse Systems

(2nded., ed, VOl. 2, pp. 495-510). New York: Marcel Dekker Inc.


formulasi, pengaruh silikon terhadap penetrasi secara in

Documents