Download - Ppt Kelompok 9 Perhitungan Mikroba
Perhitungan Jumlah Mikroba
Terdapat 2 macam pengukuran dasar:
1. Penentuan Jumlah sel mikroorganisme bersel tunggal
2. Penentuan massa sel mikroorganisme bersel tunggal dan mikroorganisme berfilamen
Metode hitungan mikroorganisme secara mikroskopis:Metode Petroff-Hauser
Metode Hitungan Cawan
Metode MPN (Most Probable Number)
Metode Hitungan Turbidimetri
Metode Hitungan Berat Massa Sel
Metode petroff-Hauser: Bantuan Skala (menggunakan hemasitometer)
1. Ukuran skala 1 mm²
2.Terdapat 25 kotak besar (0.04 mm²) 3. Kedalaman 0.1 mm³
4. Terdapat 9 area
Contoh perhitungan: (metode petroff-hauser)
Area:I = 30 selII = 30 selIII = 20 selIV = 40 sel V = 30 selJumlah total sel 150150 x 5= 750 sel / mm²
Luas 1 area adalah 1 mm² dan kedalaman hemasitometer 0.1 mm³ volume 1 area = 1 mm² x 0.1 mm³ =0.1 mm³1 ml = 1 cm³1 cm³ = 1000 mm³
Sehingga:=750 sel/0.1 mm³=7500 sel/mm³=7500 sel/mm³ = 7.500.000 sel/cm³ = 7.500.000 sel/ml
Kelemahan metode Petrof-Hauser:
Sel yang mati dan hidup tidak bisa dibedakan
Perlu ketelitian yang tinggi
Untuk mempertinggi ketelitian , jumlah sel di
dalam suspensi harus cukup tinggi . (karena setiap bidang pandang harus terdapat jumlah sel terhitung)
Tidak dapat digunakan pada bahan yg mengandung debris atau ekstrak makanan
Metode hitungan cawan (menggunakan colony counter): Metode ini merupakan cara yang paling sensitif untuk
menentukan jumlah jasad renik:
1. Hanya sel hidup yg dapat dihitung2. Beberapa jasad renik dapat dihitung3. Dapat digunakan untuk isolasi mikroba
Kelemahan metode ini :
1. Hasil tidak menunjukkan perhitungan sel sebenarnya2. Jika medium dan kondisi inkubasi berbeda maka jumlah berbeda3.Waktu persiapan dan inkubasi lama
Catatan:Jumlah koloni yang dapat dihitung 30-300 koloni
Contoh perhitungan hitungan (SPC): Biakan 10^
-210^-3
10^-4
SPC Keterangan
A 175
208
15
20
5
2
=(17500+20800)/2
=1,9 x 10^4
Data lain < 30
B 135
163
45
45
5
8
=(13500+16500)/2
1,5 x 10^4
45000/13500 > 240000/28000 < 2, maka dilaporkan pengenceran terendah
C 275
285
35
40
5
7
=(27500+35000)/2 = a=(28500+40000)/2 = b(a+b)/2=3,3 x 10^4
35000/27500 < 240000/28500 < 2, maka dilaporkan hasil rata-rata
D 290
305
25
28
5
0
=(29000+30500)/2=3 x 10^4
25 < 30, dirata rata meskipun 305 > 300
Metode perhitungan MPN ( Most Probable Number) Metode hitungan cawan menggunakan medium padat tetapi metode
MPN menggunakan medium cair dalam tabung reaksi
Berdasarkan jumlah tabung reaksi positif (mengamati kekeruhan/ terbentuknya gas dalam tabung durham.
Pengenceran sampel harus tinggi hingga beberapa tabung terdapat hanya 1 jasad renik,beberapa tabung lain >1 sel, dan tabung lain tidak ada sel
Metode ini dapat digunakan untuk mengitung mikroba tertentu dalam campuran mikroba lain
Rumus :Nilai MPN dari tabel x 1/pengenceran tabung tengah
Metode perhitungan Turbidimeteri: Menggunakan alat nephelometri (alat
pengukur pemantulan cahaya [turbidimeteri] yang dapat mengukur cahaya yang terserap pada suspensi bakteri)
Keuntungan Lebih praktis
Jumlah bakteri dinyatakan dalam OD (Optical Density Load)
Rumus : OD=Log 100-Log GG=pembacaan pada alat
Metode perhitungan berat sel keringMengukur berat kering sel/filamen miselium
Cara kerja:1. Sampel (media cair)2.Disentrifugasi / disaring3.Dicuci4.Dikeringkan5.Beratnya ditimbang