PENETAPAN KADAR KAPSAISIN DAN UJI AKTIVITAS
ANTIOKSIDAN FRAKSI TOLUEN-ETIL ASETAT BUAH CABAI
MERAH (Capsicum annuum L.) DENGAN METODE 2,2-DIFENIL-1-
PIKRILHIDRAZIL (DPPH)
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Kevin Giovedi
NIM : 138114063
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2016
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
i
PENETAPAN KADAR KAPSAISIN DAN UJI AKTIVITAS
ANTIOKSIDAN FRAKSI TOLUEN-ETIL ASETAT BUAH CABAI
MERAH (Capsicum annuum L.) DENGAN METODE 2,2-DIFENIL-1-
PIKRILHIDRAZIL (DPPH)
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Kevin Giovedi
NIM : 138114063
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2016
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
“Hardwork doesn’t guarantee success, but improves its chances.”
-B. J. Gupta-
“All the hardwork, all the sacrifices, all the sleepless nights, struggles, downfalls,
it all pays off.”
-Anonim-
Kupersembahkan skripsi ini untuk :
Tuhan Yesus Kristus
Kedua orangtuaku (Bapak Arijanto Winarti Suwino dan Ibu Nita)
Adikku (Thania Marshella)
Sahabat-sahabatku dan Almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PRAKATA
Puji Syukur kepada Tuhan karena berkat rahmat dan karunia-Nya penulis
dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “PENETAPAN KADAR
KAPSAISIN DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN FRAKSI TOLUEN-
ETIL ASETAT BUAH CABAI MERAH (Capsicum annuum L.) DENGAN
METODE 2,2-DIFENIL-1-PIKRILHIDRAZIL (DPPH)” sebagai salah satu
syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Dalam proses penelitian dan penyusunan skripsi ini, penulis tidak lepas
dari bantuan dan dukungan dari berbagai pihak. Maka pada kesempatan ini
dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-
besarnya kepada:
1. Ibu Aris Widayati, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta yang telah memberikan kesempatan
kepada penulis untuk melakukan penelitian ini.
2. Ibu Dr. Erna Tri Wulandari, Apt. selaku Dosen Pembimbing yang telah
memberikan bantuan dan bimbingan selama pembuatan proposal skripsi hingga
penulisan naskah skripsi dengan kesabaran dan penuh perhatian.
3. Bapak Florentinus Dika Octa Riswanto, M.Sc. selaku Dosen Pembimbing
Akademik dan Dosen Penguji yang telah memberikan motivasi, perhatian,
bimbingan, kritik dan saran selama perkuliahan sehingga skripsi ini dapat
terselesaikan.
4. Ibu Dr. Yustina Sri Hartini, Apt. selaku Dosen Penguji yang telah memberikan
arahan, kritik dan saran sehingga skripsi ini dapat terselesaikan.
5. Segenap dosen dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.
6. Tim Skripsi Selalu Hepi (Regina Hiacinta Eva Angelista, Asti Aprilia Putri dan
Edwin Tesalonika) atas kerjasama, dukungan dan semangatnya selama
pengerjaan skripsi.
7. Teman-teman Farmasi angkatan 2013 atas semua dukungannya dalam
pengerjaan dan penyelesaian skripsi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
8. Teman seperjuangan kuliah di Yogyakarta (Aldwin Teguh dan Ricky Winata)
atas canda, tawa dan dukungannya dalam pengerjaan dan penyelesaian skripsi.
9. Semua pihak yang telah memberikan dukungan dan bantuan yang tidak dapat
disebutkan satu persatu
Akhir kata, penulis merasa masih banyak kekurangan dalam skripsi ini.
Oleh karena itu, dengan segenap kerendahan hati, penulis mengharapkan saran
dan kritik yang membangun demi penyempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi ini
dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan selanjutnya khususnya
dalam bidang farmasi dan kesehatan.
Yogyakarta, 14 November 2016
Penulis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ............................................................................................... i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv
PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI…………………………………v
PRAKATA ............................................................................................................. vi
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .............................................................. viii
DAFTAR ISI .......................................................................................................... ix
DAFTAR TABEL .................................................................................................... x
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii
ABSTRAK ........................................................................................................... xiii
ABSTRACT ........................................................................................................... xiv
PENDAHULUAN ................................................................................................... 1
METODE PENELITAN .......................................................................................... 2
Alat dan Bahan ........................................................................................... 2
Determinasi Tanaman ................................................................................ 2
Pembuatan Simplisia .................................................................................. 2
Ekstraksi………………………………………………………………….2
Pembuatan Larutan Standar Kapsaisin ...................................................... 3
Fraksinasi ................................................................................................... 3
Validasi Metode Analisis Penetapan Kadar ............................................... 3
Penetapan Kadar Kapsaisin dalam Fraksi .................................................. 4
Uji Aktivitas Antioksidan .......................................................................... 4
Perhitungan Nilai IC50 ..................................................................................................................... 5
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................ 5
KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................................. 11
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 11
LAMPIRAN ........................................................................................................... 13
BIOGRAFI PENULIS ........................................................................................... 38
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR TABEL
Tabel I. Hasil pengukuran akurasi dan presisi ...................................................... 7
Tabel II. Hasil penetapan kadar kapsaisin dalam fraksi ......................................... 9
Tabel III. Hasil pengukuran akurasi dan presisi metode penetapan kadar ............ 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Hasil penotolan ekstrak etanol buah cabai merah dan standar
kapsaisin dengan fase gerak toluen-etil asetat (1:1 v/v), fase diam
silika gel 60 F254 dan detektor UV 365 nm ………………………..…6
Gambar 2. Kurva hubungan konsentrasi dengan absorbansi standar kapsaisin ...... 9
Gambar 3. Mekanisme kapsaisin dengan radikal bebas........................................ 10
Gambar 4. Buah cabai merah segar....................................................................... 15
Gambar 5. Buah cabai merah kering ..................................................................... 15
Gambar 6. Serbuk simplisia buah cabai merah ..................................................... 15
Gambar 7. Ekstrak etanol buah cabai merah.………...………………………….15
Gambar 8. Hasil KLT preparatif ekstrak etanol cabai merah dan standar
kapsaisin ............................................................................................. 15
Gambar 9. Sampel fraksi toluen- etil asetat cabai merah Replikasi 1,
Replikasi 2 dan Replikasi 3 ................................................................. 16
Gambar 10.Hasil penotolan ekstrak etanol buah cabai merah dan standar
kapsaisin dengan fase gerak toluen-etil asetat (1:1 v/v), fase diam
silika gel 60 F254 dan detektor UV 365 nm …………………...…….21
Gambar 11.Hasil uji aktivitas antioksidan etanol, standar kapsaisin, ekstrak
etanol cabai merah dan fraksi toluen-etil asetat cabai merah .............. 24
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat keterangan hasil determinasi tanaman .................................. 13
Lampiran 2. Certificate of Analysis standar kapsaisin ........................................ 14
Lampiran 3. Gambar sampel penelitian .............................................................. 15
Lampiran 4. Penimbangan sampel ...................................................................... 16
Lampiran 5. Perhitungan pembuatan larutan seri kapsaisin untuk kurva
baku penetapan kadar ..................................................................... 18
Lampiran 6. Hasil scanning pelarut kapsaisin (etanol) ....................................... 19
Lampiran 7. Hasil scanning optimasi panjang gelombang maksimum
kapsaisin ......................................................................................... 19
Lampiran 8. Pengukuran serapan larutan seri kapsaisin ..................................... 20
Lampiran 9. Perhitungan Rf ................................................................................ 21
Lampiran 10. Perhitungan konsentrasi fraksi ....................................................... 21
Lampiran 11. Pengukuran serapan kapsaisin dan perhitungan konsentrasi
kapsaisin dalam fraksi pengenceran 4x .......................................... 22
Lampiran 12. Perhitungan penetapan kadar .......................................................... 23
Lampiran 13. Hasil uji kualitatif aktivitas antioksidan ......................................... 24
Lampiran 14. Optimasi metode uji aktivitas antioksidan ..................................... 25
Lampiran 15. Uji aktivitas antioksidan standar kapsaisin..................................... 27
Lampiran 16. Uji aktivitas antioksidan sampel fraksi........................................... 29
Lampiran 17. Hasil dan perhitungan adisi sampel………………………...…….34
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
ABSTRAK
Radikal bebas merupakan senyawa yang dapat merusak sel dan memicu
timbunya penyakit-penyakit degeneratif. Buah cabai merah (Capsicum annuum
L.) memiliki kandungan utama berupa kapsaisin yang memiliki aktivitas
antioksidan. Berdasarkan penelitian sebelumnya ekstrak etanol buah cabai merah
memiliki aktivitas antioksidan. Untuk memastikan sumber dari aktivitas
antioksidan, dilakukan tahap purifikasi kapsaisin. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui ada tidaknya kapsaisin, kadar kapsaisin dan aktivitas antioksidan pada
fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah cabai merah. Manfaat dari penelitian
ini adalah penggunaan buah cabai merah sebagai sumber antioksidan alami.
Simplisia buah cabai merah diekstrak dengan metode sokhletasi menggunakan
etanol, lalu dilakukan fraksinasi menggunakan KLT preparatif dengan fase diam
berupa silika gel 60 F254 dan fase gerak berupa toluen-etil asetat (1:1 v/v).
Penetapan kadar kapsaisin dilakukan dengan spektrofotometri UV-Vis. Uji
aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH. Hasil dari penetapan kadar
kapsaisin di dalam fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah cabai merah
menunjukkan terdapat kapsaisin sebanyak 95,262±8,464 μg/mL. Hasil dari uji
aktivitas antioksidan dengan metode DPPH menunjukkan bahwa fraksi toluen-etil
asetat ekstrak etanol buah cabai merah memiliki aktivitas antioksidan yang
dinyatakan dengan rata-rata nilai IC50 sebesar 319,012±21,997 µg/mL.
Kata kunci : aktivitas antioksidan, cabai merah (Capsicum annuum L.), fraksi
toluen-etil asetat ekstrak etanol buah cabai merah, IC50, kapsaisin, metode DPPH
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
ABSTRACT
Free radical is a substance which can cause cell damage and induce
degenerative diseases. Red chilli fruit (Capsicum annuum L.) contains main
compound called capsaicin which has antioxidant activity. Previous research have
indicated that red chilli fruit ethanolic extract has antioxidant activity. In this
research, purification of capsaicin from red chilli fruit ethanolic extract has been
conducted. The aims of this research were to examine the presence and level of
capsaicin also, the antioxidant activity in toluene-ethyl acetate fraction of ethanol
extract red chilli fruit. The benefit of this research was to make red chilli fruit as
another source of natural antioxidant. Red chilli fruit simplisia was extracted
using soxhlet and ethanol as solvent, then fractination was conducted using
preparative TLC using silica gel 60 F254 as stationary phase and toluene-ethyl
acetate as mobile phase. Capsaicin level was determined using spectrophotometry
UV-Vis. Antioxidant activity was assigned using DPPH method. The result
showed that capsaicin level in toluene-ethyl acetate fraction of red chilli fruit
ethanolic extract was 95,262±8,464 μg/mL. Toluene-ethyl acetate fraction of red
chilli fruit ethanolic extract of red chilli fruit has antioxidant activity which
expressed with IC50 value 319,012±21,997 µg/mL.
Keywords : antioxidant activity, red chilli (Capsicum annuum L.), toluene-ethyl
acetate fraction of red chilli fruit ethanolic extract, IC50, capsaicin, DPPH method
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
PENDAHULUAN
Belakangan ini, kasus penderita penyakit degeneratif seperti hipertensi, diabetes
dan kanker terus bertambah. Penyakit degeneratif disebabkan oleh terbentuknya radikal
bebas secara terus-menerus baik melalui proses metabolisme sel maupun akibat dari
paparan dari luar tubuh seperti sinar UV, asap rokok dan makanan. Radikal bebas memiliki
tingkat kereaktifan yang tinggi sehingga dapat menyebabkan kerusakan pada sel. Maka
dari itu, dibutuhkan senyawa antioksidan yang dapat meredam aktivitas radikal bebas.
Penggunaan bahan alam sebagai sumber antioksidan menarik perhatian dunia selama
beberapa dekade terakhir karena sudah banyak studi yang menunjukkan senyawa-senyawa
yang terkandung di dalam tanaman dapat meredam radikal bebas (Rahal, et al., 2014).
Cabai merah merupakan salah satu tanaman sayur yang banyak tumbuh dan
dikonsumsi di Indonesia. Cabai merah (Capsicum annuum L.) memiliki kandungan utama
berupa senyawa kapsaisin yang bertanggung jawab terhadap rasa pedas yang ditimbulkan
(Peter, 2012). Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Sellami, et al. (2013), ekstrak
etanol cabai merah diketahui memiliki aktivitas antioksidan terhadap radikal DPPH yang
ditandai dengan nilai IC50 sebesar 324,14±9,47 µg/mL. Pada penelitiannya juga dinyatakan
bahwa senyawa fenolik dan flavonoid tidak terlalu berpengaruh terhadap aktivitas
antioksidan yang ditimbulkan. Hal ini disebabkan karena adanya kandungan lain yang
lebih berperan besar seperti vitamin (A, C dan E).
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Viktorija, et al. (2014) diketahui
aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol buah cabai merah tidak hanya berasal dari
kandungan vitamin di dalamnya namun juga karena adanya senyawa kapsaisin. Pada
penelitian Zimmera, et al. (2012), kapsaisin murni diketahui memiliki nilai EC50 sebesar
17,62±1,84 µg/mL. Maka dari itu, kapsaisin yang terkandung dalam buah cabai merah
diduga memiliki aktivitas antioksidan. Untuk memastikan aktivitas antioksidan dari
kapsaisin diperlukan tahap purifikasi senyawa kapsaisin karena pada ekstrak masih
banyak senyawa lain yang mungkin menghambat aktivitas antioksidan dari kapsaisin.
Dalam penelitian ini, akan dilakukan purifikasi senyawa kapsaisin dari ekstrak
etanol buah cabai merah dengan fraksinasi menggunakan metode kromatografi lapis tipis
(KLT) preparatif dengan fase diam berupa silika gel 60 F254 dan fase gerak berupa toluen-
etil asetat. Fraksi yang mengandung senyawa kapsaisin akan diuji aktivitas antioksidannya
dengan menggunakan senyawa 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) serta akan dilakukan
penetapan kadar kapsaisin dalam fraksi tersebut. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
mengukur aktivitas antioksidan dari fraksi yang mengandung kapsaisin, menentukan kadar
kapsaisin dalam fraksi serta menentukan nilai IC50. Hasil dari penelitian ini diharapkan
dapat menjadikan cabai merah sebagai salah satu sumber antioksidan alami.
METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain alat-alat gelas yang biasa
digunakan di laboratorium (Pyrex-Germany dan Iwaki), seperangkat alat soxhlet,
mikropipet 200-1000 µL; 10-100 µL (Socorex), blender (Miyako), neraca analitik (Scaltec
SBC 22, BP 160P, max 60/120 g, min 0,001 g), spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu UV-
Vis Spectrophotometer 1240-090499), waterbath, oven, vacuum rotary evaporator (Buchi),
bejana kromatografi, lampu UV 365 nm dan vortex.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain buah cabai merah yang
didapat dari pasar Beringharjo Yogyakarta yang berasal dari perkebunan cabai di daerah
Kopeng, Semarang. Bahan kimia yang digunakan meliputi DPPH pro analysis (p.a.)
(Sigma-Aldrich), kapsaisin p.a. (Sigma-Aldrich), metanol p.a. (Merck), etanol 96% teknis
(CV Genera Labora), toluen p.a. (Merck), etil asetat p.a. (Merck), alumunium foil, kertas
saring dan TLC silica gel 60 F254 (Merck).
Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman cabai merah dilakukan di Laboratorium Sistematika
Tumbuhan, Fakultas Biologi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Bagian yang
digunakan untuk determinasi adalah keseluruhan tanaman cabai (akar, batang, daun, bunga
dan buah).
Pembuatan Simplisia
Buah cabai merah sebanyak 1 kg disortasi terlebih dahulu untuk memisahkan
buah dari pengotor. Buah cabai merah diiris menjadi beberapa bagian lalu dikeringkan di
bawah sinar matahari secara tidak langsung. Proses pengeringan dilakukan sampai
didapatkan buah cabai merah kering yang ditandai dengan mudah hancur apabila diremas
dengan tangan. Lalu pengeringan dilanjutkan dengan oven pada suhu 50°C hingga
didapatkan bobot tetap. Buah cabai merah yang sudah kering dihaluskan dengan blender
sehingga didapatkan serbuk simplisia buah cabai merah.
Ekstraksi
Metode ekstraksi yang digunakan adalah sokhletasi menggunakan 25 g serbuk
simplisia buah cabai merah dengan 350 mL etanol 96% pada suhu 70°C. Sokhletasi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
dilakukan sampai ekstrak pada tabung sokhlet tampak bening atau sekitar 26 jam lalu
ekstrak dipekatkan dengan menggunakan vacuum rotary evaporator hingga volume
ekstrak mencapai kurang lebih setengah dari volume awal. Proses pemekatan dilanjutkan
dengan menguapkan ekstrak di atas waterbath hingga diperoleh ekstrak kental dengan
bobot tetap. Lalu dilakukan perhitungan rendemen ekstrak.
Pembuatan Larutan Standar Kapsaisin
Standar kapsaisin 1000 µg/mL dibuat dengan menimbang 10 mg standar kapsaisin
lalu dilarutkan dengan etanol 96% dalam 10 mL labu takar.
Fraksinasi
Fraksinasi dilakukan dengan metode KLT preparatif dengan fase diam berupa
silika gel 60 F254 dan fase gerak berupa campuran toluen dan etil asetat. Dilakukan
optimasi fase gerak (toluen-etil asetat) terlebih dahulu dengan menotolkan ekstrak etanol
buah cabai merah dan standar kapsaisin 1000 µg/mL pada plat KLT. Fase gerak yang
dipilih adalah fase gerak yang dapat memberikan pemisahan yang baik ditandai dengan
tidak adanya bercak yang saling menumpuk.
Tahap fraksinasi dilakukan dengan mengambil 0,2 g ekstrak kental lalu dilarutkan
dengan 0,5 mL etanol 96% dan ditotolkan membentuk pita sepanjang plat KLT hingga
larutan ekstrak tersebut habis. Standar kapsaisin 1000 µg/mL ditotolkan sebanyak 5 totol
pada KLT sebagai penanda. Plat KLT dielusi dengan fase gerak optimum. Pita bercak yang
sejajar dengan standar kapsaisin dikerok, dilarutkan dalam etanol dan disaring dengan
corong buchner untuk memisahkan fraksi dengan silika gel. Fraksi diuapkan dengan
waterbath hingga diperoleh bobot tetap. Setelah itu dilarutkan kembali dengan etanol
sebanyak 10 mL dan dilakukan pengenceran sebanyak empat kali.
Validasi Metode Analisis Penetapan Kadar
Akurasi dan Presisi
Adisi dilakukan dengan 2,5 mL sampel fraksi dimasukkan ke dalam tiga tabung
lalu masing-masing tabung ditambah dengan 1 mL, 2 mL dan 3 mL standar kapsaisin 100
µg/mL dan ditambah dengan etanol 96% hingga 10 mL. Proses adisi dilakukan replikasi
sebanyak 3 kali. Akurasi dilihat dari nilai perolehan kembali (recovery) pada sampel yang
diadisi. Presisi dilihat dari nilai SD dan CV dari pengukuran sampel yang diadisi.
Linearitas dan Rentang
Dilakukan pengukuran absorbansi terhadap 5 seri konsentrasi standar kapsaisin
(20, 40, 60, 80 dan 100 µg/mL) lalu dibuat kurva hubungan antara konsentrasi standar
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
kapsaisin dengan absorbansinya. Linearitas didapat dari nilai r pada persamaan kurva baku.
Rentang didapat dari konsentrasi terendah dan tertinggi yang digunakan pada kurva baku
standar kapsaisin.
Spesifisitas
Dilakukan penentuan panjang gelombang maksimum kapsaisin terlebih dahulu
menggunakan 3 seri konsentrasi standar kapsaisin (20, 40 dan 60 µg/mL) yang diukur pada
rentang 200-400 nm. Dilakukan scanning terhadap etanol pada panjang gelombang 200-
800 nm. Spesifisitas dilihat dari ada tidaknya spektra yang muncul pada panjang
gelombang maksimum kapsaisin.
Penetapan Kadar Kapsaisin Dalam Fraksi
Fraksi diambil sebanyak 2,5 mL lalu ditambah dengan etanol 96% sampai 10 mL.
Fraksi diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum. Hasil pengukuran
dimasukkan ke dalam persamaan kurva baku untuk mendapatkan nilai kadar. Dilakukan
replikasi sebanyak 3 kali.
Uji Aktivitas Antioksidan
Uji kualitatif aktivitas antioksidan dilakukan dengan mengamati perubahan warna
yang terjadi. 4 tabung reaksi disiapkan dimana tabung A berisi 1 mL etanol, tabung B
berisi standar kapsaisin 100 µg/mL, tabung C berisi 1 mL ekstrak 20 µg/mL dan tabung D
berisi 1 mL fraksi. Masing-masing tabung ditambah dengan 1 mL DPPH 100 µg/mL dan 3
mL etanol. Semua tabung divortex dan ditunggu selama 30 menit.
Uji kuantitatif aktivitas antioksidan dilihat dari serapan DPPH yang diukur dengan
spektrofotometer Vis. Dilakukan penentuan panjang gelombang maksimum terlebih dahulu
terhadap larutan DPPH 100 µg/mL pada rentang 400-800 nm. Kemudian dilakukan
penentuan operating time (OT) dengan menyiapkan 4 mL standar kapsaisin 80 µg/mL, lalu
ditambah dengan 1 mL DPPH 80 µg/mL dan diukur pada panjang gelombang maksimum
setiap 5 menit selama 1 jam. OT ditentukan pada waktu dimana absorbansi mulai stabil.
Blanko dibuat dengan 4 mL etanol yang ditambah dengan 1 mL DPPH 100
µg/mL, ditunggu selama OT dan diukur serapannya pada panjang gelombang maksimum.
Standar kapsaisin dibuat dalam 5 seri konsentrasi (5, 10, 15, 20 dan 25 µg/mL) dimana
setiap konsentrasi diambil sebanyak 4 mL lalu ditambah dengan 1 mL DPPH 100 µg/mL,
ditunggu selama OT dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum.
Sampel fraksi juga dibuat dalam 5 seri konsentrasi dimana setiap konsentrasi diambil
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
sebanyak 4 mL lalu ditambah dengan 1 mL DPPH 100 µg/mL, ditunggu selama OT dan
diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum.
Perhitungan Nilai IC50
Nilai IC50 standar kapsaisin didapatkan dari persamaan pada kurva hubungan
antara seri larutan standar kapsaisin dengan persentase aktivitas antioksidan. Nilai IC50
sampel fraksi didapatkan dari persamaan pada kurva hubungan antara seri larutan fraksi
dengan persentase aktivitas antioksidan.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi dilakukan sebagai tahap awal dalam penelitian yang menggunakan
sampel berupa tanaman. Tujuan determinasi adalah untuk memastikan identitas dari suatu
tanaman sehingga menghindari kesalahan dalam pemilihan sampel. Hasil dari determinasi
tanaman menyatakan bahwa sampel yang digunakan adalah tanaman cabai merah.
Buah cabai merah segar didapatkan dari Pasar Beringharjo Yogyakarta yang
berasal dari perkebunan cabai di Kopeng, Semarang. Buah cabai merah dicuci dan disortasi
untuk memisahkannya dari pengotor dan bagian yang tidak terpakai. Buah cabai merah
segar dikeringkan menggunakan sinar matahari secara tidak langsung. Proses pengeringan
berlangsung hingga didapatkan buah cabai merah kering yang ditandai dengan mudah
hancur apabila diremas dengan tangan. Lalu pengeringan dilanjutkan dengan oven hingga
didapatkan bobot tetap. Tujuan dari pengeringan hingga dicapainya bobot tetap adalah
untuk meminimalkan kandungan air di dalam simplisia sehingga tidak ditumbuhi bakteri
atau jamur. Buah cabai merah kering dihaluskan menggunakan blender hingga didapatkan
serbuk simplisia cabai merah. Proses penghalusan simplisia menjadi serbuk bertujuan
untuk memperkecil ukuran partikel sehingga luas permukaan menjadi lebih besar yang
dapat membuat proses ekstraksi menjadi maksimal karena luas area kontak antara simplisia
dan larutan penyari menjadi lebih besar. Didapatkan persentase rendemen serbuk simplisia
sebesar 14,2836% (b/b).
Ekstraksi serbuk simplisia buah cabai merah dilakukan dengan metode ekstraksi
panas yaitu sokhletasi. Sokhletasi merupakan metode ekstraksi yang menggabungkan
metode maserasi dengan perkolasi. Pelarut akan menguap melewati sidearm menuju ke
labu pendingin dan menetes sehingga sampel akan terendam dengan pelarut yang akan
melarutkan zat aktif. Pelarut yang membawa zat aktif akan turun ke labu alas bulat apabila
ketinggian pelarut sudah melewati sifon. Kelebihan dari sokhletasi yaitu adanya
pemanasan yang menyebabkan meningkatnya kelarutan dari senyawa aktif dan adanya
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
sirkulasi pelarut membuat proses ekstraksi lebih maksimal karena pelarut tidak jenuh
(Mandal, Mandal and Das, 2015). Pada proses ekstraksi, digunakan serbuk simplisia buah
cabai merah sebanyak 25 g dan pelarut berupa etanol 96% sebanyak 350 mL. Proses
ekstraksi dilakukan hingga ekstrak tampak bening pada tabung sokhlet atau kurang lebih
selama 26 jam. Pemekatan ekstrak dilakukan dengan menggunakan vaccuum rotary
evaporator hingga volume ekstrak mencapai kurang lebih setengah dari volume awal lalu
dilanjutkan diatas waterbath hingga didapatkan ekstrak kental atau sudah mencapai bobot
tetap. Didapatkan rata-rata persentase rendemen ekstrak sebesar 21,2304±0,0073% (b/b).
Purifikasi senyawa kapsaisin dilakukan dengan melakukan fraksinasi terhadap
ekstrak etanol buah cabai merah. Fraksinasi dilakukan dengan metode KLT preparatif yang
merupakan metode pemisahan senyawa dalam tahap purifikasi senyawa berdasarkan
afinitas dari senyawa terhadap fase gerak dan fase diam. Metode ini membutuhkan waktu
yang singkat dalam memisahkan senyawa dan memerlukan sampel dalam jumlah sedikit
(Sarker and Nahar, 2012). Optimasi fase gerak dilakukan untuk menentukan fase gerak
yang dapat memberikan pemisahan yang baik dimana tidak adanya bercak yang
menumpuk pada plat KLT. Optimasi fase gerak dilakukan dengan menotolkan ekstrak
etanol buah cabai merah dan standar kapsaisin 1000 µg/mL pada plat KLT lalu dielusi
dengan varian perbandingan toluen p.a dan etil asetat p.a. Dari hasil optimasi didapatkan
fase gerak optimum berupa toluen – etil asetat (1:1 v/v).
Gambar 1. Hasil penotolan (A) ekstrak etanol buah cabai merah dan (B) standar kapsaisin
dengan fase gerak toluen-etil asetat (1:1 v/v), fase diam silika gel 60 F254 dan detektor UV
365 nm
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
Ekstrak kental dilarutkan dengan etanol 96% lalu dilakukan penotolan
membentuk pita sepanjang KLT. Standar kapsaisin 1000 µg/mL juga ditotolkan pada KLT
sebagai penanda lalu plat KLT dielusi dengan fase gerak optimum. Penentuan bercak yang
mengandung kapsaisin didasarkan pada kesamaan nilai Rf (Retardation factor) bercak
ekstrak etanol buah cabai merah dengan standar kapsaisin. Hasil yang didapatkan
menunjukkan terdapat enam bercak yang muncul dan bercak keempat memiliki nilai Rf
yang sama dengan standar kapsaisin yaitu 0,43 (Gambar 1). Pita bercak yang memiliki
nilai Rf 0,43 diasumsikan mengandung senyawa kapsaisin di dalamnya sehingga pita
bercak dikerok. Pita bercak yang sudah dikerok dilarutkan dengan etanol 96% dan
disaring menggunakan corong buchner untuk memisahkan fraksi dengan silika. Fraksi
dipekatkan diatas waterbath sampai kering atau sudah mencapai bobot tetap. Didapatkan
persentase rendemen fraksi sebesar 5,8391±0,0033% (b/b).
Validasi metode analisis dilakukan untuk menilai dan membuktikan bahwa
parameter-parameter tertentu memenuhi persyaratan dan tujuan penggunaannya. Akurasi
adalah kedekatan hasil pengukuran yang diperoleh dengan nilai sebenarnya. Presisi adalah
kedekatan hasil serangkaian pengukuran yang diperoleh dari sampel yang homogen di
bawah kondisi tertentu (Pharmaceutical Convention Incorporation, 2014). Semua sampel
(Tabel I) memiliki nilai recovery dan CV yang baik menurut Gonzales dan Herrador
(2007) yaitu 80-110% untuk nilai recovery dan <11,3% untuk nilai CV sehingga dapat
dikatakan bahwa metode sudah akurat dan dapat menghasilkan data yang presisi dalam
mengukur kadar kapsaisin dalam fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah cabai merah.
Tabel I. Hasil Pengukuran Akurasi dan Presisi
Konsentrasi
(µg/mL) Recovery
Rata-rata
(µg/mL) SD CV
Tanpa
Adisi
Replikasi 1 25,272 -
23,815 2,116 8,886% Replikasi 2 24,786 -
Replikasi 3 21,388 -
Adisi 10
µg/mL
Replikasi 1 34,398 91,262%
33,783 1,325 3,923% Replikasi 2 34,689 99,029%
Replikasi 3 32,262 108,738%
Adisi 20
µg/mL
Replikasi 1 44,301 95,146%
43,265 0,918 2,121% Replikasi 2 42,942 90,777%
Replikasi 3 42,553 105,825%
Adisi 30
µg/mL
Replikasi 1 55,757 101,618%
53,556 3,728 6,961% Replikasi 2 55,660 102,913%
Replikasi 3 49,252 92,880%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
Linearitas adalah kemampuan metode analisis untuk memberikan hasil
pengukuran yang proporsional dengan konsentrasi analit pada sampel. Rentang (Range)
adalah interval konsentrasi tertinggi dan terendah dari kadar analit dalam sampel yang
dapat ditetapkan secara presisi, akurat dan linearitas yang dapat diterima (Pharmaceutical
Convention Incorporation, 2014). Dari kurva perbandingan seri konsentrasi standar
kapsaisin dengan absorbansinya (Gambar 2), didapatkan nilai r sebesar 0,9998 sehingga
dapat dikatakan bahwa metode dapat menghasilkan data yang linier. Rentang pada kurva
ini adalah pada konsentrasi 20-100 μg/mL.
Spesifisitas adalah kemampuan suatu metode analisis untuk mendeterminasi analit
secara spesifik tanpa adanya interferensi dari komponen matrik seperti pengotor.
(Pharmaceutical Convention Incorporation, 2014). Spesifisitas metode dilihat dari ada
tidaknya puncak spektra yang muncul saat scanning etanol pada panjang gelombang
maksimum kapsaisin yaitu 280 nm. Hasil menunjukkan tidak terdapat puncak yang muncul
pada panjang gelombang maksimum kapsaisin. Selain itu, panjang gelombang maksimum
kapsaisin yang didapatkan sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Musfiroh, et al.
(2013) dan Viktorija, et al. (2014) dimana untuk mengukur kandungan kapsaisin yang
terlarut dalam etanol digunakan panjang gelombang 280 nm. Maka dari itu, metode yang
digunakan dalam mengukur kadar kapsaisin dalam fraksi toluen-etil asetat buah cabai
merah sudah spesifik.
Penetapan kadar kapsaisin menggunakan metode spektrofotometri. Prinsip metode
ini adalah mengukur absorbsi energi dari suatu senyawa pada panjang gelombang tertentu,
di mana absorbsi energi sebanding dengan konsentrasi dari senyawa tersebut. Panjang
gelombang maksimum kapsaisin yang didapatkan adalah 280 nm. Panjang gelombang
maksimum yang didapatkan sesuai dengan penelitian yang pernah dilakukan oleh Okada et
al. (2010). Pada tabel II, ditunjukkan hasil penetapan kadar kapsaisin dalam fraksi toluen-
etil asetat ekstrak etanol buah cabai merah sebesar 95,262±8,464 μg/mL, sehingga
diketahui kadar kapsaisin dalam buah segar sebesar 144,339±15,928 mg/kg atau
0,015±0,002% (b/b).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
Gambar 2. Kurva hubungan konsentrasi dengan absorbansi standar kapsaisin
Uji aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH dimana ketika bereaksi
dengan senyawa yang bersifat sebagai antioksidan maka akan terjadi perubahan warna dari
DPPH yang awalnya berwarna ungu menjadi kuning Metode ini merupakan salah satu
metode uji aktivitas antioksidan yang sangat cepat, sederhana, sensitif, dan reprodusibel.
Hasil dari uji aktivitas antioksidan diinterpretasikan dengan nilai IC50 (inhibitory
concentration) yang menunjukkan pada konsentrasi berapa suatu senyawa dapat
menghambat aktivitas senyawa lain sebanyak 50%. Semakin kecil nilai IC50 dari suatu
senyawa maka semakin besar aktivitas antioksidan yang dihasilkan (Kumar, 2016).
Uji kualitatif aktivitas antioksidan bertujuan untuk mengetahui ada atau tidaknya
aktivitas antioksidan. Uji kualitatif dilakukan untuk mengetahui apakah etanol, standar
kapsaisin, ekstrak etanol buah cabai merah, fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah
cabai merah memiliki aktivitas antioksidan terhadap DPPH. Hasil yang didapatkan berupa
perubahan warna dari ungu menjadi ungu pucat hingga kuning pada senyawa standar
kapsaisin, ekstrak etanol buah cabai merah dan fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah
cabai merah. Etanol tidak menunjukkan adanya perubahan warna yang terjadi. Hasil uji
kualitatif menunjukkan bahwa standar kapsaisin, ekstrak cabai merah dan fraksi toluen-etil
asetat ekstrak etanol buah cabai merah memiliki aktivitas antioksidan sedangkan etanol
sebagai pelarut tidak memiliki aktivitas antioksidan.
Tabel II. Hasil Penetapan Kadar Kapsaisin Dalam Fraksi
Kadar (µg/mL) Rata-rata (µg/mL) SD CV
Replikasi 1 101,087 95.262 8.464 8.885%
Replikasi 2 99,146
Replikasi 3 85,553
y = 0,0103x - 0,0003
R² = 0,99970
0,5
1
1,5
0 50 100 150A
bso
rba
nsi
Konsentrasi (µg/mL)
Standar
kapsaisin
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
Tabel III. Hasil perhitungan IC50 sampel fraksi
IC50 (µg/mL) Rata-rata (µg/mL) SD CV
Replikasi 1 323,621
319,012 21,997 6,895% Replikasi 2 338,340
Replikasi 3 295,076
Uji kuantitatif aktivitas antioksidan bertujuan untuk mengukur kemampuan
senyawa antioksidan dalam menghambat aktivitas radikal bebas yang dinyatakan dengan
nilai IC50. Penentuan panjang gelombang maksimum dilakukan untuk menentukan panjang
gelombang dimana larutan DPPH menghasilkan absorbansi maksimum. Dari hasil
percobaan, panjang gelombang maksimum DPPH adalah pada 516 nm. Penentuan OT
dilakukan untuk menentukan waktu yang dibutuhkan oleh senyawa antioksidan untuk
menghambat aktivitas radikal bebas secara sempurna atau ketika absorbansi mulai stabil.
Dari hasil percobaan, didapatkan OT reaksi pada menit ke-40.
Dari hasil uji aktivitas antioksidan (Tabel III), didapatkan nilai IC50 standar
kapsaisin sebesar 14,417 μg/mL dan IC50 fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah cabai
merah sebesar 319,012±21,997 μg/mL. Menurut Blois (1958), kekuatan aktivitas
antioksidan dibagi menjadi empat tingkatan yaitu nilai antioksidan sangat kuat (IC50 <50
μg/mL), antioksidan kuat (50-100 μg/mL), antioksidan sedang (101-150 μg/mL) dan
antioksidan lemah (>150 μg/mL). Berdasarkan tingkatan tersebut, standar kapsaisin
termasuk dalam antioksidan sangat kuat, sedangkan fraksi toluen - etil asetat buah cabai
merah merupakan antioksidan lemah.
Gambar 3. Mekanisme kapsaisin dengan radikal bebas
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
Nilai IC50 fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah cabai merah lebih kecil
dibandingkan dengan IC50 ekstrak etanol buah cabai merah yang diteliti oleh Sellami, et al.
(2013) yaitu sebesar 324,14±9,47 µg/mL, yang menandakan bahwa fraksi toluen-etil asetat
buah cabai merah lebih poten dalam memberikan aktivitas antioksidan dibandingkan
dengan ekstrak etanol buah cabai merah. Pada ekstrak etanol buah cabai merah,
kemungkinan kandungan senyawa di dalamnya masih banyak dan kompleks sehingga
memungkinkan adanya reaksi antagonis dengan kapsaisin sehingga aktivitas antioksidan
yang ditimbulkan berkurang. Dari hasil yang didapatkan, senyawa kapsaisin merupakan
senyawa yang mungkin berperan besar dalam aktivitas antioksidan yang dimiliki oleh buah
cabai merah karena aktivitas antioksidan pada fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah
cabai merah lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak etanol buah cabai merah. Namun
nilai IC50 yang dihasilkan masih tergolong lemah yang mungkin disebabkan oleh masih
adanya senyawa lain yang terkandung di dalam fraksi yang dapat menimbulkan reaksi
antagonis dengan kapsaisin sehingga aktivitas antioksidan yang ditimbulkan berkurang.
Menurut Okada et al. (2010), senyawa kapsaisin bersifat sebagai antioksidan yang
dapat menghambat aktivitas dari radikal bebas. Pada struktur kapsaisin terdapat gugus OH
fenolik yang merupakan asam lemah sehingga dapat memberikan atom H kepada senyawa
radikal. Senyawa radikal akan bersifat netral ketika mendapatkan elektron tambahan
(Gambar 3).
KESIMPULAN DAN SARAN
Terdapat kandungan kapsaisin dalam fraksi toluen-etil asetat buah cabai merah
sebesar 95,262±8,464 μg/mL. Fraksi toluen-etil asetat buah cabai merah memiliki aktivitas
antioksidan yang dinyatakan dalam nilai IC50 sebesar 319,012±21,997 µg/mL.
Saran untuk penelitian berikutnya yaitu melanjutkan tahap purifikasi senyawa
kapsaisin dari fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah cabai merah sampai ke tahap
isolasi untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari senyawa kapsaisin. Diperlukan
pengujian spesifisitas lebih lanjut terhadap fraksi toluen-etil asetat ekstrak etanol buah
cabai merah untuk mengetahui ada tidaknya spektra yang menumpuk pada 280 nm
sehingga dapat meningkatkan validitas metode yang digunakan.
DAFTAR PUSTAKA
Blois, M. S., 1958. Antioxidant determination by the use of stable free radicals, Nature,
181, 1199-2000.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
Gonzales, A.G. and Herrador, M.A., 2007. A Practical Guide to Analytical Method
Validation, Including Measurement Uncertainty and Accuracy Profiles, Trends in
Analytical Chemistry. 26 (3), 228-238.
Kumar, S., 2016. Analytical Techniques for Natural Product Reasearch. CAB
International, United Kingdom, 167-168.
Mandal, S.C., Mandal, V. and Das, A.K., 2015. Essential of Botanical Extraction
Principles and Applications. Academic Press, New York, 122.
Musfiroh, I., Mutakin, M., Angelina, T., and Muchtardi, M., 2013. Capsaicin Level of
Various Capsicum Fruits. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical
Science, 5(1), 248-251.
Okada, Y., Tanaka, K., Sato, E., and Okajima, H., 2010. Kinetics and Antioxidative Sites
of Capsaicin in Homogenous Solution. J Am Oil Chem Soc, 87, 1397-1405.
Peter, K.V., 2012. Handbook of Herbs and Spices, 2nd ed. Woodhead Publishing Limited,
New Delhi, 12, 29.
Pharmaceutical Convention Incorporation, 2014. United States Pharmacopoeia XXXVII/
NF XXXII. Twin Brook Parkway, 1225.
Rahal, A., et al., 2014. Oxidative Stress, Prooxidants, and Antioxidants: The Interplay.
BioMed Research International, 1-19.
Sarker, S.D. and Nahar, L., 2012. Natural Products Isolation, 3rd ed. Humana Press, New
York, 9, 33, 118-120, 129, 135.
Sellami, M., Ghariani, B., Louati, H., Miled, N. and Gargouri, Y. 2013. Biological
Activities of Extracts of Different Spices and Plants. International Journal of
Current Engineering and Technology. 3 (3), 1051-1060.
Viktorija, M., Liljana, K.G., Tatjana, R., Ana, C., and Rubin G., 2014. Antioxidative Effect
of Capsicum Oleoresins Compared With Pure Capsaicin. IOSR Journal of
Pharmacy, 4 (11), 44-48.
Zimmer, A.R., Leonardi, B., Miron, D., Schapoval, E., Oliveira, J.R., and Gosmann, G.,
2011. Antioxidant and Anti-Inflammatory Properties of Capsicum Baccatum:
from Traditional Use to Scientific Approach. Journal of Ethnopharmacology, 139,
228–233.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat keterangan hasil determinasi tanaman
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
Lampiran 2. Certificate of Analysis standar kapsaisin
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
Lampiran 3. Gambar sampel penelitian
Gambar 4. Buah cabai merah segar Gambar 5. Buah cabai merah kering
Gambar 6. Serbuk simplisia buah
cabai merah
Gambar 7. Ekstrak etanol buah
cabai merah
Gambar 8. Hasil KLT preparatif ekstrak etanol cabai merah
(A) dan standar kapsaisin (B)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
Lampiran 4. Penimbangan sampel dan perhitungan % rendemen
% rendemen = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑏𝑎ℎ𝑎𝑛 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑑𝑎𝑝𝑎𝑡
𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑏𝑎ℎ𝑎𝑛 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑔𝑢𝑛𝑎𝑘𝑎𝑛 𝑥 100%
a. Data penimbangan buah segar
b. Data penimbangan buah hasil pengeringan
c. Data penimbangan serbuk total
Berat wadah 80,200 g
Berat wadah + serbuk 226,850 g
Berat serbuk 146,650 g
Berat tampah 181,5 g
Berat tampah + buah 1208,5 g
Berat tampah sisa 181,8 g
Berat buah 1026,7 g
Berat tampah 181,5 g
Berat tampah + buah 363,8 g
Berat buah 182,3 g
Gambar 9. Hasil sampel fraksi toluen - etil asetat cabai
merah Replikasi 1 (A), Replikasi 2 (B) dan Replikasi 3 (C)
% rendemen = 204,439 𝑔
1026,4 𝑔 𝑥 100%
= 19,918% b/b
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
d. Data penimbangan serbuk untuk ekstraksi
Replikasi 1 (g) Replikasi 2 (g) Replikasi 3 (g)
Berat cawan 64,2402 64,2402 53,1227
Berat cawan + serbuk 89,2811 89,2850 78,1432
Berat cawan sisa 64,2458 64,2402 53,1229
Berat serbuk 25,0353 25,0448 25,0203
e. Data penimbangan ekstrak
Replikasi 1 (g) Replikasi 2 (g) Replikasi 3 (g)
Berat cawan 63,5615 55,9816 52,5895
Berat cawan + ekstrak 68,8130 61,5039 57,7600
Berat ekstrak 5,2515 5,5223 5,1705
Replikasi 1
% rendemen = 5,2515 𝑔
25,0353 𝑔 𝑥 100%
= 20,976% b/b
Replikasi 2
% rendemen = 5,5223 𝑔
25,0448 𝑔 𝑥 100%
= 22,050% b/b
f. Data penimbangan ekstrak untuk fraksinasi
Replikasi 1 (g) Replikasi 2 (g) Replikasi 3 (g)
Berat vial 6,3310 6,3310 6,3310
Berat vial + ekstrak 6,5314 6,5315 6,5312
Berat vial ekstrak 0,2004 0,2005 0,2002
g. Data penimbangan fraksi
Replikasi 1 (g) Replikasi 2 (g) Replikasi 3 (g)
Berat cawan 51,5012 49,6297 55,3545
Berat cawan + fraksi 51,5130 49,6420 55,3655
Berat cawan fraksi 0,0118 0,0123 0,0110
Replikasi 3
% rendemen = 5,1705 𝑔
25,0203 𝑔 𝑥 100%
= 20,665% b/b
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
Replikasi 1
% rendemen = 0,0118 𝑔
0,2004 𝑔 𝑥 100%
= 5,888% b/b
Replikasi 2
% rendemen = 0,0123 𝑔
0,2005 𝑔 𝑥 100%
= 6,135% b/b
h. Data penimbangan standar kapsaisin
Kertas 0,2409 g
Kertas + serbuk 0,2511 g
Kertas sisa 0,2409 g
Serbuk 0,0102 g
i. Data penimbangan DPPH
Replikasi 1 (g) Replikasi 2 (g) Replikasi 3 (g)
Berat gelas beaker 62,5867 96,8635 96,8345
Berat gelas beaker +
DPPH 62,5975 96,8744 96,8447
Berat DPPH 0,0108 0,0109 0,0102
Lampiran 5. Perhitungan pembuatan larutan seri kapsaisin untuk kurva
baku penetapan kadar
Semua larutan seri dibuat dari larutan stok kapsaisin 1000 μg/mL dan diencerkan
dalam labu takar 10 mL.
C1 . V1 = C2. V2
100 μg/mL
1000 μg/mL.V1 = 100 μg/mL.10 mL
V1 = 1 mL
Replikasi 3
% rendemen = 0,0110 𝑔
0,2002 𝑔 𝑥 100%
= 5,495% b/b
80 μg/mL
1000 μg/mL.V1 = 80 μg/mL.10 mL
V1 = 0,8 mL
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
60 μg/mL
1000 μg/mL.V1 = 60 μg/mL.10 mL
V1 = 0,6 mL
40 μg/mL
1000 μg/mL.V1 = 40 μg/mL.10 mL
V1 = 0,4 mL
Lampiran 6. Hasil scanning pelarut kapsaisin (etanol)
Lampiran 7. Hasil scanning optimasi panjang gelombang maksimum
kapsaisin
20 μg/mL
1000 μg/mL.V1 = 20 μg/mL.10 mL
V1 = 0,2 mL
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
Lampiran 8. Pengukuran serapan larutan seri kapsaisin
a. Hasil scanning larutan seri kapsaisin
b. Kurva baku dan persamaan regresi linier larutan seri kapsaisin
x = konsentrasi (μg/mL)
y = absorbansi
Persamaan regresi linier: y = 0,0103x - 0,0003
r = 0,9998
y = 0,0103x - 0,0003R² = 0,9997
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
0 50 100 150
Ab
sorb
ansi
Konsentrasi (µg/mL)
Konsentrasi vs Absorbansi Kapsaisin
Seri konsentrasikapsaisin
Konsentrasi
(μg/mL) Absorbansi
20 0,205
40 0,411
60 0,618
80 0,81
100 1,031
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
Lampiran 9. Perhitungan Rf
Ekstrak etanol cabai merah dielusi dengan fase gerak optimum yaitu toluen : etil
asetat (1:1) v/v
Lampiran 10. Perhitungan konsentrasi fraksi
Semua fraksi dilarutkan dalam labu takar 10 mL
a. Konsentrasi fraksi stok
C = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑓𝑟𝑎𝑘𝑠𝑖
𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑢𝑛𝑡𝑢𝑘 𝑚𝑒𝑙𝑎𝑟𝑢𝑡𝑘𝑎𝑛
Replikasi 1
C = 0,0118 𝑔
10 𝑚𝐿 = 1180 μg/mL
Replikasi 2
C = 0,0123 𝑔
10 𝑚𝐿 = 1230 μg/mL
b. Perhitungan konsentrasi pengenceran fraksi 4x
Replikasi 1
1180 μg/mL.2,5 mL = C2.10 mL
C2 = 295 μg/mL
Gambar 10. Hasil penotolan ekstrak etanol buah cabai merah dan
standar kapsaisin dengan fase gerak toluen-etil asetat (1:1 v/v), fase
diam silika gel 60 F254 dan detektor UV 365 nm
Replikasi 3
C = 0,0110 𝑔
10 𝑚𝐿 = 1100 μg/mL
Replikasi 3
1100 μg/mL . 2,5 mL = C2 . 10 mL
C2 = 275 μg/mL
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
Replikasi 2
1230 μg/mL.2,5 mL = C2.10 mL
C2 = 307,5 μg/mL
Lampiran 11. Pengukuran serapan kapsaisin dan perhitungan konsentrasi
kapsaisin dalam fraksi pengenceran 4x
a. Pengukuran serapan kapsaisin dalam fraksi pengenceran 4x
b. Perhitungan konsentrasi kapsaisin dalam fraksi pengenceran 4x
Perhitungan menggunakan persamaan regresi linier dari kurva baku konsentrasi
vs absorbansi kapsaisin
Replikasi 1
y = 0,0103x - 0,0003
0,260 = 0,0103x – 0,0003
x = 25,272 μg/mL
Replikasi 2
y = 0,0103x - 0,0003
0,255 = 0,0103x – 0,0003
x = 24,786 μg/mL
Rata-rata = C Replikasi 1+C Replikasi 2+C Replikasi 3
3
= 25,272+24,786+21,388
3 = 23,816 μg/mL
SD = 2,1159
Replikasi Absorbansi
1 0,260
2 0,255
3 0,220
Replikasi 3
y = 0,0103x - 0,0003
0,220 = 0,0103x – 0,0003
x = 21,388 μg/mL
CV = SD
Rata−rata x 100%
= 2,1159
23,816 x 100%
= 8,8848 %
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
Lampiran 12. Perhitungan penetapan kadar
Kadar kapsaisin dalam fraksi = konsentrasi yang didapat x faktor pengenceran
Jumlah kapsaisin dalam 10 ml fraksi = kadar kapsaisin dalam fraksi x 10 mL
Kadar kapsaisin dalam ekstrak = jumlah kapsaisin dalam 10 ml fraksi
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑡𝑜𝑡𝑜𝑙𝑘𝑎𝑛
Kadar kapsaisin dalam simplisia = kadar kapsaisin dalam ekstrak
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑢𝑛𝑡𝑢𝑘 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘𝑠𝑖
Kadar kapsaisin dalam buah segar = Kadar kapsaisin dalam simplisia
𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑏𝑢𝑎ℎ 𝑠𝑒𝑔𝑎𝑟 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑔𝑢𝑛𝑎𝑘𝑎𝑛
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
Kadar
kapsaisin
dalam fraksi
25,272 μg/mL x 4
= 101,087 μg/mL
24,786 μg/mL x 4
= 99,146 μg/mL
21,388 μg/mL x 4
= 85,553 μg/mL
Jumlah
kapsaisin
dalam 10 ml
fraksi
101,087 μg/mL x
10 mL
= 1010,874 µg
99,146 μg/mL x
10 mL
= 991,456 µg
85,553 μg/mL x
10 mL
= 855,534 µg = 855,534 µg
Kadar
kapsaisin
dalam ekstrak
1010,874
µg/0,2004 g
= 26,490
mg/5,2515 g
991,456
µg/0,2005 g
= 27,307
mg/5,5223 g
855,534
µg/0,2002 g
= 22,096
mg/5,1705 g
Kadar
kapsaisin
dalam
simplisia
26,490
mg/25,0353 g
= 155,171
mg/146,650 g
27,307 mg
/25,0448 g
= 159,898
mg/146,650 g
22,096
mg/25,0203 g
= 129,508
mg/146,650 g
Kadar
kapsaisin
dalam buah
segar
155,171
mg/1026,7 g
= 151,136 mg/kg
= 0,015% b/b
159,898
mg/1026,7 g
= 155,740 mg/kg
= 0,016% b/b
129,508
mg/1026,7 g
= 126,140 mg/kg
= 0,013% b/b
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
Rata-rata = 𝐾𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 1+𝐾𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 2+𝐾𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 3
3
= 151,136+155,740+126,140
3
= 144,339 mg/kg
SD = 15,9279
CV = 𝑆𝐷
𝑅𝑎𝑡𝑎−𝑟𝑎𝑡𝑎 x 100%
= 15,9279
144,339 x 100%
= 11,040%
Lampiran 13. Hasil uji kualitatif aktivitas antioksidan
Gambar 11. Hasil uji aktivitas antioksidan etanol (A),
standar kapsaisin (B), ekstrak etanol cabai merah (C) dan
fraksi toluen-etil asetat cabai merah (D)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
Lampiran 14. Optimasi metode uji aktivitas antioksidan
a. Penentuan operating time
Hasil serapan standar kapsaisin setiap 5 menit
Waktu
(menit) Absorbansi
Selisih
absorbansi
Waktu
(menit) Absorbansi
Selisih
absorbansi
0 0,754 - 30 0,337 0,022
3 0,661 0,093 35 0,318 0,019
5 0,571 0,09 40 0,301 0,017
10 0,488 0,083 45 0,284 0,017
15 0,425 0,063 50 0,271 0,013
20 0,39 0,035 55 0,26 0,011
25 0,359 0,031 60 0,251 0,009
Kurva Operating Time
0
0,2
0,4
0,6
0,8
0 20 40 60 80
Ab
sorb
ansi
Waktu (menit)
Penentuan Operating Time Standar Kapsaisin
Standarkapsaisin 100µg/mL
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
b. Penentuan panjang gelombang maksimum DPPH
Replikasi 1
Replikasi 2
Replikasi 3
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
Rata-rata = 𝐴𝑏𝑠 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 1+𝐴𝑏𝑠 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 2+𝐴𝑏𝑠 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 3
3
= 514+516+518
3
= 516 nm
Lampiran 15. Uji aktivitas antioksidan standar kapsaisin
a. Pembuatan seri konsentrasi standar kapsaisin
5 μg/mL
100 μg/mL . V1 = 5 μg/mL . 10 mL
V1 = 0,5 mL
10 μg/mL
100 μg/mL . V1 = 10 μg/mL . 10 mL
V1 = 1 mL
15 μg/mL
100 μg/mL . V1 = 15 μg/mL . 10 mL
V1 = 1,5 mL
a. Hasil serapan blanko dan seri konsentrasi standar kapsaisin
b. Perhitungan %S
%S = 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜−𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 x 100%
Konsentrasi (µg/mL) Absorbansi
5 0,25
10 0,219
15 0,184
20 0,158
25 0,109
Blanko 0,376
20 μg/mL
100 μg/mL . V1 = 20 μg/mL . 10 mL
V1 = 2 mL
25 μg/mL
100 μg/mL . V1 = 25 μg/mL . 10 mL
V1 = 2,5 mL
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
5 μg/mL
%S = 0,376−0,250
0,376 x 100%
= 33,511%
10 μg/mL
%S = 0,376−0,219
0,376 x 100%
= 41,755%
15 μg/mL
%S = 0,376−0,184
0,376 x 100%
= 51,064%
d. Kurva baku dan persamaan regresi linier
x = konsentrasi (µg/mL)
y = %S
Persamaan regresi linier: y = 1,8245x + 23,697
r = 0,9950
c. Perhitungan IC50 standar kapsaisin
Perhitungan menggunakan persamaan regresi linier dari kurva baku konsentrasi
vs %S kapsaisin
IC50 standar kapsaisin: y = 1,8245x + 23,697
50 = 1,8245x + 23,697
x = 14,417 µg/mL
y = 1,8245x + 23,697R² = 0,9901
0
20
40
60
80
0 10 20 30
%S
(%)
Konsentrasi (μg/mL)
Konsentrasi vs %S Kapsaisin
Seri konsentrasikapsaisin
Linear (Serikonsentrasikapsaisin)
20 μg/mL
%S = 0,376−0,158
0,376 x 100%
= 57,979%
25 μg/mL
%S = 0,376−0,109
0,376 x 100%
= 71,011%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
Lampiran 16. Uji aktivitas antioksidan sampel fraksi
a. Pembuatan seri konsentrasi sampel
Replikasi 1
- Pengenceran 10x (118 μg/mL)
1180 μg/mL . V1 = 118 μg/mL . 10 mL
V1 = 1 mL
- Pengenceran 6,667x (177 μg/mL)
1180 μg/mL . V1 = 177 μg/mL . 10 mL
V1 = 1,5 mL
- Pengenceran 5x (236 μg/mL)
1180 μg/mL . V1 = 236 μg/mL . 10 mL
V1 = 2 mL
- Pengenceran 4x (295 μg/mL)
1180 μg/mL . V1 = 295 μg/mL . 10 mL
V1 = 2,5 mL
- Pengenceran 3,333x (354 μg/mL)
1180 μg/mL . V1 = 354 μg/mL . 10 mL
V1 = 3 mL
Replikasi 2
- Pengenceran 10x (123 μg/mL)
1230 μg/mL . V1 = 123 μg/mL . 10 mL
V1 = 1 mL
- Pengenceran 6,667x (184,5 μg/mL)
1230 μg/mL . V1 = 184,5 μg/mL . 10 mL
V1 = 1,5 mL
- Pengenceran 5x (246 μg/mL)
1230 μg/mL . V1 = 246 μg/mL . 10 mL
V1 = 2 mL
- Pengenceran 4x (307,5 μg/mL)
1230 μg/mL . V1 = 307,5 μg/mL . 10 mL
V1 = 2,5 mL
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
- Pengenceran 3,333x (369 μg/mL)
1230 μg/mL . V1 = 369 μg/mL . 10 mL
V1 = 3 mL
Replikasi 3
- Pengenceran 10x (110 μg/mL)
1100 μg/mL . V1 = 110 μg/mL . 10 mL
V1 = 1 mL
- Pengenceran 6,667x (165 μg/mL)
1100 μg/mL . V1 = 165 μg/mL . 10 mL
V1 = 1,5 mL
- Pengenceran 5x (220 μg/mL)
1100 μg/mL . V1 = 220 μg/mL . 10 mL
V1 = 2 mL
- Pengenceran 4x (265 μg/mL)
1100 μg/mL . V1 = 265 μg/mL . 10 mL
V1 = 2,5 mL
- Pengenceran 3,333x (330 μg/mL)
1100 μg/mL . V1 = 330 μg/mL . 10 mL
V1 = 3 mL
d. Hasil serapan blanko
Rata-rata = 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜1+𝐵𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 2+𝐵𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 3
3
= 0,561+0,552+0,564
3
= 0,559
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
e. Hasil serapan seri konsentrasi sampel fraksi
Replikasi 1
Replikasi 2
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
Konsentrasi
(μg/mL) Abs
Konsentrasi
(μg/mL) Abs
Konsentrasi
(μg/mL) Abs
118 0,427 123 0,423 110 0,443
177 0,383 184,5 0,382 165 0,390
236 0,345 246 0,339 220 0,338
295 0,300 307,5 0,300 265 0,291
354 0,257 369 0,260 330 0,257
Replikasi 3
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
g. Perhitungan %S
Replikasi 1
- 118 μg/mL
%S = 0,559−0,427
0,559 x 100%
= 23,614%
- 177 μg/mL
%S = 0,559−0,383
0,559 x 100%
= 31,485%
- 236 μg/mL
%S = 0,559−0,345
0,559 x 100%
= 38,283%
Replikasi 2
- 123 μg/mL
%S = 0,559−0,423
0,559 x 100%
= 24,329%
- 184,5 μg/mL
%S = 0,559−0,382
0,559 x 100%
= 31,664%
- 246 μg/mL
%S = 0,559−0,339
0,559 x 100%
= 39,356%
Replikasi 3
- 110 μg/mL
%S = 0,559−0,443
0,559 x 100%
= 20,791%
- 165 μg/mL
%S = 0,559−0,390
0,559 x 100%
= 30,233%
- 295 μg/mL
%S = 0,559−0,300
0,559 x 100%
= 46,333%
- 354 μg/mL
%S = 0,559−0,257
0,559 x 100%
= 54,025%
- 307,5 μg/mL
%S = 0,559−0,300
0,559 x 100%
= 46,333%
369 μg/mL
%S = 0,559−0,260
0,559 x 100%
= 53,488%
- 275 μg/mL
%S = 0,559−0,291
0,559 x 100%
= 47,943%
- 330 μg/mL
%S = 0,559−0,257
0,559 x 100%
= 54,025%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
- 220 μg/mL
%S = 0,559−0,338
0,559 x 100%
= 39,535%
e. Kurva baku dan persamaan regresi linier
x = konsentrasi (µg/mL)
y = %S
Persamaan regresi linier:
Replikasi 1: y = 0,1283x + 8,4794
r = 0,9997
Replikasi 2: y = 0,1187x + 9,839
r = 0,9998
f. Perhitungan IC50 sampel
Perhitungan menggunakan persamaan regresi linier dari kurva baku konsentrasi
vs %S sampel
IC50 Replikasi 1: y = 0,1283x + 8,4794
50 = 0,1283x + 8,4794
x = 323,621 µg/mL
IC50 Replikasi 2: y = 0,1187x + 9,839
50 = 0,1187x + 9,839
x = 338,340 µg/mL
0
10
20
30
40
50
60
0 100 200 300 400
%S
(%)
Konsentrasi (µg/mL)
Konsentrasi vs %S SampelReplikasi1
Replikasi2
Replikasi3
Linear(Replikasi 1)
Replikasi 3: y = 0,1532x + 4,7943
r = 0,9967
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
IC50 Replikasi 3: y = 0,1532x + 4,7943
50 = 0,1532x + 4,7943
x = 295,076 µg/mL
Rata-rata = IC50 Replikasi 1+ IC50 Replikasi 2+ IC50 Replikasi 3
3
= 323,621+338,340+ 295,076
3
= 319,013 µg/mL
SD = 21,997
CV = 𝑆𝐷
𝑅𝑎𝑡𝑎−𝑟𝑎𝑡𝑎 x 100%
= 21,997
319,013 x 100%
= 6,895%
Lampiran 17. Hasil dan perhitungan adisi sampel
a. Hasil serapan sampel
Replikasi 1
Replikasi 2
Replikasi 3
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
Konsentrasi adisi
10 µg/mL 20 µg/mL 30 µg/mL
Replikasi 1 0,354 0,456 0,574
Replikasi 2 0,357 0,442 0,573
Replikasi 3 0,332 0,438 0,507
b. Perhitungan konsentrasi sampel
Perhitungan menggunakan persamaan regresi linier dari kurva baku konsentrasi
vs absorbansi kapsaisin
Adisi 10 µg/mL
- Replikasi 1
y = 0,0103x - 0,0003
0,354 = 0,0103x – 0,0003
x = 34,398 μg/mL
- Replikasi 2
y = 0,0103x - 0,0003
0,357 = 0,0103x – 0,0003
x = 34,689 μg/mL
Rata-rata = C Replikasi 1+ C Replikasi 2+ C Replikasi 3
3
= 34,398+34,689+ 32,262
3
= 33,783 µg/mL
SD = 1,325
Adisi 20 µg/mL
- Replikasi 1
y = 0,0103x - 0,0003
0,456 = 0,0103x – 0,0003
x = 44,301 μg/mL
- Replikasi 3
y = 0,0103x - 0,0003
0,332 = 0,0103x – 0,0003
x = 32,262 μg/mL
- Replikasi 3
y = 0,0103x - 0,0003
0,438 = 0,0103x – 0,0003
x = 42,553 μg/mL
CV = 𝑆𝐷
𝑅𝑎𝑡𝑎−𝑟𝑎𝑡𝑎 x 100%
= 1,325
33,783 x 100%
= 3,923%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
- Replikasi 2
y = 0,0103x - 0,0003
0,442 = 0,0103x – 0,0003
x = 42,942 μg/mL
Rata-rata = C Replikasi 1+ C Replikasi 2+ C Replikasi 3
3
= 44,301 +42,942 + 42,553
3
= 43,265 µg/mL
SD = 0,918
CV = 𝑆𝐷
𝑅𝑎𝑡𝑎−𝑟𝑎𝑡𝑎 x 100%
= 0,918
43,265 x 100%
= 2,121%
Adisi 30 µg/mL
- Replikasi 1
y = 0,0103x - 0,0003
0,574 = 0,0103x – 0,0003
x = 55,757 μg/mL
- Replikasi 2
y = 0,0103x - 0,0003
0,573 = 0,0103x – 0,0003
x = 55,660 μg/mL
Rata-rata = C Replikasi 1+ C Replikasi 2+ C Replikasi 3
3
= 55,757+55,660+ 49,252
3
= 53,557 µg/mL
SD = 3,728
CV = 𝑆𝐷
𝑅𝑎𝑡𝑎−𝑟𝑎𝑡𝑎 x 100%
= 3,728
53,557 x 100%
= 6,961%
- Replikasi 3
y = 0,0103x - 0,0003
0,507 = 0,0103x – 0,0003
x = 49,252 μg/mL
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
c. Perhitungan % recovery
% recovery = Konsentrasi larutan n setelah adisi− Konsentrasi tanpa adisi
Konsentrasi (jumlah) adisi x100%
Adisi 10 µg/mL
- Replikasi 1
% recovery = 34,398−25,272
10 x 100%
= 91,262%
- Replikasi 2
% recovery = 34,689−24,786
10 x 100%
= 99,029%
Adisi 20 µg/mL
Replikasi 1
% recovery = 44,301−25,272
20 x 100%
= 95,146%
Replikasi 2
% recovery = 42,942−24,786
20 x 100%
= 90,777%
Adisi 30 µg/mL
Replikasi 1
% recovery = 55,757−25,272
30 x 100%
= 101,618%
Replikasi 2
% recovery = 55,662−24,786
30 x 100%
= 102,913%
- Replikasi 3
% recovery = 32,262−21,388
10 x 100%
= 108,738%
Replikasi 3
% recovery = 42,553−30,515
20 x 100%
= 105,825%
Replikasi 3
% recovery = 49,252−21,388
30 x 100%
= 92,880%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi yang berjudul “Penetapan Kadar
Kapsaisin dan Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Toluen-
Etil Asetat Buah Cabai Merah (Capsicum annuum L.)
dengan Metode 2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil (DPPH)”
memiliki nama lengkap Kevin Giovedi. Penulis
dilahirkan di Tangerang pada tanggal 2 November 1995
sebagai anak pertama dari dua bersaudara, dari pasangan
Arijanto Winarti Suwino dengan Nita. Penulis
menempuh pendidikan formal di TK Kanaan (2000-
2001), SD Penabur Kota Modern Tangerang (2001-2007), SMP Penabur Kota
Modern Tangerang (2007-2010), SMA Terpadu Pahoa Tangerang (2010-2013),
dan kemudian melanjutkan kuliah di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta pada tahun 2013. Semasa kuliah, penulis aktif dalam berbagai
kegiatan baik kegiatan fakultas maupun universitas, seperti menjadi seksi
perlengkapan Pelepasan Wisuda Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
(2013 dan 2014), seksi perlengkapan Titrasi (2014), master of ceremony
Pharmacy 3 on 3 (2014), seksi pendamping kelompok Titrasi (2015), koordinator
keamanan Pharmacy 3 on 3 (2015), asisten praktikum Anatomi Fisiologi Manusia
(2014) dan asisten praktikum Farmakologi Toksikologi (2015 dan 2016).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI