perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id skrining tanaman ... · skrining tanaman obat berkhasiat...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER SERVIKS:

EFEK SITOTOKSIK EKSTRAK DAUN KEMUNING (Murraya paniculata)

TERHADAP KULTUR SEL HELA IN VITRO

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

Akhmad Miftahudin Fazri

G.0010011

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

Surakarta

2013


commit to user

ii

PENGESAHAN SKRIPSI

Skripsi dengan judul: Skrining Tanaman Obat Berkhasiat Antikanker Serviks:

Efek Sitotoksik Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata) terhadap

Kultur Sel Hela in Vitro

Akhmad Miftahudin Fazri, NIM: G0010011, Tahun: 2013

Telah diuji dan disahkan di hadapan Dewan Penguji Skripsi

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta

Pada Hari Senin, Tanggal 23 Desember 2013

Pembimbing Utama

Nama : Brian Wasita, dr., Ph.D

NIP : 19790722 200501 1 003 (…………………………….)

Pembimbing Pendamping

Nama : Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc

NIP : 19810208 200604 2 003 (…………………………….)

Penguji Utama

Nama : Riza Novierta Pesik, dr., M.Kes

NIP : 19651117 199702 2 001 (…………………………….)

Penguji Pendamping

Nama : Nanang Wiyono, dr., M.Kes

NIP : 19760530 200212 1 002 (…………………………….)

Surakarta, __________________________

Ketua Tim Skripsi Dekan FK UNS

Ari Natalia Probandari, dr., MPH., Ph.D Muthmainah, dr., M.Kes.

NIP 19751221 200501 2 001 NIP 19510601 197903 1 002

Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM


commit to user

iii

PERNYATAAN

Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah

diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan

sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah

ditulis atau diterbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam

naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, 23 Desember 2013


NIM. G0010011


commit to user

iv

ABSTRAK

Akhmad Miftahudin Fazri, G.0010011, 2013. Skrining Tanaman Obat Berkhasiat

Antikanker Serviks: Efek Sitotoksik Ekstrak Daun Kemuning (Murraya

paniculata) terhadap Kultur Sel Hela in Vitro. Skripsi. Fakultas Kedokteran

Universitas Sebelas Maret, Surakarta.

Latar Belakang: Kanker serviks adalah kanker yang tumbuh dan berkembang di

daerah leher rahim. Kanker serviks merupakan kanker yang paling banyak ketiga

dan menempati urutan keempat penyebab kematian karena kanker. Banyak faktor

risiko yang dapat menyebabkan kanker serviks, salah satu yang paling sering (99%)

adalah infeksi Human Papilloma Virus (HPV). Terapi standar untuk kanker serviks

seperti pembedahan, radioterapi, dan kemoterapi masih banyak kekurangan dan

banyak efek samping, selain harganya mahal. Oleh karena itu, inovasi terapi kanker

serviks sangat dibutuhkan. Salah satu inovasi menggunakan Daun Kemuning

(Murraya paniculata) yang memiliki kandungan antioksidan, antiinflamasi,

antibakteri, antimutagen, dan antitumor serta neuroprotective. Penelitian ini

bertujuan untuk membuktikan dan mengembangkan tanaman obat antikanker

dengan menggunakan ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata) terhadap

kultur sel Hela secara in vitro berdasarkan efek sitotoksik.

Metode Penelitian: Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorik dengan the

post test only controlled group design. Sampel menggunakan kultur sel Hela.

Masing-masing kultur sel Hela terdiri dari Kontrol Media (KM), Kontrol Sel (KS),

Kontrol Positif dengan doxorubicin (KP1), dan Kelompok Perlakuan dengan

ekstrak Daun Kemuning (KP2). Ekstrak Daun Kemuning yang digunakan adalah 8

serial dosis (80 µg/ml; 40 µg/ml; 20 µg/ml; 10 µg/ml; 5 µg/ml; 2,5 µg/ml; 1,25

µg/ml; 0,625 µg/ml). Efek sitotoksik dihitung menggunakan persentase kematian

sel menggunakan trypan blue. Data kemudian dianalisis menggunakan rumus

penghitungan IC50.

Hasil Penelitian: Hasil analisis data penelitian dengan uji nonparametrik

Kruskal Wallis menunjukkan hasil yang signifikan (p = 0,000). Dosis ekstrak 40

µg/ml adalah dosis yang mampu memberikan efek paling baik pada penelitian ini.

Efek sitototoksik IC50 ekstrak Daun Kemuning pada kultur sel Hela sebesar

8,52 µg/ml dan doxorubicin 19,80 µg/ml.

Simpulan: Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata) memiliki efek sitotoksik

terhadap kultur sel Hela secara in vitro. Efek sitotoksik ekstrak Daun Kemuning

pada kultur sel Hela lebih kuat dibandingkan kontrol positif doxorubicin.

Kata kunci: ekstrak Daun Kemuning, sitotoksik, sel Hela, kanker serviks


commit to user

v

ABSTRACT

Akhmad Miftahudin Fazri, G.0010011, 2013. Screening of Anticancer Plants for

Cervical Cancer: Cytotoxic Effects Kemuning Leaves Extract (Murraya

paniculata) against Hela Cells Culture in Vitro. Mini Thesis. Faculty of Medicine,

Sebelas Maret University, Surakarta.

Background: Cervical cancer is the third most common cancer and ranks fourth

leading cause of death due to cancer. Many risk factors can lead to cervical cancer,

one of the most frequent (99%) is infection with the Human Papilloma Virus

(HPV). Standard therapy for cervical cancer such as surgery, radiotherapy, and

chemotherapy are still many deficiencies and side effects, in addition to cost a

fortune. Therefore, the innovation of cervical cancer therapy is needed. One of the

innovation is using Kemuning Leaves (Murraya paniculata) which contains

antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial, antimutant, antitumor, and

neuroprotective. This study aims to elucidate anticancer medicinal plant extracts

using Kemuning Leaves (Murraya paniculata) against Hela cell cultures in vitro by

cytotoxic effects.

Methods: The study was an experimental laboratory with a controlled group post

test only design. Samples were using Hela cell culture. Each consists of a Hela cell

culture Media Controls (KM), Control Cells (KS), Positive Control with

doxorubicin (KP1), and the Group Treated with the extract of Kemuning Leaves

(KP2). Kemuning Leaves extract was used 8 serial doses (80 µg/ml; 40 µg/ml; 20

µg/ml; 10 µg/ml; 5 µg/ml; 2,5 µg/ml; 1,25 µg/ml; 0,625 µg/ml). Cytotoxic effects

were calculated using the percentage of cell death using trypan blue. Data were

analyzed using the formula IC50 calculation.

Results: Kruskal Wallis test showed a significant result (p = 0.000). In this study,

40 µg/ml is the dose that is able to provide most excellent effect. Cytotoxic effect

on Hela cell cultures (IC50) with Kemuning Leaves extract was 8.52 µg/ml and

19.80 µg/ml for doxorubicin, respectively.

Conclusions: Kemuning Leaves (Murraya paniculata) extract has cytotoxic effect

on Hela cell cultures in vitro. The cytotoxic effects of Kemuning Leaves extract on

Hela cell culture are stronger than doxorubicin which serve as positive control.

Key words : Murraya paniculata extract, cytotoxic, Hela cell, cervical cancer


commit to user

vi

PRAKATA

Alhamdulillah, segala puji bagi Allah Azza Wajalla yang telah memberikan

kekuatan dan kemudahan, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan

penyusunan laporan penelitian dengan judul “Skrining Tanaman Obat Berkhasiat

Antikanker Serviks: Efek Sitotoksik Ekstrak Daun Kemuning (Murraya

paniculata) terhadap Kultur Sel Hela in Vitro”.

Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat kelulusan tingkat sarjana di

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Kendala dalam

penyusunan skripsi ini dapat teratasi atas pertolongan Allah melalui bimbingan dan

dukungan banyak pihak. Untuk itu, perkenankan penulis mengucapkan terima kasih

kepada:

1. Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM, selaku Dekan Fakultas

Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.

2. Brian Wasita, dr., Ph.D, selaku Pembimbing Utama yang telah banyak

meluangkan waktu untuk memberikan motivasi dan bimbingan.

3. Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc, selaku Pembimbing Pendamping yang

telah banyak meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan dan solusi.

4. Riza Novierta Pesik, dr., M.Kes, selaku Penguji Utama yang telah

memberikan banyak masukan dalam penyusunan skripsi ini.

5. Nanang Wiyono, dr., M.Kes, selaku Anggota Penguji yang telah memberikan

banyak masukan dalam penyusunan skripsi ini.

6. Group Research Kanker FK UNS (Brian Wasita, dr., Ph.D, Nanang Wiyono,

dr., M.Kes, Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc) atas kesediaan, kerjasama, dan

bantuan dalam pelaksanaan peneitian ini.

7. Tim skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta,

Muthmainah, dr., M.Kes.; Ari Natalia Probandari, dr., MPH.,Ph.D.;

Kusmadewi, dr.; Ibu. Sri Eni Narbietty, SH, MH; dan Bp. Sunardi yang telah

meluangkan waktu dan banyak membantu.

8. Ayah Dasiman (Alm) dan Ibu Darsih., Kakak Novi Prasetiawati dan Siti

Meisyaroh, keluarga yang luar biasa, terima kasih atas doa yang tanpa jeda,

motivasi yang tiada henti, kesabaran yang menenangkan, dan kasih sayang yang

tak pernah lekang.

9. Erma Malindha, teman seperjuangan skripsi yang luar biasa beserta sahabat

yang selalu menemani, membantu, dan memotivasi.

10. Hajar, Silvia, Dina, Adi, teman yang menemani, membantu, dan memotivasi.

11. Seluruh Keluarga Besar Kastrat de Geneeskunde dan BSMI Surakarta yang

senantiasa menjadi rumah pelepas lelah dan teman yang hangat.

12. Keluarga Besar Asisten Patologi Anatomi FK UNS 2010 dan segenap dosen

serta karyawan Lab PA, atas dukungan dan bantuan selama ini.

13. Semua pihak yang telah membantu terselesainya skripsi ini, yang tidak dapat

penulis sebutkan satu-persatu.

Meskipun tulisan ini masih belum sempurna, penulis berharap skripsi ini bisa

bermanfaat untuk pengembangan ilmu pengetahuan. Penulis mengharapkan masukan,

kritik, dan saran dari pembaca untuk kesempurnaan skripsi ini.

Surakarta,



commit to user

vii

DAFTAR ISI

PRAKATA ............................................................................................................ vi

DAFTAR ISI ......................................................................................................... iii

DAFTAR TABEL ................................................................................................. vii

DAFTAR GRAFIK ............................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xi

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii

BAB I. PENDAHULUAN ............................................................................. 1

A. Latar Belakang Masalah................................................................ 1

B. Perumusan Masalah ..................................................................... 4

C. Tujuan Penelitian ......................................................................... 4

D. Manfaat Penelitian ....................................................................... 4

BAB II. LANDASAN TEORI ......................................................................... 5

A. Tinjauan Pustaka .......................................................................... 5

1. Kanker Serviks .......................................................................... 5

2. Doxorubicin .............................................................................. 13

3. Daun Kemuning (Murraya paniculata) .................................... 15

4. Kultur Sel Hela ......................................................................... 19

B. Kerangka Pemikiran ..................................................................... 24

C. Hipotesis ...................................................................................... 25

BAB III. METODE PENELITIAN .................................................................... 26

A. Jenis Penelitian............................................................................... 26


commit to user

viii

B. Lokasi Penelitian............................................................................ 26

C. Subjek Penelitian............................................................................ 26

D. Teknik Sampling ........................................................................... 26

E. Rancangan Penelitian .................................................................... 27

F. Identifikasi Variabel Penelitian ..................................................... 28

G. Definisi Operasional Variabel Penelitian ...................................... 28

H. Alat dan Bahan Penelitian ............................................................. 31

I. Cara Kerja .................................................................................... 32

J. Teknik Analisis Data .................................................................... 39

BAB IV. HASIL PENELITIAN ........................................................................ 40

BAB V. PEMBAHASAN ................................................................................ 45

BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 50

A. Simpulan ....................................................................................... 50

B. Saran ............................................................................................. 50

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 53

LAMPIRAN .......................................................................................................... 59


commit to user

ix

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1. Stadium Kanker Serviks (Muttaqin, 2010) ....................................... 11

Tabel 4.1. Hasil Uji Senyawa Aktif Ekstrak Murraya paniculata ..................... 40

Tabel 4.2. Hasil Uji Mann-Whitney Antarkelompok Perlakuan Ekstrak

Daun Kemuning dengan Nilai p Signifikan ...................................... 43

Tabel 4.3. Hasil Perhitungan IC50 pada Ekstrak Murraya paniculata dan

Doxorubicin. ..................................................................................... 44


commit to user

x

DAFTAR GRAFIK

Grafik 4.1. Persentase Kematian Sel Perlakuan Ekstrak Murraya Paniculata.

Data Disajikan dalam Bentuk Rata-Rata ± SD. ............................... 41

Grafik 4.2. Persentase Kematian Sel Menggunakan Doxorubicin. Data

Disajikan dalam Bentuk Rata-Rata ± SD. .......................................... 42

Grafik 4.3. Perbandingan Persentase Kematian Sel antara Ekstrak Daun

Kemuning Dengan Doxorubicin. Data Disajikan Dalam

Bentuk Rata-Rata ± SD. ..................................................................... 42


commit to user

xi

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Daerah Metaplasia Skuamokolumner Junction (Schiffman et

al., 2007) ....................................................................................... 5

Gambar 2.2. Genome organization dari HPV 16 dan 18 (Abreu et al.,

2012) ............................................................................................. 8

Gambar 2.3. Murraya paniculata (L.) Jack (Welsh, 1998) ............................... 16

Gambar 2.4. Morfologi Sel Hela (DeFillippis et al., 2003) .............................. 21

Gambar 2.5. Skema Kerangka Pemikiran ......................................................... 24

Gambar 3.1. Skema Rancangan Penelitian........................................................ 27


commit to user

xii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Izin Penelitian

Lampiran 2. Etichal Clearance

Lampiran 3. Hasil Uji Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata)

Lampiran 4. Foto Pembuatan Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata)

Lampiran 5. Foto Plate dan Hasil Trypan Blue Kultur Sel Hela

Lampiran 6. Hasil Analisis Presentase Kematian Sel dari Uji Sitotoksik

Menggunakan Tryphan Blue

Lampiran 7. Hasil Analisis Kematian Sel Menggunakan SPSS

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id skrining tanaman ... · skrining tanaman obat berkhasiat...

Documents