1. Definisi dan syarat media.

Definisi :

Media adalah suatu substrat yang diperlukan untuk menumbuhkan dan

mengembang biakan mikroba.

Syarat :

a) mengandung semua unsur hara yang diperlukan untuk pertumbuhan dan

perkembang biakan mikroba.

b) Mempunyai tekanan osmotik, tegangan permukaan dan pH yang sesuai

dengan kebutuhan mikroba.

c) Steril, sebelum ditanami mikroba tidak ditumbuhi oleh mikroba lain yang

tidak diharapkan.

2. Jenis media.

Media dapat digunakan berdasarkan :

a) Bentuknya.

Dengan ada tidaknya bahan tambahan berupa zat pemadat seperti agar-agar atau

gelatin, dikenal 3 bentuk media yaitu :

1) Media padat; media yang ditambahi tepung agar-agar sebanyak 12-15 %.

Media ini umumnya digunakan untuk pertumbuhan bakteri atau kapang.

2) Media semi padat atau semi cair; media yang ditambahi tepung agar-agar

hanya 50% atau kurang dari yang seharusnya. Umumnya digunakan untuk

pertumbuhan mikroba yang banyak memerlukan air dan hidup anaerobik atau

fakultatif.

3) Media cair; media yang tidak ditambahi bahan pemadat, umumnya digubakan

untuk pertumbuhan mikroalga.

b) Komposisi/susunannya

Berdasarkan komposisinya media terbagi atas :

1) Media alami; yaitu media yang disusun dari bahan-bahan alami seperti

kentang, tepung, daging, telur, ikan sayur dsb.

2) Media semi sintetis; yaitu media yang disusun dari bahan-bahan alami dan

bahan-bahan sintetis . Contoh:

Kaldu nutrisi disusun dari :

Pepton 10,0 gram

Ekstrak daging 10,0 gram

NaCl 5,0 gram

Aquadest 1000 ml

3) Media sintetis; yaitu media yang disusun dari senyawa kimia.

Contoh media untuk pertumbuhan bakteri Clostridium disusun dari :

K2HPO4 0,5 gram

KH2PO4 0,5 gram

MgSO4 7 H2O 0.1 gram

NaCl 0.1 gram

FeSO4 7H2O 0.01 gram

MnSO4 7H2O 0.01 gram

CaCO3 seangin

c) Sifatnya.

Berdasarkan pengaruh zat yang ditambahkan ke dalamnya maka media dapat

dibedakan menjadi :

1) Media umum (general medium)

Media yang dipergunakan untuk pertumbuhan satu atau lebih kelompok mikroba.

Misalnya kaldu nutrisi untuk bakteri, agar kentang dekstrosa untuk jamur dsb.

2) Media perkayaan (enrichment medium).

Media yang umumnya mengandung bahan-bahan tertentu untuk memberikan

kesempatan tumbuh lehih cepat didalam satu bahan. Contoh; kaldu selenit atau

kaldu tetrationat untuk memisahkan bakteri Salmonella thyposa dari dari tinja.

3) Media selektif.

Media yang digunakan untuk menunjang pertumbuhan mikroba tertentu,

sementara pertumbuhan mikroba yang lainnya terhambat. Misalnya Mc Conkey

agar dan Eosin methylen Blue agar (EMB) mengandung zat warna yang dapat

menghambat bakteri gram positif tetapi bakteri gram negatifnya tetap dapat

tumbuh.

4) Media diferensial.

Media yang digunakan untuk pertumbuhan mikroba tertentu serta sifat-sifatnya,

mengandung indikator untuk membedakan mikroba berdasarkan penampilan pada

media tersebut. Contoh , Mc monkey agar yang mengandung sejenis gula dan

suatu zat warna yang akan menjadi merah bila pH turun sampai di bawah 6.8

(mikroba yang dapat memfermentasi laktosa akan menghasilkan asam yang dapat

menurunkan pH dan menyebabkan koloni berwarna merah).

5) Media penguji.

Media yang digunakan untuk menguji senyawa tertentu denganbantuan mikroba.

6) Media identifikasi

Media yang digunakan untuk mempelajari atau membuktikan satu atau lebih

fungsi metabolik khas dari mikroba yang diperlukan untuk diidentifikasi. Contoh

Triple Sugar Iron Agar (TSIA) untuk identifikasi enterobakter.

7) Media Perhitungan.

Media yang digunakan untuk menghitung jumlah mikroba pada suatu bahan

(dapat berupa media umum, selektif ataupun media diferensial dan penguji)

SEJARAH

4.1.1 Uraian dan Contoh

Mikrobiologi adalah ilmu yang mempelajari bentuk, sifat dan kehidupan

jasad- hidup yang termasuk mikroba (jasad-renik, mikrobia, mikroorganisme).

Bidang ilmu ini merupan salah satu pembahasan dari kelompok besar jasad hidup

yang mempunyai bentuk dan ukuran sangat kecil, serta sifat hidup yang berbeda

dengan umumnya jasad lain. Karenanya tanpa menggunakan alat pembesaran

seperti lup atau mikroskop, bentuknya akan sulit untuk dapat dilihat dan

dipelajari.

Dunia mikroba walaupun sudah sejak lama dikenal kehadiran dan

peranannya, baru “terbuka” setelah Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

menciptakan mikroskop sederhana. Disebut sederhana karena mikroskop tersebut

hanya terdiri dari satu lensa dengan mencapai pembesaran kurang dari 200 kali.

Tetapi dengan adanya mikroskop sederhana tersebut maka rahasia dan pertanyaan

besar tentang bentuk mikroba yang belum terungkap sebelumnya, mulai terbuka

(gambar 1.1)

Dunia mikroba lebih terungkap kembali setelah Louis Pasteur (1822-1895)

seorang ahli kimia Perancis, menemukan prinsip-prinsip dasar yang berkaitan

dengan sifat hidup mikroba ; sehingga banyak masalah dan pertanyaan yang

tadinya belum terungkap, setelah penemuan-penemuan Pasteur menjadi terjawab.

Gambar 1.1 Contoh Beberapa Mikroskop

(a) (b)

Keterangan : (a) Mikroskop monokuler (b) Mikroskop binokuler yang sudah

maju.

Tampil pula sarjana lain yang banyak jasanya di dalam bidang

mikrobiologi yaitu Robert Koch (1843-1910) seorang dokter Jerman. Atas

penemuan dan penelitian yang bersangkutan, kalau kemudian kaitan dan peranan

mikroba sebagai jasad penyebab penyakit dapat terjawab dan diterangkan secara

jelas. Sehingga salah satu batasan (postulat) yang telah di susunnya saat itu, masih

tetap berlaku sampai sekarang ini, yang umum dikenal dengan nama Postulat

Koch, yang terdiri dari 4 atau 5 masalah.

Berbicara tentang sejarah mikrobiologi, maka sebaiknya diungkapkan

berdasarkan periode perkembangan bidang tersebut mulai dari periode yang

paling awal hingga yang modern sesuai dengan kemajuan yang telah dicapai,

yaitu :

(1) Periode Spekulasi dan Perintisan : Dari zaman Prasejarah sampai 1850

Pada periode ini para ahli mencoba mencari jawaban dari berbagai

permasalahan yang timbul di lingkungannya yang mungkin berkaitan dengan

peranan mikroba, misalnya :

(a) Bagaimana dan dari mana kehidupan ini berasal (masalah biogenesis)

(b) Apa yang terjadi dengan bahan-makanan yang kemudian menjadi busuk atau

berbau (masalah pembusukan, pelendiran)

(c) Mengapa dan bagaimana suatu penyakit dapat menular dan menyebar

(masalah kontagion)

(d) Apa yang terjadi dengan pelukaan yang kemudian membengkak dan

mengeluarkan nanah (masalah supurasi)

(e) Bagaimana proses fermentasi dapat terjadi.

Pada periode inilah timbul dan lahir banyak fenomena, batasan, ataupun

postulat tentang segala sesuatu yang berhubungan dengan mikrobiologi secara

umum ataupun secara khusus.

Adalah hal yang bisa dimengerti mengingat tingkat kemajuan ilmu

pengetahuan dan sarana peralatan yang ada saat itu, kalau pada zaman dahulu

orang mempercayai adanya generatio spontanea (generasi spontan) atau teori

abiogenesis. Yaitu bahwa suatu kehidupan atau hadirnya mahluk hidup dapat

terjadi secara spontan atau tiba-tiba dari benda mati. Seperti misalnya :

(a) Kita menempatkan air jernih pada sebuah gelas, kemudian disimpan dan

dikenai cahaya matahari. Selang beberapa waktu, timbullah kehidupan di

dalamnya : jentik-jentik kecil ataupun jasad-bewarna hijau atau hijau-kebiruan

yang menempel pada pinggiran gelas. Padahal tadinya di dalam air tidak ada

jasad-hidup seperti itu. Jawaban perkiraan yang bisa dicapai saat itu ialah

jentik-jentik dan jasad berwarna tersebut timbul langsung dari air (benda

mati).

(b) Kita menyimpan bahan-makanan, misalnya daging yang masih segar pada

tempat biasa tanpa penutup yang bersih. Maka timbullah pada permukaan

daging tersebut makhluk-makhluk kecil yang makin lama nampak membesar :

menjadi belatung atau tumbuhan melebar membentuk lendir. Padahal

sebelumnya pada permukaan daging tersebut tidak nampak adanya kehidupan.

Jawaban-perkiraan yang dapat dicapai saat itu ialah bahwa belatung dan lendir

berasal dari daging secara langsung.

Banyak lagi contoh-contoh kejadian seperti di atas yang pada umumnya

mempunyai jawaban yang sama : bahwa makhluk hidup dapat secara langsung

berasal dari benda/jasad mati.

Percobaan Redi (16266-1697) seorang ahli pengetahuan dan kedokteran

Italia yang mula-mula “meruntuhkan” teori abiogenesis. Yaitu dengan

memanaskan terlebih dahulu benda-benda yang mau disimpan, sehingga

kemungkinan besar kalaupun sudah menempel “bibit” jasad-hidup pada

permukaan benda/barang akibat sentuhan tangan, hembusan angin ataupun dicuci

dengan air biasa, akan mati. Ternyata dengan penyimpanan lama setelah

pemanasan, benda atau bahan tersebut tidak ditumbuhi oleh jasad-hidup.

Juga percobaan Spallanzani (1729-1799) yang memasukkan

substrat/bahan berupa senyawa organik ke dalam botol-labu yang bagian atasnya

ditutup rapat, kemudian dipanaskan. Ternyata walaupun botol labu itu kemudian

disimpan lama, adanya kehidupan di dalam bahan tidak nampak dan terjadi.

Tetapi berbeda hasilnya dengan botol lain yang diisi dengan bahan yang sama

tetapi hanya ditutup dan tidak dipanaskan didalamnya telah ditumbuhi oleh jasad

hidup.

Untuk masa berpuluh-puluh tahun tetap dianut adalah tentang proses

fermentasi, misalnya fermentasi cairan buah anggur menjadi minuman anggur

beralkohol. Proses tersebut adalah proses kimia, karena jasad pemrosesannya

tidak nampak, serta kalaupun kemudian adanya pertumbuhan jasad (misal ragi)

pada permukaan larutan dianggap sebagai akibat proses tersebut. Tetapi berkat

penelitian tiga orang ahli, antara lain Pasteur pada tahun 1830, dapat diketahui dan

dipastikan bahwa proses fermentasi adalah proses biologis dimana mikroba (ragi)

yang berperan.

Juga di dalam bidang ilmu penyakit, walaupun sejak jaman dulu sudah

banyak ahli yang mempunyai keyakinan bahwa penyebab penyakit dapat

berpindah tempat dan menyebar dari satu orang ke orang lain, baik melalui udara,

melalui air, ataupun melalui pembawa lainnya. Baru oleh Fracastorius (1478-

1553) dasar-dasar yang meyakinkan tentang perpindahan dan penyebaran jasad

penyebab penyakit, mulai diungkapkan. Serta lebih kurang satu setengah abad

kemudian oleh Kircher (1602-1680) cara-cara yang pasti tentang penularan,

penyebaran, dan perpindahan jasad-penyebab penyakit tersebut diuraikan dengan

lebih terperinci.

Uraian, bahasan, dan batasan Kircher inilah yang kemudian dapat

mengungkapkan berbagai jenis penyebab penyakit serta cara penyebaran dan

penularannya, seperti oleh Panum (1820-1885) ahli kedokteran Denmark untuk

penyakit campak, Snow (1813-1858) dan Budd (1811-1880) tentang epidemi

kolera Asia, dan sebagainya.

Pada periode perintisan dan spekulasi, yang paling banyak diteliti adalah

masalah mikrobiologi bidang penyakit/kedokteran, karena masalah ini secara

langsung menyangkut mati-hidup orang.

Juga pada periode ini tentang terjadinya gejala pembengkakan pada luka

yang dibiarkan, diketahui kemudian, disebabkan oleh adanya pertumbuhan

mikroba “pengubah” darah menjadi nanah yang kemudia banyak hidup di sekitar

dan di dalam luka.

(2) Periode keemasan : 1850 sampai 1910

Berkat penemuan dan penelitian selama periode sebelumnya, maka masa

antara tahun 1850-1910 dinamakan periode keemasan. Hal ini dikaitkan dengan :

(a) Penemuan Robert Koch pada tahun 1881 tentang metode isolasi (pemisahan),

pembuatan preparat dan identifikasi biakan mikroba secara murni.

(b) Penemuan Petri (salah seorang assisten Koch) untuk cawan-petri (petri-disk)

di dalam cara-teknik mikroba.

(c) Penemuan Gram di tahun 1844 untuk sistem perwarnaan bakteri sehingga

“terbagi” menjadi dua kelompok besar : Gram-positif dan Gram-negatif.

(d) Penemuan Chamberland pada tahun 1887 untuk sistem saringan/filter guna

keperluan sterilisasi secara fisik.

Nama-nama seperti Ehrlich (1854-1915), Von Behring dan Kitasato

(1890), Metchnikkoff (1883), Loeffer (1884), Park (1894) dan banyak nama-nama

ahli di bidang mikrobiologi, merupakan nama yang ditulis dengan tinta emas di

dalam sejarah perkembangan mikrobiologi. Seperti secara khusus untuk bidang

penyebab penyakit sipilis, pes, kolera, tifus, dan difteri di Amerika Serikat oleh

Rush (1813), Webster (1843), Spencer (1851), Welch (1894), McCoy (1910).

Khusus mengenai Robert Koch yang sampai sekarang namanya tetap

dikenang dan dihargai karena jasa-jasanya besar di bidang mikrobiologi

kedokteran dan kemanusiaan. Berkat penelitian Koch ini maka ihwal dan

penyebab penyakit TBC, tifus, difteri, kolera dan gonorhu serta anthraks, dapat

terungkap dan dipisahkan secara murni. Yang paling penting adalah Postulat

Koch yang menjadi dasar bagi seseorang ahli untuk mencari, menemukan, dan

mengetahui jasad penyebab suatu penyakit di dalam suatu wabah yang sedang

berkecamuk. Tahap-tahap kerja Postulat tersebut sebagai berikut :

(a) Bahwa mikroba yang disangka penyebab harus selalu didapatkan pada semua

penderita dan tidak didaptkan pada bukan penderita (misal yang sehat).

(b) Bahwa mikroba penyebab harus dapat dibiakkan secara murni di dalam media

tanpa kehadiran bagian/jaringan jasad yang tadinya dikenai.

(c) Bahwa biakan jasad yang sudah dibiakkan, bila diinokulasikan (disuntikkan)

kepada hewan percobaan, akan menimbulkan gejala penyakit yang sama

seperti pada (a).

(d) Bahwa biakan jasad yang sudah diinokulasikan, dapat diisolasi/dipisahkan

kembali serta kalau kemudian dibiakkan akan mempunyai bentuk yang sama

seperti asal/seperti (a).

(3) Periode modern : 1910 sampai sekarang

Periode ini ditandai dengan dipergunakannya metode dan peralatan yang

mutakhir, di bidang mikrobiologi seperti misalnya elektron-mikroskop,

khromatografi-gas dan sebagainya. Sehingga masalah-masalah pelik yang

sebelumnya belum terungkap, misalnya masalah antibiotika, vaksin, serum, virus,

dan sebagainya, dapat diketahui.

Virus misalnya, sudah sejak Pasteur dan Koch melakukan penelitian,

masalahnya sudah ada dan berusaha untuk diketahui. Tetapi baru ketika hasil

penelitian Iwanowski sarjana-mikroba Rusia di umumkan (1892), penyebab

penyakit aneh pada daun tembakau (yang dikenal dengan nama TMV/tobacco

mosaic virus) dan sebagainya lebih dikenal. Diketahui nama-nama ahli seperti

Buist (1887), Negri (1903), Ricketts (1906), Woodruff dan Goodpasture (1930),

Stanley (1937) dan sebagainya, banyak berkecimpung di dalam penelitian virus.

Periode modern ditandai pula dengan diraihnya beberapa hadiah Nobel

oleh para ahli mikrobiologi yang bergerak dalam bidang pengobatan dan

kedokteran, seperti oleh Domagk (1939) untuk penemuan obat-obat sulfa sebagai

obat ampuh untuk infeksi bakteri, oleh Flemming, Florey dan Chain (1945) untuk

penemuan antibiotika : penisilin, oleh Waksman (1952) untuk penemuan

antibiotika : streptomisin, oleh Stanley (1946) Beadle (1954) untuk penemuan

virus poliomyelitis sehingga pembuatan vaksin polio memungkinkan untuk

dilakukan.