DAFTAR PUSTAKA

1. Alamsyah, N.A., 2005, Minyak Kelapa Murni Harapan Kita Semua, Badan Penelitian & Pengembangan Pertanian Bogor.

2. Setiaji, B. & Prayugo, S., 2006, Membuat VCO Berkualitas Tinggi, Penebar Swadaya, Depok.

1-79. 3. Yasya, W, 2007, Pembuatan Minyak Kelapa Murni Secara Enzimatis Menggunakan Ekstrak

Nanas, Skripsi, Institut Teknologi Bandung. 4. Lowry, O. H., Rosebrough, N.J., Farr, A.L. & Randall, R. J., 1951, Protein Measurement With

The Folin Phenol Reagent, Journal of Biological Chemistry, 265-274 5. Fujiwara, N and A. Masui., 1993, Purification and Properties of The Highly Thermostable

Alkaline Protease from an Alkaliphilic and Thermophilic Bacillus Sp., Journal of Biotechnology, 30, 245-256.

6. Gani, Z., et al, 2005, Bebas Segala Penyakit dengan VCO, Puspa Swara, Jakarta , 9-12. 7. Padaga, M., 2008, Virgin Coconut Oil (VCO) Manfaat DitinjauDari Aspek Kesehatan, Koran

PDHI, Edisi 7, 1-2. 8. Balasubramanian, K., 1976, Polysaccharides of The Kernel of Maturing and Maturated

Coconuts, Journal Food Sci., 41, 1370-1373. 9. Ohta, Y., dan Tano-Debrah, 1997, Aqueous Extraction of Coconut Oil by an Enzyme-Assisted

Process, Journal Science Food Agriculture., 74, 497-502. 10. Mulyoto, 2005, Tanaman Obat Indonesia, Iptek, Iptek BPPT Jakarta, http://www.iptec.net.id. 11. Wales, J., & Sanger, L., 2001, Nanas, Dari Wikipedia Indonesia, ensiklopedia bebas berbahasa

Indonesia, http://id.wikipedia.org/wiki/nanas. 12. Schoick, D.V., 1998, How To Grow A Pineapple Top Indoors,

http://www.rickswoodskopcalations.com/pineapple.html. 13. Winarno, F.G., 1992, Kimia Pangan dan Gizi, Gramedia Pustaka Utama, Jakarta, 88-90. 14. Fife, B., Coconut Oil Miracle, Annisa Rahmalia (Penterjemah), 2005, Bhuana Ilmu Populer,

Jakarta, 21-151. 15. Poedjiadi, Anna., 1994, Dasar – Dasar Biokimia, UI Press, Jakarta, 140-147. 16. Lehninger, Albert.L., 1997, Dasar-dasar Biokimia, Vol 1, Erlangga Jakarta, 247-258.

82

17. Volker, E. J, 1993, An Attack on the AIDS Virus : Inhibition of the HIV-1 Protease, Journal Chemical Education, 70 (1), 3-8.

18. Vestling, M. M, Insulin : HPLC Mapping of Protease Digestion Products, Journal Chemical

Education, 68 (11), 958-960. 19. Abdulrahman, M. & Mostafa, 2004, Production and Some Properties of Protease Produced by

Bacillus Licheniformis Isolated from Tihamet Aseer Saudi Arabia, Pakistan Journal of Biological Sciencist 7 (9), 1631-1635.

20. Anwar, A. & Saleemuddin, M., 1998, Alkaline Proteases : Areview, Bioresource Technology

64, 175-181.. 21. Widowati, S., N. Azizah, E.I. Riyanti, L. Sukarno, P. Raharto dan H. Herawati, 2000, Bioproses

Enzimatis dalam Reduksi Asam Pitat dan Inaktivasi Lipase untuk perbaikan mutu bekatul, Laporan Hasil Penelitian Balitbio Bogor

22. Setyahadi, Siswa., 1999, Dari Limbah Keluarlah Enzim, Puslitbang Teknologi Bioindustri

BPPT. 23. Kim, S.M., 2002 Purification and characteristics of bacillus subtilis JM-3 salt and acid tolerant

protease derived from anshovy sauce, Annual Meeting and Food Expo-Anaheim, California, Abstract.

24. Manachini, P.L., M.G. Fortina and Parini, 1988, Thermostable Alkaline Protease produced by

Bacillus thermoruber-a new species of Bacillus, Applied Microbiology and Biotechnology, 28, 409-413.

25. Zvidzai, C.J and R. Zvauya, 2001, Purification of a Protease from an alkalophilic Bacilus

Subtilis CHI isolated from a Zimbabwean Hot Spring, Journal of Food Biochemistry, 25(1),1-14.

26. Kubo, N., K. Murayama, K. Seto and T. Imanaka, 1988, Highly Thermostable Neutral Protease

From Bacillus stearothermophilus, Jurnal of Fermentation Technology, 66, 13-17. 27. Zamost, B.L., Q.I. Brantley, D.D. Elin and C.M. Beck, 1990, Production and Caracterization of

a thermostable protease produced by an asporogenous of Bacillus stearothermophilus, Journal of Industrial Microbiology, 5, 303-312.

28. Scopes, R.K., 1982, Protein Purification-Principles and Practise, Springer-Verlag, New York. 29. Maurer, H. R., 2001, Bromelain : Biochemistry, Pharmacology and medical use, Cell. Mol.

Life. Sci 58, 1234-1245.

83

84

Lampiran 1

RANDEMEN VCO

Randemen VCO = Volume minyak yang dihasilkan x 100 % Volume krim yang digunakan

Akar Kering

Percobaan 1 : Gelas 1 = 20/150 x 100 % = 13,33 %

Gelas 2 = 25/150 x 100 % = 25 %

Gelas 3 = 30/150 x 100 % = 20 %

Percobaan 2 : Gelas 1 = 10/100 x 100 % = 10 %

Gelas 2 = 15/100 x 100 % = 15 %

Gelas 3 = 7/100 x 100 % = 7 %

Percobaan 3 : Gelas 1 = 7/300 x 100 % = 2,33 %

Gelas 2 = 25/300 x 100 % = 8,33 %

Gelas 3 = 25/300 x 100 % = 8,33 %

Gelas 4 = 10/300 x 100 % = 3,33 %

Gelas 5 = 10/300 x 100 % = 3,33 %

Percobaan 4 : Tidak terbentuk

Akar Hidroponik

Percobaan 5 tidak dapat diukur

Percobaan 6 tidak dapat diukur

85

Lampiran 2

PENENTUAN KADAR AIR

Kadar air = kehilangan bobot x 100 % g contoh

Kadar air 1 = (11,5807 – 11,5723) x 100 % = 0,3994 % (11,5807 – 9,4773)

Kadar air 2 = (11,3134 – 11,3044) x 100 % = 0,4883 % (11,3134 – 9,4701)

Kadar air rata-rata = 0,3994 % + 0,4883 % = 0,4439 % 2

86

Lampiran 3

PENENTUAN BILANGAN ASAM

Standarisasi

Standar baku primer

Asam oksalat ( C2H2O42H2O ) , Mr = 126,07 g / mol.

Membuat asam oksalat 0,5 .

Perhitungan :

M = mol / liter

0,5 M = mol/ 0,250 L mol = 0,125

Massa asam oksalat = mol x Mr

= 0,125 mol x 126,07 g / mol = 15,75875 g = 15,76 g

Pengenceran asam oksalat 0,5 M menjadi asam oksalat 0,05 M.

V1M1 = V2M2

10 ml . 0,5 M = V2 . 0,05 M

5 = V2 . 0,05 M

V2 = 100 ml

Standar baku sekunder

KOH 0,05 M ( tidak stabil ) sehingga distandarisasi dulu oleh asam oksalat 0,05 M.

Titrasi asam oksalat 0,05 M oleh KOH 0,05 M, asam oksalat yang dipakai sebanyak

10 ml dan titrasi dilakukan triplo.

Titrasi ke Volume KOH ( ml )

1. 23,20

2. 23,00

3. 23,90

Volume KOH rata - rata 23,03

87

Persaman reaksi :

H2C2O4 2H+ + C2O4 2-

0,05 M 0,1 M

Sehingga [KOH] yang sesungguhnya adalah :

mol Asam oksalat = mol KOH

V1M1 = V2M2

10 ml . 0,1 M = 23,03 ml . M2

M2 = 1 / 23,03 = 0,0434 M

Titrasi untuk penentuan Bilangan Asam :

Volume KOH 0,0434 M ( ml ) Titrasi ke

SAMPEL BLANKO

1. 0,30 0,1

2. 0,25 0,1

3. 0,25 0,1

Volume KOH rata - rata 0,27 0,1

Bilangan asam = A x N X 56,1 G

A = Volume KOH untuk titrasi ( Blanko – sampel )

N = N KOH

G = Sampel (gram )

56,1 = Mr KOH

Catatan : M KOH = N KOH

Bilangan Asam = ( 0,27 ml – 0,1 ml) x 0,0434 x 56,1 1 = 0,4139 = 0,41

88

Lampiran 4

PENENTUAN BILANGAN IODIUM

Standarisasi

Larutan standar baku primer

Mol K2Cr2O7 = gram / Mr = 0,123 g / 294,184 g / mol = 4,18 . 10 -4 mol.

[ K2Cr2O7 ] = 4,18 . 10 -4 mol / 0,025 l = 0,0167 M.

Larutan standar baku sekunder

Mol Na2S2O3 = 24,82 g / 158 g / mol = 0,157 mol.

[Na2S2O3 } = 0,157 g / mol / 1 L = 0,157 M.

Titrasi K2Cr2O7 0,0167 M oleh Na2S2O3 0,157 M, volume K2Cr2O7 yang dipakai sebanyak 20

ml dan titrasi dilakukan triplo.

Titrasi ke Volume Na2S2O3 ( ml )

1. 5,50

2. 5,20

3. 6,00

Volume Na2S2O3 rata - rata 5,56

Persamaan reaksi :

Cr2O72- (aq) + 14 H+ (aq) + 6 S2O3

2- (aq) 2Cr+3 (aq) + 3 S4O62- + 7 H2O

Sehingga [Na2S2O3] yang sesungguhnya adalah :

Mol Cr2O7 2- ≈ mol S2O3

2- = 1 : 6

Mol S2O3 2- = 6 mol Cr2O7

2-

[S2O3

2- ] = 6 .[Cr2O7 2-] . V Cr2O7

2-

V S2O3 2-

= 6. 0,0167 M . 20 ml

5,56

= 0,3604 M = 2 x 0,3604 M = 0,7209 N

89

Titrasi untuk penentuan Bilangan Iodium :

Volume Na2S2O3 M ( ml ) Titrasi ke

SAMPEL BLANKO

1. 16,00 18,10

2. 17,60 18,15

3. 17,60 18,10

Volume Na2S2O3 rata - rata 17,07 18,12

Bilangan Iodium = ( B – S ) x N x 12,69 G

N = Normalitas Na2S2O3

G = Berat sampel (gram )

B = Volume Na2S2O3 untuk titrasi blanko

S = Volume Na2S2O3 untuk titrasi sampel

12,69 = 1 / 10 . Mr I

Bilangan iodium = ( 18,12 ml – 17,07 ) x 0,7209 x 12,69 0,1 = 1,05 x 0,7209 x 12,69 0,1 = 96,0563 x 1/10 = 9,6056 = 9,6

90

Lampiran 5

Kromatogram Hasil GCMS

Spesifikasi alat :

Kondisi alat GCMS QP 5000

Kolom DB-17 p = 30 m, Ø = 0,25 mm

Injektor : 300 0C

Detektor : 300 0C

Suhu program 80 0C / 3' / 10 0C per menit / 260 0C / 12'

Split ratio 1 : , Pressure : 68 Kpa

Linear velocity= , Flow : ml/min

Injeksi : 1 μl

Preparasi

Sebanyak 0,6018 g sampel melalui proses metilasi lalu dilarutkan dalam 25 ml isooktan.

Larutan standar

Peak Report PKNO R.Time l.Time-F.Time Area Height A/H(sec) MK % Total Name

1 13.507 13.458-13.575 11333501 6034650 1.878 12.84

2 15.946 15.883-16.050 30400879 15831341 1.920 34.43

3 18.148 18.092-18.233 46557504 22992542 2.025 52.73

Total 88291884 100.00

Methyl laurat

Methyl myristat

Methyl Palmitat

91

Larutan sampel

Peak Report PKNO R.Time l.Time-F.Time Area Height A/H(sec) MK % Total Name

1 13.128 13.075-13.217 11004133 6027495 1.826 34.13

2 14.069 13.975-14.233 12429106 3515229 3.536 38.55

3 15.437 15.392-15.517 3732259 2121405 1.759 11.58

4 16.243 16.192-16.342 2517222 841585 2.991 7.81

5 16.466 16.342-16.533 838366 205674 4.076 2.60

6 17.526 17.483-17.575 1315394 717641 1.833 4.08

7 18.256 18.217-18.308 401889 176091 2.282 1.25

Total 32238369 100.00

Perhitungan kadar (%)

methyl laurat = 11004133 x 100 % = 34,13 % 32238369 asam laurat = 12429106 x 100 % = 38,55 % 32238369 methyl myristat = 3732259 x 100 % = 11,58 % 32238369 asam myristat = 2517222 x 100 % = 7,81 % 32238369

Methyl laurat

Asam Laurat

Methyl Myristat

Asam Myristat

92

Lampiran 6

KURVA KALIBRASI LARUTAN BSA

UNTUK PENENTUAN KONSENTRASI PROTEIN

DENGAN METODE LOWRY

No. [BSA]

μg / ml Absorbans 1 Absorbans 2 Absorbans rata - rata

1. 0 0 0 0

2. 20 0,042 0,041 0,042

3. 40 0,091 0,091 0,091

4. 80 0,149 0,149 0,149

5. 120 0,213 0,212 0,213

6. 160 0,282 0,281 0,282

7. 180 0,295 0,291 0,293

Sementara itu pengukuran absorbansi terhadap crude dan kelima fraksi yaitu

fraksi 1 ,2 ,3 , 4 dan 5 menghasilkan data sebagai berikut : No. Sampel A 1 A 2 A rata - rata

1 . Crude 0,385 0,384 0,385

2 . F 1 0,526 0,527 0,527

3 . F 2 0,306 0,307 0,307

4 . F 3 0,363 0,364 0,364

5 . F 4 0,386 0,387 0,387

6 . F 5 0,139 0,140 0,140

y = 0.0016x + 0.0205R2 = 0.9926

0 0.05

0.1 0.15

0.2 0.25

0.3 0.35

0 50 100 150 200

[ BSA ]

A B S OR B A N

93

Lampiran 7

PERHITUNGAN KONSENTRASI PROTEIN

Berdasarkan persamaan regresi y = 0,0016 x + 0,0205 maka dapat dihitung

konsentrasi protein ( protease ) dalam setiap sampel :

Crude 0,385 = 0,0016 x + 0,0205

0,385- 0,0205 = 0,0016 x

x = 227,8125 μg / ml F 1 0,527 = 0,0016 x + 0,0205

0,527 - 0,0205 = 0,0016 x

x = 316,5625 μg / ml F 2 0,307 = 0,0016 x + 0,0205

0,307 - 0,0205 = 0,0016 x

x = 179,0625 μg / ml F 3 0,364 = 0,0016 x + 0,0205

0,364 - 0,0205 = 0,0016 x

x = 214,6875 μg / ml F 4 0,387 = 0,0016 x + 0,0205

0,387 - 0,0205 = 0,0016 x

x = 229,0625 μg / ml F 5 0,140 = 0,0016 x + 0,0205

0,140 - 0,0205 = 0,0016 x

x = 74,6875 μg / ml

94

Lampiran 8

KURVA KALIBRASI LARUTAN TIROSIN

UNTUK PENENTUAN AKTIVITAS PROTEASE

DENGAN METODA HORIKOSHI

No. [ Tyrosin ] mg / ml Absorbans 1 Absorbans 2 Absorbans rata - rata

1. 0 0 0 0

2. 0,05 0,120 0,120 0,120

3. 0,10 0,290 0,290 0,290

4. 0,15 0,666 0,665 0,666

5. 0,20 0,903 0,895 0,899

6. 0,25 0,948 0,948 0,948

7. 0,30 1,111 1,110 1,111

Sedangkan data – data absorbans untuk setiap sampel pada uji aktifitas adalah :

No . Kontrol Sampel Absorbans Sampel Absorbans Δ Absorbans

1 . Crude 0,674 Crude 0,791 0,117 2 . F 1 0,177 F 1 0,181 0,004 3 . F 2 0,120 F 2 0,145 0,025 4 . F 3 0,168 F 3 0,323 0,155 5 . F 4 0,284 F 4 0,331 0,047 6 . F 5 0,198 F 5 0,185 0,013

0,155 = Aktivitas tertinggi

y = 4.0926x - 0.0439R2 = 0.9503

0 0.30.60.91.21.5

0 0.1 0.2 0.3 0.4

[ TIROSIN ]

A B S O R B A N

95

Δ A Crude = 0,674 – 0,791 = 0,117

Δ A F 1 = 0,181 – 0,177 = 0,004

Δ A F 2 = 0,145 – 0,120 = 0,025

Δ A F 3 = 0,323 – 0,168 = 0,155 AKTIVITAS TERTINGGI

Δ A F 4 = 0,331 – 0,284 = 0,047

Δ A F 5 = 0,185 – 0,198 = 0,013

Berdasarkan persamaan regresi y = 4,0926 x – 0,0439 , maka konsentrasi Tirosin

yang dihasilkan dari reaksi antara substrat kasein dengan protease untuk setiap sampel

adalah :

Crude

0,117 = 4,0926 x – 0,0439

0,117 + 0,0439 = 4,0926 x

x = 0,0393 F 1 0,004 = 4,0926 x – 0,0439

0,004 + 0,0439 = 4,0926 x

x = 0,0117 F 2 0,025 = 4,0926 x – 0,0439

0,025 + 0,0439 = 4,0926 x

x = 0,0168 F 3 0,155 = 4,0926 x – 0,0439

0,155 + 0,0439 = 4,0926 x

x = 0,0486 F 4 0,047 = 4,0926 x – 0,0439

0,047 + 0,0439 = 4,0926 x

x = 0,0222 F 5 0,013 = 4,0926 x – 0,0439

0,013 + 0,0439 = 4,0926 x

x = 0,0139

96

Lampiran 9

AKTIVITAS TOTAL

Aktivitas Total = 1 unit = 1 mg Tyrosin yang dihasilkan oleh 0,1 ml larutan

enzim setiap detik.

Aktivitas Total = d [ Tirosin ] Detik . ml enzim Crude = 0,0393 mg / ml = 3,2750 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 3,2750 . 10 -4 unit 1200 detik . 0,1 ml

F 1 = 0,0117 mg / ml = 0,9750 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 0,9750 . 10 -4 unit 1200 detik . 0,1 ml

F 2 = 0,0168 mg / ml = 1,4000 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 1,4000 . 10 -4 unit 1200 detik . 0,1 ml

F 3 = 0,0486 mg / ml = 4,0500 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 4,0500 . 10 -4 unit 1200 detik . 0,1 ml

F 4 = 0,0222 mg / ml = 1,8500 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 1,8500 . 10 -4 unit 1200 detik . 0,1 ml

F 5 = 0,0139 mg / ml = 1,1583 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 1,1583 . 10 -4 unit 1200 detik . 0,1 ml

97

Lampiran 10

AKTIVITAS SPESIFIK

Aktifitas Spesifik = Aktivitas Total [ protein ] Crude = 3,2750 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 1,4376 . -4 unit / mg 2,2781 mg / ml F 1 = 0,9750 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 0,3079 . -4 unit / mg 3,1656 mg / ml F 2 = 1,4000 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 0,7819 . -4 unit / mg 1,7906 mg / ml F 3 = 4,0500 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 1,8864 . -4 unit / mg 2,1469 mg / ml F 4 = 1,8500 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 0,8076 . -4 unit / mg 2,2906 mg / ml F 5 = 1,1583 . 10 -4 mg / ml 2 . det = 1,5508 . -4 unit / mg 0,7469 mg / ml

98

Lampiran 11

DATA ABSORBANS UNTUK KURVA OPTIMASI

OPTIMASI pH

Absorbans pH Blanko Kontrol Enzim Enzim Δ A Rata–rata ΔA

0 0,627 0,693 0,066 4

0 0,630 0,692 0,062 0,064

0 0,186 0,262 0,076

0 0,090 0.161 0,071 5

0 0,087 0,163 0,076

0,074

0 0,096 0,118 0,022 6

0 0,096 0,114 0,018 0,020

0 0,169 0,199 0,030 7

0 0,242 0,262 0,020 0,025

0 0.171 0,298 0,127 8

0 0,026 0,192 0,166 0,147

0 0,667 0,803 0,126 9

0 0,665 0,803 0,138 0,132

99

Lampiran 12

OPTIMASI SUHU

Absorbans Suhu ( 0 C )

Blanko Kontrol enzim Enzim Δ A rata - rata

25 0

0,054

0,054

0,054

0.056

0,057

0,063

0,063

0,062

0,064

0,060

0,009

37 0

0,158

0,158

0,154

0,155

0,153

0,298

0,298

0,295

0,296

0,290

0,140

49 0

0,155

0,154

0,155

0,153

0,152

0,258

0,258

0,259

0,256

0,258

0,103

61 0

0,189

0,188

0,189

0,190

0,187

0,131

0,131

0,133

0,130

0,131

0,057

100

Lampiran 13

OPTIMASI KONSENTRASI SUBSTRAT

Konsentrasi

kasein ( % ) Blanko Kontrol Enzim

Enzim

Δ A rata rata

0,1 0

1,078

1,078

1,078

1,071

1,071

1,592

1,592

1,592

1,592

1,592

0,514

0,25 0

0,018

0,016

0,015

0,018

0,020

0,188

0,186

0,183

0,188

0,188

0,170

0,5 0

0,052

0,052

0,049

0,051

0,050

0,057

0,057

0,056

0,055

0,057

0,005

1 0

0,131

0,132

0,133

0,131

0,131

0,261

0,247

0,261

0,259

0,254

0,130

1,5 0

0,096

0,096

0,103

0,106

0,111

0,119

0,117

0,118

0,119

0,120

0,023

2 0

0,127

0,127

0,129

0,139

0,130

0,137

0,137

0,134

0,133

0,129

0.010

101

Lampiran 14

KURVA STANDAR PROTEIN MARKER DALAM PENENTUAN BERAT MOLEKUL

Marker Protein Rekombinan Sampel Berat Molekul (kDa) Log BM Jarak Migrasi Pita (cm) Jarak Migrasi Pita (cm)

150 2,1761 0,8/5,3 = 0,1509 - 100 2 1,0/5,3 = 0,1887 - 75 1,8751 1,3/5,3 = 0,2453 - 50 1,6989 1,7/5,3 = 0,3208 1,8/5,3 = 0,3396 25 1,3979 2,6/5,3 = 0,4906 2,5/5,3 = 0,4717 15 1,1761 3,6/5,3 = 0,6792 - 10 1 4,1/5,3 = 0,7736 4,1/5,3 = 0,7736

Dari persamaan regresi y = - 0,3334x + 2,3368, maka dapat dihitung berat molekul dari sampel berdasarkan pita – pita yang nampak dalam sampel : PITA 1

y = - 0,3334x + 2,3368 y = - 0,3334 (0,3396) + 2,3368 y = 2,2236 anti log 2,2236 = 167,3401 Jadi BM = 167,3401 kDa = 167.340 Da

y = -0.3334x + 2.3368R2 = 0.9786

0

0.5

1

1.5

2

2.5

0 1 2 3 4 5

JARAK MIGRASI (cm)

L O G BM

102

PITA 2 y = - 0,3334 (0,4717) + 2,3368

y = 2,1795 anti log 2,1795 = 151,1819 Jadi BM = 151,1819 kDa = 151.182 Da PITA 3 y = -0,3334 (0,7736) + 2,3368 y = 2,0789 anti log 2,0789 = 119,9223 Jadi BM = 119,9223 kDa = 119.922 Da

103

Lampiran 15

Fraksinasi amonium sulfat

Konsentrasi akhir amonium sulfat (% jenuh) pada 0°C

20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100

Konsentrasi awal amonium sulfat (% jenuh) pada

0°C Berat amonium sulfat yang ditambahkan (gram) dalam 1 liter larutan

0 106 134 164 194 206 258 291 326 361 398 436 476 516 559 603 650 697 5 79 108 137 166 197 229 262 296 331 368 405 444 484 526 570 615 662

10 53 81 109 139 169 200 233 266 301 337 374 412 452 493 536 581 627 15 26 54 82 111 141 172 204 237 271 306 343 381 420 460 503 547 592 20 0 27 55 83 113 143 175 207 241 276 312 349 387 427 469 512 557 25 0 27 56 84 115 146 179 211 245 280 317 355 395 436 478 522 30 0 28 56 86 117 148 181 214 249 285 323 362 402 445 488 35 0 28 57 87 118 151 184 218 254 291 329 369 410 453 40 0 29 58 89 120 153 187 222 258 296 335 376 418 45 0 29 59 90 123 156 190 226 263 302 342 383 50 0 30 60 92 125 159 194 230 268 308 348 55 0 30 61 93 127 161 197 235 273 313 60 0 31 62 95 129 164 201 239 279 65 0 31 63 97 132 168 205 244 70 0 32 62 99 134 171 209 75 0 32 66 101 137 174 80 0 33 67 103 139 85 0 34 68 105 90 0 34 70 95 0 35

100 0