80

LAMPIRAN

Lampiran 1 Skema Penelitian

Persiapan alat dan bahan

Sterilisasi alat

Pembuatan media

Inisiasi kalus

Pengamatan

Penimbangan dan subkultur

Hasil

81

Lampiran 2 Skema Kerja Sterilisasi Alat

Direndam alat (botol kultur,

glassware, alat diseksi)

dengan teepol selam 24 jam

Dicuci dengan menggunakan

deterjen, dibilas dengan air

mengalir dan aquades steril

dan dikeringkan di dalam

oven

Ditutup botol dengan plastik

dan dibungkus cawan petri

dengan kertas kemudian

dimasukkan ke dalam

autoklaf dan disterilisasi

selama 60 menit dengan suhu

1210C

Dibungkus alat-alat diseksi

dengan alumunium foil dan

disterilisasi dalam oven

selama 3 jam pada suhu

1250C

Disimpan dalam ruang steril

82

Lampiran 3 Perhitungan Pembuatan Media

1. Media MS

a. Media MS untuk 1 L dari Universitas Muhammadiyah Malang

diencerkan sampai 600 mL.

b. Media MS 600 mL dibagi untuk media, masing-masing 150 mL.

c. Selanjutnya media MS 150 mL ditambahkan ZPT 2,4-D dan air kelapa

sampai 250 mL.

d. Pembagian media ini untuk pembuatan 4 macam media.

2. ZPT 2,4-D

a. Larutan stok 2,4-D

100 ppm 2,4-D = 10 mg 2,4-D + 100 mL aquades

b. Pengambilan larutan stok 2,4-D

1) 1 mg/L

V1M1 = V2M2

V1(100) = (250)(1)

V1 = 2,5 mL

2) 2 mg/L

V1M1 = V2M2

V1(100) = (250)(2)

V1 = 5 mL

3) 3 mg/L

V1M1 = V2M2

V1(100) = (250)(3)

V1 = 7,5 mL

3. Air kelapa (AK)

a. 10%

10% x 250 mL = 25 mL

b. 15%

15% x 250 mL = 37 mL

c. 20%

20% x 250 mL = 50 mL

4. Media

a. Media 1

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 0 + 25 + 75 = 250 mL

b. Media 2

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 0 + 37 + 63 = 250 mL

c. Media 3

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 0 + 50 + 50 = 250 mL

83

d. Media 4

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 2,5 + 25 + 72,5 = 250 mL

e. Media 5

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 2,5 + 37 + 60,5 = 250 mL

f. Media 6

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 2,5 + 25 + 47,5 = 250 mL

g. Media 7

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 5 + 25 + 70 = 250 mL

h. Media 8

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 5 + 37 + 58 = 250 mL

i. Media 9

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 5 + 50 + 45 = 250 mL

j. Media 10

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 7,5 + 25 + 67,5 = 250 mL

k. Media 11

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 7,5 + 37 + 55,5 = 250 mL

l. Media 12

MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 7,5 + 50 + 42,5 = 250 mL

84

Lampiran 4 Hasil Penelitian

1. Munculnya eksplan berkalus

Media 2,4-D (mg/L)

+ Air Kelapa (%)

Ulangan (Hari) Total Rata-Rata Keterangan

I II III

0 + 10 13 0 0 13 4,33 Hidup

0 + 15 13 18 0 31 10,33 Hidup

0 + 20 11 11 0 22 7,33 Hidup

1 + 10 9 9 9 27 9,00 Hidup

1 + 15 11 13 14 38 12,67 Hidup

1 + 20 11 17 0 28 9,33 Hidup

2 + 10 0 0 0 0 0,00 Tidak tumbuh kalus

2 + 15 0 0 0 0 0,00 Tidak tumbuh kalus

2 + 20 9 10 0 19 6,33 Hidup

3 + 10 8 8 8 24 8,00 Hidup

3 + 15 9 10 9 28 9,33 Hidup

3 + 20 7 8 7 22 7,33 Hidup

Total 101 104 47 252

2. Persentase kalus

Media 2,4-D (mg/L)

+ Air Kelapa (%)

Ulangan (%) Total Rata-Rata

I II III

0 + 10 33,33 0,00 0,00 33,33 11,11

0 + 15 100,00 66,67 0,00 166,67 55,56

0 + 20 33,33 66,67 0,00 100,00 33,33

1 + 10 66,67 100,00 100,00 266,67 88,89

1 + 15 66,67 100,00 100,00 266,67 88,89

1 + 20 33,33 33,33 0,00 66,67 22,22

2 + 10 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

2 + 15 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

2 + 20 66,67 100,00 0,00 166,67 55,56

3 + 10 100,00 100,00 100,00 300,00 100,00

3 + 15 33,33 33,33 33,33 100,00 33,33

3 + 20 33,33 66,67 66,67 166,67 55,56

Total 566,67 666,67 400,00 1633,33

85

3. Berat basah kalus

Media 2,4-D (mg/L)

+ Air Kelapa (%)

Ulangan (gr) Total Rata-Rata

I II III

0 + 10 0,0234 0,0000 0,0000 0,0234 0,0078

0 + 15 0,0373 0,0077 0,0000 0,0450 0,0150

0 + 20 0,0347 0,0255 0,0000 0,0602 0,0201

1 + 10 0,1198 0,1707 0,1733 0,4638 0,1546

1 + 15 0,0158 0,0131 0,0103 0,0392 0,0131

1 + 20 0,0172 0,0209 0,0000 0,0381 0,0127

2 + 10 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000

2 + 15 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000

2 + 20 0,0235 0,0149 0,0000 0,0384 0,0128

3 + 10 0,0606 0,0725 0,0526 0,1857 0,0619

3 + 15 0,032 0,0068 0,008 0,0468 0,0156

3 + 20 0,0510 0,0326 0,0562 0,1398 0,0466

Total 0,4151 0,3646 0,3005 1,0802

4. Gambar morfologi kalus

Media 2,4-D (mg/L)

+ Air Kelapa (%)

Ulangan Keterangan

I II III

0 + 10

Hijau

kecokelatan,

kompak

0 + 15

Putih

kekuningan,

kompak

0 + 20

Hijau

kecokelatan,

kompak

86

1 + 10

Kekuningan,

kompak

1 + 15

Putih

kehijauan,

kompak

1 + 20

Kuning

kehijauan,

kompak

2 + 10

Tidak

tumbuh

kalus

2 + 15

Tidak

tumbuh

kalus

2 + 20

Putih

kekuningan,

kompak

3 + 10

Putih

kekuningan,

intermediet

87

3 + 15

Hijau

kecokelatan,

kompak

3 + 20

Putih

kekuningan,

remah

88

Lampiran 5 ANAVA

1. Munculnya eksplan berkalus

89

2. Persentase kalus

90

3. Berat basah kalus

91

92

93

Lampiran 6 Komposisi Media MS 1000 mL

Garam Mineral Kebutuhan Stok Yang Diambil

Makro

KNO3 1900 19000 mg/100 mL 10 mL

MgSO4 . 7H2O 370 3700 mg/100 mL 10 mL

CaCl2 . 2H2O 440 4400 mg/100 mL 10 mL

KH2PO4 170 1700 mg/100 mL 10 mL

NH4NO3 1650 16500 mg/100 mL 10 mL

Mikro

FeSO4 . 7H2O 27,8 2780 mg/100 mL 1 mL

Na2EDTA 37,3 3730 mg/100 mL 1 mL

ZnSO4 . 7H2O 8,6 860 mg/100 mL 1 mL

H3BO3 6,2 62 mg/50 mL 5 mL

Kl 0,83 83 mg/50 mL 0,5 mL

Na2MoO4 . 2H2O 0,25 25 mg/50 mL 0,5 mL

CoCl2 . 6H2O 0,025 25 mg/100 mL 0,1 mL

CuSO4 . 5H2O 0,025 25 mg/100 mL 0,1 mL

MnSO4 . 4H2O 22,3 2230 mg/100 mL 1 mL

Vitamin

Myo-inositol 100 2500 mg/50 mL 2 mL

Niasin 0,5 50 mg/50 mL 0,5 mL

Piridoksin-HCl 0,5 50 mg/50 mL 0,5 mL

Tiamin 0,1 50 mg/100 mL 0,2 mL

94

Lampiran 7 Alat, Bahan dan Kegiatan Penelitian

1. Alat

Alat-Alat Gelas Hot Plate Autoklaf

Oven LAF Timbangan Analitik

Cawan Petri Dan Alat

Diseksi Steril Ruang Inkubator Freezer

Timbangan Analitik ph Meter

2. Bahan

Media Karet, Plastik dan Label Bahan-Bahan Sterilisasi

Eksplan

95

Media Sterilisasi Ruang dan

Alat-Alat Bahan Untuk Inisiasi

Spiritus dan Formalin Pegagan

3. Kegiatan penelitian

Sterilisasi Kering Alat Pembuatan Media Inisiasi

Sterilisasi Eksplan Penimbangan Bahan Pencucian Alat-Alat

Perendaman Alat dengan

Tipol Sterilisasi Media Mengukur pH

Pengamatan

96

97

98

Lampiran 10 Daftar Riwayat Hidup

DAFTAR RIWAYAT HIDUP

Nama Yusria Nazza

Tempat, Tanggal

Lahir Malang, 15 Juni 1991

Jenis Kelamin Perempuan

Kewarganegaraan Indonesia

Agama / Status Islam / Belum Menikah

No. Identitas SIM 910615260767

Alamat

Jalan Tirto RT. 04 RW. 05 Desa

Pagedangan Kecamatan Turen

Kabupaten Malang

No. HP +6285851217887

RIWAYAT PENDIDIKAN

Tingkat Tahun Lembaga Lokasi Keterangan

Sekolah Dasar 1997-2003

MI.

Hidayatul

Falah

Jl. Suko 03

Pagedangan Turen Lulus

Sekolah

Mengah

Pertama

2003-2006 MTs.Negeri

Turen

Jl. Kenongosari

16 Turen Lulus

Sekolah

Menengah

Akhir

2006-2009 MAN

Malang I

Jl. Baiduri Bulan

40 Malang Lulus

Malang, 07 September 2013

Yusria Nazza