7/25/2019 Cara Menghitung Bakteri

1/4

Menentukan jumlah mikroorganisme (enumerasi)

b.1. Penghitungan jumlah bakteri hidup (tidak langsung)

b.1.1.PlateCount(hitungan cawan)Plate count / viable count didasarkan pada asumsi bahwa setiap sel mikroorganisme

hidup dalam suspensi akan tumbuh menjadi satu koloni setelah ditumbuhkan dalam media

pertumbuhan dan lingkungan yang sesuai. Setelah diinkubasi, jumlah koloni yang tumbuhdihitung dan merupakan perkiraan atau dugaan dari jumlah mikroorganisme dalam suspensi

tersebut.

Koloni yang tumbuh tidak selalu berasal dari satu sel mikroorganisme karena beberapamikroorganisme tertentu cenderung membentuk kelompok atau berantai. erdasarkan hal

tersebut digunakan istilah Coloni Forming Units(!"#$s) per ml. koloni yang tumbuh berasal

dari suspensi yang diperoleh menggunakan pengenceran bertingkat dari sebuah sampel yang

ingin diketahui jumlah bakterinya.Syarat koloni yang ditentukan untuk dihitung adalah sebagai berikut %

& Satu koloni dihitung 1 koloni.

& 'ua koloni yang bertumpuk dihitung 1 koloni.

& eberapa koloni yang berhubungan dihitung 1 koloni.& 'ua koloni yang berhimpitan dan masih dapat dibedakan dihitung

koloni.& Koloni yang terlalu besar (lebih besar dari setengah luas cawan) tidah

dihitung.

& Koloni yang besarnya kurang dari setengah luas cawan dihitung 1 koloni.

!ara menghitung sel relati / !"#$s per ml

!"#$s / ml * jumlah koloni + "aktor pengenceran

isal - penanaman dilakukan dari tabung pengenceran 1& dengan metodeSpread PlatedanPour Plate.

Spread plate- koloni * 0 * 0 1!"#$s / ,1 ml

"p * 1/1 & * 0 !"#$s / ,1 ml

SP * ,1 ml * 0 !"#$s / ml* 012 !"#$s / ml

Pour plate- koloni * 0 * 0 1!"#$s / 1 ml

"p * 1/1 & * 0 !"#$s / ,1 ml

SP * 1 ml * 013 !"#$s / ml

b.1.1.1. Prosedur perhitungan jumlah bakteri dengan metodePlate Count.

7/25/2019 Cara Menghitung Bakteri

2/4

4akukan preparasi suspensi kepada sampel terlebih dahulu (swab, maserasi dan

rinse) (jika perlu).

asukkan sampel ke tabung berisi 5 ml akuades untuk pengenceran pertama,

selanjutnya diencerkan sampai tingkat pengenceran (misalnya sampai 1&2) tertentu.

'ari 6 pengenceran terakhir diplating (ditanam) ke media 78 (Nutrien Agar) atau

P!8 (Plate Count Agar) sebanyak dua kali tiap pengenceran (duplo). Plating dapat

secara Spread Plate atau Pour Plate. 9ika secara Spread Plate, dapat digunakan

batang 4 atauglass beads.

:nkubasi pada suhu 6; ! selama 1& < jam.

Setelah tumbuh, koloni dihitung dengan persyaratan SP!

Penghitungan koloni pada cawan sebaiknya dibuat

transek atau dibagi&bagi jika koloni yang tumbuh terlalu

banyak. =ransek dibuat dengan spidol/marker di bagianbawah cawan petri. Pola transek dapat dibuat

ber>ariasi, tergantung kebutuhan. Penghitungan akan

lebih mudah bila memakai Coloni Counter.

b.1.1.. Standard Plate Count(SP!)

Koloni yang dipilih untuk dihitung menggunakan cara SP! memiliki syarat khusus

berdasarkan statistic untuk memperkecil kesalahan dalam perhitungan. Perhitungan mengacukepada standar atau peraturan yang telah ditentukan. Syarat&syaratnya sebagai berikut -

& ila diperoleh perhitungan ? 6 dari semua pengenceran, maka hanya daripengenceran tertinggi yang dilaporkan. isalnya dengan cara menghitung jumlahnya

pada @ bagian (transek) cawan kemudian hasilnya dikalikan empat. Aasilnya

dilaporkan sebagai lebih dari 6 dikalikan dengan besarnya aktor pengenceran, tetapijumlah sebenarnya harus dicantumkan dalam tanda kurung.

7/25/2019 Cara Menghitung Bakteri

3/4

1& 1&6 1&< SP! Keterangan

=7=! =7=! 3586,+1

(6,+1)Pngc.trtgg(1&

7/25/2019 Cara Menghitung Bakteri

4/4

agan alur persyaratan SP!