biosel ppt

7/18/2019 BIOSEL PPT

http://slidepdf.com/reader/full/biosel-ppt 1/16

RT - qPCR

Present By :

Dzikra Arwie P1505214011



Pendahuluan

Ply!erase Chain Rea"tin #PCR$

!eru%akan teknik %er&anyakan!lekul D'A den(an ukurantertentu se"ara enzi!atis!elalui !ekanis!e %eru&ahan

suhu



Prinsi% PCR

Denaturasi #%e!isahan unit (anda!en)adi unit tun((al$* suhu +4-+5dera)at C

Annealin( #%ene!%elan %ri!er$* suhu54 dera)at C

,tensin.,ln(atin( #%er%an)an(anuntaian %ri!er$* suhu /2 suhu /2dera)at C



Real-Ti!e PCR atau )u(a &iasa dise&ut q-PCR#quantitatie PCR$ !eru%akan se&uah !etde unuk!en(a!%likasi D'A

Real-Ti!e PCR adalah teknik yan( di(unakan untuk!en((andakan D'A tar(et dari suatu r(anis!eyan( dilakukan untuk tu)uan !en(etahui kuantitasD'A tar(et* !elihat kuantitasnya se"ara relati*eks%resi (en #kuantikasi !R'A$* deteksike&eradaan D'A tar(et* !enentukan )enis 3'P#3in(le 'u"letide Ply!r%his!$* !enentukankura T! #eltin( Cure$* dan !elakukan skrinin(i(h Reslutin eltin( #R$6



Real Ti!e 7 8uantitatie Ply!eraseChain Rea"tin #RT-qPCR$

RT-qPCR : etde analisa yan( dike!&an(kandari reaksi PCR6 Teknik ini di(unakan untuk!en(a!%likasi sekali(us kuantikasi )u!lahtar(et !lekul D'A hasil a!%likasi terse&ut

PCR knensinal : deteksi ke&erdaan D'Adilakukan %ada akhir reaksi sedan(kan Real Ti!e PCR !e!un(kinkan untuk dilakukan%en(a!atan %ada saat reaksi &erlan(sun(



9an)utan

Real Ti!ePCR

Tidak

!e!&utuhkantaha%elektrresis

sehin((a tidakdi&utuhkan (el

a(arsa

e&eradaan D'Ahasil a!%likasi

da%at dia!ati%ada (rak yan(!un"ul se&a(aihasil aku!ulasi;uresensi dari

%r&e



Prinsi%

Real Ti!e !en(ikuti %rinsi% u!u!reaksi PCR* uta!anya adalah D'Ayan( telah dia!%likasi dihitun(setelah diaku!ulasikan dala! reaksise"ara real ti!e sesudah setia% siklusa!%likasi selesai6



Prsedur ker)a

16 ,kstraksi R'A

3a!%el #islat$ dita!&ahkan enzi!

Reerse Transkri%si

!en(hasilkan ekstrak

D'A



9an)utan

26 Prses PCR

,kstrak R'A

Dita!&ahkan PCR !i #3B<R =reendan %ri!er

9alu hasilnya akan ter&a"a #dala!(rak$



enentukan )u!lah RT-qPCR

en((unakan

%ri!er>niersal

en((unakan %ri!er s%esik



RT-qPCR !enun)ukkan 100?

s%esisitas dan nilai %rediksi%sitinya !e!%unyai

sensitiitas setara den(anteknik kultur


http://slidepdf.com/reader/full/biosel-ppt 16/16Any 8uestin @

Teri!a

asih

biosel ppt

Documents