UJI KELARUTAN BATU GINJAL KALSIUM DENGAN AIR BUAH

JERUK PERAS (Citrus sinensis (L) Osbeck) SECARA IN VITRO

Artikel

Dyah Bita Wahyu Rini

1040812054

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI YAYASAN PHARMASI

SEMARANG

2012

1

UJI KELARUTAN BATU GINJAL KALSIUM DENGAN AIR BUAH

JERUK PERAS (Citrus sinensis (L) Osbeck) SECARA IN VITRO

THE SOLUBILITY TEST CALCIUM KIDNEY STONE WITH WATER

ORANGE FRUIT (CITRUS SINENSIS (L) Osbeck) BY IN VITRO

Dyah Bita Wahyu Rini1)

, Antonius Tri Widodo2)

, Sukirno3)

1,3)

Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Yayasan Pharmasi Semarang 2)

Universitas Negeri Semarang

ABSTRAK

Batu ginjal merupakan penumpukan garam mineral yang terjadi di

sepanjang saluran kemih. Penumpukan garam mineral ini dapat menyebabkan

sakit yang menjalar pada punggung bagian atas ke perut bagian bawah dan paha.

Buah jeruk adalah salah satu buah yang banyak dikenal oleh masyarakat. Rasa

asam pada jeruk disebabkan oleh kandungan asam sitrat. Di dalam urin asam sitrat

akan bereaksi dengan kalsium membentuk kalsium sitrat yang lebih mudah larut.

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kelarutan batu ginjal kalsium

dengan air buah jeruk peras, dan untuk mengetahui adanya perbedaan pengaruh

konsentrasi dalam air buah jeruk peras untuk melarutkan batu ginjal kalsium.

Teknik pengumpulan data dilakukan dengan metode eksperimen laboratorium,

dengan mengukur kadar asam sitrat dalam air buah jeruk peras menggunakan

HPLC, mengukur kadar kalsium batu ginjal yang terlarut dalam air buah jeruk

peras menggunakan SAA, dan identifikasi jenis batu ginjal yang digunakan

menggunakan spektrometer FTIR. Hasil penelitian menunjukkan bahwa air buah

jeruk peras dapat melarutkan batu ginjal kalsium pada konsentrasi 60%, 80%,

100% sebanyak 0,9244 mg, 2,0713 mg, 2,5651 mg. Kontrol positif menggunakan

asam sitrat pada konsentrasi 60%, 80%, 100% dapat melarutkan batu ginjal

kalsium sebanyak 1,3716 mg, 2,4991 mg, 3,0491 mg. Dari uji pasca anava

menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara konsentrasi

100%, 80% dan 60% air buah jeruk peras dengan 100%, 80%, dan 60% kontrol

positif, dalam melarutkan batu ginjal kalsium secara in vitro.

Kata kunci : Jeruk peras, batu ginjal kalsium, HPLC, SAA, FTIR

ABSTRACT

Kidney stones are accumulation of mineral salts that occur in the urine

along the urinary tract. The accumulation of mineral salts can cause pain that

radiates to the upper back to lower abdomen and thighs. Citrus fruit is one of fruit

which much known by society. Acid taste on orange caused by citrate acid

2

content. Citric acid in the urine reacts with calcium to form calcium citrate a

more soluble. The purpose of this research was to determine the solubility of

calcium kidney stones with orange fruit, and to found presence difference of

concentration influence within orange water to dissolved calcium kidney stone.

Data collection technique carried out by laboratorium experiment method,

measured citrate acid concentration within orange water used HPLC, measured

kidney stone calcium concentration which dissolved within orange water used

SAA, and identification of kidney stone type which used by using spectrometer

FTIR. Research result showed that orange water could dissolved calcium kidney

stones within concentration of 60%, 80%, 100% about 0,9244 mg, 2,0713 mg,

2,5651 mg. Positive control used citrate acid within concentration of 60%,

80%,100% could dissolved calcium kidney stone about 1,3716 mg, 2,4991 mg,

3,0491 mg. From pasca anova test showed that there were no significant

difference among concentrations 100%, 80% and 60% of orange water by 100%,

80% and 60% positive control, to dissolved calcium kidney stone by in vitro.

Key words: Orange fruit, calcium kidney stones, HPLC, SAA, FTIR

PENDAHULUAN

Batu ginjal secara medis disebut renal calculi, merupakan penumpukan garam

mineral yang terdapat di sepanjang saluran kemih. Penumpukan garam mineral ini

terjadi jika di dalam urin terdapat asam urat, fosfat, dan kalsium oksalat dalam

bentuk jenuh. Pada keadaan normal, zatzat tersebut dapat larut dalam cairan urin

dan dengan mudah terbilas saat buang air kecil. Tetapi ketika mekanisme alami

seperti pengaturan keseimbangan asam basa (pH) terganggu atau imunitas tertekan,

zatzat tersebut mengkristal dan kristal ini bisa menumpuk, akhirnya akan

membentuk zat yang cukup besar untuk menyumbat aliran urin (Pearle, dkk., 2003 :

55).

Keluhan yang paling sering dirasakan oleh pasien adalah nyeri pada pinggang.

Nyeri ini mungkin bisa berupa nyeri kolik atau non kolik. (Purnomo, 2008 : 62).

Pemilihan pengobatan terhadap batu ginjal umumnya didasarkan pada cara

pengobatan yang mudah, murah, dan mempunyai efek samping yang kecil.

Pengobatan terhadap penyakit batu ginjal yang sudah dikenal di masyarakat

Indonesia dapat ditangani dengan cara operasi untuk mengeluarkan batu,

penghancuran batu dengan sinar radiasi, dan pemakaian obat-obatan baik obat

tradisional maupun obat modern, sehingga masyarakat cenderung untuk kembali

3

kepada alam (back to nature). Obat tradisional merupakan cara pengobatan yang

banyak dipilih oleh masyarakat, selain mudah pelaksanaannya, bahanbahan yang

didapat dari alam cenderung murah, dengan efek samping kecil, bahan tanaman juga

mudah didapat di lingkungan sekitar kita.

Buah jeruk adalah salah satu buah yang banyak dikenal oleh masyarakat. Buah

yang berasa manis, agak asam dan sangat menyegarkan ini, kaya dengan vitamin

dan mineral, buah ini juga mengandung serat makanan esensial yang baik bagi

pertumbuhan dan perkembangan tubuh normal. Buah jeruk dapat dikonsumsi dalam

berbagai bentuk, baik dikonsumsi dalam keadaan segar maupun dibuat sari buah

atau jus.

Rasa asam yang tinggi pada jeruk di sebabkan oleh kandungan asam sitrat.

Kandungan asam sitrat ini diduga dapat mencegah agregrasi kristal dalam kompleks

kalsium karena asam sitrat dapat berikatan dengan kalsium membentuk kalsium

sitrat yang lebih mudah larut dan mungkin dapat mengurangi resiko agregrasi kristal

dalam saluran kemih (Aru, dkk., 2006 : 563)

Rumusan masalah penelitian ini adalah apakah air buah jeruk peras (Citrus

sinensis L. Osbeck) dapat melarutkan batu ginjal kalsium secara invitro dan adakah

perbedaan kelarutan batu ginjal kalsium, jika terdapat perbedaan konsentrasi air

buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck)

Tujuan penelitian ini adalah mengetahui adanya pengaruh air buah jeruk peras

(Citrus sinensis L. Osbeck) terhadap kelarutan batu ginjal kalsium secara in vitro

dan mengetahui adanya perbedaan pengaruh konsentrasi dalam air buah jeruk peras

(Citrus sinensis L. Osbeck) untuk melarutkan batu ginjal kalsium secara in vitro.

Hipotesis penelitian ini adalah air buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck)

memiliki kemampuan untuk melarutkan batu ginjal kalsium dan terdapat perbedaan

konsentrasi air buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) dalam melarutkan batu

ginjal kalsium.

METODE PENELITIAN

Obyek yang diteliti adalah kadar kalsium batu ginjal yang terlarut dalam air

buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) pada konsentrasi 60%, 80%, dan

4

100%. Konsentrasi 60%, dan 80%, dibuat dengan cara mengencerkan konsentrasi

100% yang diperoleh dari air buah jeruk peras.

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah peralatan gelas laboratorium

yang umum seperti gelas beker, labu takar, corong kaca, gelas ukur, pipet volum,

pipet ukur, thermometer, tabung reaksi, pengatur waktu, alat spektrofotometri

serapan atom merk Perkin Elmer no seri 3110, HPLC (High Performance Liquid

Chromatography) merk knauer smartline, dan FTIR merk simadzu tipe IR Prestige

21.

Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah asam sitrat monohidrat p.a

dan asam nitrat pekat p.a yang semuanya buatan dari Merck, akuadestilata, batu

ginjal, dan buah jeruk peras.

CARA KERJA

1. Pembuatan Air Buah Jeruk Peras

Delapan buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) dicuci hingga bersih

dibawah air yang mengalir, buah jeruk yang sudah dicuci, dikeringkan, dipotong

menjadi dua, dan diperas, air buah yang didapat dicampur menjadi satu dan

diidentifikasi dengan HPLC.

2. Pengukuran Konsentrasi Asam Sitrat Dalam Jeruk Peras.

Diambil 2,0 ml air buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) dilarutkan dalam

10,0 ml akuadestilata kemudian diukur pada panjang gelombang 210 nm. Dengan

cara larutan air buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) disuntik ke kolom,

hasil kromatogram yang muncul akan menunjukkan senyawa yang terdapat dalam

air buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) yang memiliki luas area dan waktu

retensi yang berbeda.

3. Analisis Kualitatif Jenis Batu Ginjal Dengan FTIR

Dua miligram batu ginjal ditambah dengan 200 mg kalium bromida kering,

dicampur dalam mortir sampai rata, dicetak dengan tekanan 8 ton selama 5 menit

sehingga diperoleh tablet transparan yang siap dianalisis menggunakan

spektrofotometer inframerah, hasil spektra yang didapat dibandingkan dengan

spektra Analyse des calculs par spectrophotoretrie infrarouge.

5

4. Pengukuran Kadar Kalsium Batu Ginjal yang Terlarut Dalam Air Buah

Jeruk Peras

Air buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) dengan berbagai seri konsentrasi

masing-masing sebanyak 25,0 ml, dimasukkan dalam tabung reaksi, direndam

dengan penambahan 100 mg batu ginjal, dilakukan dalam suhu 370

C selama 5 jam,

setiap 15 menit diaduk. Filtrat yang didapat disaring dan didestruksi dengan cara

filtrat ditambah 3 ml asam nitrat, diukur kadar kalsium yang terlarut dengan

Spektrofotometri Serapan Atom pada panjang gelombang 423 nm.

5. Pembuatan Larutan Asam Sitrat yang Setara Dengan Asam Sitrat Dalam

Air Buah Jeruk Peras

Asam sitrat murni ditimbang sebanyak 924,72 mg dilarutkan dengan 100,0 ml

akuadestilata, sehingga diperoleh konsentrasi 100% asam sitrat yang setara dengan

asam sitrat dalam air buah jeruk peras pada konsentrasi 100%.

6. Pengukuran Kadar Kalsium Batu Ginjal yang Terlarut Dalam Asam Sitrat

Murni

Asam sitrat dari konsentrasi 60%, 80%, dan 100%, masing-masing diambil

sebanyak 25,0 ml dimasukkan dalam tabung reaksi dengan penambahan 100 mg

batu ginjal yang dilakukan dalam suhu 370

C selama 5 jam, setiap 15 menit diaduk.

Filtrat yang didapat disaring dan didestruksi dengan cara filtrat ditambah 3 ml asam

nitrat, di ukur kadar kalsium yang terlarut dengan Spektrofotometri Serapan Atom

pada panjang gelombang 423 nm.

7. Pengukuran Kadar Kalsium yang Terdapat Dalam Air Buah Jeruk Peras

Air buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) dengan berbagai seri konsentrasi

masing-masing sebanyak 25,0 ml dimasukkan dalam tabung reaksi, tanpa

penambahan batu ginjal dalam suhu 370

C selama 5 jam, setiap 15 menit diaduk.

Filtrat yang didapat disaring dan didestruksi dengan cara filtrat ditambah 3 ml asam

nitrat, diukur kadar kalsium yang terlarut dengan Spektrofotometri Serapan Atom

pada panjang gelombang 423 nm.

8. Pengukuran Kadar Kalsium Batu Ginjal yang Terlarut Dalam Blanko

Akuadestilata yang digunakan sebagai pelarut, sebanyak 25,0 ml dimasukkan

dalam tabung reaksi, direndam dengan penambahan 100 mg batu ginjal dilakukan

6

dalam suhu 370

C selama 5 jam, setiap 15 menit diaduk. Filtrat yang didapat disaring

dan didestruksi dengan cara filtrat ditambah 3 ml asam nitrat, diukur kadar kalsium

yang terlarut dengan Spektrofotometri Serapan Atom pada panjang gelombang 423

nm.

Analisis data

Kadar batu ginjal yang terlarut diperoleh dari hasil pengukuran menggunakan

spektrofotometer serapan atom dan data tersebut diolah sehingga diperoleh data

kadar kalsium batu ginjal yang terlarut (mg) dalam air buah jeruk peras.

Kadar kalsium yang terlarut dalam air buah jeruk peras (Citrus sinensis L.

Osbeck) dianalisis dengan statistika metode anava dua arah.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Buah jeruk mengandung gula buah, serat yang dapat larut (pektin), berbagai

vitamin (khususnya C, B dan B9), dan mineral (Kotzman, 2007 : 104). Selain

vitamin C, jeruk merupakan sumber beta karoten dan asam sitrat (Made, dkk., 2008 :

97). Buah jeruk juga mengandung asam-asam organik seperti asam oksalat, asam

tatrat, asam malat, asam laktat, dan asam sitrat (Violeta, dkk., 2010). Vitamin dan

mineral pada jeruk sangat penting bagi proses metabolik yang vital dan menjaga

kesehatan berbagai jaringan dan organ tubuh (Kotzman, 2007 : 104).

Rasa asam yang tinggi pada jeruk peras di sebabkan oleh kandungan asam

sitrat yang terdapat di dalamnya. Pengukuran kadar asam sitrat secara kuantitatif

dalam air buah jeruk peras (Citrus sinensis (L) Osbeck) dilakukan dengan

menggunakan HPLC (High Performance Liquid Chromatography), karena HPLC

(High Performance Liquid Chromatography) dapat memisahkan asamasam

organik berdasarkan waktu retensinya.Kadar asam sitrat yang terukur dalam delapan

buah jeruk peras sebesar 9,2472 mg/ml.

Identifikasi jenis batu ginjal dalam penelitian ini menggunakan spektrometer

FTIR (Fourier Transform Infrared). Pada sistem optik peralatan spektrometer FTIR

Kadar kalsium total = kadar kalsium x pengenceran x volume

7

dipakai dasar daerah waktu yang non dispersif. Penggunaan gelombang radiasi

elektromagnetik yang berdasarkan daerah waktu adalah interferometer.

Interferometer merupakan perangkat ukur yang memanfaatkan gejala interferensi.

Interferensi adalah suatu kejadian dua gelombang atau lebih berjalan melalui bagian

yang sama dari suatu ruangan pada waktu yang bersamaan. Interferometer berfungsi

sebagai penentu bentuk spektrum pada sampel. Pada interferometer akan terjadi pola

interferensi. Pola interferensi yang terjadi disebut interferogram. Interferometer

merupakan alat yang sangat berperan pada spektroskopi FTIR (Wahyu, dkk., 2008).

Hasil analisis kualitatif batu ginjal dapat dibandingkan dengan Analyse des

calculs par spectrophotoretrie infrarouge (analisis batu ginjal dengan

spektrofotometri inframerah) yang dapat dilihat pada gambar 1.

Gambar 1. Hasil batu ginjal cholesterol + bilirurinaria de calcium

Hasil analisis dengan menggunakan spektrometri FTIR tersebut dapat

diketahui bahwa sampel batu ginjal yang digunakan pada penelitian ini adalah batu

ginjal jenis kalsium fosfat yang dapat di tunjukkan pada puncak yang khas pada

bilangan gelombang tertentu.

Analisis kuantitatif kadar kalsium batu ginjal yang terlarut dalam air buah

jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) diukur menggunakan spektrofotometer

serapan atom.

Pada penelitian ini sampel di inkubasi pada suhu 370

C selama 5 jam dan

diaduk setiap 15 menit. Hal ini dimaksudkan agar kondisi percobaan sedapat

mungkin sama dengan kondisi normal dalam tubuh manusia. Dipilih suhu inkubasi

8

370C karena pada umumnya, suhu pada manusia normal ialah 37

0 C. Lama waktu

inkubasi selama 5 jam dipilih berdasarkan waktu inkubasi optimal pada air buah

jeruk. Pengadukan setiap 15 menit diasumsikan bahwa batu ginjal yang berada

dalam ginjal manusia mengalami pergerakan, misalnya gerakan peristaltik. Namun

di dalam ginjal tidak terdapat gerakan peristaltik. Walaupun demikian di dalam

ginjal terjadi proses-proses reabsorbsi, baik itu berjalan secara aktif maupun pasif

sehingga bukan ginjal yang mengalami pergerakan, namun batu ginjal yang ada di

dalam ginjal mengalami gerakan-gerakan akibat adanya aliran urin, aliran air,

ataupun gerakan akibat aktivitas dari tubuh manusia.

Filtrat hasil perendaman didestruksi mengunakan HNO3 pekat. Sebelum di

destruksi filtrat hasil perendaman disaring terlebih dahulu. Proses penyaringan ini

bertujuan agar batu ginjal yang tidak larut dalam air buah jeruk tidak ikut

terdestruksi. Sedangkan maksud dari destruksi adalah untuk memecah atau memutus

ikatan unsur logam dengan unsur yang lainnya. Kesempurnaan proses ini ditandai

dengan diperolehnya larutan jernih pada larutan hasil destruksi.

Konsentrasi asam sitrat murni di sesuaikan dengan kadar asam sitrat dalam

air buah jeruk peras, hal ini bertujuan untuk mengetahui apakah asam sitrat dalam

air buah jeruk tersebut memiliki potensi yang besar untuk melarutkan batu ginjal

kalsium. Pada gambar 2 dapat digambarkan bahwa asam sitrat memiliki potensi

yang besar dalam melarutkan batu ginjal kalsium. Hal ini dapat ditunjukkan oleh

kelarutan batu ginjal kalsium dalam air buah jeruk peras hampir sama dengan

kelarutan batu ginjal kalsium dengan menggunakan asam sitrat murni.

Gambar 2. Perbandingan kadar kalsium batu ginjal yang terlarut dalam asam

sitrat dan air buah jeruk peras

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

60% 80% 100%

0.9244

2.0713

2.5651

1.3716

2.4991

3.0491

Air Buah Jeruk Peras (mg)

Asam sitrat (mg)

9

Kadar kalsium yang terlarut dalam air buah Jeruk Peras (Citrus sinensis L,

Osbeck) dianalisis dengan metode statistika anava dua jalan. Hasil analisis

menunjukkan terdapat perbedaan antar kelompok, antar baris dan antar kolom,

karena F hitung lebih besar dari F tabel, sehingga di lakukan uji pasca anava.

Pada uji pasca anava konsentrasi 100%, 80% dan 60% air buah jeruk peras

jika dibandingkan dengan konsentrasi 100%, 80% dan 60% asam sitrat

menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan dari dua kelompok

tersebut, sehingga dari berbagai konsentrasi air buah jeruk peras dapat digunakan

untuk menggantikan asam sitrat, dalam melarutkan batu ginjal kalsium.

Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa semakin besar konsentrasi air

buah jeruk peras maka semakin banyak pula kemampuan air buah jeruk peras untuk

melarutkan batu ginjal. Semakin tinggi konsentrasi air buah jeruk peras, maka

semakin tinggi pula kadar asam sitrat yang ada dalam air buah jeruk peras tersebut.

Semakin tinggi kadar asam sitrat, maka semakin banyak kalsium batu ginjal yang

terlarut dalam air buah jeruk peras.

KESIMPULAN DAN SARAN

Kesimpulan

1. Air buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck) dapat melarutkan batu ginjal

kalsium secara maksimal pada konsentrasi 100% sebanyak 2,5651 mg.

2. Terdapat perbedaan kelarutan batu ginjal kalsium, pada konsentrasi 60%, 80%,

dan 100% air buah jeruk peras (Citrus sinensis L. Osbeck).

Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut, mengenai kemampuan air buah jeruk

peras (Citrus sinensis L. Osbeck) untuk melarutkan batu ginjal jenis lain.

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut, mengenai kemampuan air buah jeruk

peras (Citrus sinensis L. Osbeck) untuk melarutkan batu ginjal secara in vivo.

10

DAFTAR PUSTAKA

Aru, W. S., Bambang, S., Idrus A., Marcellus, S. K., dan Siti S. 2006. Buku Ajar

Ilmu Penyakit Dalam. Jakarta : Pusat Penerbitan Ilmu Penyakit Dalam

Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia

Kotzman, A. C. 2007. Diet Makanan Terapis. Jakarta : Penerbit Buku Berkualitas

Prima

Made, A. dan Andreas, L. 2008. Khasiat Warna Warni Makanan. Jakarta :

Gramedia Pustaka Utama

Pearle, T. P., Hazel, C. P., Des, C., dan Monika, P. R. 2003. Ginjal Si Penyaring

Ajaib. Diterjemahkan oleh Helvi, S. dan Brosi, S. Bandung : Indonesia Publising

House

Purnomo, B. 2008. Dasar-dasar Urology. Jakarta : CV Sagung Seto

Violeta, N., Ion, T., dan Mira, E. I. 2010. HPLC Organic Acid Analysis in Different

Citrus Juices under Reversed Phase Conditions. Not. Bot. Hort. Agrobot Cluj.

1. (38) : 44-48

Wahyu, A. W., Catur, E. W., Much, A. K., dan Sofjan, F. 2008. Rancang Bangun

Pengatur Cermin Sebagai Komponen Gerak Interferometer Pada Spektroskopi

FTIR. ISSN : 1410 9662. 11. (3) : 79-87