KELOMPOK 4

API

API sebagai pionir dalam identifikasi dengan sistem yang mempersembahkan tes-tes biokimia konvensional yang dirancang secara khusus dalam ukuran kecil dengan prosedur kerja yang standar

Kelebihan API

• Membuat identifikasi mikroba secara manual menjadi lebih mudah cepat dan terpercaya

• API dipercaya sebagai rujukan dunia untuk identifikasi mikroba, terbukti dengan dipakai secara global untuk identifikasi lain di pasaran

• paling banyak digunakan dipusat pendidikan dan riset terkenal dunia

• lebih dari 800 spesies bakteri dan jamur dapat di identifikasi

• tersedia lebih dari 2000 referensi ilmiah tentang API

Komponen API

API-20E menggunakan sebuah strip plastik dengan susunan 20 mikrotabung , masing- masing berisi suatu medium kering, dan sebuah cupule di atasnya. Media menjadi berair selama penginokulasian suspensi organisme yang diuji, selanjutnya strip diinkubasi, plastik ditutup baki untuk mencegah evaporasi. Sesudah inkubasi, identifikasi organisme dibuat dengan menggunakan peta yang berbeda, yang diberi oleh pabrik, dengan menggunakan sistem computer yang dinamakan PRS (profile recognition system).. Yang mencakup sebuah API coder, profile register dan selector.

Jenis API berdasarkan kegunaanya

Identifikasi Gram Negatif

• API 20 E Identifikasi spesies bakteri gram negatif non fermenter

• API Rapid 20 E identifikasi Enterobacteriaceae dalam waktu 4 jam

• API 20 NE identifikasi gram negatif non Enterobacteriaceae dalam waktu 24-48 jam

• API NH Identifikasi Neisseria haemophilus dalam 2 jam

Identifikasi Gram Positif

• API Staph identifikasi Staphylococcus dan Micrococcus dalam waktu semalam

• API 20 Strep identifikasi Streptococcus dan Enterococcus dalam waktu 4 atau 24 jam

• API Coryne Identifikasi Corinebacterium dan bakteri yang menyerupai Coryne dalm waktu 24 jam

Identifikasi Bakteri Anaerob

• API 20 A Identifikasi bakteri Anaerob dalam waktu 24 jam

Identifikasi Jamur/ Yeast

• API Candida Identifikasi Candida yang sering menyebabkan infeksi dalam waktu 18-24 jam

• API 20 C AUX Identifikasi sel ragi atau Yeast emnggunakan tes Asimilasi yang merupakan tes rujukan untuk identifikasi Yeast waktu inkubasi 24-48 jam

Identifikasi Lain

• API 50 CH menilai kinerja tes metabolisme karbohidrat

• API ZYM aktifitas enzimatis secara semi kuantitatif

Procedure

Langkah 1. : Siapkan suspensi bakteri dalam tabung garamTanam koloni besar (2-3mm diameter) dari bakteri (biakan murni) ke dalam larutan NaCl 0,85%, pastikan bahwa suspensi yang homogen dan tanpa gumpalan bakteri mengambang.

Gunakan barium sulfat standar McFarland # 3 untuk quantitate suspensi.

Langkah 2. Inokulasi strip API- Pegang strip sedikit miring, lalu tanam suspensi

bakteri ke dalam sumur masing-masing dengan pipet steril (lihat Gambar. A).

- Sentuh ujung pipet ke sisi cupule, agar kapiler menarik cairan ke dalam sumur saat Anda perlahan-lahan menekan bola lampu. Tidak boleh ada gelembung yang terbentuk di sumur. - Setiap sumur harus diisi sampai ke leher

- CIT, VP, dan GEL memiliki kotak sekitar nama mereka. Tes sumur ini akan diisi sepanjang jalan sampai ke puncak sumur.

LDC, ODC, ADH, H2S, dan URE diisi seperti yang dijelaskan pada poin 2 (Langkah 2), tetapi kemudian diisi ke atas dengan minyak mineral steril 

Langkah 3. Inkubasi strip pada chamber- Bagian bawah ruang inkubasi memiliki sumur indentasi kecil di bagian bawah: isi dengan air sampai pada bagian lekukannya.- Tempatkan strip pada bagian bawah ruang inkubasi tersebut.- Tidak boleh terlalu banyak air agar tidak kotor ke strip API.- Tempatkan bagian atas ruang inkubasi pada bagian bawah, dan beri label- Inkubasi strip pada 37 ° C selama 18-24 jam.

INTERPRETASI• Tambahkan reagen yang tepat untuk kompartemen:

– 1 tetes ini Kovac ke IND (baca dalam beberapa menit)

– 1 tetes Barritt A dan B ke VP (reaksi + bisa memakan waktu hingga 10 menit)

– 1 tetes FeCl 3 sampai TDA

• Baca semua tes lainnya seperti yang dijelaskan

1, 2, atau 4 poin untuk + (positif) reaksi untuk tabung pertama, kedua dan ketiga di setiap triad, 0 poin untuk - * reaksi * negatif untuk tabung pertama, kedua dan ketiga di masing-masing triad). Reaksi Uji oksidase harus! Menjadi negatif, dan ditambahkan sebagai hasil tes terakhir! .

Reaksi karakteristik dari beberapa bakteri

Quality Control

• Media, strip, dan reagen secara sistematis telah di-QC pada berbagai tahap pemeriksaan. Bagi pengguna yang ingin melakukan tesQC sendiri dengan strip, dapat menggunakan strain Escherichia coli ATCC25922 atau salah satu strain berikut:

• 1. Stenotrophomonasmaltophilia ATCC 51331 • 2. Enterobacter cloacae ATCC 13047 • 3. Proteus mirabilis ATCC 35659 • 4. Klebsiellapneumoniaessppneumoniae ATCC

35657

Reaksi karakteristik dari beberapa bakteri

BacT Alert

Prinsip Kerja

• BacT/ALERT memanfaatkan sensor kolorimetri dan pantulan cahaya untuk memantau keberadaan dan produksi karbon dioksida (CO2) yang dilarutkan dalam medium kultur. Jika mikroorganisme ada dalam sampel uji, karbon dioksida yang dihasilkan organisme memetabolisme substrat dalam medium kultur. Ketika pertumbuhan mikroorganisme menghasilkan CO2, warna sensor gas-permeable yang dipasang dibagian bawah, yaitu botol kultur akan berubah warna dari biru-hijau ke kuning. Hasil warna lebih terang dalam peningkatan pantulan unit seperti yang dipantau oleh sistem. Pantulan botol dipantau dan dicatat oleh instrumen setiap 10 menit.

Fungsi Alat

bacT/alert adalah media kultul otomatis yang merupakan cara system deteksi cepat. Biasanya dilakukan pada pemeriksaan organ jantung, ginjal, hati dan lain2.

Quality Control

• Tambahkan 1,0 mL MB/BacT Enrichment Fluid untuk setiap botol BacT/ALERT MB kultur yang diperlukan untuk pengujian.

• Menyuntik botol representative dengan 5.0 ml dari organisme kontrol, diencerkan sampai 103 CFU/ml di darah domba defibrinated steril. Subkultur di plate Middlebrook7H11 untuk menentukan kelayakan dan menghitung.

• Setelah mendapatkan hasil yang diharapkan, gunakan botol yang tersisa untuk pengujian spesimen klinis. Jika hasil yang diharapkan tidak diperoleh, hubungi Layanan Pelanggan bioMérieux.

Ada Pertanyaan???

kesimpulan

• Indeks Profil Analitis (API) merupakan miniatur dari panel uji biokimia dikompilasi untuk identifikasi kelompok bakteri tertentu.

• BacT/alert adalah media kultur otomatis yang merupakan cara system deteksi cepat. Biasanya dilakukan pada pemeriksaan organ jantung, ginjal, hati dan lain2.